水梔子與梔子高效液相色譜指紋圖譜比較研究

1、DOC格式論文，方便您的復(fù)制修改刪減水梔子與梔子高效液相色譜指紋圖譜比較研究(作者：?jiǎn)挝唬亨]編：)【摘要】目的建立梔子和水梔子的高效液相色譜 (HPLC)指紋圖譜并進(jìn)行比較研究。方法采用反相高效液相色譜法，使用CenturySIL C18 BDS 柱(20 cm 4.6 mm , 5 町i)，以 1%醋酸水-1% 醋酸乙腈為流動(dòng)相，低壓線性梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)265 nm,柱溫(30.0 ).15) C，進(jìn)樣量5山 測(cè)定梔子和水梔子的HPLC指紋圖譜。結(jié)果 以梔子苷峰為參照物峰，確定35個(gè)共有峰，將水梔子和梔子的HPLC 指紋圖譜進(jìn)行比較，并用“中藥色譜指紋圖譜超信息特征數(shù)字化評(píng)價(jià) 系統(tǒng)”軟件對(duì)

2、其進(jìn)行全面評(píng)價(jià)。結(jié)論水梔子在化學(xué)成分分布上與梔子 極為相似，但各組分的含量相差較大。【關(guān)鍵詞】水梔子；梔子；高效液相色譜指紋圖譜Abstract : ObjectiveTo investigate the differences between theHPLC fingerprints of Fructus Gardeniae and Fructus Gardeniae Gran diflorae. MethodsThe chromatographic fin gerpri nts were obtained by injecting the sample solution each time

3、 on aCenturySIL C18 BDS column (20 cm 4.6 mm , 5 g) with the gradie nt eluti on solve nt system composed of 1% acetate acid -water and 1% acetate acid -acetonitrile. The flow rate was 1.0 ml/min, the column temperature was maintained at (30.00).15) Cand the detection wavelength was set at 265 nm. Re

4、sults35 co-possessing peaks were selected as the fingerprint peaks by taking Geniposide peak as the referenee peak. The fingerprints were compared and comprehe nsively evaluated by The digitized evaluation system of the Traditional Chinese Medicine fingerprint with the super- in formati on character

5、istics ”.Con clusi on There were good similarities betwee n the HPLC-FPs of Fructus Garde niae and Fructus Garde niae Gran diflorae in terms of the distributio n of chemical ingredients, but the quantitative similarity was not desirable.Key words : Fructus Gardeniae;Fructus GardeniaeGran diflorae; H

6、PLC digital fin gerpri nt梔子為茜草科植物梔子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟 果實(shí)，2005年版中國(guó)藥典作為正品入藥的梔子僅此一種。水梔 子則為同科植物大花梔子 Garde nia jasmi noides Ellis var.gra ndiflora Nakai的果實(shí)。水梔子為梔子的一個(gè)變型，果實(shí)較梔子長(zhǎng)，歷來(lái)只作 染料用或外用治扭挫傷等，栽培于水溪岸旁，分布于江西、廣西、貴 州、湖北、湖南、四川等地1。研究發(fā)現(xiàn)，水梔子中含梔子苷高于梔 子1倍多，且有利膽和抗炎作用，均比梔子更顯著2。為了能充分 利用與開(kāi)發(fā)水梔子的寶貴資源，本文從指紋圖

7、譜角度對(duì)水梔子與梔子 作全面比較，為其藥材鑒別及開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。1儀器與試藥Agile nt 1100型液相色譜儀（配有二極管陣列檢測(cè)器、低壓四元 梯度泵、在線脫氣裝置、自動(dòng)進(jìn)樣器），ChemStation工作站（Agilent 科技有限公司）。KQ-50B型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公 司），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀RE52（上海亞榮生化儀器廠），Sarturius-BS110S 分 析天平（北京賽多利斯天平有限公司）。梔子苷仲國(guó)藥品生物制品檢定 所），乙腈（色譜純，山東禹王實(shí)業(yè)有限公司），冰醋酸（色譜純，天津 市科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心），其它試劑均為分析純，所用水為去離 子水。10批梔子藥材

8、產(chǎn)自S1河南唐河縣，S2貴州銅仁，S3安徽池 州東至縣，S4河南桐柏縣，S5云南威信縣，S6云南省紅河哈尼族 彝族自治州，S7浙江五鳳鄉(xiāng)，S8四川達(dá)縣，S9江西金溪縣，S10 廣西鹿寨縣。10批水梔子藥材產(chǎn)自P1江西樟樹(shù)市，P2廣西富川縣， P3廣西全州縣，P4廣西柳州市，P5浙江安吉縣，P6湖北廣水市， P7湖北襄樊市，P8江西撫州市，P9四川開(kāi)江縣，P10湖南龍山縣。2方法2.1樣品溶液制備2.1.1供試液制備梔子于60 C干燥40 min，粉碎后取約2.5 g， 精密稱定，加水50 ml，回流提取2 h，濾過(guò)，殘?jiān)铀?0 ml，繼續(xù) 回流1.5 h，合并兩次濾液，減壓濃縮至20 ml，

9、加乙醇至80%（V/V）， 冷處避光放置、醇沉 24 h，濾除沉淀，減壓回收乙醇至無(wú)醇味，殘 液再用水定容至25 ml，搖勻，即得。同法可得水梔子供試液。2.1.2對(duì)照品溶液制備 精密稱取梔子苷對(duì)照品5.0 mg，置25 ml量瓶中，以甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，即得。2.2 色譜條件 CenturySIL C18 BDS 柱（25 cm X4.6 mm，5 卩 m ），所用A=1%醋酸水，B=乙腈（含1%醋酸），低壓線性梯度程序： 03 min，00%B;3 9 min，05%B;9 22 min，5 10%B;22 30 min，10 12.5%B;30 45 min，12.5 30%B;

10、45 50 min，30 36%B;50 75 min，36 86%B;流速 1.0 ml min-1，柱溫（30 士 0.15） C，進(jìn)樣量5山 紫外檢測(cè)波長(zhǎng)265 nm。3結(jié)果與討論3.1梔子HPLC指紋圖譜的建立3.1.1參照物峰選擇 將梔子苷對(duì)照品溶液和梔子樣品供試液 分別進(jìn)樣5譏對(duì)比保留時(shí)間及在線紫外光譜圖可知梔子苷峰在23.6min左右。由于梔子苷峰與相鄰峰分離很好，在測(cè)定時(shí)比較穩(wěn)定，峰 面積較大，因此選作參照物峰。3.1.2指紋圖譜方法學(xué)考察經(jīng)指紋圖 譜方法學(xué)考察，各項(xiàng)指標(biāo)均符合要求。3.1.3梔子HPLC指紋圖譜建立按“2.2”項(xiàng)條件將 10個(gè)不同產(chǎn)地 梔子供試液在HPLC儀上

11、進(jìn)樣分析，記錄色譜圖，比較分析并以出 現(xiàn)率100%計(jì)，確定35個(gè)共有峰，見(jiàn)圖1。將10批梔子色譜圖原始 信號(hào)導(dǎo)入孫國(guó)祥等3開(kāi)發(fā)的“中藥指紋圖譜超信息特征數(shù)字化評(píng)價(jià)系 統(tǒng)”軟件生成對(duì)照指紋圖譜（平均值法）數(shù)據(jù)（見(jiàn)表1）。結(jié)果10批梔子與 對(duì)照指紋圖譜的相似度SF初.936。圖1梔子的HPLC指紋圖譜表1 梔子對(duì)照HPLC-FP峰信息3.2水梔子的HPLC指紋圖譜建立按“2.2”項(xiàng)條件將10個(gè)不同 產(chǎn)地水梔子供試液在 HPLC儀上進(jìn)樣分析，記錄色譜圖，比較分析 并以出現(xiàn)率100%計(jì)，確定35個(gè)共有峰，見(jiàn)圖2。將10批水梔子色 譜圖原始信號(hào)導(dǎo)入孫國(guó)祥等3開(kāi)發(fā)的“中藥指紋圖譜超信息特征數(shù)字 化評(píng)價(jià)系統(tǒng)

12、”軟件生成對(duì)照指紋圖譜（平均值法）數(shù)據(jù)見(jiàn)表2。以?shī)A角余 弦為測(cè)度計(jì)算10批水梔子與對(duì)照指紋圖譜的相似度 SF初.921。圖2 水梔子的HPLC指紋圖譜表2水梔子對(duì)照HPLC-FP峰信息3.3水梔子和梔子HPLC指紋圖譜超信息特征數(shù)字化評(píng)價(jià)結(jié)果 分析由“中藥色譜指紋圖譜超信息特征數(shù)字化評(píng)價(jià)系統(tǒng)”軟件分別計(jì) 算得水梔子和梔子HPLC指紋圖譜超信息特征數(shù)字化評(píng)價(jià)結(jié)果，選 擇代表性指標(biāo)進(jìn)行比較，見(jiàn)表3（表中數(shù)據(jù)為二者對(duì)照指紋圖譜數(shù)據(jù)）。 從表3中可見(jiàn)：水梔子的丫和3值都比梔子的相應(yīng)數(shù)值小，說(shuō)明其指 紋信號(hào)均化性差。水梔子的n值較大，說(shuō)明其色譜空間占有率較大。 水梔子的平均峰高較大。指紋圖譜指數(shù)F和指紋

13、圖譜信息量指數(shù) I是反映指紋信號(hào)強(qiáng)度、信號(hào)大小均性、分離程度的綜合指數(shù)，水梔 子的F，F(xiàn)r，I和lr值都較大。表3梔子和水梔子HPLC指紋圖譜超 信息特征數(shù)字化評(píng)價(jià)結(jié)果圖 3水梔子對(duì)照指紋圖譜與梔子對(duì)照指紋 圖譜比較圖4結(jié)論本實(shí)驗(yàn)建立了水梔子和梔子的 HPLC指紋圖譜，用“中藥色譜指紋圖譜超信息特征數(shù)字化評(píng)價(jià)系統(tǒng)”軟件，采用多個(gè)量化指標(biāo)從多維角DOC格式論文，方便您的復(fù)制修改刪減度、多側(cè)面、全方位、宏觀定性定量揭示了水梔子HPLC指紋圖譜隱含的超信息特征，并比較了水梔子與梔子 HPLC指紋圖譜的差異， 水梔子與梔子在化學(xué)成分分布上極為相似，但各組分的含量相差較 大，這為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用水梔子提供了依據(jù)， 也