22土壤中分解尿素的細菌的分離和計數(shù)

1、+選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基（1 1）將土壤中的固氮菌分離出來）將土壤中的固氮菌分離出來（2 2）將土壤中自養(yǎng)微生物分離出來）將土壤中自養(yǎng)微生物分離出來舉一反三（3 3）篩選出抗青霉素的微生物）篩選出抗青霉素的微生物（4 4）篩選出耐高濃度食鹽的微生物）篩選出耐高濃度食鹽的微生物計數(shù)板是一塊特制的載玻片，上面有一個特定計數(shù)板是一塊特制的載玻片，上面有一個特定的面積（的面積（1 mm1 mm2 2）和高（）和高（0.1 mm0.1 mm）的計數(shù)室，在）的計數(shù)室，在1 mm1 mm2 2的面積里又被劃分成的面積里又被劃分成2525個（或個（或1616個）中格，個）中格，每個中格進一步劃分成每個中格進一步

2、劃分成1616個（或者個（或者2525個）小格，個）小格，但計數(shù)室都是由但計數(shù)室都是由400400個小格組成。個小格組成。計數(shù)室計數(shù)室操作：操作：將清潔干燥的血球計數(shù)板將清潔干燥的血球計數(shù)板蓋上蓋玻片蓋上蓋玻片，再將，再將稀釋的樣品滴稀釋的樣品滴在計數(shù)板上，然后在顯微鏡下統(tǒng)計在計數(shù)板上，然后在顯微鏡下統(tǒng)計4 45 5個中格中的細菌數(shù)，并求出每個小格所含細菌的平均個中格中的細菌數(shù)，并求出每個小格所含細菌的平均數(shù)，再按下面公式求出每毫升樣品中所含的細菌數(shù)。數(shù)，再按下面公式求出每毫升樣品中所含的細菌數(shù)。 計算公式：計算公式：每毫升原液所含細菌數(shù)每小格平均細每毫升原液所含細菌數(shù)每小格平均細菌數(shù)菌數(shù)40

3、04001000010000稀釋倍數(shù)。稀釋倍數(shù)。 當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表 面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋 液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的 菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有 多少活菌。多少活菌。在設(shè)計實驗時，一定在設(shè)計實驗時，一定要涂布至少要涂布至少3 3個平板，作為重復(fù)組，才能增強實驗的說服力個平板，作為重復(fù)組，才能增強實驗的說服力與準確性與準確性。在分析實驗結(jié)果時，。在分析實驗結(jié)果時，一定要考慮所設(shè)置的重復(fù)一定要考慮所設(shè)置的重復(fù)組的結(jié)果是否一致，結(jié)果不

4、一致，意味著操作有誤，需要組的結(jié)果是否一致，結(jié)果不一致，意味著操作有誤，需要重新實驗重新實驗。判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染：判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染：將未接種的培養(yǎng)基同時進行培養(yǎng)。將未接種的培養(yǎng)基同時進行培養(yǎng)。判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用：判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用：完全培養(yǎng)基（完全培養(yǎng)基（牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基）與）與選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基接種接種后培養(yǎng)觀察菌落數(shù)目。后培養(yǎng)觀察菌落數(shù)目。 從富含有機物、潮濕、從富含有機物、潮濕、 ph7ph7的土壤中取的土壤中取樣。先鏟去表層土樣。先鏟去表層土3cm3cm左右，再取樣，將樣品裝左右，再取樣，將樣品裝入事先準備好的信封

5、中。入事先準備好的信封中。取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的的信封在使用取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的的信封在使用前都要滅菌。前都要滅菌。制備以尿素為唯一氮源的制備以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基。實驗時要實驗時要對培養(yǎng)皿作對培養(yǎng)皿作好標記。注好標記。注明培養(yǎng)基類明培養(yǎng)基類型、培養(yǎng)時型、培養(yǎng)時間、稀釋度、間、稀釋度、培養(yǎng)物等。培養(yǎng)物等。三重復(fù)組三重復(fù)組求平均值使求平均值使結(jié)果更準確結(jié)果更準確最好增加空白對照：最好增加空白對照： 排除排除的干擾，證明的干擾，證明是由是由引起的。引起的。關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)地等等，都是鑒定細菌的重要手段。質(zhì)地

6、等等，都是鑒定細菌的重要手段。 關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)地等等，都是鑒定細菌的重要手段。質(zhì)地等等，都是鑒定細菌的重要手段。 結(jié)果：結(jié)果： 酚紅指示劑變酚紅指示劑變_，初步鑒定該細菌能夠分解尿素初步鑒定該細菌能夠分解尿素 分析：分析：細菌能分解尿素產(chǎn)生細菌能分解尿素產(chǎn)生_，使培養(yǎng)基呈堿性，氨，使培養(yǎng)基呈堿性，氨增加增加phph升高，酚紅由無色變?yōu)樯撸蛹t由無色變?yōu)榧t色。紅色。 操作：操作：在以在以_為唯一氮源的培養(yǎng)基中加為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入入酚紅指示劑酚紅指示劑尿素尿素（鑒別培養(yǎng)基）（鑒別培養(yǎng)基）紅色紅色氨氨三、課題延伸三、課題延伸

7、實驗結(jié)果的進一步鑒定實驗結(jié)果的進一步鑒定1.1.對細菌群體生長規(guī)律測定的正確的表述是（對細菌群體生長規(guī)律測定的正確的表述是（ ） a.a.在液體培養(yǎng)基上進行在液體培養(yǎng)基上進行 b.b.至少接種一種細菌至少接種一種細菌 c.c.接種一個細菌接種一個細菌 d.d.及時補充消耗的營養(yǎng)物質(zhì)及時補充消耗的營養(yǎng)物質(zhì) 2.2.使用選擇培養(yǎng)基的目的是（使用選擇培養(yǎng)基的目的是（ ） a.a.培養(yǎng)細菌培養(yǎng)細菌 b.b.培養(yǎng)真菌培養(yǎng)真菌 c.c.使需要的微生物大量繁殖使需要的微生物大量繁殖 d.d.表現(xiàn)某微生物的特定性狀與其他微生物加以區(qū)別表現(xiàn)某微生物的特定性狀與其他微生物加以區(qū)別3.3.能合成脲酶的微生物所需要的

8、碳源和氮源分別是能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分別是( )( ) a.co a.co2 2和和n n2 2 b. b.葡萄糖和葡萄糖和nhnh3 3 c.coc.co2 2和尿素和尿素 d.d.葡萄糖和尿素葡萄糖和尿素a ac cd d 4 4、實驗測定鏈霉素對、實驗測定鏈霉素對3 3種細菌的抗生素效應(yīng)，用種細菌的抗生素效應(yīng)，用3 3種細種細菌在事先準備好的瓊脂塊平板上畫菌在事先準備好的瓊脂塊平板上畫3 3條等長的平行線（條等長的平行線（3 3條線均與下圖中的鏈霉素帶接觸），將平板置于條線均與下圖中的鏈霉素帶接觸），將平板置于3737條條件下恒溫培養(yǎng)件下恒溫培養(yǎng)3 3天，結(jié)果如圖所示。從實驗結(jié)果分析以天，結(jié)果如圖所示。從實驗結(jié)果分析以下敘述，不正確的是下敘述，不正確的是