分析化學(xué)課件 第一學(xué)期 第10章

1、1沉淀滴定法沉淀滴定法滴定劑滴定劑莫爾法莫爾法法揚(yáng)司法法揚(yáng)司法佛爾哈德法佛爾哈德法終點(diǎn)顏色變化終點(diǎn)顏色變化指示劑指示劑 AgNO3 K2CrO4磚紅色磚紅色NH4SCN鐵銨礬鐵銨礬NH4Fe(SO4)2紅色紅色吸附指示劑吸附指示劑如熒光黃如熒光黃 AgNO3 紅色紅色2化化學(xué)學(xué)分分析析儀儀器器分分析析酸堿滴定酸堿滴定配位滴定配位滴定氧化還原滴定氧化還原滴定沉淀滴定沉淀滴定光化學(xué)分析光化學(xué)分析重量分析滴定分析滴定分析第六章第六章 吸光光度法吸光光度法3本次課主要內(nèi)容：本次課主要內(nèi)容：6.1 吸光光度法概述吸光光度法概述 吸光光度法的特點(diǎn)吸光光度法的特點(diǎn)光吸收的基本定律光吸收的基本定律比色法和吸光

2、光度法及其儀器比色法和吸光光度法及其儀器 重點(diǎn)與難點(diǎn)：重點(diǎn)與難點(diǎn)：朗伯朗伯比爾定律；比爾定律；摩爾吸光系數(shù)及桑德爾靈敏度的概念及計(jì)算摩爾吸光系數(shù)及桑德爾靈敏度的概念及計(jì)算；分光光度計(jì)分光光度計(jì)4第六章第六章 吸光光度法吸光光度法吸光光度法（分光光度法）：基于物質(zhì)吸光光度法（分光光度法）：基于物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收對(duì)光的選擇性吸收而建而建立起來的方法立起來的方法6.1 6.1 概述概述一、吸光光度法特點(diǎn)一、吸光光度法特點(diǎn)1.1.光的基本性質(zhì)光的基本性質(zhì)光是一種電磁波，不同波長的光具有不同的能量光是一種電磁波，不同波長的光具有不同的能量hchE當(dāng)用不同波長的光照射物質(zhì)時(shí)，引起物質(zhì)內(nèi)部不同能當(dāng)用不同波

3、長的光照射物質(zhì)時(shí)，引起物質(zhì)內(nèi)部不同能量能級(jí)的躍遷量能級(jí)的躍遷5電磁波譜范圍表6遠(yuǎn)紫外遠(yuǎn)紫外近紫外近紫外 可見可見近紅外近紅外中紅外中紅外 遠(yuǎn)紅外遠(yuǎn)紅外（真空紫外）（真空紫外）10nm200nm200nm 400nm400nm 750nm750 nm 2.5 m2.5 m 50 m50 m 300 m7圖圖6-1分子中電子能級(jí)、振動(dòng)能級(jí)和轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)示意圖分子中電子能級(jí)、振動(dòng)能級(jí)和轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)示意圖2、吸收光譜產(chǎn)生的原理、吸收光譜產(chǎn)生的原理1）分子吸收光譜）分子吸收光譜 分子具有三種不同的能級(jí)：電子能級(jí)、轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)、振動(dòng)能級(jí)分子具有三種不同的能級(jí)：電子能級(jí)、轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)、振動(dòng)能級(jí)10105 5 同一物質(zhì)與不同

4、顯色劑生成不同有色化合物，具同一物質(zhì)與不同顯色劑生成不同有色化合物，具有不同的有不同的值值， 在一定條件下為一常數(shù)。在一定條件下為一常數(shù)。215 5、桑德爾靈敏度，用、桑德爾靈敏度，用S S表示表示1 1）S S的定義：的定義：S S是指當(dāng)儀器的檢測(cè)極限為是指當(dāng)儀器的檢測(cè)極限為A=0.001A=0.001時(shí)時(shí), ,單位截面單位截面積光程積光程內(nèi)所能檢出吸光內(nèi)所能檢出吸光物質(zhì)的最低含量物質(zhì)的最低含量（截面積為（截面積為1cm1cm2 2的的液層，在一定波長處測(cè)得的吸光度液層，在一定波長處測(cè)得的吸光度A A為為0.0010.001時(shí)，所含待測(cè)時(shí)，所含待測(cè)物質(zhì)的質(zhì)量）物質(zhì)的質(zhì)量）, , S S越小越

5、靈敏（越小越靈敏（gcmgcm-2-2） 2 2）與與S S的關(guān)系：的關(guān)系： A=bc = 0.001 ，則，則cb=0.001/； c的單位為的單位為mol/L，可變，可變?yōu)闉閙ol/1000cm3； b單位為單位為cm，cb/1000為為mol/cm2;MMS310001. 0）（236g10101000cmScbMMcb22式中式中M的單位為的單位為gmol-1，的單位為的單位為Lmol-1cm-124.0050. 0101 . 185.55cmgMS 例例1：鐵（：鐵（）濃度為）濃度為5.010-4 gL-1 的溶液，與的溶液，與 1，10-鄰二鄰二氮菲反應(yīng)，生成橙紅色絡(luò)合物。該絡(luò)合物

6、在波長氮菲反應(yīng)，生成橙紅色絡(luò)合物。該絡(luò)合物在波長508nm，比比色皿厚度為色皿厚度為2cm時(shí)，測(cè)得時(shí)，測(cè)得A=0.19。計(jì)算計(jì)算1，10-鄰二氮菲鐵的鄰二氮菲鐵的及及S 需要知兩個(gè)公式需要知兩個(gè)公式 A= b c 以及以及S =M/ , 解：已知解：已知 M (Fe)=55.85 C= 5.010-4/ 55.85=8.9510-6 mol/L =A / bc = 0.19/28.9510-6= 1.1104Lmol-1cm-123B. 用用4,7-二苯基鄰二氮菲光度法測(cè)定鐵二苯基鄰二氮菲光度法測(cè)定鐵 5332.2104 Lmol-1cm-1B方法比方法比A方法的靈敏度高方法的靈敏度高.A.

7、用鄰二氮菲光度法測(cè)定鐵時(shí)，用鄰二氮菲光度法測(cè)定鐵時(shí)，5081.1104 Lmol-1cm-1S = 55.85/(1.1104)0.0051 ( gcm-2)S = 55.85/(2.2104)0.0025 ( gcm-2)24三、比色法和吸光光度法及其儀器三、比色法和吸光光度法及其儀器1 1、目視比色法和吸光光度法的特點(diǎn)目視比色法和吸光光度法的特點(diǎn)：1 1）靈敏度：）靈敏度：質(zhì)量分?jǐn)?shù)質(zhì)量分?jǐn)?shù)1%-10-5的微量組分，甚至的微量組分，甚至10-610-8痕痕量組分量組分2 2）準(zhǔn)確度：準(zhǔn)確度：目視比色分析，相對(duì)誤差目視比色分析，相對(duì)誤差5 510%10%，分光光度法，分光光度法，2 25%5%

8、3 3）應(yīng)用廣泛：）應(yīng)用廣泛：可測(cè)定幾乎所有無機(jī)離子和許多有機(jī)物可測(cè)定幾乎所有無機(jī)離子和許多有機(jī)物4 4）儀器簡單、操作簡便、快速）儀器簡單、操作簡便、快速252 2、目視比色法、目視比色法1 1) )定義：定義：用眼睛比較溶液顏色深淺以確定物質(zhì)含量的方法用眼睛比較溶液顏色深淺以確定物質(zhì)含量的方法。2 2) ) 優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：設(shè)備簡單，操作簡便，適宜于大批試樣分析；靈設(shè)備簡單，操作簡便，適宜于大批試樣分析；靈敏度高，不要求嚴(yán)格遵守比爾定律敏度高，不要求嚴(yán)格遵守比爾定律。3 3) ) 用途用途: :用在要求不高的常規(guī)分析中用在要求不高的常規(guī)分析中。4 4) ) 缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：準(zhǔn)確度不高，標(biāo)準(zhǔn)系列不能

9、久存準(zhǔn)確度不高，標(biāo)準(zhǔn)系列不能久存。263 3、吸光光度法、吸光光度法 借助于借助于分光光度計(jì)分光光度計(jì)來測(cè)量一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，來測(cè)量一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后根據(jù)被測(cè)試液的吸光度，從標(biāo)，然后根據(jù)被測(cè)試液的吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得被測(cè)物質(zhì)的濃度或含量準(zhǔn)曲線上求得被測(cè)物質(zhì)的濃度或含量A b c工作曲線法工作曲線法(校準(zhǔn)曲線校準(zhǔn)曲線) 0 1.0 2.0 3.0 4.0 c(mg/mL)A。 。 。 。*0.800.600.400.200.00Axcx27特點(diǎn)：特點(diǎn)：測(cè)定吸光度測(cè)定吸光度 入射光為較純單色光，準(zhǔn)確度高入射光為較純單色光，準(zhǔn)確度高 利用吸光度加合性，可

10、測(cè)定兩種以上物質(zhì)利用吸光度加合性，可測(cè)定兩種以上物質(zhì) 在紫外或紅外區(qū)域也可測(cè)定在紫外或紅外區(qū)域也可測(cè)定目視比色法和吸光光度法的區(qū)別目視比色法和吸光光度法的區(qū)別：吸光光度法比較有色溶液對(duì)某一波長光的吸光光度法比較有色溶液對(duì)某一波長光的吸收吸收情況，情況，目視比色法是比較目視比色法是比較透過光透過光的強(qiáng)度的強(qiáng)度4 4、分光光度計(jì)及其基本部件、分光光度計(jì)及其基本部件0.57529氫燈，氘燈，氫燈，氘燈，185 350 nm； 鎢燈，鎢燈，360 800 nm.基本要求：光源強(qiáng)，能量分布均勻，穩(wěn)定基本要求：光源強(qiáng)，能量分布均勻，穩(wěn)定作用：將復(fù)合光色散成單色光作用：將復(fù)合光色散成單色光棱鏡：玻璃，石英棱

11、鏡：玻璃，石英光柵：光柵：平面透射光柵，反射光柵平面透射光柵，反射光柵可見光區(qū)用玻璃，紫外光區(qū)用石英可見光區(qū)用玻璃，紫外光區(qū)用石英盛放試液（比色皿）盛放試液（比色皿）30 /nm鎢燈（鎢燈（熱輻射光源熱輻射光源）40040060060080080010001000氙燈氙燈（氣體放電光源氣體放電光源）氫燈氫燈強(qiáng)度強(qiáng)度31棱鏡：根據(jù)光的折射原理將復(fù)合光色散為不同波長棱鏡：根據(jù)光的折射原理將復(fù)合光色散為不同波長的單色光的單色光玻璃棱鏡適用于可見光玻璃棱鏡適用于可見光石英棱鏡在可見光和紫外都可用石英棱鏡在可見光和紫外都可用入射狹縫入射狹縫準(zhǔn)直透鏡準(zhǔn)直透鏡棱鏡棱鏡聚焦透鏡聚焦透鏡出射狹縫出射狹縫白光白光

12、紅紅紫紫1 12 2800 600 50040032光柵：根據(jù)光的干涉和衍射原理，將復(fù)合光分解為不同波長光柵：根據(jù)光的干涉和衍射原理，將復(fù)合光分解為不同波長的單色光的單色光 光柵的分辨率比棱鏡大，可用的波長范圍也較寬。光柵的分辨率比棱鏡大，可用的波長范圍也較寬。M1M2出出射射狹狹縫縫光屏光屏透透鏡鏡平面透平面透射光柵射光柵33h （片）（片）紅敏管紅敏管 625-1000 nm藍(lán)敏管藍(lán)敏管 200-625 nm 光電管光電管( (Phototube) )34光電倍增管光電倍增管( (Photomultiplier Tube, PMT) )1個(gè)光子可產(chǎn)生個(gè)光子可產(chǎn)生106107個(gè)電子個(gè)電子16

13、0-700 nm35361 1、人眼能感覺到的光稱為可見光，其波長范圍是、人眼能感覺到的光稱為可見光，其波長范圍是A.400750nm B.200320nmA.400750nm B.200320nmC.200750nm D.2001000nmC.200750nm D.2001000nm答案：答案： A A2 2 、符合比爾定律的一有色溶液，當(dāng)其濃度增大時(shí)，、符合比爾定律的一有色溶液，當(dāng)其濃度增大時(shí)，最大吸收波長和吸光度分別是最大吸收波長和吸光度分別是A.A.不變，增加不變，增加 B.B.不變，減少不變，減少C. C.增加，不變?cè)黾樱蛔?D.D.減少，不變減少，不變答案：答案： A A 373

14、 3、下列表述不正確的是：、下列表述不正確的是：A.A.吸收光譜曲線，表明了吸光度隨波長的變化關(guān)系吸收光譜曲線，表明了吸光度隨波長的變化關(guān)系B.B.吸收光譜曲線中吸收光譜曲線中, ,最大吸收處的波長為最大吸收波長最大吸收處的波長為最大吸收波長C.C.吸收光譜曲線，以波長為縱坐標(biāo)吸收光譜曲線，以波長為縱坐標(biāo), ,以吸光度為橫坐標(biāo)以吸光度為橫坐標(biāo)D.D.吸收光譜曲線，表明了吸光物質(zhì)的吸收特性吸收光譜曲線，表明了吸光物質(zhì)的吸收特性答案：答案： C C4 4、影響有色物質(zhì)摩爾吸收系數(shù)的因素是、影響有色物質(zhì)摩爾吸收系數(shù)的因素是A.A.吸收池厚度吸收池厚度 B.B.入射光波長入射光波長C. C.有色物質(zhì)溶

15、液的濃度有色物質(zhì)溶液的濃度 D.D.入射光的強(qiáng)度入射光的強(qiáng)度答案：答案： B B385 5、某有色物質(zhì)溶液，遵守比爾定律，當(dāng)其濃度為、某有色物質(zhì)溶液，遵守比爾定律，當(dāng)其濃度為c c 時(shí)，時(shí)，用用1.001.00cmcm比色皿測(cè)得其透光度為比色皿測(cè)得其透光度為T T，當(dāng)濃度減小為當(dāng)濃度減小為0.50 0.50 c c 時(shí)，在同樣條件下測(cè)定，其透光率應(yīng)為時(shí)，在同樣條件下測(cè)定，其透光率應(yīng)為A.A.T T 2 2 B.2 B.2T T C. C.T T 1/21/2 D. D.T T / 2/ 2答案：答案： C C lg1/lg1/T T = = b c b c6 6、紫外可見分光光度計(jì)在可見區(qū)測(cè)量

16、時(shí)所用光源是紫外可見分光光度計(jì)在可見區(qū)測(cè)量時(shí)所用光源是A.A.氫燈氫燈 B.B.鎢燈鎢燈 C. C.空心陰極燈空心陰極燈 D.D.紅外燈紅外燈答案：答案： B B39同學(xué)們好！同學(xué)們好！上課了！大家安靜！上課了！大家安靜！40朗伯比爾定律朗伯比爾定律6.1 6.1 概述概述bcKbcIIAtOlg吸光光度法吸光光度法 借助于分光光度計(jì)來測(cè)量一系列借助于分光光度計(jì)來測(cè)量一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后根據(jù)被測(cè)試液的吸光度根據(jù)被測(cè)試液的吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得被測(cè)物質(zhì)的濃度或含量從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得被測(cè)物質(zhì)的濃度或含量4142將待測(cè)組分轉(zhuǎn)化成有色化合物的的

17、反應(yīng)。將待測(cè)組分轉(zhuǎn)化成有色化合物的的反應(yīng)。 M RMR（絡(luò)合反應(yīng)為主）（絡(luò)合反應(yīng)為主） （1）選擇性好；）選擇性好； （2）靈敏度高，）靈敏度高，104； （3）有色化合物）有色化合物MR要穩(wěn)定，不分解；要穩(wěn)定，不分解； （4）MR的組成要的組成要恒恒定；定； （5）MR與與R顏色差別大顏色差別大nmRMR6043：助色團(tuán)助色團(tuán)NH，OH，X （孤對(duì)電子）孤對(duì)電子）neO生色團(tuán)：生色團(tuán)：NN，CO，OC=S,N （共軛雙鍵）共軛雙鍵）e3 3、顯色劑、顯色劑與待測(cè)組分形成有色化合物的試劑與待測(cè)組分形成有色化合物的試劑無機(jī)顯色劑（不常用）無機(jī)顯色劑（不常用）2422,MoOOHSCN有機(jī)顯色劑有

18、機(jī)顯色劑44常用有機(jī)顯色劑的類型常用有機(jī)顯色劑的類型NNOHCOOHSO3HOO型：型：NNNOH OHON型型：PARNH NHNSNS型型：雙硫腙雙硫腙NN型：型：鄰二鄰二氮菲氮菲磺基水楊酸磺基水楊酸45nmFe520,max3nmNi470,max2nmFe508,max2CuCu2+2+, Pb, Pb2+2+，ZnZn2+2+, Cd, Cd2+2+, Hg, Hg2+2+nmPb520,max246主要用于測(cè)定稀土離子主要用于測(cè)定稀土離子nmAl530,max33Tl474 4、多元絡(luò)合物、多元絡(luò)合物a a、三元混配絡(luò)合物、三元混配絡(luò)合物 用于釩的測(cè)定，靈敏度高，選擇性好用于釩的測(cè)

19、定，靈敏度高，選擇性好b b、離子締合物、離子締合物 金屬離子首先與絡(luò)合劑生成絡(luò)陰離子或絡(luò)陽離子，金屬離子首先與絡(luò)合劑生成絡(luò)陰離子或絡(luò)陽離子，然后再與帶相反電荷的離子生成離子締合物然后再與帶相反電荷的離子生成離子締合物c c、金屬離子、金屬離子絡(luò)合劑絡(luò)合劑表面活性劑體系表面活性劑體系 形成膠束化合物，吸收峰向長波方向移動(dòng)，靈敏形成膠束化合物，吸收峰向長波方向移動(dòng)，靈敏度顯著提高度顯著提高d d、雜多酸、雜多酸1 : 1 : 1:22PAROHV48二、顯色條件的選擇二、顯色條件的選擇491 1、溶液的酸度、溶液的酸度M + nR = MRnOH-H+M(OH)nHRRH = + H+ 1pH

20、1350適宜酸度通過實(shí)驗(yàn)確定，作適宜酸度通過實(shí)驗(yàn)確定，作A-pHA-pH曲線確定最佳曲線確定最佳pH（c(M)、 c(R)一定）一定）51實(shí)際工作中，作實(shí)際工作中，作 A CR 曲線，尋找適宜曲線，尋找適宜 CR 范圍范圍2、顯色劑的用量：、顯色劑的用量： M + nR = MRn平臺(tái)處用量平臺(tái)處用量52如如SCN-與與Mo() 需嚴(yán)格控制用量需嚴(yán)格控制用量如如SCN-與與Fe3+配位數(shù)越高，顏色越深配位數(shù)越高，顏色越深需嚴(yán)格控制用量需嚴(yán)格控制用量533、溫度的選擇、溫度的選擇實(shí)際工作中，作實(shí)際工作中，作 A T 曲線，尋找適宜反應(yīng)溫度。曲線，尋找適宜反應(yīng)溫度。4、反應(yīng)時(shí)間的選擇、反應(yīng)時(shí)間的選

21、擇實(shí)際工作中，作實(shí)際工作中，作 A t 曲線，尋找適宜曲線，尋找適宜 反應(yīng)時(shí)間。反應(yīng)時(shí)間。2550t /minA545、溶劑：、溶劑：1）降低有色化合物離解度，增加靈敏度）降低有色化合物離解度，增加靈敏度 如在如在Fe(SCN)3的溶液中加入與水混溶的有機(jī)試劑的溶液中加入與水混溶的有機(jī)試劑（如丙酮），由于降低了（如丙酮），由于降低了Fe(SCN)3的解離度而使顏的解離度而使顏色加深，提高了測(cè)定靈敏度。色加深，提高了測(cè)定靈敏度。2）提高顯色反應(yīng)的速率，影響有色絡(luò)合物的溶解度）提高顯色反應(yīng)的速率，影響有色絡(luò)合物的溶解度和組成和組成 如用氯代磺酚如用氯代磺酚S法測(cè)定鈮（法測(cè)定鈮（V），水中需幾個(gè)?。?/p>

22、，水中需幾個(gè)小時(shí)，加入丙酮后只需時(shí)，加入丙酮后只需30min556、干擾及其消除：、干擾及其消除：（1）控制溶液酸度；）控制溶液酸度；（2）加入掩蔽劑；）加入掩蔽劑；（3）利用氧化還原反應(yīng)改變離子的狀態(tài)；）利用氧化還原反應(yīng)改變離子的狀態(tài)；（4）選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL，要求吸收大，干擾小；）選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL，要求吸收大，干擾?。唬?）選擇合適的參比溶液；）選擇合適的參比溶液；（6）采用適當(dāng)?shù)念A(yù)先分離的方法。）采用適當(dāng)?shù)念A(yù)先分離的方法。56選選520nm進(jìn)行測(cè)定進(jìn)行測(cè)定三、測(cè)量波長和吸光度范圍的選擇三、測(cè)量波長和吸光度范圍的選擇1 1、測(cè)量波長、測(cè)量波長v “ “最大吸收原則最大吸收原則” ” 無干擾無干擾

23、，選選maxmax v”吸收最大，干擾最小吸收最大，干擾最小”：有干擾時(shí)有干擾時(shí)57 2 2、吸光度范圍、吸光度范圍 A A 在在0.2-0.80.2-0.8之間（誤差最?。┲g（誤差最?。?A A 過大過大, ,稀釋或選厚度小的比色皿稀釋或選厚度小的比色皿 A A 小小, ,選厚度大的比色皿選厚度大的比色皿cbA58I0It四、參比溶液的選擇四、參比溶液的選擇A (樣樣) = A (待測(cè)吸光物質(zhì)待測(cè)吸光物質(zhì)) + A （干擾）干擾）+ A （池）池）A （參比）參比） = A （干擾）干擾）+ A （池）池）59無色無色無吸收無吸收溶劑溶劑蒸餾水蒸餾水有色有色無吸收無吸收吸收吸收不加顯色不加

24、顯色劑的試液劑的試液無色無色吸收吸收吸收吸收不加試樣不加試樣溶液的試溶液的試劑空白劑空白有色有色吸收吸收吸收吸收吸收吸收顯色劑顯色劑 + 試液試液 + 待測(cè)組分待測(cè)組分的掩蔽劑的掩蔽劑試液試液顯色劑顯色劑吸光物質(zhì)吸光物質(zhì)參比液參比液60五、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作1 1、制作依據(jù)：比爾定律、制作依據(jù)：比爾定律 A A = =KbcKbc 吸光度與吸光物質(zhì)的含量呈正比關(guān)系吸光度與吸光物質(zhì)的含量呈正比關(guān)系2 2、制作方法：、制作方法：1 1）在選擇的實(shí)驗(yàn)條件下，從低濃度到高濃度分別測(cè)量一系）在選擇的實(shí)驗(yàn)條件下，從低濃度到高濃度分別測(cè)量一系列（不少于列（不少于5 5）不同含量的標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度）不同含量的標(biāo)準(zhǔn)

25、溶液的吸光度2 2）以標(biāo)準(zhǔn)溶液中）以標(biāo)準(zhǔn)溶液中待測(cè)組分的含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐待測(cè)組分的含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)標(biāo)作圖，得到一條通過原點(diǎn)的直線，稱為標(biāo)準(zhǔn)曲線（或作圖，得到一條通過原點(diǎn)的直線，稱為標(biāo)準(zhǔn)曲線（或工作曲線）。工作曲線）。3 3）再測(cè)量待測(cè)溶液的吸光度，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上就可以查到與）再測(cè)量待測(cè)溶液的吸光度，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上就可以查到與之相對(duì)應(yīng)的被測(cè)物質(zhì)的含量。之相對(duì)應(yīng)的被測(cè)物質(zhì)的含量。61 0 1.0 2.0 3.0 4.0 c(mg/mL)A。 。 。 。*0.800.600.400.200.00Axcx626.3.1 對(duì)朗對(duì)朗伯伯比耳定律的偏離比耳定律的偏離6.3.2 吸光度測(cè)量的

26、誤差吸光度測(cè)量的誤差636.3 6.3 光度分析法的誤差光度分析法的誤差一、對(duì)朗伯一比爾定律的偏離一、對(duì)朗伯一比爾定律的偏離64iKAA或或 1 2 1 對(duì)應(yīng)的對(duì)應(yīng)的 1較小較小 2 對(duì)應(yīng)的對(duì)應(yīng)的 2較大較大1 1、非單色光引起的偏離、非單色光引起的偏離（單色光不純）（單色光不純）651 1、非單色光引起的偏離、非單色光引起的偏離A A 提高單色器的精度提高單色器的精度某一波段的復(fù)合光某一波段的復(fù)合光B B 使用最大吸收波長測(cè)定使用最大吸收波長測(cè)定，提高靈敏度，減少對(duì)朗伯，提高靈敏度，減少對(duì)朗伯 一比爾定律的偏離。一比爾定律的偏離。C C 選擇適當(dāng)?shù)臐舛确秶x擇適當(dāng)?shù)臐舛确秶? 2、介質(zhì)不均勻

27、引起的偏離介質(zhì)不均勻引起的偏離 在分析中避免溶液產(chǎn)生膠體和渾濁，發(fā)生散射在分析中避免溶液產(chǎn)生膠體和渾濁，發(fā)生散射損失，使透射比減少損失，使透射比減少663、由于溶液本身的化學(xué)反應(yīng)引起的偏離、由于溶液本身的化學(xué)反應(yīng)引起的偏離 控制溶液條件，使被測(cè)組分以一種形式存在控制溶液條件，使被測(cè)組分以一種形式存在67100806040200T/% c1 c2 c3 T T T-透光率讀數(shù)誤差透光率讀數(shù)誤差 c c1c1 c2c2 c3c3 由于由于T 與濃度與濃度c 不是線性關(guān)系，不是線性關(guān)系，故不同濃度時(shí)故不同濃度時(shí)的儀器讀數(shù)誤的儀器讀數(shù)誤差差T 引起的引起的測(cè)量誤差測(cè)量誤差 c/c不同。不同。二、吸光度

28、測(cè)量誤差68儀器測(cè)量誤差公式推導(dǎo)吸光定律吸光定律cbA根據(jù)誤差傳遞公式，有根據(jù)誤差傳遞公式，有 cdcAdATAlg又又Tln434.0TdTdA434. 0TTdTAdAlnTTdcdcETrln得得濃度測(cè)量的濃度測(cè)量的相對(duì)偏差相對(duì)偏差得得T = 0.368 = 36.8 %A = 0.434 此時(shí)，此時(shí)，儀器測(cè)量誤差最小儀器測(cè)量誤差最小為了減少測(cè)量誤差，控制溶液的為了減少測(cè)量誤差，控制溶液的吸光度吸光度 A = 0.2 0.8T = 65 15 %0)ln(TT令令691 1、以、以M M 表示被測(cè)物質(zhì)的摩爾質(zhì)量，則摩爾吸收系數(shù)表示被測(cè)物質(zhì)的摩爾質(zhì)量，則摩爾吸收系數(shù) 與吸光系數(shù)與吸光系數(shù)K

29、 K 之間的關(guān)系為之間的關(guān)系為A A。 =K K / /MM B B。 =KMKMC C。 =KM KM /1000 D/1000 D。 =(=(K K/ /M M ) ) 10001000答案：答案： B B2 2、在光度分析中，選擇參比溶液的原則是、在光度分析中，選擇參比溶液的原則是A A。一般選蒸餾水一般選蒸餾水B B。一般選試劑溶液一般選試劑溶液C C。根據(jù)加入試劑和被測(cè)試液的顏色性質(zhì)選擇根據(jù)加入試劑和被測(cè)試液的顏色性質(zhì)選擇D D。一般選褪色溶液一般選褪色溶液答案：答案： C C71 3、下列幾組吸光度范圍，測(cè)量相對(duì)誤差較小的是 A。0.20.8 B。0.10.8 C。0.30.6 D

30、。0.20.6 答案： C 4、下列表述中錯(cuò)誤的是 A。吸收峰隨濃度增加而增高，但最大吸收波長不變 B。透射光與吸收光互為補(bǔ)色光，黃色和蘭色互補(bǔ) C。比色法又稱分光光度法 D。在公式A =bc 中， 稱摩爾吸收系數(shù)，其數(shù)值越大，反應(yīng)越靈敏 答案： C72 5 5、某有色物質(zhì)溶液的吸光度值較小時(shí)，則表明、某有色物質(zhì)溶液的吸光度值較小時(shí)，則表明 A。該物質(zhì)的濃度較小 B。該物質(zhì)摩爾吸收系數(shù)較小 C。所用比色皿較薄 D。上述三者都可能 答案： D 6、一有色溶液在一定波長下，測(cè)定其吸光度為0.740，如果溶液及比色皿都減小一半，則其吸光度為 A。2.96 B。0.740 C。0.370 D。0.18

31、5 答案： D73獻(xiàn)給勤奮學(xué)習(xí)的同學(xué)們！獻(xiàn)給勤奮學(xué)習(xí)的同學(xué)們！746.4.1 示差吸光光度法示差吸光光度法6.4.2 雙波長吸光光度法雙波長吸光光度法6.4.3 弱酸和弱弱酸和弱堿堿解離常數(shù)的測(cè)定解離常數(shù)的測(cè)定6.4.4 絡(luò)合物組成的測(cè)定絡(luò)合物組成的測(cè)定756.4 其它吸光光度法和光度分析法應(yīng)用普通光度法是采用普通光度法是采用空白溶液作為參比溶液，調(diào)吸光度為零空白溶液作為參比溶液，調(diào)吸光度為零。示差法是采用示差法是采用比待測(cè)溶液濃度稍低的標(biāo)準(zhǔn)溶液顯色后作參比液，比待測(cè)溶液濃度稍低的標(biāo)準(zhǔn)溶液顯色后作參比液，調(diào)吸光度為零，調(diào)吸光度為零，那么測(cè)得的試液吸光度那么測(cè)得的試液吸光度A A，實(shí)際是兩者吸光

32、度之，實(shí)際是兩者吸光度之差差A(yù) A ，它與兩者的濃度之差它與兩者的濃度之差C C 成正比。成正比。設(shè)由普通法測(cè)得：設(shè)由普通法測(cè)得： 濃度稍低標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度稍低標(biāo)準(zhǔn)溶液 obcA0:xxbcA:待測(cè)1、 方法原理（以高濃度示差法為例）方法原理（以高濃度示差法為例）一、示差吸光光度法一、示差吸光光度法76調(diào)調(diào)A0為零后實(shí)測(cè)：為零后實(shí)測(cè)： cbccbAAAAxx)(00相對(duì)配標(biāo)準(zhǔn)系列：配標(biāo)準(zhǔn)系列： 404303202101,CCCCCCCCCCCC以以C C0 0為參比測(cè)得為參比測(cè)得A A1 1, ,A A2 2, ,A A3 3, ,A A4 4，作作A A - - C C 標(biāo)準(zhǔn)曲線，設(shè)待測(cè)液為標(biāo)準(zhǔn)

33、曲線，設(shè)待測(cè)液為A Ax x ，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查得濃，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查得濃度為度為C C ，則待測(cè)液濃度為，則待測(cè)液濃度為C C0 0+ + C C772、示差吸光光度法誤差、示差吸光光度法誤差示差法測(cè)定時(shí)，讀數(shù)落在測(cè)量誤差較小的區(qū)域，因此提高了示差法測(cè)定時(shí)，讀數(shù)落在測(cè)量誤差較小的區(qū)域，因此提高了測(cè)量的準(zhǔn)確度。測(cè)量的準(zhǔn)確度。 普通法測(cè)得參比溶液透射比為普通法測(cè)得參比溶液透射比為10%10%，待測(cè)液是，待測(cè)液是7%7%，在示差法，在示差法中將參比溶液透射比從中將參比溶液透射比從10%10%調(diào)至調(diào)至100%100%（即（即A=0A=0），），就意味著就意味著將儀器透射比擴(kuò)展了將儀器透射比擴(kuò)展了1010

34、倍，那么此時(shí)待測(cè)液透射比將是倍，那么此時(shí)待測(cè)液透射比將是70%70%。 78例例稱鋼樣稱鋼樣0.500g，溶解溶解MnO4-50mL容量瓶，搖容量瓶，搖勻，從中取勻，從中取5.00mL50mL容量瓶定溶，用容量瓶定溶，用2cm比色比色皿在皿在525nm，=2235，測(cè)測(cè)A=0.124，計(jì)算計(jì)算Mn%=？(Mn=54.94) 解解 A 0.124 c2= = = 2.7710-5mol/L b 22352 Mn c2 50 1000 Mn%= 100=0.152 5.00 0.500 5079bcA111:bcA222:bcAAA)(2121光光源源單色器單色器單色器單色器檢測(cè)器檢測(cè)器切切光光器

35、器狹狹縫縫吸吸收收池池二、雙波長吸光光度法二、雙波長吸光光度法1 1、 方法原理：方法原理：使兩束不同波長的單色光交替的照射同一吸收池，測(cè)量并記使兩束不同波長的單色光交替的照射同一吸收池，測(cè)量并記錄兩者吸光度的差值錄兩者吸光度的差值A(chǔ) A，根據(jù)，根據(jù)A A與吸光物質(zhì)濃度與吸光物質(zhì)濃度c c成正比成正比進(jìn)行定量分析，可以消除試液與參比液及兩個(gè)吸收池之間的進(jìn)行定量分析，可以消除試液與參比液及兩個(gè)吸收池之間的差異所引起的測(cè)量誤差，消除干擾差異所引起的測(cè)量誤差，消除干擾802、 雙波長吸光光度的應(yīng)用雙波長吸光光度的應(yīng)用混濁試液中組成的測(cè)定?；鞚嵩囈褐薪M成的測(cè)定。單組分測(cè)定單組分測(cè)定兩組分共存時(shí)的分別測(cè)

36、定兩組分共存時(shí)的分別測(cè)定21AAA）（yxyxAAAA2211)(yyAA21xxAAA21xxxbCA）（21 2A 1XYY 的存在不干擾的存在不干擾 X 的測(cè)定的測(cè)定81三、弱酸弱堿解離常數(shù)的測(cè)定三、弱酸弱堿解離常數(shù)的測(cè)定設(shè)在某波長下，設(shè)在某波長下，HB和和B-均有吸收，液層厚度均有吸收，液層厚度b=1cm。根據(jù)吸光度的加和性根據(jù)吸光度的加和性 lg,BHBpHpKHBBHKBHHBaaBHBAAABHBBHBHKcKHKcHaaBaHB在高酸度時(shí)，主要以在高酸度時(shí)，主要以HB形式存在形式存在cHBAHBHBHBcAHBHB82在強(qiáng)堿性時(shí)，主要以在強(qiáng)堿性時(shí)，主要以B B- -型體存在，這

37、時(shí)型體存在，這時(shí)cBABBBcABB代入上式并取負(fù)對(duì)數(shù)得：代入上式并取負(fù)對(duì)數(shù)得： BHBaAAAApHpKlgA A為某一確定為某一確定pHpH時(shí)溶液的吸光度，可由時(shí)溶液的吸光度，可由n n個(gè)個(gè)pHpH不同的溶液求得不同的溶液求得n n個(gè)個(gè)pKapKa，取其平均值。，取其平均值。aBHBaaaBaHBKAHAHKAHKKAHKHAA)(83原式變換為：原式變換為： aBHBpKpHAAAAlg以以 為縱坐標(biāo)，以為縱坐標(biāo)，以 為橫坐標(biāo)作圖，曲為橫坐標(biāo)作圖，曲線與橫軸的交點(diǎn)即為線與橫軸的交點(diǎn)即為 BHBAAAAlgpH解離常數(shù)也可由圖解法求出解離常數(shù)也可由圖解法求出apk84四四 多組分分析：多組

38、分分析：以兩組分為例以兩組分為例1、吸收光譜不重疊：、吸收光譜不重疊：同單組分同單組分2、吸收光譜重疊：、吸收光譜重疊：列方程組求解列方程組求解在在1處：處： 在在2處：處： BBAABAbcbcA111BBAABAbcbcA22285五、絡(luò)合物組成的測(cè)定1、摩爾比法（飽和法）：、摩爾比法（飽和法）：1）常適用于離解度小，組成比高的配合物）常適用于離解度小，組成比高的配合物2）方法：）方法： M+nRMRn 配置一系列配置一系列M一定、一定、R不同的溶液的吸光度，以相應(yīng)的不同的溶液的吸光度，以相應(yīng)的試劑空白為參比，分別測(cè)定其吸光度值，繪制試劑空白為參比，分別測(cè)定其吸光度值，繪制A R/M圖。運(yùn)用外推法求得一交點(diǎn)，從交點(diǎn)向橫坐標(biāo)做垂線，對(duì)圖。運(yùn)用外推法求得一交點(diǎn)，從交點(diǎn)向橫坐標(biāo)做垂線，對(duì)應(yīng)應(yīng)R/M即為絡(luò)合物絡(luò)合比即為絡(luò)合物絡(luò)合比N86固定固定cM