第八章_蒽醌的提取分離

1、第八章第八章 蒽醌類化學成分蒽醌類化學成分 的提取分離技術的提取分離技術本章節(jié)要求本章節(jié)要求n掌握蒽醌的概念，熟悉蒽醌類化合物的母核掌握蒽醌的概念，熟悉蒽醌類化合物的母核結(jié)構(gòu)，了解蒽醌類化合物的分類及其基本結(jié)結(jié)構(gòu)，了解蒽醌類化合物的分類及其基本結(jié)構(gòu)類型。構(gòu)類型。n掌握蒽醌類化合物的理化性質(zhì)和檢識方法。掌握蒽醌類化合物的理化性質(zhì)和檢識方法。n掌握醌類的提取分離。掌握醌類的提取分離。簡介：簡介：n 醌類是指分子中具有醌類是指分子中具有不飽和環(huán)二酮不飽和環(huán)二酮結(jié)構(gòu)的一結(jié)構(gòu)的一類化合物，在許多中藥中都含有醌類。中藥中所類化合物，在許多中藥中都含有醌類。中藥中所含的醌類化合物按其結(jié)構(gòu)可分為苯醌、萘醌、菲

2、含的醌類化合物按其結(jié)構(gòu)可分為苯醌、萘醌、菲醌、蒽醌醌、蒽醌4 4種類型。種類型。對苯醌2,5-二甲基對苯醌1,4-萘醌鄰苯醌OOOOOOCH3H3COOOOOOOO1,2-萘醌2,6-萘醌9,10-蒽醌n分布與生理活性分布與生理活性 目前已發(fā)現(xiàn)的蒽醌類主要包括蒽醌衍生物及其不同還目前已發(fā)現(xiàn)的蒽醌類主要包括蒽醌衍生物及其不同還原程度的產(chǎn)物。在高等植物中主要分布在蓼科、鼠李科、茜原程度的產(chǎn)物。在高等植物中主要分布在蓼科、鼠李科、茜草科、豆科等植物中，是許多中藥如大黃、何首烏、虎杖、草科、豆科等植物中，是許多中藥如大黃、何首烏、虎杖、決明子、蘆薈、茜草等中的有效成分，也是一類重要的天然決明子、蘆薈、

3、茜草等中的有效成分，也是一類重要的天然色素。色素。 大黃大黃蘆薈蘆薈番瀉葉番瀉葉n蒽醌類化合物具有多方面的生理活性，如具蒽醌類化合物具有多方面的生理活性，如具瀉瀉下作用下作用（番瀉葉中的番瀉苷類化合物）、抗菌（番瀉葉中的番瀉苷類化合物）、抗菌作用（大黃中游離的羥基蒽醌類化合物）、止作用（大黃中游離的羥基蒽醌類化合物）、止血作用（茜草中的茜草素類成分）等等。血作用（茜草中的茜草素類成分）等等。茜草茜草虎杖虎杖何首烏何首烏 第一節(jié)第一節(jié) 必備知識必備知識 一、結(jié)構(gòu)和分類一、結(jié)構(gòu)和分類1、基本結(jié)構(gòu)蒽醌：蒽的中位羰基衍生物蒽醌：蒽的中位羰基衍生物1、4、5、8：位位 2、3、6、7：位位 取代基：取代

4、基： 在蒽醌母核上可有不同數(shù)目的羥基取代，其中在蒽醌母核上可有不同數(shù)目的羥基取代，其中以二元羥基取代的蒽醌化合物為多，如大黃中的幾以二元羥基取代的蒽醌化合物為多，如大黃中的幾種蒽醌類成分。種蒽醌類成分。n在其兩側(cè)苯環(huán)上多有在其兩側(cè)苯環(huán)上多有CH3、CH2OH、CHO、COOH等基團取代，個別蒽醌化合物還有等基團取代，個別蒽醌化合物還有兩個兩個C原子以上的側(cè)鏈取代。原子以上的側(cè)鏈取代。2、分類、分類n根據(jù)母核中蒽核的數(shù)量分為單蒽核類和雙根據(jù)母核中蒽核的數(shù)量分為單蒽核類和雙蒽核類；蒽核類；大黃素大黃素（單蒽核類）（單蒽核類）番瀉苷番瀉苷A（雙蒽核類）（雙蒽核類）單蒽核類單蒽核類n單蒽核類根據(jù)羥基在

5、蒽醌母核上位置的單蒽核類根據(jù)羥基在蒽醌母核上位置的不同，可將羥基蒽醌衍生物分為大黃素不同，可將羥基蒽醌衍生物分為大黃素型和茜草素型兩類。型和茜草素型兩類。n蒽醌可在酸性條件下被還原，生成蒽酚蒽醌可在酸性條件下被還原，生成蒽酚及其互變異構(gòu)體蒽酮。及其互變異構(gòu)體蒽酮。（1 1）蒽醌衍生物）蒽醌衍生物大黃素型大黃素型n這種類型的蒽醌的取代基分布在兩側(cè)苯環(huán)上，這種類型的蒽醌的取代基分布在兩側(cè)苯環(huán)上，多數(shù)呈黃多數(shù)呈黃- -棕黃色，許多重要的中藥如大黃中棕黃色，許多重要的中藥如大黃中的蒽醌多屬此類型。的蒽醌多屬此類型。大黃酚大黃素甲醚大黃素蘆薈大黃素大黃酸n 以上五種大黃素型羥基蒽醌在中藥中分布比較廣泛。

6、以上五種大黃素型羥基蒽醌在中藥中分布比較廣泛。n羥基蒽醌衍生物大多與葡萄糖、鼠李糖等結(jié)合成苷，羥基蒽醌衍生物大多與葡萄糖、鼠李糖等結(jié)合成苷，有單糖苷，也有雙糖苷。有單糖苷，也有雙糖苷。R1=glcR2=H蘆薈大黃素葡萄糖苷蘆薈大黃素葡萄糖苷 大黃素甲醚大黃素甲醚8-O-D-龍膽雙糖苷龍膽雙糖苷 （1 1）蒽醌衍生物）蒽醌衍生物茜草素型茜草素型n此類羥基蒽醌化合物其羥基分布在一側(cè)苯環(huán)上，此類羥基蒽醌化合物其羥基分布在一側(cè)苯環(huán)上，呈色以橙黃橙紅為主，主要存在于茜草中，呈色以橙黃橙紅為主，主要存在于茜草中，具有止血活血作用。具有止血活血作用。茜草素茜草素羥基茜草素羥基茜草素偽羥基茜草素偽羥基茜草素（

7、2 2）蒽酚（或蒽酮）衍生物類）蒽酚（或蒽酮）衍生物類n蒽醌在酸性環(huán)境中被還原，可生成蒽酚及其互變蒽醌在酸性環(huán)境中被還原，可生成蒽酚及其互變異構(gòu)體蒽酮。異構(gòu)體蒽酮。 蒽酚（或蒽酮）衍生物一般存在于蒽酚（或蒽酮）衍生物一般存在于新鮮新鮮植物中，其羥基衍生物常以游植物中，其羥基衍生物常以游離態(tài)或結(jié)合態(tài)與相應的羥基蒽醌共存于植物中，新鮮大黃經(jīng)離態(tài)或結(jié)合態(tài)與相應的羥基蒽醌共存于植物中，新鮮大黃經(jīng)2年以上貯存就年以上貯存就檢識不到蒽酚。檢識不到蒽酚。（3 3）二蒽酮類）二蒽酮類n二蒽酮類是由二蒽酮類是由2分子蒽酮脫去分子蒽酮脫去1分子氫后而成，上分子氫后而成，上下兩環(huán)的結(jié)構(gòu)相同而且對稱，又分為中位連接下

8、兩環(huán)的結(jié)構(gòu)相同而且對稱，又分為中位連接（即（即C10C10）和）和位連接（位連接（C1C1或或C4C4）等形式。多為黃色結(jié)晶。等形式。多為黃色結(jié)晶。番瀉苷番瀉苷A番瀉苷番瀉苷B番瀉苷番瀉苷C番瀉苷番瀉苷Dn番瀉苷番瀉苷A是由是由2分子大黃酸蒽酮通過分子大黃酸蒽酮通過C10C10反式結(jié)合而成。反式結(jié)合而成。易被酸水解生成易被酸水解生成2分子葡萄糖和分子葡萄糖和1分子番瀉苷元分子番瀉苷元A，具有右，具有右旋性。旋性。n番瀉苷番瀉苷B性質(zhì)與番瀉苷性質(zhì)與番瀉苷A相似，是番瀉苷相似，是番瀉苷A的異構(gòu)體，水解的異構(gòu)體，水解后生成后生成2分子葡萄糖和番瀉苷元分子葡萄糖和番瀉苷元B。苷元。苷元B是苷元是苷元A

9、的內(nèi)消旋的內(nèi)消旋體。體。 n番瀉苷番瀉苷C是由是由1分子大黃酸蒽酮與分子大黃酸蒽酮與1分子蘆薈大黃素蒽酮通分子蘆薈大黃素蒽酮通過過C10C10反式結(jié)合而成，番瀉苷反式結(jié)合而成，番瀉苷D是苷是苷C的異構(gòu)體。的異構(gòu)體。 n二蒽酮多以苷的形式存在，若催化加氫還原則生成分子二蒽酮多以苷的形式存在，若催化加氫還原則生成分子蒽酮，用三氯化鐵氧化則生成分子蒽醌，比較重要的二蒽酮，用三氯化鐵氧化則生成分子蒽醌，比較重要的二蒽酮是從番瀉葉中得到的番瀉苷蒽酮是從番瀉葉中得到的番瀉苷A、B、C、D。n在某些新鮮植物藥中，所含的二蒽酮苷隨著貯藏時間的增在某些新鮮植物藥中，所含的二蒽酮苷隨著貯藏時間的增加，其含量將逐漸

10、減少，而相應的單蒽酮含量則隨之增加，加，其含量將逐漸減少，而相應的單蒽酮含量則隨之增加，如果貯藏時間超過如果貯藏時間超過1年，則單蒽酮苷也能變成蒽醌苷及其苷年，則單蒽酮苷也能變成蒽醌苷及其苷元。元。二、理化性質(zhì)二、理化性質(zhì)1.1.性狀性狀n顏色：顏色：蒽醌類化合物均為蒽醌類化合物均為黃色或橙紅色黃色或橙紅色固體，固體，有一定的熔點。有一定的熔點。n結(jié)晶：結(jié)晶：游離的蒽醌類具有完好的晶形，成苷后游離的蒽醌類具有完好的晶形，成苷后則晶形不好。則晶形不好。n熒光：熒光：蒽醌類化合物大多有蒽醌類化合物大多有熒光熒光，并在不同，并在不同pH時顯示不同的顏色。時顯示不同的顏色。2.2.升華性升華性 游離蒽

11、醌類化合物具有升華性，常壓下加熱可游離蒽醌類化合物具有升華性，常壓下加熱可升華而不分解。升華而不分解。 升華性：升華性：可利用此性質(zhì)來可利用此性質(zhì)來提取分離、精制提取分離、精制蒽醌類化蒽醌類化合物。一般升華溫度隨酸性增強而升高。合物。一般升華溫度隨酸性增強而升高。3.3.溶解度溶解度n游離蒽醌類化合物：具游離蒽醌類化合物：具親脂性親脂性，易溶于苯、乙醚、氯仿和，易溶于苯、乙醚、氯仿和堿性堿性有機溶劑中，可溶于丙酮、甲醇及乙醇，不溶或難溶有機溶劑中，可溶于丙酮、甲醇及乙醇，不溶或難溶于水。于水。n蒽醌苷類：蒽醌苷類：極性較大極性較大，易溶于甲醇、乙醇及熱水，難溶于，易溶于甲醇、乙醇及熱水，難溶于

12、冷水，幾乎不溶于乙醚、苯及氯仿等溶劑。冷水，幾乎不溶于乙醚、苯及氯仿等溶劑。n羥基蒽醌苷及苷元，因具有酚羥基，可溶于堿性溶液中，羥基蒽醌苷及苷元，因具有酚羥基，可溶于堿性溶液中，加酸酸化后又可析出沉淀，此性質(zhì)可用于加酸酸化后又可析出沉淀，此性質(zhì)可用于提取分離提取分離。n蒽醌類化合物的鈣、鋇、鉛、鐵及鋁鹽均難溶于水。蒽醌類化合物的鈣、鋇、鉛、鐵及鋁鹽均難溶于水。4.4.酸堿性酸堿性酸性酸性n蒽醌類化合物大多具有蒽醌類化合物大多具有2 2個以上的酚羥基，個以上的酚羥基，因此具有酚的通性，呈因此具有酚的通性，呈弱酸性弱酸性。n蒽醌類化合物在堿性水溶液中成鹽溶解，蒽醌類化合物在堿性水溶液中成鹽溶解，加

13、酸酸化后被游離又可重新析出沉淀。加酸酸化后被游離又可重新析出沉淀。n酸性強弱規(guī)律酸性強弱規(guī)律是否存在是否存在羧基及酚羥基羧基及酚羥基的數(shù)的數(shù)目及位置有關目及位置有關（1）帶羧基者酸性強于不帶羧基者，帶羧基者）帶羧基者酸性強于不帶羧基者，帶羧基者可溶于可溶于NaHCO3水液中。水液中。（2）-羥基蒽醌羥基蒽醌的酸性的酸性強于強于-羥基蒽醌衍生物羥基蒽醌衍生物（-羥基易與醌基形成分子內(nèi)氫鍵羥基易與醌基形成分子內(nèi)氫鍵），故），故-羥羥基蒽醌可溶于基蒽醌可溶于Na2CO3中，而中，而-羥基蒽醌則不羥基蒽醌則不溶。溶。（3）羥基數(shù)目增多時，酸性增強。）羥基數(shù)目增多時，酸性增強。1,5-OH和和1,4-O

14、H 1,8-OH（-OH和不同的氧形成分子內(nèi)氫鍵）和不同的氧形成分子內(nèi)氫鍵） （只能與同一羥基形成氫鍵）（只能與同一羥基形成氫鍵） 1,2-OH -OH（分子內(nèi)形成連續(xù)氫鍵）（分子內(nèi)形成連續(xù)氫鍵） （無分子內(nèi)氫鍵）（無分子內(nèi)氫鍵）故蒽醌類成分的酸性按強弱順序大致排列為：故蒽醌類成分的酸性按強弱順序大致排列為：含含-COOH含含2個以上個以上-OH含含1個個- OH含含2個以上個以上-OH1個個-OHn根據(jù)蒽醌類根據(jù)蒽醌類化合物的酸化合物的酸性強弱的不性強弱的不同，可用梯同，可用梯度度pH萃取萃取法來分離。法來分離。酚羥（羧）基種類酚羥（羧）基種類堿溶液堿溶液-COOH或或2個以上個以上-OH5

15、%NaHCO31個個-OH5%Na2CO32個或多個個或多個-OH1%NaOH1個個-OH5%NaOH酸性酸性堿性堿性4.4.酸堿性酸堿性堿性堿性n由于氧原子的存在，蒽醌類成分也具有微弱的由于氧原子的存在，蒽醌類成分也具有微弱的堿性，表現(xiàn)為能溶于濃硫酸中成鹽再轉(zhuǎn)成陽碳堿性，表現(xiàn)為能溶于濃硫酸中成鹽再轉(zhuǎn)成陽碳離子，同時伴有顏色的顯著改變，一般顯紅至離子，同時伴有顏色的顯著改變，一般顯紅至紫紅色。紫紅色。n大黃酚大黃酚：暗黃色：暗黃色 紅色紅色n大黃素大黃素：橙紅色：橙紅色 紅色紅色濃濃H2SO4濃濃H2SO45.5.蒽醌類化合物的檢識反應蒽醌類化合物的檢識反應（1 1）顯色反應）顯色反應堿顯色反

16、應：堿顯色反應：羥基蒽醌衍生物遇堿顯紅羥基蒽醌衍生物遇堿顯紅色或紅紫色等，顏色與分子中羥基所在色或紅紫色等，顏色與分子中羥基所在位置有關。是檢識中藥中位置有關。是檢識中藥中羥基蒽醌羥基蒽醌成分成分存在的最存在的最常用方法之一常用方法之一，對羥基蒽醌結(jié)，對羥基蒽醌結(jié)構(gòu)的判定有輔助作用。構(gòu)的判定有輔助作用。n試劑：試劑：堿性溶液（氫氧化鈉、碳酸鈉、氫氧化銨）。堿性溶液（氫氧化鈉、碳酸鈉、氫氧化銨）。n作用基團：作用基團：羥基蒽醌衍生物（有游離羥基者）。羥基蒽醌衍生物（有游離羥基者）。n現(xiàn)象：現(xiàn)象：羥基蒽酚、蒽酮、二蒽酮類化合物遇堿呈黃色羥基蒽酚、蒽酮、二蒽酮類化合物遇堿呈黃色且?guī)ЬG色熒光，需在空氣

17、中或經(jīng)且?guī)ЬG色熒光，需在空氣中或經(jīng)3H2O2氧化成蒽醌氧化成蒽醌后，才顯示上述顏色。后，才顯示上述顏色。 羥基蒽醌的羥基蒽醌的Borntrger反應反應蒽醌化合物蒽醌化合物顏色顏色蒽醌化合物蒽醌化合物顏色顏色1-OH紅紅1,8-二二OH紅紅2-OH橙橙-紅紅1,2,3-三三OH綠綠1,2-二二OH紫紫-藍藍1,2,4-三三OH紫紫-紅紅1,3-二二OH紅紅1,4,5-三三OH紫紫1,4-二二OH紫紫1,4,5,8-四四OH藍藍1,5-二二OH紅紅反應機理：反應機理：醋酸鎂顯色反應醋酸鎂顯色反應 羥基蒽醌和羥基蒽醌和0.5%醋酸鎂甲醇或乙醇溶醋酸鎂甲醇或乙醇溶液生成穩(wěn)定的橙紅色、紫紅色或紫色的液

18、生成穩(wěn)定的橙紅色、紫紅色或紫色的絡合物，反應靈敏，可作色譜絡合物，反應靈敏，可作色譜顯色顯色用。用。n試劑試劑：0.5乙酸鎂的甲醇或乙醇溶液。乙酸鎂的甲醇或乙醇溶液。n作用基團：作用基團：羥基蒽醌（有羥基蒽醌（有-OH或鄰位二或鄰位二OH）。）。n反應現(xiàn)象：反應現(xiàn)象：游離蒽醌化合物游離蒽醌化合物顏色顏色1個個-OH或或1個個-OH，或二個，或二個OH不在同環(huán)時不在同環(huán)時橙黃橙黃橙色橙色已有已有1個個-OH，并且在間位有另一個，并且在間位有另一個-OH橙紅橙紅紅色紅色已有已有1個個-OH，并且在鄰位有另一個，并且在鄰位有另一個-OH藍藍藍紫色藍紫色已有已有1個個-OH，并且在對位有另一個，并且在

19、對位有另一個-OH紫紅紫紅紫色紫色鄰位二鄰位二-OH藍色藍色n反應機理：反應機理：蒽醌鎂絡合物（橙色）蒽醌鎂絡合物（橙色）對亞硝基二甲苯胺反應對亞硝基二甲苯胺反應 9、10位上未取代的羥基蒽酮類化合物，位上未取代的羥基蒽酮類化合物，酮基對位亞甲基上的酮基對位亞甲基上的H很活潑，可與很活潑，可與0.1%對亞硝基對亞硝基-二甲苯胺吡啶溶液反應二甲苯胺吡啶溶液反應縮合而產(chǎn)生各種顏色?？s合而產(chǎn)生各種顏色。 n試劑：試劑：0.1對亞硝基二甲苯胺吡啶溶液。對亞硝基二甲苯胺吡啶溶液。n作用基團：作用基團：9位或位或10位未被取代的羥基蒽酮位未被取代的羥基蒽酮類化合物。類化合物。n反應現(xiàn)象：反應現(xiàn)象：隨分子結(jié)

20、構(gòu)而不同，如隨分子結(jié)構(gòu)而不同，如1,8-二羥二羥基者具綠色?；呔呔G色。n用途：用途：蒽酮化合物的定性檢查。蒽酮化合物的定性檢查。反應機理：反應機理：（2）色譜檢識）色譜檢識方法：方法：硅膠薄層檢識、硅膠薄層檢識、聚酰胺聚酰胺薄層檢識薄層檢識展開劑：展開劑：混合溶劑混合溶劑 游離蒽醌游離蒽醌親脂性溶劑系統(tǒng)親脂性溶劑系統(tǒng) 蒽醌苷蒽醌苷親水性溶劑系統(tǒng)親水性溶劑系統(tǒng)顯色：顯色：日光：多顯黃色日光：多顯黃色 紫外：黃棕、紅、橙色熒光紫外：黃棕、紅、橙色熒光 氨水、堿溶液：顏色加深氨水、堿溶液：顏色加深/變紅變紅 0.5%醋酸鎂甲醇溶液：橙色醋酸鎂甲醇溶液：橙色/紫色紫色第二節(jié)第二節(jié) 蒽醌類化合物的提取

21、與分離蒽醌類化合物的提取與分離一、蒽醌類化合物的提取一、蒽醌類化合物的提取n溶劑提取法溶劑提取法 適用范圍：適用范圍： 游離蒽醌類游離蒽醌類用用親脂性親脂性有機溶劑提取，如苯、有機溶劑提取，如苯、 氯仿等氯仿等 蒽醌苷類蒽醌苷類用用親水性親水性有機溶劑提取，如甲醇、有機溶劑提取，如甲醇、 乙醇或沸水乙醇或沸水 通常使用通常使用甲醇或乙醇甲醇或乙醇作為提取溶劑作為提取溶劑 方法：方法：回流提取法、滲漉法回流提取法、滲漉法特殊情況下，需選用下列方法進行提?。禾厥馇闆r下，需選用下列方法進行提?。海? 1）富含油脂的種子類，先用石油醚）富含油脂的種子類，先用石油醚脫脂脫脂，再用醇類溶劑提取，但要注意，

22、低極性的大黃酚等再用醇類溶劑提取，但要注意，低極性的大黃酚等也可能被石油醚提出。也可能被石油醚提出。（2 2）用極性）用極性由小到大由小到大的溶劑依次進行提取，的溶劑依次進行提取，適合于游離形式蒽醌成分的提取，并可得到初步分適合于游離形式蒽醌成分的提取，并可得到初步分離，但由于羥基蒽醌在親脂性溶劑中的溶解度很小，離，但由于羥基蒽醌在親脂性溶劑中的溶解度很小，故提取時間較長。故提取時間較長。 （3 3）提取羥基蒽醌或具有羧基的蒽醌時，宜先將）提取羥基蒽醌或具有羧基的蒽醌時，宜先將其用其用酸酸轉(zhuǎn)化為轉(zhuǎn)化為游離游離狀態(tài)，再用醇提取。狀態(tài)，再用醇提取。 （4 4）用熱水提取含糖較多的植物材料時，應避免

23、）用熱水提取含糖較多的植物材料時，應避免加溫過高，以免糊化；提取蒽醌苷時應注意酸、加溫過高，以免糊化；提取蒽醌苷時應注意酸、堿、酶的作用；提取如蒽酮類的還原型蒽衍生物堿、酶的作用；提取如蒽酮類的還原型蒽衍生物時，最好在惰性氣體下操作，并要用時，最好在惰性氣體下操作，并要用新鮮新鮮材料。材料。 （5 5）只需提取游離蒽醌，可先用稀硫酸進行水解，）只需提取游離蒽醌，可先用稀硫酸進行水解，再用有機溶劑進行提取。再用有機溶劑進行提取。n堿提酸沉法堿提酸沉法適用范圍：適用范圍：帶游離酚羥基或羧基的蒽醌類化帶游離酚羥基或羧基的蒽醌類化合物合物方法：方法：用堿溶液進行提取，提取液用酸酸化用堿溶液進行提取，提

24、取液用酸酸化后蒽醌類化合物形成沉淀析出后蒽醌類化合物形成沉淀析出二、蒽醌類化合物的分離二、蒽醌類化合物的分離1.蒽醌苷與游離蒽醌衍生物的分離蒽醌苷與游離蒽醌衍生物的分離原理：原理：利用蒽醌苷與游離蒽醌衍生物的利用蒽醌苷與游離蒽醌衍生物的 極性極性不同進行分離不同進行分離 方法：方法：（1）兩相溶劑萃取法（水層：蒽醌苷；）兩相溶劑萃取法（水層：蒽醌苷； 有機溶劑層：游離蒽醌）有機溶劑層：游離蒽醌） （2）有機溶劑提取法（有機溶劑：游離）有機溶劑提取法（有機溶劑：游離 蒽醌；殘渣：蒽醌苷）蒽醌；殘渣：蒽醌苷）n方法方法1 1：含有蒽醌的乙醇提取液含有蒽醌的乙醇提取液 濃縮濃縮 濃縮液濃縮液 與水不

25、相混溶的有機溶劑（氯仿、與水不相混溶的有機溶劑（氯仿、 苯、乙醚等）反復萃取苯、乙醚等）反復萃取 有機溶劑層有機溶劑層 水層水層 （游離蒽醌）（游離蒽醌） （蒽醌苷）（蒽醌苷）n方法方法2 2：中藥的乙醇提取液：中藥的乙醇提取液 減壓濃縮至干減壓濃縮至干 殘留物殘留物在回流提取器內(nèi)用氯仿提取在回流提取器內(nèi)用氯仿提取 氯仿提取液氯仿提取液 殘渣殘渣（游離蒽醌衍生物）（蒽醌苷）（游離蒽醌衍生物）（蒽醌苷）2.游離蒽醌衍生物的分離游離蒽醌衍生物的分離原理：原理：利用游離蒽醌衍生物的利用游離蒽醌衍生物的酸性酸性強弱差異強弱差異 和和結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)差異差異方法：方法：（1）溶劑分步結(jié)晶法）溶劑分步結(jié)晶法 （2

26、）pH梯度萃取法梯度萃取法 （3）色譜法）色譜法（1）溶劑分步結(jié)晶法）溶劑分步結(jié)晶法 是利用化合物溶解度差異將粗品溶于適宜是利用化合物溶解度差異將粗品溶于適宜的溶劑中，經(jīng)處理使先析出結(jié)晶的溶劑中，經(jīng)處理使先析出結(jié)晶過濾得到，過濾得到，分出結(jié)晶的母液濃縮后再析出結(jié)晶分出結(jié)晶的母液濃縮后再析出結(jié)晶，濾取結(jié)，濾取結(jié)晶晶后的母液再濃縮析出結(jié)晶后的母液再濃縮析出結(jié)晶，如此一，如此一步一步結(jié)晶可達到分離目的。分步結(jié)晶法得到步一步結(jié)晶可達到分離目的。分步結(jié)晶法得到的各個結(jié)晶純度不高，尚需反復重結(jié)晶才可得的各個結(jié)晶純度不高，尚需反復重結(jié)晶才可得到高純度結(jié)晶。到高純度結(jié)晶。（2）pH梯度萃取法梯度萃取法 此法是

27、分離游離蒽醌的經(jīng)典方法，也是此法是分離游離蒽醌的經(jīng)典方法，也是最常最常用的方法用的方法。是根據(jù)蒽醌的。是根據(jù)蒽醌的酸性差異酸性差異而利用不同強而利用不同強弱的堿液，自有機溶劑中分別提取不同酸性蒽醌弱的堿液，自有機溶劑中分別提取不同酸性蒽醌類成分，可使混合物得到一定程度的分離。類成分，可使混合物得到一定程度的分離。 但對于結(jié)構(gòu)相似、酸性相差不大的羥基蒽但對于結(jié)構(gòu)相似、酸性相差不大的羥基蒽醌混合物存在著局限性。醌混合物存在著局限性。n根據(jù)蒽醌類根據(jù)蒽醌類化合物的酸化合物的酸性強弱的不性強弱的不同，可用梯同，可用梯度度pH萃取萃取法來分離。法來分離。酚羥（羧）基種類酚羥（羧）基種類堿溶液堿溶液-CO

28、OH或或2個以上個以上-OH5%NaHCO31個個-OH5%Na2CO32個或多個個或多個-OH1%NaOH1個個-OH5%NaOH酸性酸性堿性堿性（3）色譜法）色譜法 色譜法對蒽醌類成分的分離效果較好，一色譜法對蒽醌類成分的分離效果較好，一般先用經(jīng)典方法經(jīng)過初步分離再用色譜法作進般先用經(jīng)典方法經(jīng)過初步分離再用色譜法作進一步分離。分離游離蒽醌衍生物常用的吸附劑一步分離。分離游離蒽醌衍生物常用的吸附劑有有硅膠硅膠和和聚酰胺聚酰胺粉等，慎用氧化鋁，因羥基蒽粉等，慎用氧化鋁，因羥基蒽醌能與氧化鋁形成牢固的螯合物，難以洗脫。醌能與氧化鋁形成牢固的螯合物，難以洗脫。 蒽苷的分離比苷元困難，一般不易得到純

29、品，常用的方蒽苷的分離比苷元困難，一般不易得到純品，常用的方法是利用吸附或分配柱色譜進行分離，在分離前，需用鉛法是利用吸附或分配柱色譜進行分離，在分離前，需用鉛鹽法或溶劑法除去大部分雜質(zhì)，制得較純的總苷后，再上鹽法或溶劑法除去大部分雜質(zhì)，制得較純的總苷后，再上柱分離。柱分離。 常用的吸附劑有常用的吸附劑有硅膠、聚酰胺和葡聚糖凝膠硅膠、聚酰胺和葡聚糖凝膠等。如在等。如在SepHadex LH-20SepHadex LH-20凝膠柱上分離大黃的凝膠柱上分離大黃的7070甲醇提取液，用甲醇提取液，用7070甲醇洗脫，分段收集，則依次得到二蒽酮苷（番瀉苷甲醇洗脫，分段收集，則依次得到二蒽酮苷（番瀉苷A

30、 A、B B、C C、D D）、蒽醌二葡萄糖苷、蒽醌單葡萄糖苷、游離苷元。）、蒽醌二葡萄糖苷、蒽醌單葡萄糖苷、游離苷元。第三節(jié)第三節(jié) 應用應用大黃中蒽醌類化合物的提取分離大黃中蒽醌類化合物的提取分離n大黃為重要中藥之一，具通里攻下、清熱解毒、大黃為重要中藥之一，具通里攻下、清熱解毒、活血通瘀等各種功能?；钛龅雀鞣N功能。n其化學成分較復雜，有其化學成分較復雜，有游離羥基蒽醌、蒽醌苷、游離羥基蒽醌、蒽醌苷、二蒽酮苷二蒽酮苷及鞣苷等，此外，還含樹脂類物質(zhì)、碳及鞣苷等，此外，還含樹脂類物質(zhì)、碳水化合物及有機酸等多類成分。其中以蒽醌苷含水化合物及有機酸等多類成分。其中以蒽醌苷含量為最高。量為最高。n

31、游離羥基蒽醌是親脂性成分，難溶于水，易溶于游離羥基蒽醌是親脂性成分，難溶于水，易溶于苯、乙醚、氯仿等親脂性有機溶劑，有生化性，苯、乙醚、氯仿等親脂性有機溶劑，有生化性，且都有蒽醌的顯色反應。且都有蒽醌的顯色反應。大黃酚大黃素甲醚大黃素蘆薈大黃素大黃酸大黃中的游離羥基蒽醌才大黃中的游離羥基蒽醌才番瀉苷番瀉苷A番瀉苷番瀉苷B番瀉苷番瀉苷C番瀉苷番瀉苷D大黃中的二蒽酮苷大黃中的二蒽酮苷n提取原理：提取原理： 根據(jù)大黃中的羥基蒽酮苷經(jīng)根據(jù)大黃中的羥基蒽酮苷經(jīng)酸水解酸水解成成游離蒽醌苷元，苷元可溶于氯仿而被游離蒽醌苷元，苷元可溶于氯仿而被提出。再利用各蒽醌類化合物酸性不提出。再利用各蒽醌類化合物酸性不同，采用同，采用pH梯度萃取法梯度萃取法進行分離而得進行分離而得到各單體苷元。到各單體苷元。大黃粗粉苯及20%硫酸連續(xù)回流提取23次苯液5%Na