細(xì)胞藻類(lèi)培養(yǎng)課件

1、LOGO第二章第二章 單細(xì)單細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng) 細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)u 一、單細(xì)胞藻類(lèi)的種類(lèi)與生物特性一、單細(xì)胞藻類(lèi)的種類(lèi)與生物特性u(píng) （一）單細(xì)胞藻類(lèi)培養(yǎng)的種類(lèi)（一）單細(xì)胞藻類(lèi)培養(yǎng)的種類(lèi)u 常用的餌料微藻主要有：常用的餌料微藻主要有：u 牟氏角毛藻牟氏角毛藻：蝦、蟹、海參、海膽的幼體；：蝦、蟹、海參、海膽的幼體；u 三角褐指藻三角褐指藻：蝦、蟹、海參、海膽的幼體、種貝；：蝦、蟹、海參、海膽的幼體、種貝；u 中肋骨條藻：蝦、蟹幼體；中肋骨條藻：蝦、蟹幼體；u 底棲舟形藻：鮑、海參、海膽、埋棲貝類(lèi)、舔食螺類(lèi)的附底棲舟形藻：鮑、海參、海膽、埋棲貝類(lèi)、舔食螺類(lèi)的附著幼體；著幼體；u 底棲卵形

2、藻：同上；底棲卵形藻：同上；u 等鞭金藻：貝、蝦、蟹、海參、海膽的幼體；等鞭金藻：貝、蝦、蟹、海參、海膽的幼體；u 亞心形四片藻：輪蟲(chóng)、鹵蟲(chóng)、種貝及蝦的后期幼體；亞心形四片藻：輪蟲(chóng)、鹵蟲(chóng)、種貝及蝦的后期幼體；u 海水小球藻海水小球藻：同上；：同上；u 鈍頂螺旋藻鈍頂螺旋藻：蝦、蟹幼體及配合飼料的添加劑；：蝦、蟹幼體及配合飼料的添加劑；細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)（二）單細(xì)胞藻類(lèi)的生物學(xué)（二）單細(xì)胞藻類(lèi)的生物學(xué)u 1、鹽度：、鹽度：u 大多數(shù)單胞藻鹽度適應(yīng)范圍很寬。大多數(shù)單胞藻鹽度適應(yīng)范圍很寬。u 10-40大多數(shù)單胞藻能適應(yīng)。大多數(shù)單胞藻能適應(yīng)。u 如扁藻、鹽藻、小球藻在如扁藻、鹽藻、小球藻在10

3、-80的鹽度中能正常生長(zhǎng)。的鹽度中能正常生長(zhǎng)。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)2、溫度、溫度u 適溫適溫u 綠色巴夫藻綠色巴夫藻10-35；u 扁藻扁藻7-30 ；u 鹽藻鹽藻4-40 。u 因此大多數(shù)單細(xì)胞藻類(lèi)適合在因此大多數(shù)單細(xì)胞藻類(lèi)適合在20-25 下培養(yǎng)。下培養(yǎng)。u 一些單胞藻適合在較高溫度下生存；如一些單胞藻適合在較高溫度下生存；如鈍頂螺旋藻鈍頂螺旋藻生存最生存最適為適為28-34 。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)低溫低溫u 單胞藻單胞藻一般忍耐性較強(qiáng)一般忍耐性較強(qiáng)，在一定的低溫條件下產(chǎn)生的形態(tài)，在一定的低溫條件下產(chǎn)生的形態(tài)和生理變化是可逆的。和生理變化是可逆的。u 利用其在低溫環(huán)境下呈休眠狀態(tài)的

4、特點(diǎn)，利用其在低溫環(huán)境下呈休眠狀態(tài)的特點(diǎn)，可較長(zhǎng)時(shí)間保存可較長(zhǎng)時(shí)間保存單細(xì)胞藻類(lèi)單細(xì)胞藻類(lèi)。u 如在如在-20 溫度下，冰凍溫度下，冰凍20d的三角褐指藻濃縮藻液，解的三角褐指藻濃縮藻液，解凍后，培養(yǎng)凍后，培養(yǎng)2d即可恢復(fù)正常生長(zhǎng)。即可恢復(fù)正常生長(zhǎng)。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)3、光照、光照u 5000-10000lx，適合大多數(shù)單細(xì)胞藻類(lèi)的培養(yǎng)。，適合大多數(shù)單細(xì)胞藻類(lèi)的培養(yǎng)。u 某些藻類(lèi)適合在弱光下培養(yǎng)：某些藻類(lèi)適合在弱光下培養(yǎng)：u 如如中肋骨條藻：中肋骨條藻：5000lx較適宜，而較適宜，而10000lx產(chǎn)生抑制作產(chǎn)生抑制作用）；用）；u 三角褐指藻：三角褐指藻：3000-5000lxu 某些

5、單細(xì)胞藻適合較強(qiáng)的光照：某些單細(xì)胞藻適合較強(qiáng)的光照：u 等鞭藻：等鞭藻：7000-9000lxu 角毛藻角毛藻:10000-15000lxu 某些單細(xì)胞藻類(lèi)適合在強(qiáng)光下培養(yǎng)：某些單細(xì)胞藻類(lèi)適合在強(qiáng)光下培養(yǎng)：u 如如鈍頂螺旋藻：鈍頂螺旋藻：30000-35000lx。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)4、pHu 7.5-8.5是大多數(shù)藻類(lèi)的適宜范圍。是大多數(shù)藻類(lèi)的適宜范圍。u 也有一些藻類(lèi)適合堿性條件：也有一些藻類(lèi)適合堿性條件：u 如如鈍頂螺旋藻鈍頂螺旋藻8.6-9.5。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)5、繁殖、繁殖u 主要以二分裂繁殖為主。主要以二分裂繁殖為主。u 可將培養(yǎng)過(guò)程分為：延緩期、可將培養(yǎng)過(guò)程分為：延

6、緩期、對(duì)數(shù)（指數(shù)）生長(zhǎng)期、相對(duì)對(duì)數(shù)（指數(shù)）生長(zhǎng)期、相對(duì)生長(zhǎng)下降期生長(zhǎng)下降期、靜止期和衰亡期。、靜止期和衰亡期。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)二、藻種的分離二、藻種的分離u （一）采樣（一）采樣u 個(gè)體個(gè)體較大較大的浮游藻類(lèi)，可用的浮游藻類(lèi)，可用密浮游生物網(wǎng)在水中撈取密浮游生物網(wǎng)在水中撈取。u 但在水產(chǎn)動(dòng)物的人工育苗中所需要的但在水產(chǎn)動(dòng)物的人工育苗中所需要的餌料微藻餌料微藻，一般，一般個(gè)體個(gè)體很小很小，往往在幾微米到十幾微米，用浮游生物網(wǎng)無(wú)法采集，往往在幾微米到十幾微米，用浮游生物網(wǎng)無(wú)法采集到，需要到，需要把水樣采回實(shí)驗(yàn)室處理把水樣采回實(shí)驗(yàn)室處理。u 水樣采回后，進(jìn)行顯微鏡檢查，如果發(fā)現(xiàn)有需要分離的藻

7、水樣采回后，進(jìn)行顯微鏡檢查，如果發(fā)現(xiàn)有需要分離的藻種，而這種藻種的數(shù)量較多時(shí)，可立即進(jìn)行分離，若數(shù)量種，而這種藻種的數(shù)量較多時(shí)，可立即進(jìn)行分離，若數(shù)量少，必須先經(jīng)過(guò)預(yù)備培養(yǎng)，待數(shù)量增多后再分離。少，必須先經(jīng)過(guò)預(yù)備培養(yǎng)，待數(shù)量增多后再分離。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)（二）預(yù)備培養(yǎng)（二）預(yù)備培養(yǎng)u 1、容器：、容器：u 通常采用三角燒瓶。通常采用三角燒瓶。u 2、培養(yǎng)液：、培養(yǎng)液：u 各種藻類(lèi)的培養(yǎng)液存在差異。各種藻類(lèi)的培養(yǎng)液存在差異。u 土壤抽出液土壤抽出液:取土壤取土壤1kg，加純水，加純水1000ml，煮沸，煮沸60min，在，在暗處放置暗處放置2d，過(guò)濾，以濾液，過(guò)濾，以濾液600ml加純水

8、加純水400ml。u 土壤抽出液土壤抽出液：取土壤：取土壤1kg，加純水，加純水1000ml，再加入，再加入NaOH2-3g，煮沸，煮沸120min，冷卻后過(guò)濾，濾液直接使用。，冷卻后過(guò)濾，濾液直接使用。u 土壤抽出液土壤抽出液：取土壤：取土壤1kg，加純水，加純水2000ml，煮沸煎濃，把上，煮沸煎濃，把上部泥漿傾入燒瓶中澄清，靜置一晝夜后，次日吸取上清液，再煮部泥漿傾入燒瓶中澄清，靜置一晝夜后，次日吸取上清液，再煮沸煎濃。第三天在如法煎濃，最后傾入三角燒瓶中，加棉花塞，沸煎濃。第三天在如法煎濃，最后傾入三角燒瓶中，加棉花塞，煎濃，直至得到煎濃，直至得到1000ml的深褐色的土壤抽出液。每次

9、使用后，的深褐色的土壤抽出液。每次使用后，煮沸滅菌保存。煮沸滅菌保存。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)u 土壤抽出液土壤抽出液：取田園土壤：取田園土壤1kg，加水，加水2000ml，攪拌均，攪拌均勻，浸泡，用前吸取上清，煮沸消毒后使用。勻，浸泡，用前吸取上清，煮沸消毒后使用。u 海泥（或土壤）抽出液海泥（或土壤）抽出液：用海灘上砂質(zhì)較少，有機(jī)物較：用海灘上砂質(zhì)較少，有機(jī)物較多而又不是過(guò)分淤黑的上層軟泥，清除其中的小樹(shù)枝和小多而又不是過(guò)分淤黑的上層軟泥，清除其中的小樹(shù)枝和小石塊等雜物，以容量計(jì)算石塊等雜物，以容量計(jì)算1份泥加份泥加2份水，充分?jǐn)嚢杈鶆?，份水，充分?jǐn)嚢杈鶆?，靜置靜置1-2min，待粗砂，小

10、石沉下，把上層泥漿傾入鋁鍋，待粗砂，小石沉下，把上層泥漿傾入鋁鍋內(nèi)，棄去底部粗砂，小石等雜物。靜置內(nèi)，棄去底部粗砂，小石等雜物。靜置24h，吸取上清液，吸取上清液使用。使用。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)3、管理、管理u 攪動(dòng)或搖動(dòng)：攪動(dòng)或搖動(dòng)：u 浮游種類(lèi)應(yīng)浮游種類(lèi)應(yīng)每天搖動(dòng)一次每天搖動(dòng)一次。u 附著種類(lèi)應(yīng)靜置不動(dòng)。附著種類(lèi)應(yīng)靜置不動(dòng)。u 經(jīng)常觀察，掌握時(shí)機(jī)及時(shí)分離經(jīng)常觀察，掌握時(shí)機(jī)及時(shí)分離：u 如發(fā)現(xiàn)藻類(lèi)呈淡淡顏色，即進(jìn)行顯微鏡檢查，如需分離藻如發(fā)現(xiàn)藻類(lèi)呈淡淡顏色，即進(jìn)行顯微鏡檢查，如需分離藻類(lèi)已占優(yōu)勢(shì)，應(yīng)立即進(jìn)行分離。類(lèi)已占優(yōu)勢(shì)，應(yīng)立即進(jìn)行分離。u 如沒(méi)有需要分離的藻類(lèi)，便重新進(jìn)行采樣及預(yù)培養(yǎng)

11、。如沒(méi)有需要分離的藻類(lèi)，便重新進(jìn)行采樣及預(yù)培養(yǎng)。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)（三）分離方法：（三）分離方法：u 1、微吸管分離法：、微吸管分離法：u 選直徑約選直徑約5mm的細(xì)玻璃管的細(xì)玻璃管，在，在酒精噴燈上加熱酒精噴燈上加熱，待熔，待熔，快快速拉成口徑極細(xì)的微吸管速拉成口徑極細(xì)的微吸管。u 微吸管的另一端套接一條長(zhǎng)約微吸管的另一端套接一條長(zhǎng)約30cm或或8cm的醫(yī)用乳膠管。的醫(yī)用乳膠管。u 在分離操作時(shí)長(zhǎng)乳膠管的另一端用牙齒咬緊，如用短乳膠在分離操作時(shí)長(zhǎng)乳膠管的另一端用牙齒咬緊，如用短乳膠管則用手指壓緊，用以控制吸取動(dòng)作。管則用手指壓緊，用以控制吸取動(dòng)作。u 將稀釋的水樣，置淺凹載玻片上，在將

12、稀釋的水樣，置淺凹載玻片上，在顯微鏡下觀察挑取要顯微鏡下觀察挑取要分離的藻類(lèi)細(xì)胞分離的藻類(lèi)細(xì)胞，吸取時(shí)把，吸取時(shí)把微吸管對(duì)準(zhǔn)藻細(xì)胞微吸管對(duì)準(zhǔn)藻細(xì)胞，然后，然后牙齒牙齒或手指放松或手指放松，由于氣流的關(guān)系，藻，由于氣流的關(guān)系，藻細(xì)胞被微吸管吸入細(xì)胞被微吸管吸入，接，接著吸入的水滴放入另一凹玻片上，觀察是否是目標(biāo)單胞藻。著吸入的水滴放入另一凹玻片上，觀察是否是目標(biāo)單胞藻。u 然后把分離出的藻細(xì)胞移入預(yù)先裝有培養(yǎng)液的試管中，管然后把分離出的藻細(xì)胞移入預(yù)先裝有培養(yǎng)液的試管中，管口塞棉塞，在適宜光照下培養(yǎng)。每天搖動(dòng)一次。口塞棉塞，在適宜光照下培養(yǎng)。每天搖動(dòng)一次。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)2、水滴分離法、水

13、滴分離法u 將微吸管將微吸管插入水樣中約插入水樣中約2cm深深，提取微吸管，待無(wú)水滴自，提取微吸管，待無(wú)水滴自然滴下，然滴下，把微吸管與載玻片接觸把微吸管與載玻片接觸，即有一小水滴水樣留在，即有一小水滴水樣留在載玻片上。載玻片上。u 按照上述方法，按照上述方法，吸取水滴吸取水滴3-4滴滴，水滴作直線排列，水滴作直線排列，相互相互間隔一段距離間隔一段距離。然后在。然后在顯微鏡下觀察顯微鏡下觀察每個(gè)水滴，每個(gè)水滴，如果某一如果某一水滴中藻細(xì)胞只有一個(gè)需要分離的藻細(xì)胞，即用培養(yǎng)把水水滴中藻細(xì)胞只有一個(gè)需要分離的藻細(xì)胞，即用培養(yǎng)把水滴連同藻類(lèi)細(xì)胞沖入試管中滴連同藻類(lèi)細(xì)胞沖入試管中，并加入培養(yǎng)液到試管容

14、量的，并加入培養(yǎng)液到試管容量的1/4，試管口塞上棉花塞，放在適宜光照下培養(yǎng)，每天搖，試管口塞上棉花塞，放在適宜光照下培養(yǎng)，每天搖動(dòng)一次。動(dòng)一次。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)3、平板劃線法、平板劃線法u 方法同光合細(xì)菌。方法同光合細(xì)菌。u 由于單細(xì)胞藻類(lèi)大多不適合在固體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，因此，由于單細(xì)胞藻類(lèi)大多不適合在固體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，因此，分離效果較差分離效果較差。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)二、單細(xì)胞藻類(lèi)的培養(yǎng)方式二、單細(xì)胞藻類(lèi)的培養(yǎng)方式u （一）純培養(yǎng)與單種培養(yǎng)：（一）純培養(yǎng)與單種培養(yǎng)：u 1、純培養(yǎng)：純培養(yǎng)、純培養(yǎng)：純培養(yǎng)即無(wú)菌培養(yǎng)即無(wú)菌培養(yǎng)，是指排除了包括細(xì)菌在內(nèi)，是指排除了包括細(xì)菌在內(nèi)的一切生物

15、的條件下進(jìn)行的培養(yǎng)。的一切生物的條件下進(jìn)行的培養(yǎng)。u 2、單種培養(yǎng)：在生產(chǎn)性培養(yǎng)中是、單種培養(yǎng)：在生產(chǎn)性培養(yǎng)中是不排除細(xì)菌存在的不排除細(xì)菌存在的，為了，為了區(qū)別而稱(chēng)單種培養(yǎng)。區(qū)別而稱(chēng)單種培養(yǎng)。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)（二）開(kāi)放式培養(yǎng)和封閉式培養(yǎng)（二）開(kāi)放式培養(yǎng)和封閉式培養(yǎng)u 1、開(kāi)放式培養(yǎng)、開(kāi)放式培養(yǎng)：是把藻類(lèi)培養(yǎng)在：是把藻類(lèi)培養(yǎng)在敞開(kāi)的敞開(kāi)的廣口玻璃瓶，水族廣口玻璃瓶，水族箱等箱等容器中容器中進(jìn)行培養(yǎng)，設(shè)備簡(jiǎn)單，為目前主要的培養(yǎng)單細(xì)進(jìn)行培養(yǎng)，設(shè)備簡(jiǎn)單，為目前主要的培養(yǎng)單細(xì)胞藻類(lèi)的形式。胞藻類(lèi)的形式。u 特點(diǎn)：特點(diǎn)：充足的光照和通風(fēng)，繁殖迅速。充足的光照和通風(fēng)，繁殖迅速。u 容易受敵害生物的污

16、染。容易受敵害生物的污染。u 2、封閉式培養(yǎng)、封閉式培養(yǎng)：在：在封閉容器中封閉容器中進(jìn)行培養(yǎng)，僅有充氣管，培進(jìn)行培養(yǎng)，僅有充氣管，培養(yǎng)液加入管和藻液抽出管與外界有接觸，其余不與外界接養(yǎng)液加入管和藻液抽出管與外界有接觸，其余不與外界接觸。觸。u 特點(diǎn)：特點(diǎn)：減少敵害生物污染，成功率高。減少敵害生物污染，成功率高。u 生長(zhǎng)速度較慢。生長(zhǎng)速度較慢。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)（三）一次性培養(yǎng)、半連續(xù)培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)（三）一次性培養(yǎng)、半連續(xù)培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)u 1、一次性培養(yǎng)：在各種容器中，配制培養(yǎng)液，把少量藻種、一次性培養(yǎng)：在各種容器中，配制培養(yǎng)液，把少量藻種接種進(jìn)去，在適宜的環(huán)境條件下培養(yǎng)，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間藻種

17、接種進(jìn)去，在適宜的環(huán)境條件下培養(yǎng)，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間藻種繁殖達(dá)到較高的密度，繁殖達(dá)到較高的密度，一次全部收獲一次全部收獲。u 2、半連續(xù)培養(yǎng)：半連續(xù)培養(yǎng)是在一次性培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，當(dāng)、半連續(xù)培養(yǎng)：半連續(xù)培養(yǎng)是在一次性培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，當(dāng)培養(yǎng)的藻細(xì)胞達(dá)到或接近收獲的密度時(shí)，培養(yǎng)的藻細(xì)胞達(dá)到或接近收獲的密度時(shí)，每天收獲藻液的每天收獲藻液的一部分并補(bǔ)充等量的培養(yǎng)液一部分并補(bǔ)充等量的培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。，繼續(xù)培養(yǎng)。u 3、連續(xù)培養(yǎng)：一般為室內(nèi)，人工光源，自動(dòng)控溫，封閉式、連續(xù)培養(yǎng)：一般為室內(nèi)，人工光源，自動(dòng)控溫，封閉式充氣培養(yǎng)。充氣培養(yǎng)。u 連續(xù)培養(yǎng)能使藻細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖的條件穩(wěn)定，藻細(xì)胞始終處連續(xù)培養(yǎng)能使藻細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖

18、的條件穩(wěn)定，藻細(xì)胞始終處于指數(shù)生長(zhǎng)期，生長(zhǎng)迅速，產(chǎn)量高。于指數(shù)生長(zhǎng)期，生長(zhǎng)迅速，產(chǎn)量高。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)三、培養(yǎng)方法：三、培養(yǎng)方法：u （一）培養(yǎng)容器：（一）培養(yǎng)容器：u 三角燒瓶、玻璃鋼水槽三角燒瓶、玻璃鋼水槽和和水泥池水泥池等均可作為單胞藻的培養(yǎng)等均可作為單胞藻的培養(yǎng)容器。容器。u （二）容器工具的消毒：（二）容器工具的消毒：u 同光合細(xì)菌的消毒方法。同光合細(xì)菌的消毒方法。u （三）培養(yǎng)液的制備：（三）培養(yǎng)液的制備：u 選擇合適的培養(yǎng)液配方，按照配方配制。選擇合適的培養(yǎng)液配方，按照配方配制。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)（四）接種（四）接種u 1、接種質(zhì)量：一般要求選取無(wú)敵害生物污染，生

19、活力強(qiáng)，、接種質(zhì)量：一般要求選取無(wú)敵害生物污染，生活力強(qiáng)，生活旺盛的藻種培養(yǎng)。生活旺盛的藻種培養(yǎng)。u 顏色正常，無(wú)大量沉淀和無(wú)明顯附壁現(xiàn)象。顏色正常，無(wú)大量沉淀和無(wú)明顯附壁現(xiàn)象。u 2、藻種數(shù)量、藻種數(shù)量:u 藻種培養(yǎng)：藻液容量和新配培養(yǎng)液比例為藻種培養(yǎng)：藻液容量和新配培養(yǎng)液比例為1：2-1：3，一，一般般一瓶藻種可接成一瓶藻種可接成3-4瓶瓶。u 中繼培養(yǎng)和生產(chǎn)性大量培養(yǎng)由于培養(yǎng)容器容量大，藻種供中繼培養(yǎng)和生產(chǎn)性大量培養(yǎng)由于培養(yǎng)容器容量大，藻種供應(yīng)有時(shí)不足，可根據(jù)具體情況靈活掌握，但最少不宜低于應(yīng)有時(shí)不足，可根據(jù)具體情況靈活掌握，但最少不宜低于1：50。u 一般以一般以1：10-1：20較適

20、宜。較適宜。u 3、接種時(shí)間：、接種時(shí)間：u 最好在最好在8-10時(shí)時(shí)，不宜在晚上。，不宜在晚上。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)（五）培養(yǎng)（五）培養(yǎng)u 1、日常管理、日常管理u 攪拌和充氣：攪拌和充氣：u 通過(guò)通過(guò)攪拌或充氣增加水和空氣的接觸面攪拌或充氣增加水和空氣的接觸面，使空氣中，使空氣中二氧化二氧化碳溶解碳溶解到培養(yǎng)液中，補(bǔ)充由于藻細(xì)胞作用對(duì)二氧化碳的消到培養(yǎng)液中，補(bǔ)充由于藻細(xì)胞作用對(duì)二氧化碳的消耗。耗。u 幫助沉淀藻細(xì)胞幫助沉淀藻細(xì)胞上浮上浮而而獲得光照獲得光照。u 防止防止水表面長(zhǎng)出水表面長(zhǎng)出菌膜菌膜。u 攪動(dòng)、搖動(dòng)一般攪動(dòng)、搖動(dòng)一般每天至少每天至少3次次，定時(shí)定時(shí)進(jìn)行，進(jìn)行，每次半分鐘每

21、次半分鐘。u 充氣充氣。可。可24小時(shí)連續(xù)充氣或間歇充氣。小時(shí)連續(xù)充氣或間歇充氣。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)調(diào)節(jié)光照調(diào)節(jié)光照u 人工光照：人工光照：u 自然光：極端易變是太陽(yáng)光源的特點(diǎn)，必須自然光：極端易變是太陽(yáng)光源的特點(diǎn)，必須根據(jù)天氣情況，根據(jù)天氣情況，不斷調(diào)節(jié)光照度不斷調(diào)節(jié)光照度。u 室內(nèi)盡可能利用室內(nèi)盡可能利用近窗口的漫射光近窗口的漫射光，防止直射光照射，光照，防止直射光照射，光照過(guò)強(qiáng)時(shí)可用竹簾或布簾遮光調(diào)節(jié)。過(guò)強(qiáng)時(shí)可用竹簾或布簾遮光調(diào)節(jié)。u 室外室外一般應(yīng)有一般應(yīng)有棚室頂架棚室頂架，用活動(dòng)，用活動(dòng)白帆布或彩條布蓬調(diào)節(jié)光白帆布或彩條布蓬調(diào)節(jié)光照，陰雨天，可短期利用人工光照照，陰雨天，可短期

22、利用人工光照。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)調(diào)節(jié)溫度調(diào)節(jié)溫度u 一般一般單胞藻培養(yǎng)單胞藻培養(yǎng)不須控溫設(shè)備不須控溫設(shè)備，冬季冬季培養(yǎng)應(yīng)培養(yǎng)應(yīng)加取暖設(shè)備加取暖設(shè)備來(lái)來(lái)提高溫度。提高溫度。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)注意酸堿變化注意酸堿變化u CO2被吸收利用，導(dǎo)致藻液被吸收利用，導(dǎo)致藻液pH上升。上升。u 其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，也會(huì)引起其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，也會(huì)引起pH的上升或下降。的上升或下降。u 如如pH過(guò)高或過(guò)低，可用過(guò)高或過(guò)低，可用1mol/L的鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)的鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)2、培養(yǎng)藻類(lèi)生長(zhǎng)情況觀察和檢查、培養(yǎng)藻類(lèi)生長(zhǎng)情況觀察和檢查u 藻類(lèi)的生長(zhǎng)情況，可以通過(guò)藻液呈現(xiàn)的

23、藻類(lèi)的生長(zhǎng)情況，可以通過(guò)藻液呈現(xiàn)的顏色顏色，藻細(xì)胞的，藻細(xì)胞的運(yùn)運(yùn)動(dòng)或是懸浮情況動(dòng)或是懸浮情況，是否有沉淀和附壁現(xiàn)象是否有沉淀和附壁現(xiàn)象；u 菌膜和敵害生物污染菌膜和敵害生物污染跡象的有無(wú)等觀察而了解大概情況。跡象的有無(wú)等觀察而了解大概情況。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)（六）防治敵害生物的措施（六）防治敵害生物的措施u 1、預(yù)防措施：、預(yù)防措施：u 嚴(yán)格防止污染：嚴(yán)格防止污染：u 防止污染的防止污染的重點(diǎn)應(yīng)該放在生產(chǎn)性藻種培養(yǎng)這一級(jí)上重點(diǎn)應(yīng)該放在生產(chǎn)性藻種培養(yǎng)這一級(jí)上。u 因?yàn)椋涸宸N培養(yǎng)在室內(nèi)，培養(yǎng)容器為玻璃瓶。因?yàn)椋涸宸N培養(yǎng)在室內(nèi)，培養(yǎng)容器為玻璃瓶。防止污染條防止污染條件較好。件較好。u 只要藻

24、種級(jí)沒(méi)有敵害生物污染，擴(kuò)大培養(yǎng)到水池，生產(chǎn)周只要藻種級(jí)沒(méi)有敵害生物污染，擴(kuò)大培養(yǎng)到水池，生產(chǎn)周期短，就是發(fā)生污染敵害生物還需要一段生長(zhǎng)、繁殖時(shí)間期短，就是發(fā)生污染敵害生物還需要一段生長(zhǎng)、繁殖時(shí)間才能達(dá)到一定數(shù)量，所以影響不大。才能達(dá)到一定數(shù)量，所以影響不大。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)保持培養(yǎng)藻液的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)和數(shù)量?jī)?yōu)勢(shì)保持培養(yǎng)藻液的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)和數(shù)量?jī)?yōu)勢(shì)u 首先接種的藻種最好取自首先接種的藻種最好取自指數(shù)生長(zhǎng)期指數(shù)生長(zhǎng)期。u 接種量大接種量大，從培養(yǎng)開(kāi)始培養(yǎng)藻液在培養(yǎng)液中即占數(shù)量上的，從培養(yǎng)開(kāi)始培養(yǎng)藻液在培養(yǎng)液中即占數(shù)量上的絕對(duì)優(yōu)勢(shì)。絕對(duì)優(yōu)勢(shì)。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)做好藻種的分離、培養(yǎng)和供應(yīng)工作做好藻

25、種的分離、培養(yǎng)和供應(yīng)工作u 在培養(yǎng)過(guò)程中，嚴(yán)格防止污染是重要的，但從目前單細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中，嚴(yán)格防止污染是重要的，但從目前單細(xì)胞藻類(lèi)的培養(yǎng)水平看，絕對(duì)防止敵害生物污染是不可能的，藻類(lèi)的培養(yǎng)水平看，絕對(duì)防止敵害生物污染是不可能的，u 要根本的解決這個(gè)問(wèn)題，就必須要根本的解決這個(gè)問(wèn)題，就必須不斷的補(bǔ)充新的不斷的補(bǔ)充新的“純純”藻藻種來(lái)取代在長(zhǎng)期培養(yǎng)過(guò)程中已經(jīng)受污染的藻種種來(lái)取代在長(zhǎng)期培養(yǎng)過(guò)程中已經(jīng)受污染的藻種，這才可能，這才可能使培養(yǎng)較好的順利進(jìn)行。使培養(yǎng)較好的順利進(jìn)行。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)2、清除、抑制或殺滅敵害生物的方法、清除、抑制或殺滅敵害生物的方法u 使用過(guò)濾方法清除大型敵害生物：使用

26、過(guò)濾方法清除大型敵害生物：u 餌料微藻都很小，對(duì)污染的大型敵害生物（如輪蟲(chóng)等）可餌料微藻都很小，對(duì)污染的大型敵害生物（如輪蟲(chóng)等）可用過(guò)濾方法清除。用過(guò)濾方法清除。u 清除輪蟲(chóng)等敵害生物可用清除輪蟲(chóng)等敵害生物可用網(wǎng)孔小于網(wǎng)孔小于60um的密篩絹網(wǎng)過(guò)濾的密篩絹網(wǎng)過(guò)濾，必須連續(xù)過(guò)濾。必須連續(xù)過(guò)濾。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)使用藥物抑制或殺滅敵害生物使用藥物抑制或殺滅敵害生物u 培養(yǎng)培養(yǎng)亞心形扁藻和湛江等鞭藻亞心形扁藻和湛江等鞭藻出現(xiàn)出現(xiàn)尖鼻蟲(chóng)尖鼻蟲(chóng)危害時(shí)，在藻液危害時(shí)，在藻液中加中加0.003%醫(yī)用濃氨水醫(yī)用濃氨水，可有效殺死尖鼻蟲(chóng)不影響藻細(xì)，可有效殺死尖鼻蟲(chóng)不影響藻細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖。胞生長(zhǎng)繁殖。u 如果

27、在藻液中如果在藻液中細(xì)菌大量繁殖細(xì)菌大量繁殖時(shí)，致使藻細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢大量時(shí)，致使藻細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢大量下沉，在下沉，在lL藻液中加入藻液中加入少量青霉素少量青霉素，可抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。，可抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)改變環(huán)境條件殺滅敵害生物改變環(huán)境條件殺滅敵害生物u 利用利用亞心形扁藻亞心形扁藻耐高鹽的特性，使用提高比重的方法殺滅耐高鹽的特性，使用提高比重的方法殺滅敵害生物。在被污染的藻液中敵害生物。在被污染的藻液中加入食鹽加入食鹽，把藻液，把藻液比重提高比重提高到到1.056-1.060，游仆蟲(chóng)等敵害生物可被殺死。，游仆蟲(chóng)等敵害生物可被殺死。u 鹽藻培養(yǎng)受變形蟲(chóng)危害時(shí)，在鹽藻培養(yǎng)受變形蟲(chóng)

28、危害時(shí)，在1000ml藻液中加鹽藻液中加鹽70-110g能殺死尖鼻蟲(chóng)，游仆蟲(chóng)及個(gè)體較小的原生動(dòng)物。能殺死尖鼻蟲(chóng)，游仆蟲(chóng)及個(gè)體較小的原生動(dòng)物。u 當(dāng)亞心形扁藻、湛江等鞭藻中有尖鼻蟲(chóng)、游仆蟲(chóng)等敵害生當(dāng)亞心形扁藻、湛江等鞭藻中有尖鼻蟲(chóng)、游仆蟲(chóng)等敵害生物時(shí)，可以采用鹽酸酸化藻液的辦法進(jìn)行殺滅。物時(shí)，可以采用鹽酸酸化藻液的辦法進(jìn)行殺滅。u 方法方法1000ml藻液中加藻液中加1mol/L鹽酸鹽酸3ml，邊加邊攪拌同，邊加邊攪拌同時(shí)測(cè)定時(shí)測(cè)定pH值，值，待待pH降到降到3時(shí)時(shí)，停止加鹽酸，停止加鹽酸，酸化酸化0.5-1h，即可將上述敵害生物殺死。即可將上述敵害生物殺死。u 然后用然后用氫氧化鈉將藻液恢復(fù)原

29、氫氧化鈉將藻液恢復(fù)原pH，藻液經(jīng)，藻液經(jīng)23-25h后，就后，就可恢復(fù)游動(dòng)及正常生長(zhǎng)繁殖。可恢復(fù)游動(dòng)及正常生長(zhǎng)繁殖。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)四、幾種比較特殊的培養(yǎng)方法四、幾種比較特殊的培養(yǎng)方法u （一）同槽培養(yǎng)（一）同槽培養(yǎng)u 在對(duì)蝦育苗池施肥培養(yǎng)生物餌料供同池培養(yǎng)的對(duì)蝦幼體食用，生在對(duì)蝦育苗池施肥培養(yǎng)生物餌料供同池培養(yǎng)的對(duì)蝦幼體食用，生物餌料培養(yǎng)與對(duì)蝦育苗在同一水池內(nèi)同時(shí)進(jìn)行，即同槽培養(yǎng)。物餌料培養(yǎng)與對(duì)蝦育苗在同一水池內(nèi)同時(shí)進(jìn)行，即同槽培養(yǎng)。u 1、培養(yǎng)池：、培養(yǎng)池：水容量大，室外、露天水容量大，室外、露天。u 2、清池消毒：、清池消毒：u 3、藻種：從海區(qū)抽上來(lái)，經(jīng)沉淀池沉淀的海水，用、藻

30、種：從海區(qū)抽上來(lái)，經(jīng)沉淀池沉淀的海水，用150目篩娟目篩娟網(wǎng)過(guò)濾后灌入池中。網(wǎng)過(guò)濾后灌入池中。u 4、施肥：、施肥：u 第一天第一天氮肥：氮肥：2-3mg/L、磷肥：磷肥：0.2-0.3mg/Lu 以后每天施以后每天施氮肥：氮肥：0.5-1.5mg/L、磷肥：、磷肥：0.05-0.15mg/Lu 鐵肥和硅肥不必每天施，隔鐵肥和硅肥不必每天施，隔2-3天施一次或完全不施。天施一次或完全不施。u 鐵肥：鐵肥：0.3-0.5mg/Lu 硅肥：硅肥：0.05-0.1mg/L細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)（二）專(zhuān)池培養(yǎng)（二）專(zhuān)池培養(yǎng)u 專(zhuān)池培養(yǎng)：與同槽培養(yǎng)不同的是使用專(zhuān)用餌料池培養(yǎng)，專(zhuān)池培養(yǎng)：與同槽培養(yǎng)不同的

31、是使用專(zhuān)用餌料池培養(yǎng)，施施肥量加大，培養(yǎng)時(shí)間短濃度大肥量加大，培養(yǎng)時(shí)間短濃度大。u 1、2、3步驟同上。步驟同上。u 4、施肥：、施肥：u 第一次施硝酸鈉：第一次施硝酸鈉：30mg/Lu 磷酸氫二鉀：磷酸氫二鉀：3mg/Lu 三氯化鐵：三氯化鐵：0.3mg/Lu 一般一般三、四天三、四天，即可收獲。，即可收獲。u 優(yōu)點(diǎn)：方法簡(jiǎn)單、培養(yǎng)速度快，能大量及時(shí)的供餌。優(yōu)點(diǎn)：方法簡(jiǎn)單、培養(yǎng)速度快，能大量及時(shí)的供餌。u 缺點(diǎn)：生長(zhǎng)起來(lái)絕大多數(shù)單胞藻不適合缺點(diǎn)：生長(zhǎng)起來(lái)絕大多數(shù)單胞藻不適合蚤狀幼體攝食蚤狀幼體攝食，生生長(zhǎng)起來(lái)又極容易大量死亡長(zhǎng)起來(lái)又極容易大量死亡。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)（三）底棲硅藻的培養(yǎng)

32、（三）底棲硅藻的培養(yǎng)u 鮑、蛤鮑、蛤及海參等海產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的幼蟲(chóng)卵孵出后，只有一短及海參等海產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的幼蟲(chóng)卵孵出后，只有一短暫的浮游階段即下沉過(guò)底棲生活。在暫的浮游階段即下沉過(guò)底棲生活。在底棲生活階段需要底棲生活階段需要提提供供底棲性餌料底棲性餌料。u 1、藻種的來(lái)源：、藻種的來(lái)源：u 海區(qū)掛板附片：在海區(qū)掛板附片：在海區(qū)浮筏下海區(qū)浮筏下，懸掛各種類(lèi)型的，懸掛各種類(lèi)型的附著基附著基（如文蛤殼、塑料板、玻璃片等），懸掛深度在（如文蛤殼、塑料板、玻璃片等），懸掛深度在0.5m左右左右，2、3天后取回天后取回；沖洗沖洗去附著去附著雜物雜物，再，再取下底棲硅藻，收集取下底棲硅藻，收集藻種。藻種。u 刮

33、砂淘洗：自然繁殖的底棲硅藻在刮砂淘洗：自然繁殖的底棲硅藻在海灘的表面海灘的表面形成形成黃綠黃綠色至黃褐色的密集藻群色至黃褐色的密集藻群。取有密集藻群的表面細(xì)砂取有密集藻群的表面細(xì)砂，加入，加入清潔海水，攪拌清洗雜物，靜置片刻，待沙泥下沉，清潔海水，攪拌清洗雜物，靜置片刻，待沙泥下沉，上層上層液體呈茶褐色，在經(jīng)粗篩娟過(guò)濾液體呈茶褐色，在經(jīng)粗篩娟過(guò)濾，即可得到濃度很大的底，即可得到濃度很大的底棲棲硅藻藻液硅藻藻液。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)2、培養(yǎng)容器和附片裝置、培養(yǎng)容器和附片裝置u 培養(yǎng)容器：培養(yǎng)容器：u 玻璃鋼水槽玻璃鋼水槽：藻種：藻種u 水族箱水族箱：中繼培養(yǎng)：中繼培養(yǎng)u 水泥池水泥池：大型培

34、養(yǎng)：大型培養(yǎng)u 附片裝置附片裝置u 玻璃、聚乙烯薄膜、玻璃、聚乙烯薄膜、玻璃鋼波紋板玻璃鋼波紋板等均可作為附片裝置。等均可作為附片裝置。u 附片架附片架細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)3、培養(yǎng)方法、培養(yǎng)方法u 接種附片接種附片u 把培養(yǎng)容器、培養(yǎng)池和附片裝置把培養(yǎng)容器、培養(yǎng)池和附片裝置清洗消毒干凈清洗消毒干凈，將幅片裝將幅片裝置裝入培養(yǎng)容器置裝入培養(yǎng)容器中，中，加滿過(guò)濾海水加滿過(guò)濾海水。u 把采集到得把采集到得底棲硅藻液用密篩娟網(wǎng)過(guò)濾底棲硅藻液用密篩娟網(wǎng)過(guò)濾1-2次后次后，倒入培倒入培養(yǎng)池中養(yǎng)池中，攪拌均勻攪拌均勻，靜置靜置1天天，利用底棲硅藻在靜水中沉降，利用底棲硅藻在靜水中沉降并附片的特性來(lái)并附片

35、的特性來(lái)附片附片。u 24h后，硅藻藻種已比較均勻地附著在附片的向上面，后，硅藻藻種已比較均勻地附著在附片的向上面，用用水輕輕沖洗附片水輕輕沖洗附片，附片上的硅藻不脫離時(shí)附片上的硅藻不脫離時(shí)，即全部換水即全部換水，加入新鮮海水并施肥，加入新鮮海水并施肥，開(kāi)始培養(yǎng)開(kāi)始培養(yǎng)。u 培養(yǎng)培養(yǎng)2-3天后天后，可將，可將附片裝置翻轉(zhuǎn)附片裝置翻轉(zhuǎn)，再一次接種附片再一次接種附片，即，即得雙面附片，繼續(xù)培養(yǎng)。得雙面附片，繼續(xù)培養(yǎng)。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)換水換水u 每每2-3天換水一次并施肥天換水一次并施肥，換水時(shí)必須，換水時(shí)必須沖洗池底污物沖洗池底污物，并，并將敵害生物沖走。將敵害生物沖走。u 在在高溫季節(jié)里

36、高溫季節(jié)里，換水次數(shù)應(yīng)增加換水次數(shù)應(yīng)增加。u 在條件許可時(shí)在條件許可時(shí)利用循環(huán)水或流動(dòng)水培養(yǎng)底棲硅藻利用循環(huán)水或流動(dòng)水培養(yǎng)底棲硅藻，能獲得，能獲得更理想更理想的效果。的效果。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)u 施肥施肥u 硝酸銨：硝酸銨：10-25mgu 九水硅酸鈉：九水硅酸鈉：1mgu 磷酸二氫鉀：磷酸二氫鉀：1-2.5mgu 維生素維生素B12：0.25ugu 檸檬酸鐵：檸檬酸鐵：0.1mgu 海水海水1000mlu 光照光照5000-10000lxu 生長(zhǎng)情況觀察生長(zhǎng)情況觀察u 收獲：收獲：5-7天天培養(yǎng)即可收獲。培養(yǎng)即可收獲。u 將附片裝置用過(guò)濾海水輕輕沖洗或在池中蕩洗幾次，然后將附片裝置用過(guò)

37、濾海水輕輕沖洗或在池中蕩洗幾次，然后整個(gè)移整個(gè)移入育苗池中入育苗池中，培養(yǎng)的幼蟲(chóng)下沉在附片上，并以附片上的底棲硅藻，培養(yǎng)的幼蟲(chóng)下沉在附片上，并以附片上的底棲硅藻為餌料。為餌料。u 洗刷：將硅藻從附片上洗刷：將硅藻從附片上洗刷下來(lái)洗刷下來(lái)，經(jīng)過(guò)濾后投入育苗池中經(jīng)過(guò)濾后投入育苗池中。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)五、藻種的保存五、藻種的保存u （一）瓊脂斜面保存（一）瓊脂斜面保存在微藻培養(yǎng)液中，在微藻培養(yǎng)液中，溶入瓊脂溶入瓊脂，制成，制成1.5%-2%的瓊脂斜面的瓊脂斜面固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基，劃線接種上微藻劃線接種上微藻，在，在弱光下培養(yǎng)弱光下培養(yǎng)，當(dāng)目測(cè)到，當(dāng)目測(cè)到藻落形成時(shí)，在藻落形成時(shí)，在實(shí)驗(yàn)室溫

38、下保存或放入冰箱中保存實(shí)驗(yàn)室溫下保存或放入冰箱中保存。u 優(yōu)點(diǎn)：時(shí)間長(zhǎng)，一般為優(yōu)點(diǎn)：時(shí)間長(zhǎng)，一般為1年左右年左右u 如果如果每天每天讓藻種讓藻種接受短時(shí)間弱光照接受短時(shí)間弱光照，則可保存，則可保存2-3年；年；u 體積小便于攜帶和郵寄。體積小便于攜帶和郵寄。u 缺點(diǎn)：瓊脂斜面易干燥收縮，引起藻細(xì)胞變形，缺點(diǎn)：瓊脂斜面易干燥收縮，引起藻細(xì)胞變形，重接種時(shí)重接種時(shí)需較長(zhǎng)時(shí)間恢復(fù)需較長(zhǎng)時(shí)間恢復(fù)。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)（二）液體保種（二）液體保種u 方法與單胞藻的培養(yǎng)基本相同，但是注意以下幾點(diǎn)可以延方法與單胞藻的培養(yǎng)基本相同，但是注意以下幾點(diǎn)可以延長(zhǎng)保種時(shí)間。長(zhǎng)保種時(shí)間。u 1、減少接種量：、減少接

39、種量：u 如如中肋骨條藻中肋骨條藻接種接種1周周就能達(dá)到就能達(dá)到最大生長(zhǎng)密度最大生長(zhǎng)密度，然后漸漸開(kāi)，然后漸漸開(kāi)始衰敗，始衰敗，2周周作用就會(huì)作用就會(huì)全部死亡全部死亡。u 這樣就必須這樣就必須每周或者每周或者10d左右就左右就更新接種一次更新接種一次。u 如果在如果在100ml的的培養(yǎng)液培養(yǎng)液中，只中，只接種接種2-3滴滴藻種在室溫和室藻種在室溫和室內(nèi)自然光照下，需要內(nèi)自然光照下，需要1個(gè)多月才能達(dá)到最大密度個(gè)多月才能達(dá)到最大密度。u 這樣就可以在這樣就可以在1個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間更新個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間更新1次接種即可次接種即可。細(xì)細(xì)胞藻胞藻類(lèi)類(lèi)培培養(yǎng)養(yǎng)2、加入氮素、加入氮素u 以往在微藻保種時(shí)，常用降低氮素的濃度來(lái)使微藻緩慢生以往在微藻保種時(shí)，常用降低氮素的濃度來(lái)使微藻緩慢生長(zhǎng)，延長(zhǎng)更新接種的周期。長(zhǎng)，延長(zhǎng)更新接種的周期。u 現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)微藻細(xì)胞分裂率與氮濃度之間有一個(gè)雙曲線的關(guān)現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)微藻細(xì)胞分裂率與氮濃度之間有一個(gè)雙曲線的關(guān)系，即在適宜濃度范圍內(nèi)生長(zhǎng)率隨氮濃度增加而上升，隨系，即在適宜濃度范圍內(nèi)生長(zhǎng)率隨氮濃度增加而上升，