《實驗診斷學(xué)》貧血溶血性貧血的實驗室診斷內(nèi)容整理

1、貧血的實驗室診斷貧血的定義外周血中單位容積內(nèi)紅細(xì)胞計數(shù)（RBC）、血紅蛋白含量（Hb）或紅細(xì)胞比容（Het）低于正常下限。其中以血紅蛋白含量最為重要。貧血是一種癥狀，可以發(fā)生于多種疾病。貧血的檢查：一、貧血的確定12RBC(X 10/L)Hb(g/L)Het(L/L)男性4.04.51200.4女性3.54.01100.35孕婦100二、確定貧血的程度程度Hb值(g/L)癥狀輕度91正常值下限(120)癥狀輕微中度6190活動后心悸、氣促，需藥物治療重度3160休息時也有心悸、氣促，需藥物、輸血極重度30常合并貧血性心臟病三、確定貧血的類型(1)按形態(tài)學(xué)分類1.按MCVMCH MCH分類平均紅

2、細(xì)胞容積：每升血液中紅細(xì)胞比容/紅細(xì)胞數(shù)MCV=HCT 103/(1012XRBC) ( fL)正常參考值：8090fL平均紅細(xì)胞血紅蛋白量：每升血液中血紅蛋白量/紅細(xì)胞數(shù)MCH二Hgb/RBCPg)正常參考值：2732Pg平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度：每升血液中血紅蛋白量/血細(xì)胞比容MCHC=Hgb/HCTg/L)正常參考值：320360g/L可分成四類:大細(xì)胞性貧血巨幼細(xì)胞性貧血正常細(xì)胞性貧血急性失血性貧血、白血病小細(xì)胞低色素性貧血缺鐵性貧血(IDA)單純小細(xì)胞性貧血慢性感染性貧血2. Bessman分型即按MCV/RD分型平均紅細(xì)胞容積：每升血液中紅細(xì)胞比容/紅細(xì)胞數(shù)MCV=HCT103/(1

3、012XRBC) ( fL)正常參考值：8090fLRDW紅細(xì)胞容積分布寬度，反映外周血紅細(xì)胞異質(zhì)性的參數(shù)即紅細(xì)胞大小 均一程度?？煞殖闪悾盒〖?xì)胞同質(zhì)性貧血輕度B-珠蛋白生成障礙性貧血小細(xì)胞不同質(zhì)性貧血缺鐵性貧血、重型地中海貧血正細(xì)胞同質(zhì)性貧血急性失血性貧血正細(xì)胞不同質(zhì)性貧血早期缺鐵性貧血 大細(xì)胞同質(zhì)性貧血再生障礙性貧血大細(xì)胞不同質(zhì)性貧血巨幼細(xì)胞性貧血（2）按病因?qū)W分類1.紅細(xì)胞生成減少：骨髓造血功能障礙、造血原料缺乏、骨髓抑制（感染）骨髓替代（纖維化）2.紅細(xì)胞破壞增加：內(nèi)部膜、酶、珠蛋白；外部免疫、感染、 鉛中毒3.失血：急性失血、慢性潰瘍、月經(jīng)紊亂、血紅蛋白尿（3）按骨髓增生程度（僅適

4、用于國內(nèi)）增生性貧血：缺鐵貧、溶貧、巨幼貧（幼紅細(xì)胞20%增生低下性貧血：再障、純紅再障（幼紅細(xì)胞10%）（4）其它幫助診斷貧血類型的檢查網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)：正常值： 百分比法0.51.5%絕對計數(shù)法（2484）X109/L意義：反映骨髓造血功能，觀察療效（治療性試驗） ，病情觀察的指標(biāo)四、常見貧血的實驗診斷DIC、(1)缺鐵性貧血:血象MCV MCH MCH減小，RDW升高骨髓象一一有核細(xì)胞、紅系細(xì)胞增生，幼紅細(xì)胞較小骨髓鐵染色一一胞內(nèi)鐵陽性率降低，是金標(biāo)準(zhǔn)(2)巨幼細(xì)胞性貧血血象大卵圓形紅細(xì)胞增多，中粒核分葉增加骨髓象一一出現(xiàn)各階段巨幼紅細(xì)胞，Howell-Jolly小體，嗜堿性點彩五、貧血的

5、診斷要點貧血是綜合性的，應(yīng)找出貧血原因，才能進(jìn)行合理有效治療實驗室檢查策略：血液檢查是貧血診斷與鑒別診斷不可缺少的措施，檢查由簡而繁一一外周血象、網(wǎng)織紅細(xì)胞、血紅蛋白分析檢查、紅細(xì)胞脆性試驗、特殊檢查。外周血象診斷舉例：紅細(xì)胞小、染色淺、中央淡染區(qū)擴大一一多提示缺鐵性貧血紅細(xì)胞呈球形、染色深遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥紅細(xì)胞大小不等、染色淺并有異形、靶形、和碎片者一一多提示地中海貧血紅細(xì)胞形態(tài)正常急性溶貧或骨髓造血功能障礙 溶血性貧血的實驗室診斷一、定義：正常人骨髓具有68倍的代償造血功能，當(dāng)紅細(xì)胞的破壞程度較輕，骨 髓的代償造血功能足以補償其損耗時，可不發(fā)生貧血，稱為代償性溶血病。如紅細(xì)胞的生存時

6、間縮短至1520天以下， 破壞速度超過骨髓的代償造血能力時，才出現(xiàn)貧血，稱為溶血性貧血。二、分類：（1）按發(fā)病機制分類:1.紅細(xì)胞內(nèi)在缺陷：膜缺陷遺傳性球形細(xì)胞增多癥?珠蛋白異常鐮刀形細(xì)胞貧血癥?酶缺陷一一G6PD缺乏，導(dǎo)致蠶豆病2.紅細(xì)胞外在因素：免疫自身免疫、同種免疫?物理因素、感染、毒素?獲得性膜異常陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥（2）按發(fā)生部位分類血管內(nèi)溶血一一RBC（紅細(xì)胞）在血管內(nèi)破壞，見于DIC、機械性微血管病變、燒傷、輸血血管外溶血一一RBC在單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬或破壞 原位溶血-幼紅細(xì)胞未成熟就在骨髓中被破壞，又稱紅細(xì)胞無效性生成。三、溶血的病生原理（1） 血紅蛋白的代謝血管內(nèi)溶

7、血是紅細(xì)胞在血管內(nèi)直接溶解破壞，進(jìn)入血漿的Hb與結(jié)合珠蛋白Hp結(jié)合并轉(zhuǎn)運至肝臟清除。游離Hb超過Hp的清除速度時，形成高血紅蛋白血癥， 可經(jīng)腎小球重吸收。嚴(yán)重時則形成血紅蛋白尿。 腎小管上皮細(xì)胞吸收的過量Hb以含 鐵血黃素形式沉積在細(xì)胞內(nèi)，脫落后形成含鐵血黃素尿。嚴(yán)重溶血時,Hb分解產(chǎn)生的亞鐵血紅素被氧化、結(jié)合成為高鐵血紅素白蛋白。血管外溶血一一紅細(xì)胞在單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)中被吞噬或破壞，釋出的Hb被分 解為鐵、珠蛋白和卟啉，卟啉被轉(zhuǎn)變?yōu)橛坞x膽紅素，導(dǎo)致血漿游離膽紅素增高。（2） 紅細(xì)胞的異常形態(tài)改變、發(fā)生吞噬和自身凝集現(xiàn)象、形成海因小體（體外活體染色后，光鏡下發(fā)現(xiàn)的12卩m顆粒狀折光小體。見于

8、不穩(wěn)定血紅蛋白病、G6PD缺陷癥和芳香族 苯胺或硝基類化合物中毒所致的溶貧。）、紅細(xì)胞滲透脆性增加-球形紅細(xì)胞、紅 細(xì)胞壽命縮短。（3）紅細(xì)胞代償性增生溶血發(fā)生后骨髓造血功能亢進(jìn)，紅細(xì)胞系代償性增生。血液中的網(wǎng)織紅細(xì) 胞（未成熟的年輕紅細(xì)胞）、甚至幼紅細(xì)胞增加。四、臨床表現(xiàn)急性：發(fā)熱、畏寒，可出現(xiàn)Hb尿，腎功能改變慢性：貧血、黃疸、脾腫大，免疫指標(biāo)異常，膽紅素代謝異常五、實驗室檢查（1）確定溶血的依據(jù)、確定溶血部位。1RBC破壞增多的依據(jù)1. |RBC壽命測定（最佳）正常值:2532天。51Cr同位素標(biāo)記，半衰期15天，說明有溶血存在。2.紅細(xì)胞形態(tài)改燈 可見破碎的、球形、靶形、橢圓形等的紅細(xì)

9、胞。3.血清乳酸脫氫酶活性測定|正常值：80U250U/L，升高（600U/L）為RBC破壞指標(biāo)。2RBC分別在血管內(nèi)、血管外被破壞的相應(yīng)檢測血管內(nèi)溶血4.血漿游離血紅蛋白Hb測定正常值：50mg/L5.血清結(jié)合珠蛋白Hp測定|正常值：0.71.5g/L，各種溶血時結(jié)合即檢測紅細(xì)胞滲透脆性。RBC表面積/RBC容積比值與RBC脆性成反比珠蛋白均可減低，以血管內(nèi)溶血減低最為顯著，增高則見于炎癥、感染、組織壞死、 惡性腫瘤、風(fēng)濕性疾病、口服避孕藥、類固醇激素治療。6.血紅蛋白尿測定血管內(nèi)有大量紅細(xì)胞破壞，血漿中的游離Hb量超過1000mg/L時出現(xiàn)，正常值：陰性7.含鐵血黃素尿試驗正常時：陰性8.

10、血漿高鐵血紅素白蛋白檢測正常時：陰性血管外溶血3RBC代償性增生的依據(jù)10.血象觀察11.網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)（無特異性）正常：0.51.5%,絕對值（2085）X109/L，溶貧時達(dá)525%甚至75%上12.骨髓象觀察（2）確定溶血性貧血的病因的檢查紅細(xì)胞膜缺陷所致溶血的檢查:9.高膽紅素血癥尿膽原血管外溶血時會增高即檢測紅細(xì)胞滲透脆性。RBC表面積/RBC容積比值與RBC脆性成反比1. RBC滲透脆性試驗檢測紅細(xì)胞在不同濃度低滲NaCl溶液中的抵抗力,脆性增高一一遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥脆性減低地中海貧血、缺鐵性貧血2.|自身溶血試驗及其糾正試驗正常人紅細(xì)胞經(jīng)孵育48h后，溶血率很低4.0%，加葡

11、萄糖或ATP后更低（0.6%）。膜缺陷性溶貧時，溶血率升高，但可被糾 正。3.酸化溶血試驗（Ham實驗）|特異性高，是國內(nèi)外公認(rèn)的陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥PNH確診試驗，利用補體在弱酸性環(huán)境中激活，并攻擊RBC膜，致溶血。4.蔗糖溶血試驗在低離子強度的蔗糖水溶液中，可促進(jìn)補體與紅細(xì)胞的 結(jié)合，引發(fā)溶血紅細(xì)胞酶缺陷所致溶血的檢查5.自身溶血試驗及其糾正實驗先天性非球形細(xì)胞性溶血， 由于紅細(xì)胞內(nèi)酶缺陷，葡萄糖酵解障礙，不能提供足量ATP,鈉泵作用減弱，溶血增強。屬于葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺陷癥：加入葡萄糖和ATP均可糾正屬于丙酮酸激酶缺陷癥：加入葡萄糖不能糾正，加入ATP才可糾正?？箟难嵩囼灳鶠?/p>

12、篩選試驗。9.葡萄糖-6-磷酸脫氫酶熒光斑點試驗10.丙酮酸激酶熒光篩選試驗6.變性珠蛋白小體生成試驗7.高鐵血紅蛋白還原試驗8.氰化物-均為酶活性測定試驗?珠蛋白生成異常的檢測正常血紅蛋白的種類正常成人2%-3%時間，只有含HbF的紅細(xì)胞不被洗脫，再用伊紅染色呈鮮紅色 地中海貧血患者陽性紅細(xì)胞增多12.? HbH包涵體生成試驗參考值05% HbH病者陽性可達(dá)50%以上13.血紅蛋白電泳分析條帶顯示順序為HbA-HbA-NHb-點樣線。HbA增高是診斷P-輕型地中海貧血的重要依據(jù)14.?HbF定量測定（堿變性試驗）HbF具抗堿作用，正常值：成人2% 4%為升高，主要見于p-地中海貧血15.異丙醇沉淀試驗正常人Hb 40min后幵始沉淀。有不穩(wěn)定血紅蛋白存在，10min內(nèi)出現(xiàn)混濁沉淀HbA正常成人95%HbF正常成人2%為胎兒期Hb主要成分11.?HbF酸洗脫法測定HbF抗酸能力較HbA強，在酸性緩沖液中保濕一定成人陽性率小于1%4自身免疫性溶血性貧血的檢測16.抗人球蛋白試驗|抗人球蛋白抗體是完全