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1、分類 藥植與鑒定 年 級(jí) 2007級(jí) 瀉下藥番瀉葉中番瀉苷a和番瀉苷b的含量測(cè)定指 導(dǎo) 教 師: 申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:學(xué) 士 專業(yè)名稱: 藥學(xué)論文提交時(shí)間: 2011 年5 月 論文答辯時(shí)間: 2011年 6 月學(xué)位授予單位: 答辯委員會(huì)主席: 評(píng)閱人: 2011年 5 月目 錄中文目錄3英文目錄4前 言4一.瀉下藥4二.番瀉葉5三.番瀉苷a和番瀉苷b7實(shí)驗(yàn)部分11一.實(shí)驗(yàn)儀器與試劑11二 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果11三.結(jié)果與討論16參考文獻(xiàn).17致 謝18番瀉葉中番瀉苷a與番瀉苷b的含量測(cè)定考察中文摘要目的:建立hplc測(cè)定番瀉總苷提取物中番瀉苷a和番瀉苷b的含量的方法。方法:采用hypersil ods
2、 c18柱(250 mm4.6 mm,5m),以乙腈01三氟乙酸的水溶液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,檢測(cè)波長(zhǎng)為340nm。結(jié)果:番瀉苷a在02188g到10940g范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(r=1000 0),番瀉苷b在0262g到1310g范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(r=09999)。結(jié)論:采用hplc直接測(cè)定番瀉葉中番瀉苷a和番瀉苷b的含量,方法簡(jiǎn)單快捷,精密度高、穩(wěn)定性好,加樣回收率高,結(jié)果可靠,可作為番瀉總苷提取物質(zhì)控制的方法。關(guān)鍵詞:hplc 瀉下藥 番瀉苷a 番瀉苷bcontent determination of sennoside a and sennoside b in senna le
3、af by hplcyang keabstract objective: because determining total sennoside by uv is very complex and noteasier to bedone for the operationto establish a hplc method for deteming sennoside a and sennoside b in folium sennae extractmethods:a hypersil ods c18 (250 mm4.6 mm,5m) was usedthe mobile phase wa
4、s can-0.1 trinuomacetic acid,detection wavelength of sennoside a and sennoside b were set up at a1=340nmresults:the linear range of sennoside a concentration was from 02188g to 10940 g(r=1000 0),then linear range of sennoside b concentration was from 0262g to 1310g(r=0999 9)conclusion:the methed is
5、simple high accuracy, good stability, add kind high efficiency and convenient accurate with a good replloducibility and can be used for determination of sennoside a and sennoside b in leaf of cassia anguscifolia vahl.conclusion:the method is dependable accurate and easykey words: hplc:purging doped;
6、sennoside a & sennoside b前 言一. 瀉下藥凡是能夠攻積、逐水,引起腹瀉,或潤(rùn)腸通便的藥物,便稱為瀉下藥。主要用于里實(shí)的癥候,它的主要功能與用途,大致可以分為以下三點(diǎn):一為通利大便,以排除腸道內(nèi)的宿食積滯或燥屎;一為清熱瀉火,使實(shí)熱壅滯通過瀉下從而解除;一為逐水退腫,使水邪隨著大小便排出,從而達(dá)到驅(qū)除停飲、消退水腫的目的。瀉下藥根據(jù)其瀉下作用的強(qiáng)度,可以分為潤(rùn)下藥、攻下藥和峻下逐水藥三大類,其中后者作用最強(qiáng),攻下藥次之,潤(rùn)下藥則比較緩和。凡屬宿食停積,腹部脹滿,大便燥結(jié)所致的里實(shí)證,應(yīng)當(dāng)選擇攻下藥主之,并配伍以行氣類藥,來幫助排便,如三承氣湯。根據(jù)近代研究瀉下藥類藥物主
7、要具有下列藥理作用:1.瀉下作用:此類藥物雖然成分有別,但都有比較明顯的瀉下作用,都可以通過不同的作用機(jī)理來刺激胃腸道粘膜從而使腸蠕動(dòng)增加而致瀉。例如芒硝因含硫酸鈉,在腸內(nèi)不容易被吸收,從而致使腸內(nèi)滲透壓升高,大量的水分保留在腸腔,使腸容積變大,腸管擴(kuò)張,機(jī)械性的刺激腸壁從而引起腸道蠕動(dòng)增加而致瀉;牽牛子固含牽牛子甙,在腸液里面分解出牽牛子素刺激腸壁,使腸液的分泌增多并使之蠕動(dòng)增強(qiáng)而致瀉;芫花中的芫花素刺激腸壁便能夠引起劇烈的水瀉;火麻仁則是因?yàn)楹兄居涂梢詽?rùn)滑腸道,加之脂肪油在堿性腸液里面可以產(chǎn)生脂肪酸刺激腸壁使蠕動(dòng)增加,促進(jìn)排便。 2.利尿作用:芫花、大戟和大黃都有一定利尿的作用。大鼠灌
8、喂芫花煎劑可以使大鼠的尿量增加;麻醉犬靜脈滴注芫花煎劑,尿量亦可明顯的增加,大戟對(duì)大鼠的實(shí)驗(yàn)性腹水模型也有明顯的利尿作用。 3.利膽作用:大黃有著清化濕熱,消退黃疽的功能。通過實(shí)驗(yàn)證明,大黃能夠促進(jìn)膽汁的分泌,其以復(fù)方作用最為突出,如茵陳蒿湯、膽道排石湯等。 4.抗感染作用:甘遂、芫花、大戟和大黃對(duì)革蘭氏陰性、陽(yáng)性菌里面的多種細(xì)菌都有效,并且對(duì)某些病毒、真菌以及有些致病性原蟲也都有抑制作用。二. 番瀉葉番瀉葉是一種全世界都比較廣泛應(yīng)用的導(dǎo)瀉劑,它在國(guó)外的應(yīng)用歷史已經(jīng)有千余年的歷史。近年來番瀉的果實(shí)也被用作導(dǎo)瀉劑的研究開發(fā)以及應(yīng)用,例如德國(guó)kattwiga制造的番瀉緩瀉片(laxherba s)
9、,每片里面含有尖葉番瀉葉alex andrian senna果干浸膏47mg-67mg,約相當(dāng)于10mg番瀉苷b,把其作為緩瀉藥應(yīng)用于臨床。德國(guó)madaus制藥廠上市的一種腸溶性導(dǎo)腸粒(agiolax)(口服,不應(yīng)嚼碎),是由車前子和番瀉果苷組成,它用來調(diào)整婦女產(chǎn)后腸道的功能以及治療術(shù)后患者、老年人因腸肌力下降引起的便秘1。番瀉葉中的番瀉苷就是瀉下藥中的一種。番瀉葉是豆科植物狹葉番瀉cassiaangustifolia vahl或尖葉番瀉cassia acutifolia delile的干燥葉,收載于中國(guó)藥典2005年版一部,主要用于熱結(jié)積滯、便秘腹痛、水腫脹滿的治療,是臨床上最常用的瀉下藥之
10、一2。狹葉番瀉主要含有番瀉苷a、b、c、d等;尖葉番瀉主要含有番瀉苷a、b、c等。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,這些成分具有抗菌、致瀉、止血、松弛肌肉和解痙等很多種作用。本課題在前期實(shí)驗(yàn)研究的基礎(chǔ)上采用比較方便,操作性強(qiáng)的高效液相色譜法(hplc)測(cè)定番瀉葉中番瀉苷a和番瀉苷b的含量,為瀉下藥的進(jìn)一步研究、開發(fā)提供實(shí)驗(yàn)參考。1.番瀉的分布:狹葉番瀉主要分布在熱帶非洲,我國(guó)的臺(tái)灣、廣西、云南都有引種和栽培。尖葉番瀉主要分布在埃及,我國(guó)的臺(tái)灣、海南、云南都有引種和栽培。2.番瀉葉的化學(xué)成分:狹葉番瀉葉主要含有番瀉甙(sennoside)a、b c、d,大黃酚(crysophanol),大黃素(emodin),大黃
11、素甲醚(physcion),3-甲基-8-申氧基-2-乙?;?1,6-萘二酚-6-o-d-葡萄糖甙(tinnevellin glucoside),小葉中含山奈酚(kaempferol)。尖葉番瀉葉主要含有番瀉甙a、b、c、d,大黃素,大黃素甲醚,大黃酚。嫩葉中含有山奈酚4。3.國(guó)內(nèi)外番瀉葉及其制劑的研究和應(yīng)用3.1 國(guó)外番瀉葉及其制劑的研究和應(yīng)用根據(jù)文獻(xiàn)對(duì)德國(guó)1991年上市應(yīng)用的98種導(dǎo)瀉劑進(jìn)行統(tǒng)計(jì)的分析表明,含有番瀉葉和其有效成分番瀉苷的制劑大約占40%。日本最近研制出一種專利產(chǎn)品,將番瀉葉粉或番瀉苷、雙歧桿菌abs41凍干粉與適宜的輔料混合進(jìn)行壓片,再用羥丙基甲基纖維素苯二甲酸鹽包衣制成的
12、腸溶片,作為瀉下劑,有高效作用。usp(第23版)中收載了番瀉葉流浸膏(senna fluidextract)、番瀉葉糖漿(senna syrup)、總番瀉苷片(sennosides tablets)。bp(1993年版)也收載了番瀉葉流浸膏、番瀉苷顆粒以及總番瀉苷片等制劑,主要用來清潔腸道和進(jìn)行便秘的治療。martindale(第31版)明確了番瀉葉和其制劑的用法與用量。例如清潔腸道:在英國(guó),成人單劑量口服總番瀉苷按照番瀉苷b計(jì)算為1mg/kg,大約72mg;在美國(guó),按照總番瀉苷計(jì)算,大約大于158mg。治療便秘:在英國(guó),口服總番瀉苷按照番瀉苷b計(jì)算,成人單劑量大約為15mg-30mg;6歲
13、以上兒童,劑量減半。3.2 國(guó)內(nèi)番瀉葉及其制劑的臨床和應(yīng)用將6mg-20mg番瀉葉用沸水浸泡然后飲用,臨床上主要用于泌尿系x線造影、腹部x線攝平片、乙狀結(jié)腸鏡等檢查前全腸排空,對(duì)比較小和多發(fā)病灶的觀察尤為清晰,同時(shí)還可以避免因?yàn)榍鍧嵐嗄c引起的腸粘膜水腫和腸痙攣;還可以用于腹部手術(shù)患者作清潔腸道準(zhǔn)備,開腹后腸管完全空虛,無脹氣,無存便。對(duì)老年性及頑固性便秘、藥物性便秘等使用番瀉葉和其制劑大約3g-10g便可以發(fā)揮比較好的療效。20g-30g番瀉葉,單次開水浸泡飲用,觀察對(duì)婦產(chǎn)科大、中手術(shù)后腸功能恢復(fù)的效果,表明有促進(jìn)腸功能恢復(fù)的作用。以上的文獻(xiàn)資料表明,番瀉葉和其制劑近年來在國(guó)內(nèi)、國(guó)外主要用作腹
14、部和腸道的各種影像檢查前或手術(shù)前腸道的清潔準(zhǔn)備;主要治療各種便秘特別是老年性及頑固性便秘;對(duì)腹部術(shù)后腸功能的恢復(fù)也有著促進(jìn)的作用。服用有效劑量番瀉葉和其制劑具有安全、有效和不良反應(yīng)小等特性,但是大劑量和(或)長(zhǎng)期濫用,卻會(huì)引起低血鉀、可能的腸粘膜損傷、可能的藥物敏感性降低等3。因此,番瀉葉和其制劑的用量以軟便排泄為度,短期用藥可以增強(qiáng)它的安全性以及有效性。三.番瀉苷a和番瀉苷b1.來源 番瀉苷a來源于豆科植物狹葉番瀉(cassia angutifolia vahl.)的莢。 番瀉苷b來源于豆科植物狹葉番瀉(cassia angutifolia vahl.)的莢,蓼科植物掌葉大黃(rheum p
15、almatum l.)的根莖。2.名稱、結(jié)構(gòu)和分子式番瀉苷a 英文名:sennoside a 分子量:739分子式c42h38o2cas號(hào)(化學(xué)物質(zhì)登錄號(hào)):81-27-6番瀉甘a結(jié)構(gòu)式番瀉苷b英文名:sennoside b分子量: 862.739 分子式: c42h38o20cas號(hào)(化學(xué)物質(zhì)登錄號(hào)):128-7-4番瀉苷b結(jié)構(gòu)式3.理化性質(zhì)番瀉苷a:為淡黃色結(jié)晶,熔點(diǎn)200240,旋光度-164(c=0.1,60%丙酮),旋光度-24(c=0.2,70%二氧六環(huán))。不溶于水、苯、乙醚、氯仿,微溶于甲醇、二苷醇-乙醚、丙酮、二氧六環(huán),溶于碳酸氫鈉水溶液。應(yīng)在2-8c,避光保存,長(zhǎng)時(shí)間在暴露在
16、空氣中,含量會(huì)有所降低。番瀉苷b: 屬二蒽酮苷類,亮黃色棱柱狀結(jié)晶(稀丙酮)。良好的針狀結(jié)晶(水)。分解點(diǎn)180186,旋光度-100(c=0.2,70%丙酮),旋光度-67(c=0.4,70%二氧六環(huán))。溶解度情況類似(但稍好于)番瀉苷a。4.作用番瀉葉甙具有清熱行滯,通便利水,排毒養(yǎng)顏的功能以及具有促進(jìn)腸胃蠕動(dòng)致瀉的作用。并且具一定得抗菌功能,臨床上可以用來治療急性胰腺炎、菌痢、流行性出血熱、膽囊炎、產(chǎn)后回乳等。也適用于藥品,保健品等領(lǐng)域。主要用于熱結(jié)積滯、便秘腹痛、水腫脹滿等的治療,是臨床上幾種最常用的瀉下藥物之一。番瀉甙在小腸里面可以有部分吸收,后來經(jīng)血流或膽汁進(jìn)入大腸,但是主要?jiǎng)t由小
17、腸直接進(jìn)入大腸,在腸內(nèi)細(xì)菌作用下進(jìn)行水解、還原等變化成為大黃酸蒽酮或大黃酸蒽酮-8-葡萄糖甙。由于直接注入,大黃酸蒽酮的瀉下作用不受影響,并且可發(fā)現(xiàn)腸內(nèi)大黃酸蒽酮的生成量明顯減少,因此認(rèn)為大黃酸蒽酮才是番瀉甙引起瀉下的真正成分。另一方面,翻轉(zhuǎn)小腸和結(jié)腸囊番瀉甙能夠阻止葡萄糖和na的跨腸壁轉(zhuǎn)運(yùn),表明抑制腸道對(duì)葡萄糖、鈉和水的吸收,增加腸腔內(nèi)容積繼而刺激腸壁反射性地使小腸和結(jié)腸蠕動(dòng)增強(qiáng),也可能是其致瀉的機(jī)制之一,并且小腸也是其瀉下成分的作用部位。5、測(cè)定方法測(cè)定番瀉葉中番瀉苷a(sennoside a)、番瀉苷b(sennoside b)的方法主要有分光光度法、薄層掃描法、高效毛細(xì)管電泳法、毛細(xì)管
18、區(qū)帶電泳法。2005年版中國(guó)藥典采用紫外分光光度法測(cè)定總番瀉苷,這種方法經(jīng)過提取、分離、水解等操作步驟,從而測(cè)得總番瀉苷的含量,這個(gè)方法整個(gè)過程需要避光操作,操作過程比較復(fù)雜繁瑣,而且操作條件要求苛刻。其他幾種測(cè)定方法操作流程也比較長(zhǎng),而且操作也比較繁瑣,條件較苛刻。因此本試驗(yàn)采用hplc直接測(cè)定番瀉葉中番瀉苷a和番瀉苷b的含量,方法簡(jiǎn)單快捷,精密度高、穩(wěn)定性好,加樣回收率高,結(jié)果準(zhǔn)確可靠,可以用作番瀉總苷提取物質(zhì)控制的方法4-5。實(shí)驗(yàn)部分一. 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑1、 儀器:beckman 125型高效液相色譜儀。本系統(tǒng)由system gold 125溶劑輸送泵、system gold 166檢測(cè)
19、器(190360 nm)、rheodyne 7725i手動(dòng)進(jìn)樣閥、ht-330 柱溫箱、beckman色譜工作站、打印機(jī)等組成。re -52型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 ( 上海亞榮生化儀器廠);電子分析天平bp121s(北京sartorius 天平有限公司);uv1100型分光光度儀;2、 試劑番瀉葉于藥材市場(chǎng)采購(gòu),經(jīng)過鑒定為豆科植物狹葉番瀉cassiaangustifolia vahl的干燥葉。乙腈為色譜純(hplc級(jí)(fisher公司)磷酸為化學(xué)純(鄭州恒瑞化工有限公司)甲醇(天津四友公司)水為高純水二 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果1、對(duì)照品溶液和供試品溶液的制備1.1 對(duì)照品溶液的制備稱取經(jīng)過真空干燥12 h的番瀉
20、苷a與番瀉苷b對(duì)照品適量,進(jìn)行精密的稱定,放置于10ml棕色量瓶中,加入50的甲醇進(jìn)行溶解,并且定容至刻度,配制成含有番瀉苷a 1.50mg/ml和番瀉苷b 1.20mg/ml的混合溶液,搖勻,即可得到對(duì)照品溶液。1.2 供試品溶液的制備稱取干燥的藥材粉末大約1.0g,精密進(jìn)行稱定,放置于具塞錐形瓶中,精密加入50的甲醇30 ml,稱取質(zhì)量,超聲處理35min(控制溫度在40以下),放冷后稱取質(zhì)量,用50的甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量,然后濾過,精密量取續(xù)濾液10ml放于25 ml量瓶中,用50的甲醇進(jìn)行定容,用045m微孔濾膜濾過,即可得到供試品溶液。測(cè)定法:分別精密吸取上述溶液各4l,注入液相色譜儀
21、,測(cè)定,即得。2、 色譜條件【5】色譜柱:hypersil ods c18柱(250 mm4.6 mm,5m);流動(dòng)相:0.1%磷酸水溶液為流動(dòng)相a,乙腈為流動(dòng)相b;檢測(cè)波長(zhǎng):340nm;體積流量:1.0ml/min;柱溫:25;進(jìn)樣量:4l;理論塔板數(shù)按番瀉苷b峰計(jì)算應(yīng)不低于4000,此條件下番瀉苷a、b與其它組分的分離度應(yīng)不低于2.0。見圖2.圖2.番瀉苷a、b對(duì)照品(a)和番瀉葉提取液(b)的hplc圖譜3、 線性關(guān)系考察 對(duì)照品儲(chǔ)備溶液的制備:精密稱取番瀉苷a的對(duì)照品10.85 mg,以40的乙醇制成每lml含有108.5g的對(duì)照品溶液;精密稱取番瀉苷b的對(duì)照品13.15mg,以30的
22、乙醇制成每lml含131.5g的對(duì)照品溶液。 分別精密移取番瀉苷a的對(duì)照品儲(chǔ)備溶液2、4、6、8、10ml,放置于l0ml的量瓶中,分別加40的乙醇至刻度,搖勻,制成不同濃度的一系列番瀉苷a的對(duì)照品溶液,分別進(jìn)樣5l,每個(gè)濃度進(jìn)樣兩針。分別精密移取番瀉苷b的對(duì)照品儲(chǔ)備溶液2、4、6、8、10ml放置于10 ml的量瓶中,分別加30的乙醇至刻度,搖勻,制成不同濃度的一系列番瀉苷b的對(duì)照品溶液,分別進(jìn)樣5l,每個(gè)濃度進(jìn)樣兩針。 經(jīng)回歸分析,得到番瀉苷a的回歸方程、相關(guān)系數(shù)為:a=802.85x-1.3862,=1.0000,線性范圍為:0.2165g1.0991g。經(jīng)回歸分析,得到番瀉苷b的回歸方
23、程、相關(guān)系數(shù)為:a=713.12x-15048,r=0.9999;線性范圍為:0.362g1.510g。4、 精密度試驗(yàn)精密吸取對(duì)照品溶液5l,連續(xù)進(jìn)樣5次,測(cè)定峰面積,結(jié)果番瀉苷a和番瀉苷b的峰面積的rsd分別為125和116,結(jié)果表明所用儀器的精密度良好。見表2 表2 精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果次數(shù)番瀉苷a峰面積值番瀉苷a峰面積均值rsd(%)番瀉苷b峰面積值番瀉苷b峰面積均值rsd(%)1408.6411.51.25228.3224.41.162411.6228.43417.0225.24410.4220.15402.9226.05、 穩(wěn)定性試驗(yàn)按“1”中“1.2”項(xiàng)下制備供試品溶液,每隔2h精密吸
24、取5l注入高效液相色譜儀,測(cè)定樣品12h的穩(wěn)定性。番瀉苷a的峰面積rsd為040;番瀉苷b峰面積的rsd為040,結(jié)果表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。6、 重現(xiàn)性試驗(yàn)稱取同一批樣品,共5份,每份約1g,精密稱定,按“供試品溶液的制備”項(xiàng)下方法制備,然后進(jìn)樣進(jìn)行峰面積的測(cè)定。測(cè)定結(jié)果:番瀉苷a和番瀉苷b質(zhì)量分?jǐn)?shù)的rsd分別為1.22和1.56,結(jié)果表明該條件重現(xiàn)性好。見表3表3. 重現(xiàn)性試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)次數(shù)番瀉苷a峰面積值番瀉苷a峰面積均值rsd(%)番瀉苷b峰面積值番瀉苷b峰面積均值rsd(%)1272.4274.61.22152.2149.61.562274.4152.23278.0150.04
25、273.6146.65268.6150.27、 加樣回收率試驗(yàn)精密稱取已經(jīng)知道含量的樣品0.027g,平分為9份,精密稱定,放置于100 ml的量瓶中,分別按照樣品含量的80、100、120精密加入番瀉苷a、b對(duì)照品各3份,按照含量測(cè)定的方法下供試品溶液制備方法進(jìn)行制備并進(jìn)行檢測(cè),計(jì)算番瀉苷a、b的回收率,結(jié)果見表4.5。表4. 番瀉苷a回收率試驗(yàn)結(jié)果編號(hào)樣品含量(mg)番瀉苷a加入量(mg)測(cè)定量(mg)回收率(%)平均回收率(%)rsd (%)13.322.745.9897.1698.621.0623.362.786.1299.5933.382.746.0497.3243.363.486.
26、8499.9553.283.426.6698.8363.223.526.7299.9273.264.167.3698.4883.304.227.4497.9893.264.187.3698.32表5. 番瀉苷b回收率試驗(yàn)結(jié)果編號(hào)樣品含量(mg)番瀉苷b加入量(mg)測(cè)定量(mg)回收率(%)平均回收率(%)rsd (%)110.348.7419.10100.27100.641.86210.428.9019.60103.10310.528.9419.3698.95410.4611.1221.68100.96510.2211.0821.40100.88610.0011.2421.66103.977
27、10.1613.1823.58100.25810.2613.7423.8498.85910.1613.6223.5898.57結(jié)果表明:該含量測(cè)定方法的加樣回收率較好。8、 樣品測(cè)定取10批藥材粉末各約1g,進(jìn)行精密稱定,按照上述“二”項(xiàng)下“2”的色譜條件進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定結(jié)果見表6。表6. 10批藥材測(cè)定結(jié)果(n=2)藥材編號(hào)番瀉苷a(%)番瀉苷b(%)總量(%)10.9324.2825.21421.0042.8264.83030.7984.2245.02241.0063.8264.93251.1963.7524.94860.9103.8324.76270.9944.0225.01680.820
28、4.3785.19890.9343.9264.860100.7963.8824.678均值9.37038.95049.520三.結(jié)果與討論1. 提取溶劑的選擇 本次試驗(yàn)采用了95ch3oh,70ch3oh,50ch3oh,50ch3ch2oh,1nahco。等作為提取溶劑進(jìn)行超聲提取。結(jié)果表明:50ch3ch2oh和1nahco。提取效果最佳,但考慮到選擇的流動(dòng)相為甲醇一磷酸系統(tǒng),并且考慮到番瀉苷a、b在堿性條件下容易水解,所以最終選擇50ch3ch2oh作為提取溶劑。2. 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 精密稱番瀉苷a對(duì)照品9.98mg。用甲醇溶解制備成含番瀉苷a 0.998mg/ml的溶液,取番瀉苷b對(duì)照品儲(chǔ)備液0.73mg/ml。另
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