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1、12-中醫(yī)-陳潔整理第六章 生物氧化1名詞解釋(1)生物氧化 :在生物體內(nèi),從代謝物脫下的氫及電子通過一系列酶促反應(yīng)與氧化合成水并釋放能量的過程。(2)細(xì)胞色素 :是一類含血紅素樣輔基的電子傳遞蛋白,分子中的鐵通過氧化還原而傳遞電子,為單電子傳遞體。(3)呼吸鏈 :電子傳遞鏈(electron transfer chain)指線粒體內(nèi)膜中按一定順序排列的一系列具有電子傳遞功能的酶復(fù)合體,可通過連鎖的氧化還原將代謝物脫下的電子最終傳遞給氧生成水。這一系列酶和輔酶又稱為呼吸鏈。(4)氧化磷酸化 :是指代謝物脫氫經(jīng)呼吸鏈傳遞給氧生成誰,并且偶聯(lián)ADP磷酸化,生成ATP,又稱為偶聯(lián)磷酸化,是體內(nèi)生成A
2、TP的主要方式。(5)PO值 :P/O 比值指氧化磷酸化過程中,每消耗1/2摩爾O2所生成ATP的摩爾數(shù)(或一對電子通過氧化呼吸鏈傳遞給氧所生成ATP分子數(shù))。(6)解偶聯(lián)劑:可使氧化與磷酸化的偶聯(lián)相互分離,基本作用機(jī)制是破壞電子傳遞過程建立的跨內(nèi)膜的質(zhì)子電化學(xué)梯度,使電化學(xué)梯度儲存的能量以熱能形式釋放,ATP的生成受到抑制。2請寫出NADH氧化及琥珀酸氧化的二條呼吸鏈并比較在組成上的異同點(diǎn)。a.NADH氧化呼吸鏈:NADH 復(fù)合體Q 復(fù)合體Cyt c 復(fù)合體O2b.琥珀酸氧化呼吸鏈 :琥珀酸 復(fù)合體 Q 復(fù)合體Cyt c 復(fù)合體O2c.組成上的異同:同:異:NADH氧化呼吸鏈存在3個偶聯(lián)部位
3、, P/O比值等于2.5,即產(chǎn)生2.5molATP。琥珀酸氧化呼吸鏈存在2個偶聯(lián)部位, P/O比值等于1.5,即產(chǎn)生1.5molATP。3請寫出呼吸鏈抑制劑在呼吸鏈中的作用?為何說氰化物對機(jī)體是劇毒物質(zhì)?呼吸鏈抑制劑 ,可以阻斷呼吸鏈中某些特異部位電子傳遞。氰化物此類抑制劑使細(xì)胞內(nèi)呼吸停止,與此相關(guān)的細(xì)胞生命活動停止,引起機(jī)體迅速死亡。4電子傳遞鏈概念及排列組成電子傳遞鏈(electron transfer chain)指線粒體內(nèi)膜中按一定順序排列的一系列具有電子傳遞功能的酶復(fù)合體,可通過連鎖的氧化還原將代謝物脫下的電子最終傳遞給氧生成水。這一系列酶和輔酶又稱為呼吸鏈。排列組成:a.根據(jù)呼吸鏈
4、各組分的標(biāo)準(zhǔn)氧化還原電位,由高到低的順序排列。b.底物存在時,利用呼吸鏈特異的抑制劑阻斷某一組分的電子傳遞,在阻斷部位以前的組分處于還原狀態(tài),后面組分處于氧化狀態(tài)??衫煤粑湼鹘M分的氧化和還原狀態(tài)吸收光譜差別,根據(jù)吸收光譜的改變分析排列次序。c.利用呼吸鏈各組分特有的吸收光譜,以離體線粒體無氧時處于還原狀態(tài)作為對照,緩慢給氧,觀察各組分被氧化的順序,d.在體外將氧化呼吸鏈拆開和重組,鑒定四種復(fù)合體的組成和排列。6線粒體外還原當(dāng)量轉(zhuǎn)運(yùn)入線粒體內(nèi)的兩條途徑?考選擇(1)a-磷酸甘油穿梭(腦和骨骼?。壕€粒體外的NADH+H+在胞質(zhì)中磷酸甘油脫氫酶的催化作用下,使磷酸二羥丙酮還原成a-磷酸甘油,后
5、者通過線粒體外膜,再經(jīng)位于線粒體內(nèi)膜近胞質(zhì)側(cè)的含F(xiàn)AD輔基的磷酸甘油脫羥酶催化下氧化生成磷酸二羥丙酮和FADH2,F(xiàn)ADH2直接將2H傳遞給泛醌進(jìn)入氧化呼吸鏈。(2). 蘋果酸-天冬氨酸穿梭機(jī)制(肝和心?。涸摯┧笊婕?種內(nèi)膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和4種酶協(xié)同參與。胞質(zhì)中的NADH+H+脫氫,使草酰乙酸還原成蘋果酸,蘋果酸進(jìn)入線粒體后重新生成草酰乙酸和NADH+H+。NADH+H+進(jìn)入NADH氧化呼吸鏈。7. 試述影響氧化磷酸化的主要因素。 考選擇(一)抑制劑1. 呼吸鏈抑制劑 :阻斷呼吸鏈中某些部位電子傳遞。2. 解偶聯(lián)劑:使氧化與磷酸化偶聯(lián)過程脫離。如:二硝基苯酚,基質(zhì)側(cè)釋出H+,胞質(zhì)側(cè)結(jié)合H+解偶聯(lián)蛋
6、白,可形成質(zhì)子通道,H+通過釋放熱能3. ATP合酶抑制劑:對電子傳遞及ADP磷酸化均有抑制作用。 如:寡霉素結(jié)合F0,阻斷質(zhì)子回流 (二)ADP的調(diào)節(jié)作用是主要調(diào)節(jié)因素。ADP,氧化磷酸化。 (三)甲狀腺激素Na+,K+ATP酶和解偶聯(lián)蛋白基因表達(dá)均增加,ATP ADP (四)線粒體DNA突變 :與線粒體DNA病及衰老有關(guān)。第七章營養(yǎng)必需AA:人體營養(yǎng)需要,而又不能自身合成,必須由食物供應(yīng)的氨基酸。共8種:纈氨酸、色氨酸、蛋(甲硫)氨酸、賴氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸蛋白質(zhì)腐?。耗c道細(xì)菌對未被消化的蛋白質(zhì)及其消化產(chǎn)物所起的分解作用,稱為腐敗作用。 實質(zhì)是細(xì)菌本身的代謝過程,以無氧
7、分解為主。 主要產(chǎn)物有NH3、胺類和一些有害物質(zhì),少量脂肪酸及維生素等可被機(jī)體利用的物質(zhì)。包括以下幾個過程。1. 胺類(amines)的生成。未被消化的蛋白質(zhì)經(jīng)腸道細(xì)菌蛋白酶的作用水解生成氨基酸,氨基酸在細(xì)菌氨基酸脫羧酶的作用下,脫去羧基生成有毒的胺類。例如組氨酸、賴氨酸、色氨酸、酪氨酸、以及苯丙氨酸通過脫羧基作用就會生成組胺、尸胺、色胺、酪胺以及苯乙胺。酪胺與苯乙胺若不能在肝內(nèi)及時轉(zhuǎn)化,易進(jìn)入腦組織,分別經(jīng)-羥化酶作用,轉(zhuǎn)化為-多巴胺(羥酪胺)和苯乙醇胺,其結(jié)構(gòu)類似于兒茶酚胺,稱為假神經(jīng)遞質(zhì)。假神經(jīng)遞質(zhì)增多時,可競爭性地干擾兒茶酚胺與腦細(xì)胞結(jié)合,阻礙神經(jīng)沖動傳遞,使大腦發(fā)生異常抑制。2. 氨
8、的生成。未被吸收的氨基酸在腸道細(xì)菌的作用下,通過脫羧基作用生成氨,這是腸道氨的重要來源之一。另一來源是血液中的尿素深入腸道,經(jīng)腸菌尿素酶的水解而生成氨。降低腸道pH,NH3轉(zhuǎn)變?yōu)镹H4+以胺鹽形式排出,可減少氨的吸收,這是酸性灌腸的依據(jù)。3. 其它有害物質(zhì)的生成。蛋白質(zhì)腐敗還生成苯酚、吲哚以及硫化氫等有害物質(zhì)。正常情況下,上述有害物質(zhì) 大部分隨糞便排出, 小部分被吸收,解毒(肝)。3食物Pr的互補(bǔ)作用:營養(yǎng)價值較低的蛋白質(zhì)混合食用,則必需氨基酸可以互相補(bǔ)充從而提高營養(yǎng)價值。如:谷類蛋白質(zhì)含賴氨酸較少,色氨酸較多,豆類蛋白質(zhì)含賴氨酸較多,色氨酸較少,兩者混合食用即可提高營養(yǎng)價值。臨床:某些疾病情
9、況下,為保證氨基酸的需要,可進(jìn)行混合氨基酸輸液。4. 聯(lián)合脫氨基作用形式及部位特征:所謂聯(lián)合脫氨基,是指氨基酸的轉(zhuǎn)氨基作用和谷氨酸的氧化脫氨基作用的聯(lián)合。其過程是氨基酸首先與酮戊二酸在轉(zhuǎn)氨酶催化下生成相應(yīng)的酮酸和谷氨酸,谷氨酸在L-谷氨酸脫氫酶作用下生成酮戊二酸和氨,酮戊二酸再繼續(xù)參與轉(zhuǎn)氨基作用。聯(lián)合脫氨基作用是體內(nèi)各種氨基酸脫氨基的主要形式。上述聯(lián)合脫氨基作用是可逆的,所以也是體內(nèi)合成非必需氨基酸的主要途徑。心肌和骨骼中,氨基酸主要通過嘌呤核苷酸循環(huán)脫去氨基。在此過程中,氨基酸首先通過連續(xù)的轉(zhuǎn)氨基作用將氨基轉(zhuǎn)移給草酰乙酸,生成天冬氨酸。天冬氨酸又與次黃嘌呤核苷酸(IMP)反應(yīng)生成腺苷酸代琥珀
10、酸,后者經(jīng)過裂解釋放延胡索酸并生成腺嘌呤核苷酸(AMP)。AMP在腺苷酸脫氨酶的催化下脫去氨基,最終完成氨基的脫氨基作用。IMP可在此參與循環(huán)。由此可見,嘌呤核苷酸循環(huán)也可看成是另一種形式的聯(lián)合脫氨基作用。部位特征:氨基酸的轉(zhuǎn)氨基作用和谷氨酸的氧化脫氨基作用的聯(lián)合發(fā)生在肝、腎和腦等組織中,嘌呤核苷酸循環(huán)則發(fā)生在心肌和骨骼中。5 酮酸的去路1.酮酸可徹底氧化分解并提供能量。酮酸在體內(nèi)可通過三羧酸循環(huán)與生物氧化體系徹底氧化生成CO2和H2O,同時釋放能量以供機(jī)體生理活動需要。2.酮酸經(jīng)氨基氧化生成營養(yǎng)非必需氨基酸。3. 酮酸可轉(zhuǎn)變成糖和脂類化合物。在體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變成糖的氨基酸叫生糖氨基酸;能轉(zhuǎn)變成酮
11、體的叫生酮氨基酸;能轉(zhuǎn)變成糖又能轉(zhuǎn)變成酮體的叫生糖兼生酮氨基酸。6,氨的來源、轉(zhuǎn)運(yùn)與去路(1)氨的來源1.氨基酸脫氨基作用是主要來源。還有少量胺的氧化。胺類的分解也可以產(chǎn)生氨。2. 腸道吸收的氨:4g/日蛋白質(zhì)的腐敗作用腸道尿素的水解3.腎小管上皮細(xì)胞泌氨(2)氨的轉(zhuǎn)運(yùn):氨是有毒物質(zhì),血中的NH3主要是以無毒的丙氨酸及谷氨酰胺兩種形式運(yùn)輸?shù)摹?通過丙氨酸-葡萄糖循環(huán),氨從肌肉運(yùn)往肝;2通過谷氨酰胺,氨從腦和肌肉等組織運(yùn)往肝或腎。(3)氨的去路1在肝內(nèi)合成尿素,這是最主要的去路2合成非必需氨基酸及其它含氮化合物3合成谷氨酰胺 7 鳥氨酸循環(huán)、部位,過程,調(diào)節(jié) 考大題尿素循環(huán)是體內(nèi)解除氨毒的主要方
12、式。也是體內(nèi)氨的最主要去路。尿素循環(huán):又叫鳥氨酸循環(huán)或Krebs-Henseleit循環(huán)生成部位:主要在肝細(xì)胞的線粒體及胞液中。生成過程:首先鳥氨酸與氨及CO2結(jié)合生成瓜氨酸;第二,瓜氨酸再接受1分子氨而生成精氨酸;第三,精氨酸水解產(chǎn)生尿素,并重新生成鳥氨酸。接著,鳥氨酸參與新一輪循環(huán)。鳥氨酸循環(huán)要點(diǎn)尿素分子中的氮,一個來自氨甲酰磷酸(或游離的NH3),另一個來自Asp;每合成1分子尿素需消耗4個P;循環(huán)中消耗的Asp可通過延胡索酸轉(zhuǎn)變?yōu)椴蒗R宜?,再通過轉(zhuǎn)氨基作用,從其他a-氨基酸獲得氨基而再生;精氨酸代琥珀酸合成酶(ASS)為尿素合成的限速酶。尿素合成的調(diào)節(jié)1食物蛋白質(zhì)的影響高蛋白質(zhì)膳食時尿
13、素的合成速度加快,排出的含氮物中尿素約占 90;反之,低蛋白質(zhì)膳食時尿素合成速度減慢,尿素排出量可低于含氮排泄量的60%。 2CPS-I的調(diào)節(jié) AGA是CPSI的變構(gòu)激動劑 精氨酸是AGA合成酶的激活劑 因此,精氨酸濃度增高時,尿素生成加速。 3尿素合成酶系的調(diào)節(jié) 精氨酸代琥珀酸合成酶的活性最低,是尿素合成的限速酶,可調(diào)節(jié)尿素的合成速度。8 高血氨癥;肝昏迷氨中毒學(xué)說的主要機(jī)制正常生理情況下,血氨濃度處于較低的水平。氨在肝中合成尿素是維持這種平衡的關(guān)鍵。當(dāng)肝功能嚴(yán)重?fù)p傷時,尿素合成發(fā)生障礙,血氨濃度升高,稱為高血氨癥。肝昏迷的氨中毒學(xué)說氨進(jìn)入腦組織,NH3+-酮戊二酸生成谷氨酸, NH3 +谷
14、氨酸生成谷氨酰胺因此,腦中NH3 與 -酮戊二酸進(jìn)入三羧酸循環(huán)(TAC),可使腦細(xì)胞中的-酮戊二酸減少,導(dǎo)致三羧酸循環(huán)減弱,腦組織中ATP生成下降, 大腦功能障礙,嚴(yán)重時可發(fā)生昏迷。這就是肝昏迷氨中毒學(xué)說的基礎(chǔ)。9 氨基丁酸()、?;撬?、組胺、羥色胺、多胺分別來源于哪些AA? 一、 g-氨基丁酸(GABA)由谷氨酸脫羧生成。 酶分布:在腦、腎、組織中活性很高。作用:GABA是抑制性神經(jīng)遞質(zhì),對中樞神經(jīng)有抑制作用。臨床:維生素B6治療妊娠嘔吐和小兒抽搐,這與磷酸吡哆醛參與構(gòu)成谷氨酸脫羧酶輔酶,促進(jìn)谷氨酸脫羧生成-氨基丁酸,從而抑制神經(jīng)興奮性有關(guān)。二、牛磺酸由半胱氨酸Cys氧化后再脫羧而生成。作用
15、:1)在肝細(xì)胞中?;撬峥膳c膽汁酸結(jié)合生成結(jié)合膽汁酸;2)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)腦組織中也含有較多的?;撬?,表明它可能對腦功能也有作用。三、組胺由組氨酸(His)脫羧生成。 乳腺、肝、肺、肌肉及胃粘膜等的肥大細(xì)胞中作用:是一種強(qiáng)烈的血管舒張劑,并能增加毛細(xì)血管通透性。 創(chuàng)傷性休克及過敏反應(yīng)等,均與組胺生成過多有關(guān)。 組胺還可刺激胃液分泌。 四、 5-羥色胺(5-HT)由色氨酸Trp羥化后脫羧而成。分布:體內(nèi)各組織(神經(jīng)、胃、血小板等)作用:腦內(nèi)抑制性神經(jīng)遞質(zhì)(睡眠、疼痛、體溫調(diào)節(jié)有關(guān))。 外周組織收縮血管作用。 五、多胺是由鳥氨酸和蛋氨酸亦名甲硫氨酸(Met)參與生成的。作用:精脒和精胺是調(diào)節(jié)細(xì)胞生長的重要物質(zhì)
16、。 凡生長旺盛的組織如胚胎、再生肝、癌瘤組織等,其鳥氨酸脫羧酶活性較強(qiáng),多胺含量也較多。臨床:測定腫瘤病人血或尿中多胺的含量作為觀察病情和輔助診斷的指標(biāo)。10 一碳單位及來源、生理功用某些氨基酸在分解代謝過程中產(chǎn)生的含有一個碳原子的基團(tuán),稱為一碳單位 (one carbon unit)。一碳單位不能游離存在,常與FH4(四氫葉酸)結(jié)合而轉(zhuǎn)運(yùn)和參加代謝。一碳單位主要來源于絲氨酸(Ser)、甘氨酸(Gly)、組氨酸(His)、色氨酸(Trp)的分解代謝。一碳單位的生理功用1主要是合成嘌呤和嘧啶的原料。 2為體內(nèi)的甲基化反應(yīng)間接提供甲基。11 巨幼紅細(xì)胞貧血與一碳單位和甲硫氨酸循環(huán)關(guān)聯(lián)? 考大題一碳
17、單位的主要功能功能是參加嘌呤嘧啶的合成.一碳單位將氨基酸代謝與核苷酸代謝密切聯(lián)系起來.一碳單位代謝障礙或FH4不足時,可引起巨幼紅細(xì)胞性貧血N5-甲基四氫葉酸轉(zhuǎn)甲基酶, 輔酶-VitB12參與甲基的轉(zhuǎn)移.VitB12缺乏時,N5-CH3-FH4上的甲基不能轉(zhuǎn)移,不利于甲硫氨酸的生成,同時也影響FH4的再生,使組織中游離的FH4含量減少,不能重新利用它來轉(zhuǎn)運(yùn)其他一碳單位,導(dǎo)致核酸含成障礙,影響細(xì)胞分裂-產(chǎn)生巨幼紅細(xì)胞性貧血。12 甲硫氨酸循環(huán)過程及生理意義 考大題(同上面的11題一起考的,而且要畫出這個循環(huán)的圖)蛋氨酸循環(huán):S腺苷甲硫氨酸(SAM)在甲基轉(zhuǎn)移酶催化下,將甲基轉(zhuǎn)移給另一種物質(zhì),使其
18、甲基化,此時SAM生成S腺苷同型半胱氨酸,然后水解除去腺苷生成同型半胱氨酸,后者在蛋氨酸合成酶(又稱 N5-CH3-FH4轉(zhuǎn)甲基酶,輔酶為維生素B12)作用下,從N5-CH3-FH4獲得甲基再合成蛋氨酸,形成一個循環(huán)過程。 此循環(huán)的生理意義:把來自N5CH3FH4(一碳單位)供給甲基生成甲硫氨酸,再通過此循環(huán)的SAM提供甲基,以進(jìn)行體內(nèi)廣泛存在的甲基化反應(yīng)。由此可以將N5CH3FH4看成是甲基的間接供體。13 何謂活性甲基、活性甲硫氨酸?來源?S腺苷甲硫氨酸(SAM)中的甲基稱為活性甲基,SAM稱為活性甲硫氨酸,是體內(nèi)甲基最重要的直接供體。SAM是在轉(zhuǎn)甲基反應(yīng)前由甲硫氨酸在腺苷轉(zhuǎn)移酶的催化下與
19、ATP反應(yīng)生成的。14心肌損傷患者哪種轉(zhuǎn)氨酶和肌酸激酶升高?(這里不是很清楚)肌酸以甘氨酸為骨架,由精氨酸提供脒基,S-腺苷甲硫氨酸提供就甲基合成。心肌損傷患者,我覺得是谷草轉(zhuǎn)氨酶,又稱天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶,又稱丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶升高。心肌梗死時,血液中的MB型肌酸激酶活性增高。 15酪氨酸(Tyr)與那些神經(jīng)遞質(zhì)生成有關(guān)?白化癥,尿黑酸尿癥,帕金森 氏癥與其有何關(guān)聯(lián)?酪氨酸在腎上腺髓質(zhì)和神經(jīng)組織經(jīng)酪氨酸羥化酶催化生成3,4-二羥苯丙氨酸(DOPA,多巴)。在多巴脫羧酶的作用下,多巴脫去羧基生成多巴胺。在腎上腺髓質(zhì),多巴胺側(cè)鏈的-碳原子再被羥化,生成去甲腎上腺素(norepinephrine)
20、,后者甲基化生成腎上腺素(epinephrine)。多巴胺、去甲腎上腺素及腎上腺素統(tǒng)稱為兒茶酚胺(catecholamine)。帕金森病患者多巴胺生成減少。酪氨酸的另一條代謝途徑是合成黑色素(melanin)。在黑色素細(xì)胞中,酪氨酸經(jīng)酪氨酸酶作用羥化形成多巴后氧化、脫羧等反應(yīng)變成吲哚醌,最后聚合成黑色素。先天性酪氨酸酶缺乏的病人不能合成黑色素,即白化?。╝lbinism)。酪氨酸還可在酪氨酸轉(zhuǎn)氨酶的催化下,生成對-羥苯丙酮酸,后者經(jīng)尿黑酸等中間產(chǎn)物進(jìn)一步轉(zhuǎn)變成延胡索酸和乙酰乙酸,然后二者分別沿糖代謝和脂肪酸代謝途徑進(jìn)行代謝。當(dāng)體內(nèi)的尿黑酸分解代謝的酶先天性缺陷的時候,尿黑酸分解受阻,可出現(xiàn)尿黑
21、酸尿癥(alkaptonuria)。下面是我自己弄的圖表示,不知道對不對,因為不是中醫(yī)的重點(diǎn)。苯丙氨酸羥化酶 苯丙氨酸 酪氨酸 苯酮酸尿癥苯丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶 苯丙氨酸 苯丙酮酸尿黑酸氧化酶 先天性尿黑酸癥多巴脫羧酶 多巴 多巴胺 震顫性麻痹英漢對照中英氨基酸代謝Amino Acid Metabolism蛋白質(zhì)的營養(yǎng)作用Nutritional Function of Proteins氮平衡nitrogen balance必需氨基酸essential amino acid營養(yǎng)價值nutrition value蛋白質(zhì)的消化、吸收和腐敗Digestion,Absorption ,and Putrefact
22、ion of proteins載體蛋白carrier protein腐敗作用putrefaction胺類amines氨ammonia氨基酸的一般代謝General Metabolism of Amino Acid代謝庫metabolic pool轉(zhuǎn)氨基作用transamination丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶alanine amino-transferase, ALT或glutamic pyruvic transaminase, GPT天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶aspartate amino-transferase, AST或glutamic oxalo-acetic transaminase, GOT氨的代謝
23、Metabolism of Ammonia鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶OCT氨甲酰磷酸合成酶(carbamoyl phos-phate synthetase,CPS)N-乙酰谷氨酸N-AGA精氨酸代琥珀酸合成酶ASSg-氨基丁酸GABA5-羥色胺5-NT一碳單位one carbon unit甲基methyl甲烯基methylene甲炔基 methenyl甲?;?formyl亞氨甲基formiminoS-腺苷蛋氨酸SAM肌酸creatine磷酸肌酸creatine phosphthe, CP3-磷酸腺苷5-磷酸硫酸PAPS苯酮酸尿癥PKU白化病albinism尼克酸Vpp甲硫氨素循環(huán)methionine
24、 cycle3,4-二強(qiáng)苯丙氨酸DOPA去甲腎上腺素norepinephrine腎上腺素epinephrine兒茶酚胺catecholamine黑色素melanin尿黑癥alkaptonuria第八章1. 嘌呤嘧啶的抗代謝物有哪些?作用機(jī)制。A(1) 嘌呤核苷酸的抗代謝物是一些嘌呤、氨基酸或葉酸等的類似物。嘌呤類似物:主要有6-巰基嘌呤( 6-Mercaptopurine,6-MP),6-MP 核苷酸是 IMP的類似物氨基酸類似物:氮雜絲氨酸 (AS) 是 Gln的類似物.葉酸類似物:氨蝶呤 (AP)和甲氨蝶呤 (MTX)(2) 作用機(jī)制:主要以競爭性抑制干擾或阻斷嘌呤核苷酸的合成代謝,從而進(jìn)
25、一步阻止核酸以及蛋白質(zhì)的生物合成。B(1)嘧啶核苷酸的抗代謝物也是嘧啶、氨基酸或葉酸等的類似物 嘧啶類似物:5-氟尿嘧啶(5-FU) 是胸腺嘧啶的類似物。 氨基酸類似物:如氮雜絲氨酸抑制 CTP的合成。 葉酸類似物:如甲氨喋呤抑制 dTMP的合成。(2)作用機(jī)制:主要以競爭性抑制干擾或阻斷嘧啶核苷酸的合成代謝,從而進(jìn)一步阻止核酸以及蛋白質(zhì)的生物合成。(注:作用機(jī)制書上說同嘌呤的類似,應(yīng)該是這樣答,不知道對不對)2 核酸在體內(nèi)分解代謝的基本反應(yīng)通路,嘌呤與嘧啶的分解產(chǎn)物是什么?細(xì)胞中的核酸被水解為核苷酸,核苷酸在核苷酸酶的作用下水解為核苷,核苷經(jīng)核苷磷酸化酶的作用,磷酸解為自由的堿基及1-磷酸核
26、糖。堿基進(jìn)一步分解。嘌呤最終分解生成尿酸;嘧啶最終生成NH3、CO2、及-氨基異丁酸。3嘌呤和嘧啶的合成原料是什么?考大題嘌呤核苷酸從頭合成的原料包括:一碳單位、氨基酸(天冬氨酸、甘氨酸)、CO2及磷酸核糖、谷氨酰胺等;補(bǔ)救合成的原料包括:體內(nèi)游離的嘌呤或嘌呤核苷,如腺嘌呤、鳥嘌呤、次黃嘌呤、腺嘌呤核苷、PRPP.嘧啶核苷酸從頭合成的原料包括:谷氨酰胺、CO2和天冬氨酸和磷酸核糖。補(bǔ)救合成的原料包括:體能游離的嘧啶或嘧啶核苷。4 嘌呤嘧啶合成途徑有哪些?特點(diǎn)?考大題核苷酸的合成途徑有兩種1. 從頭合成途徑是指利用磷酸核糖、氨基酸、一碳單位及CO2等簡單物質(zhì)為原料,經(jīng)過一系列酶促反應(yīng),合成核苷酸
27、的途徑。2. 補(bǔ)救合成途徑利用體內(nèi)游離的堿基或核苷,經(jīng)過簡單的反應(yīng)過程,合成核苷酸的途徑。從頭合成嘌呤核苷酸從頭合成途徑的特點(diǎn):嘌呤核苷酸是在磷酸核糖分子上逐步合成的;先合成 IMP,再轉(zhuǎn)變成 AMP或GMP;PRPP是5-磷酸核糖的活性供體。嘧啶核苷酸從頭合成途徑的特點(diǎn):先合成嘧啶環(huán),再與磷酸核糖相連;先合成UMP,再轉(zhuǎn)變成dTMP和CTP。補(bǔ)救合成生理意義(沒找到特點(diǎn),我覺得可以當(dāng)成特點(diǎn)答,大家可以發(fā)表自己的高見哈)補(bǔ)救合成節(jié)省從頭合成時的能量和一些氨基酸的消耗。體內(nèi)某些組織器官,如腦、骨髓等只能進(jìn)行補(bǔ)救合成。5 脫氧核糖核酸如何生成?通過相應(yīng)的核糖核苷酸的直接還原作用,即以氫取代其核糖分
28、子中的C2上的羥基,生成相應(yīng)的脫氧核糖核酸。還原作用在二磷酸核苷酸(NDP)水平上進(jìn)行,由核糖核苷酸還原酶催化。6 什么是嘌呤和嘧啶核苷酸合成的補(bǔ)救通路?利用體內(nèi)游離的堿基或核苷,通過簡單的合成反應(yīng),合成相應(yīng)的核苷酸,稱為補(bǔ)救通路。核 苷 酸 代 謝 Metabolism of Nucleotides 從頭合成途徑 de novo synthesis pathway補(bǔ)救合成途徑 salvage synthesis pathway嘌呤核苷酸代謝 Metabolism of Purine Nucleotides腺嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶 adenine phosphoribosyl transferas
29、e, APRT次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(hypoxanthine- guanine phosphoribosyl transferase, HGPRT)腺苷激酶 adenosine kinase嘧啶核苷酸代謝 Metabolism of Pyrimidine Nucleotides第九章1 簡述物質(zhì)代謝的特點(diǎn)(1) 整體性。體內(nèi)各種物質(zhì)代謝過程不是彼此孤立的,而是在細(xì)胞內(nèi)同時進(jìn)行,且彼此互相聯(lián)系,互相依存。(2)代謝調(diào)節(jié),機(jī)體物質(zhì)代謝不斷受到精細(xì)調(diào)節(jié)。正常情況下,機(jī)體能通過精細(xì)的調(diào)節(jié)機(jī)制,不斷調(diào)節(jié)各種物質(zhì)代謝的強(qiáng)度、方向和速率,以保證機(jī)體各種物質(zhì)能適應(yīng)內(nèi)外環(huán)境不斷的變化,有條不玩的進(jìn)行。
30、(3)各組織、器官物質(zhì)代謝各具特色。機(jī)體各組織、器官的結(jié)構(gòu)不同,各有特定的生理功能。他們除具有細(xì)胞基本的代謝過程外,還含有不同的酶系種類和含量,以適應(yīng)和完成其特征的代謝途徑及生理功能,各具特色。(4) 體內(nèi)各種代謝物都具有共同的代謝池 同一代謝物,無論是體外攝入的成分還是體內(nèi)各組織細(xì)胞生成的,在進(jìn)行中間代謝時,不分彼此,參加到共同的代謝池中參與代謝。(5) ATP是機(jī)體儲存能量和消耗能量的共同形式糖、脂和蛋白質(zhì)在體內(nèi)分解氧化釋出大量能量的很大部分,轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞有用的高能化合物ATP的化學(xué)能。ATP作為能量載體,使產(chǎn)生能量的物質(zhì)分解代謝與消耗能量的合成代謝間相互偶聯(lián)。(6) NADPH提供合成代謝
31、所需的還原當(dāng)量許多參與氧化分解代謝的脫氫酶常以NAD+為輔酶,而參與還原性合成代謝的還原酶則多以NADPH為輔酶,提供還原當(dāng)量。2 簡述物質(zhì)代謝的相互聯(lián)系 一 在能量代謝上的相互聯(lián)系。三大營養(yǎng)素可在體內(nèi)氧化供能。一般情況下,供能以糖、脂為主,并盡量節(jié)約蛋白質(zhì)的消耗。任一供能物質(zhì)的代謝占優(yōu)勢,常能抑制和節(jié)約其他物質(zhì)的降解。二 糖、脂和蛋白質(zhì)之間的相互聯(lián)系 (1)糖代謝與脂代謝的相互聯(lián)系 糖可以轉(zhuǎn)變?yōu)橹?,但脂肪絕大部分不能在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成糖,因為脂酸-氧化產(chǎn)生的乙酰CoA不能生成丙酮酸。脂肪分解代謝的強(qiáng)度以及順利進(jìn)行有賴于糖代謝的正常進(jìn)行。(2)糖與氨基酸代謝的互相聯(lián)系。大部分氨基酸脫氨基后,生成相
32、應(yīng)的-酮酸,可轉(zhuǎn)變?yōu)樘?。糖代謝的中間產(chǎn)物可氨基化成某些非必需氨基酸 (3)脂類與氨基酸代謝的互相聯(lián)系 蛋白質(zhì)可以轉(zhuǎn)變?yōu)橹?;氨基酸可作為合成磷脂的原料;脂肪的甘油部分可轉(zhuǎn)變?yōu)榉潜匦璋被帷?(4)核酸與糖、蛋白質(zhì)代謝的互相聯(lián)系 氨基酸是體內(nèi)合成核酸的重要原料;磷酸核糖由磷酸戊糖途徑提供。3、組織、器官的代謝特點(diǎn)及聯(lián)系(營養(yǎng)物質(zhì)互變關(guān)系)(1)肝是機(jī)體物質(zhì)代謝的樞紐。在糖、脂、蛋白質(zhì)、水、鹽及維生素代謝中均具有獨(dú)特而重要的作用。(2)心臟耗能大,耗氧多,正常優(yōu)先以脂酸為燃料產(chǎn)生ATP,還儲存有很少量的磷酸肌酸和糖原,可依次以消耗自由脂酸、葡萄糖、酮體等能源物質(zhì)提供能量。(3)腦是機(jī)體耗能大,耗氧
33、多的主要器官,以葡萄糖為主要能源,不能利用脂酸。葡萄糖供應(yīng)不足時,利用酮體。(4)肌肉合成、儲存糖原,通常以脂酸氧化為主要功能方式,與運(yùn)動時以糖酵解為主;缺乏G-6-P酶,因此肌糖原不能分解直接分解葡萄糖提供血糖。(5)紅細(xì)胞。葡萄糖的糖酵解途徑是成熟紅細(xì)胞的主要能量來源。由于紅細(xì)胞沒有線粒體,不能進(jìn)行糖的有氧氧化,也不能利用脂酸及其他非糖物質(zhì)。(6)脂肪組織,合成及儲存脂肪的重要組織,將脂肪分解成脂酸和甘油釋入血循環(huán)以供機(jī)體其他組織作為能量。(7)腎臟也可進(jìn)行糖異生和生成酮體,腎髓質(zhì)主要由糖酵解供能;腎皮質(zhì)主要由脂酸、酮體有氧氧化供能。4.酶的隔離分布意義,選擇幾條相關(guān)的代謝途徑說明代謝調(diào)節(jié)
34、是通過對關(guān)鍵酶活性的調(diào)節(jié)實現(xiàn)答:參與不同代謝途徑的相應(yīng)酶類在不同細(xì)胞器的區(qū)域化分布,使同一代謝途徑一系列酶促反應(yīng)連續(xù)進(jìn)行,提高反應(yīng)速率。使不各種代謝途徑互不干擾,又利于彼此協(xié)調(diào),更有利于細(xì)胞調(diào)節(jié)物質(zhì)對各代謝途徑的特異調(diào)節(jié)。各種代謝物也相應(yīng)在不用亞細(xì)胞器或區(qū)域隔離分布,直接影響相關(guān)代謝的反應(yīng)速率。A 糖酵解在糖酵解中,大多數(shù)的反應(yīng)是可逆的,這些可逆反應(yīng)的方向、速率由底物和產(chǎn)物的濃度控制;參與這些可逆反應(yīng)的酶活性的改變,并不能決定反應(yīng)的方向。糖酵解途徑中有3個非平衡反應(yīng):己糖激酶(葡萄糖激酶)、6-磷酸果糖激酶-1和丙酮酸激酶催化的反應(yīng)。這3個反應(yīng)基本上是不可逆的,是糖酵解途徑流量的3個調(diào)節(jié)點(diǎn),分
35、別受變構(gòu)效應(yīng)劑和激素的調(diào)節(jié)。 B、糖的有氧氧化 三羧酸循環(huán)的速率和流量受多種因素的調(diào)控。在三羧酸循環(huán)中有三個不可逆反應(yīng):檸檬酸合酶、異檸檬酸脫氫酶和-酮戊二酸脫氫酶催化的反應(yīng)。目前一般認(rèn)為異檸檬酸脫氫酶和-酮戊二酸脫氫酶脫氫酶是三羧酸循環(huán)的調(diào)節(jié)點(diǎn)。異檸檬酸脫氫酶和-酮戊二酸脫氫酶在NADH/NAD+,ATP/ADP比率高時被反饋抑制。ADP還是異檸檬酸脫氫酶的變構(gòu)激活劑。另外,當(dāng)線粒體內(nèi)Ca+濃度升高時,Ca+不僅可以直接與異檸檬酸脫氫酶和-酮戊二酸脫氫酶結(jié)合,降低其對底物的Km而使酶激活;也可以激活丙酮酸脫氫酶復(fù)合體,從而推動三羧酸循環(huán)和有氧氧化的進(jìn)行。 C、脂代謝(脂酸的-氧化) 脂酸必須
36、經(jīng)過活化才能進(jìn)入線粒體進(jìn)行分解代謝。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及線粒體外膜上的脂酰CoA合成酶在ATP、CoASH、Mg2+存在的條件下,催化生成脂酰CoA。脂酰CoA進(jìn)入線粒體是脂酸-氧化的主要限速步驟,肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶是脂酸氧化的限速酶。在脂酸的-氧化過程中,主要是通過調(diào)節(jié)這些關(guān)鍵酶來實現(xiàn)調(diào)節(jié)脂代謝的調(diào)節(jié)。 5變構(gòu)調(diào)節(jié)及化學(xué)修飾調(diào)節(jié)概念、方式、意義(1)變構(gòu)調(diào)節(jié)概念:小分子化合物與酶分子活性中心以外的某一部位特異結(jié)合,引起酶蛋白分子構(gòu)象變化,從而改變酶的活性,這種調(diào)節(jié)稱為酶的變構(gòu)調(diào)節(jié)或別構(gòu)調(diào)節(jié)。 方式:變構(gòu)效應(yīng)劑 + 酶的調(diào)節(jié)亞基 疏松 緊密 酶的構(gòu)象改變 亞基聚合 亞基解聚 酶分子多聚化 酶的活性改變(激活或
37、抑制)意義: 代謝終產(chǎn)物反饋抑制 (feedback inhibition) 反應(yīng)途徑中的酶, 使代謝物不致生成過多。 變構(gòu)調(diào)節(jié)使能量得以有效利用,不致浪費(fèi)。 變構(gòu)調(diào)節(jié)使不同的代謝途徑相互協(xié)調(diào)。(2)化學(xué)修飾調(diào)節(jié)概念:酶蛋白肽鏈上某些殘基在酶的催化下發(fā)生可逆的共價修飾,從而引起酶活性改變,這種調(diào)節(jié)稱為酶的化學(xué)修飾。方式:磷酸化-去磷酸;乙酰化-脫乙酰;甲基化-去甲基;腺苷化-脫腺苷;SH 與 S S 互變。意義: 酶蛋白的共價修飾是可逆的酶促反應(yīng),在不同酶的作用下,酶蛋白的活性狀態(tài)可互相轉(zhuǎn)變。催化互變反應(yīng)的酶在體內(nèi)可受調(diào)節(jié)因素如激素的調(diào)控。 具有放大效應(yīng),效率較變構(gòu)調(diào)節(jié)高。6饑餓,應(yīng)急狀態(tài)三大
38、營養(yǎng)物質(zhì)的代謝狀態(tài)如何?(一)饑 餓 1. 短期饑餓(13天):(1)蛋白質(zhì)代謝變化,分解加強(qiáng),氨基酸異生成糖;(2)糖代謝變化 ,糖異生加強(qiáng),組織對葡萄糖利用降低;(3)脂代謝變化,脂肪動員加強(qiáng),酮體生成增多。 2. 長期饑餓:(1)蛋白質(zhì)代謝變化 ,蛋白質(zhì)分解減少;(2)糖代謝變化,肝腎糖異生增強(qiáng),肝糖異生的主要原料為乳酸、丙酮酸;(3)脂代謝變化,脂肪動員進(jìn)一步加強(qiáng),腦組織利用酮體增加。(2) 應(yīng) 激:(1) 血糖升高;(2) 脂肪動員增強(qiáng);(3)蛋白質(zhì)分解加強(qiáng)英語單詞Metabolic Interrelationships & Regulation 物質(zhì)代謝的聯(lián)系與調(diào)節(jié)Meta
39、bolic Specialty & Interrelationships of Tissues & Apparatus 組織、器官的代 謝特點(diǎn)及聯(lián)系The Regulation of Metabolism 代 謝 調(diào) 節(jié) key enzyme 關(guān)鍵酶limiting velocity enzymes 限速酶allosteric regulation 變構(gòu)調(diào)節(jié)chemical modification 化學(xué)修飾調(diào)節(jié)allosteric enzyme 變構(gòu)酶或別構(gòu)酶allosteric effector 變構(gòu)效應(yīng)劑 covalent modification 共價修飾inducer
40、 誘導(dǎo)劑 repressor 阻遏劑第十章 DNA的生物合成(復(fù)制)1遺傳信息傳遞的中心法則.中心法則的內(nèi)容:1)DNA通過復(fù)制,將基因信息代代相傳2)DNA通過基因表達(dá),決定了蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)、從而決定蛋白質(zhì)功能3)RNA參與DNA遺傳信息的表達(dá)4)RNA也可作為某些病毒遺傳信息的載體2簡述原核生物DNA-pol的種類及其作用?大題是考原核、真核復(fù)制過程中所用各種酶的功能原核生物的DNA聚合酶有三種:DNA-pol,DNA-pol,DNA-pol1)DNA-pol功能:只能延長約20個核苷酸-對復(fù)制中的錯誤進(jìn)行校讀,對復(fù)制和修復(fù)中出現(xiàn)的空隙進(jìn)行填補(bǔ)。2)DNA-pol功能:參與DNA損傷的應(yīng)
41、急狀態(tài)修復(fù);DNA-pol II基因發(fā)生突變,細(xì)菌依然能存活。3)DNA-pol功能: 是原核生物復(fù)制延長中真正起催化作用的酶。 3DNA聚合酶的即時校讀 DNA-pol的外切酶活性能夠切除錯配堿基;并利用其聚合酶活性摻入正確配對的底物,使復(fù)制可以繼續(xù)下去,這種功能稱為即使校讀。如果堿基配對正確, DNA-pol不表現(xiàn)活性。4DNA復(fù)制的保真性所依賴的三種機(jī)制。1. 遵守嚴(yán)格的堿基配對規(guī)律;2. DNA-pol在復(fù)制延長時對堿基的選擇功能;3. 復(fù)制出錯時DNA-pol的及時校讀功能。5復(fù)制的半不連續(xù)性,崗崎片斷復(fù)制的半不連續(xù)性:由于親代DNA的雙股鏈呈反向平行,DNA聚合酶只能以5'
42、3'方向聚合子代DNA鏈。因此,分別以兩條親代DNA鏈作為模板聚合子代DNA鏈時的方式是不同的。子鏈中有一條鏈合成方向與復(fù)制叉的前進(jìn)方向相同,這條新鏈稱為領(lǐng)頭鏈。而另一條鏈的合成方向與復(fù)制叉的前進(jìn)方向相反,只能斷續(xù)地合成53的多個短片段,稱為隨從連。.岡崎片段 :由于親代DNA雙鏈在復(fù)制時是逐步解開的,因此,隨從鏈的合成也是一段一段的。DNA在復(fù)制時,由隨從鏈所形成的一些子代DNA短鏈稱為岡崎片段。6原核生物DNA復(fù)制的各種酶與蛋白質(zhì)及其作用。1)解螺旋酶。利用ATP供能,作用于氫鍵,使DNA雙鏈解開成為兩條單鏈。2)引物酶。復(fù)制起始時催化生成RNA引物的酶。3)單鏈DNA結(jié)合蛋白。在
43、復(fù)制中維持模板處于單鏈狀態(tài)并保護(hù)單鏈的完整。 4)拓?fù)洚悩?gòu)酶可使DNA雙鏈中的一條鏈切斷,松開雙螺旋后再將DNA鏈連接起來,從而避免出現(xiàn)鏈的纏繞。拓?fù)洚悩?gòu)酶可切斷DNA雙鏈,使DNA的超螺旋松解后,再將其連接起來 5)DNA聚合酶 (作用見第二小題)6)核酸外切酶。能從核酸鏈的末端把核苷酸依次水解出來。7、何謂突變,突變的生物學(xué)意義及類型。 (了解影響突變的因素有哪些)遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)改變而引起的遺傳信息改變,均可稱為突變。從分子水平來看,突變就是DNA分子上堿基的改變。在復(fù)制過程中發(fā)生的DNA突變稱為DNA損傷。突變的意義:(1)突變是進(jìn)化、分化的分子基礎(chǔ)。(2)突變導(dǎo)致
44、基因型改變。 (3)突變導(dǎo)致死亡。(4)突變是某些疾病的發(fā)病基礎(chǔ)。突變的分子改變類型有錯配、缺失、插入和重排。(下面的介紹可省略吧)·錯配包括轉(zhuǎn)換和顛換,轉(zhuǎn)換是指發(fā)生在同型堿基之間,即嘌呤代替另一嘌呤,或嘧啶代替另一嘧啶。顛換是指發(fā)生在異型堿基之間,即嘌呤變嘧啶或嘧啶變嘌呤。·缺失是指一個堿基或一段核苷酸鏈從DNA大分子上消失。·插入是指原來沒有的一個堿基或一段核苷酸鏈插入到DNA大分子中間。·缺失或插入都可導(dǎo)致框移突變 。·框移突變是指三聯(lián)體密碼的閱讀方式改變,造成蛋白質(zhì)氨基酸排列順序發(fā)生改變。·重排是指DNA分子內(nèi)較大片段的交換。
45、影響突變的因素有物理因素,如紫外線、各種輻射?;瘜W(xué)因素如堿基類似物、羥胺類、亞硝酸鹽烷化劑等各種化學(xué)誘變劑。8簡述DNA損傷的三種主要修復(fù)方式1)切除修復(fù)。系統(tǒng)識別DNA雙螺旋變形,去除損傷的DNA,填補(bǔ)空隙和連接。2)重組修復(fù)。能夠修復(fù)雙鏈斷裂損傷。3)SOS修。當(dāng)DNA損傷廣泛難以繼續(xù)復(fù)制時,由此而誘發(fā)出一系列復(fù)雜的反應(yīng)。這種修復(fù)特異性低,對堿基的識別、選擇能力差。通過SOS修復(fù),復(fù)制如能繼續(xù),細(xì)胞是可存活的。然而DNA保留的錯誤較多,導(dǎo)致較廣泛、長期的突變。4)直接修復(fù)。利用酶簡單地逆轉(zhuǎn)DNA損傷。9逆轉(zhuǎn)錄及逆轉(zhuǎn)錄酶的三種活性。以RNA為模板,按照RNA中的核苷酸順序合成DNA,這與通常
46、轉(zhuǎn)錄過程中遺傳信息流從DNA到RNA的方向相反,故稱為逆轉(zhuǎn)錄。逆轉(zhuǎn)錄酶的三種活性:RNA或DNA作模板的dNTP聚合活性和RNase活性。10. DNA復(fù)制的基本規(guī)律 (1)半保留復(fù)制:當(dāng)DNA進(jìn)行復(fù)制時,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開成兩條單鏈,各自作為模板合成與之互補(bǔ)的新鏈。在子代DNA雙鏈中,一條是來自于親代,另一條完全重新合成 。由于堿基互補(bǔ),新形成的兩個子代DNA雙鏈,和親代母鏈DNA堿基序列完全一致。(2)雙向復(fù)制:原核生物復(fù)制時,DNA從起始點(diǎn)(origin)向兩個方向解鏈,形成兩個延伸方向相反的復(fù)制叉 。 (3)半不連續(xù)復(fù)制:見第五題11. 什么是端粒,端粒的功能,端粒酶的組成。端粒指真核生物
47、染色體線性DNA分子末端的結(jié)構(gòu)。端粒的功能是維持染色體的穩(wěn)定性;維持DNA復(fù)制的完整性。端粒酶由端粒酶RNA, 端粒酶協(xié)同蛋白和端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶組成。12. 引物,引物酶,引發(fā)體引物是由引物酶催化合成的短鏈RNA分子,長度約十幾個至幾十個核苷酸不等。引物酶是復(fù)制起始時催化生成RNA引物的酶。含有解螺旋酶、DnaC蛋白、引物酶和DNA復(fù)制起始區(qū)域的復(fù)合結(jié)構(gòu)稱為引發(fā)體。第十一章 RNA的生物合成英譯中structure gene 結(jié)構(gòu)基因 asymmetric transcription 不對稱轉(zhuǎn)錄template strand 模板鏈 coding strand 編碼鏈 ribosome 核糖體u
48、pstream 上游 downstream 下游 promoter 啟動子enhancer 增強(qiáng)子 stem-loop 莖環(huán) hairpin發(fā)夾cis-acting element 順式作用元件 trans-acting factors 反式作用因子transcriptional factors ,TF 轉(zhuǎn)錄因子 hetero-nuclear RNA, hn RNA 雜化核RNA split gene 斷裂基因 intron 內(nèi)含子 exon 外顯子 ribozyme 核酶思考題1. 原核生物和真核生物的RNA 聚合酶各是什么?目前原核生物研究得比較透徹的是大腸桿菌的RNA聚合酶,這是一個分子
49、量達(dá)480kD,由四種亞基2,組成五聚體的蛋白質(zhì)。:決定哪些基因被轉(zhuǎn)錄:與轉(zhuǎn)錄全過程有關(guān)(催化) :結(jié)合DNA模板(開鏈) 2,組成核心酶(core enzyme):有多種,辨認(rèn)轉(zhuǎn)錄的起始點(diǎn)。亞基加上核心酶稱為全酶,活細(xì)胞轉(zhuǎn)錄起始,需全酶,轉(zhuǎn)錄延長階段僅需核心酶。其他原核生物的RNA聚合酶,在結(jié)構(gòu)、組成和功能上均與大腸桿菌的RNA聚合酶相似。真核生物具有3種不同的RNA聚合酶,分別是RNA,RNA,RNA。(是考選擇題,而且考細(xì)了,是問以上哪個酶生成mRNA。我不會,(>_<) )2、原核生物的啟動序列和啟動序列的發(fā)現(xiàn)方法。 考大題原核生物的啟動序列是指RNA聚合酶識別、結(jié)合并啟動
50、轉(zhuǎn)錄的特異DNA序列。常采用RNA聚合酶保護(hù)法來研究發(fā)現(xiàn)它:先把一段基因分離出來,然后和提純的RNA聚合酶混合,再加進(jìn)核酸外切酶作用一定時間后,DNA鏈?zhǔn)芎怂嵬馇忻杆?,生成游離核苷酸。但有一段40至60堿基對的DNA片段是完整的,這表明,這段DNA因與RNA聚合酶結(jié)合而受到保護(hù),受保護(hù)的DNA位于結(jié)構(gòu)基因的上游。所以這一被保護(hù)的DNA區(qū)段,就是被RNA聚合酶辨認(rèn)和結(jié)合的區(qū)域,并在這里準(zhǔn)備開始轉(zhuǎn)錄。3、原核生物轉(zhuǎn)錄的起始 (一般熟悉)簡單來說,原核生物轉(zhuǎn)錄的起始就是RNA聚合酶結(jié)合到DNA模板上,DNA雙鏈局部解開,第一個NTP就可以加入,形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物。(1)RNA-pol全酶識別轉(zhuǎn)錄起
51、始點(diǎn)。 RNA-pol全酶結(jié)合于-35區(qū),該結(jié)合松弛。 全酶隨即移向-10區(qū),與-10區(qū)結(jié)合緊密,并跨越轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)。(2)DNA雙鏈解開,約17bp。(3)第一個nt 加入和第一個磷酸二酯鍵生成。 轉(zhuǎn)錄起始不需引物,第一個nt為GTP或ATP。隨即進(jìn)入第2個pppN, RNA聚合酶作用下發(fā)生第一次聚合反應(yīng),生成pppGpN-OH 3 ,稱四磷酸二核苷酸。(4)因子脫落。在RNA合成有10nt后,因子脫落,重新參加新的轉(zhuǎn)錄過程。4、原核生物轉(zhuǎn)錄的延長1. 基本情況 亞基從復(fù)合物上脫落后,核心酶構(gòu)象隨著發(fā)生改變,便于其在模板鏈上滑動,核心酶沿模板鏈3 5移動,按堿基互補(bǔ)配對原則以NTP為原料,沿
52、53方向延長RNA鏈。2、 轉(zhuǎn)錄空泡 轉(zhuǎn)錄時RNA 聚合酶分子可以覆蓋40bp以上的DNA分子段落,轉(zhuǎn)錄解鏈范圍小于20bp,產(chǎn)物RNA又和模板鏈配對形成長約12bp的RNA/DNA雜交雙鏈。3、遠(yuǎn)端: 遠(yuǎn)端RNA鏈伸出空泡,成單鏈結(jié)構(gòu),最遠(yuǎn)端是pppGpN。 遠(yuǎn)端DNA恢復(fù)雙鏈結(jié)構(gòu)。5、原核生物轉(zhuǎn)錄的終止 考大題原核生物轉(zhuǎn)錄終止分為 依賴Rho因子和非 依賴Rho因子兩大類,Rho因子是能控制轉(zhuǎn)錄終止的蛋白質(zhì),它能辨認(rèn)和結(jié)合RNA。1. 依賴Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止 Rho因子使RNA聚合酶構(gòu)象變化,使RNA聚合酶停頓。 Rho因子具ATP酶和解螺旋酶活性,使DNA/RNA雜化雙鏈拆離,RNA從轉(zhuǎn)錄復(fù)合物中釋放。 2.非依賴Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止DNA模板靠近終止處有特殊堿基序列,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA 3端形成莖環(huán)(發(fā)夾)結(jié)構(gòu),其后又有一段寡聚U, 從而使轉(zhuǎn)錄終止。 莖環(huán)結(jié)構(gòu)改變RNA pol的構(gòu)象,使酶不再向下游移動,使轉(zhuǎn)錄停頓。 RNA/DNA雜化短鏈本不穩(wěn)定,RNA分子要形成自己的局部雙鏈,DNA也要恢復(fù)雙鏈,雜化雙鏈趨于解體。 再加上莖環(huán)結(jié)構(gòu)后的一串寡聚U,rU/dA配對最不穩(wěn)定,使RNA鏈從模板上脫落。 6、真核生物的順式作用元件和反式作用因子的概念和分類順式作用元件指可影響自身基因表達(dá)活性的DNA序列。它包括
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