《病毒學(xué)基礎(chǔ)》演示PPT

1、Hard Working You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 2 第四章 病毒微生物 第一節(jié)第一節(jié) 病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成 第二節(jié)第二節(jié) 病毒的增殖病毒的增殖* 第三節(jié)第三節(jié) 病毒學(xué)研究的基本方法病毒學(xué)研究的基本方法* 第五節(jié)第五節(jié) 亞病毒因子亞病毒因子 第四節(jié)第四節(jié) 病毒的分類與命名病毒的分類與命名 第六節(jié)第六節(jié) 病毒與實踐病毒與實踐 You have to work harde

2、r if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 3 What have we learned in Chapter 3? u真核微生物與原核微生物的比較（真核微生物與原核微生物的比較（P42) u真核微生物包括哪些類群？真核微生物包括哪些類群？ u真菌的分類（分類學(xué)）。真菌的分類（分類學(xué)）。 u霉菌菌絲的分化類型。霉菌菌絲的分化類型。 u酵母菌生活史。酵母菌生活史。 u區(qū)分無性孢子與有性孢子（孢囊孢子、區(qū)分無性孢子與有性孢子（孢囊孢子、 子囊孢子、分生孢子、接合

3、孢子）。子囊孢子、分生孢子、接合孢子）。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 4 What do we learn this time? u霉菌的繁殖方式霉菌的繁殖方式 u霉菌無性孢子有哪些類型霉菌無性孢子有哪些類型,繪圖青霉孢子繪圖青霉孢子 的形態(tài)的形態(tài),注明各部分名稱。注明各部分名稱。 u霉菌孢子與細(xì)菌芽孢的比較霉菌孢子與細(xì)菌芽孢的比較 u酵母菌的繁殖方式酵母菌的繁殖方式 u酵母菌與細(xì)菌菌落有何區(qū)別酵母

4、菌與細(xì)菌菌落有何區(qū)別 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 5 什么是病毒？P62（不要背） u病毒是含有一種核酸，專性活細(xì)胞寄生，病毒是含有一種核酸，專性活細(xì)胞寄生， 只能依靠宿主細(xì)胞的代謝系統(tǒng)完成核酸只能依靠宿主細(xì)胞的代謝系統(tǒng)完成核酸 的復(fù)制和蛋白質(zhì)的合成，并經(jīng)裝配而達(dá)的復(fù)制和蛋白質(zhì)的合成，并經(jīng)裝配而達(dá) 到增殖，又能在細(xì)胞外以無生命的大分到增殖，又能在細(xì)胞外以無生命的大分 子狀態(tài)存在的非細(xì)胞型微生物。子狀

5、態(tài)存在的非細(xì)胞型微生物。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 6 病毒與其他生物的區(qū)別（P62） u形態(tài)極其微小，只有在電鏡下才能觀察到；形態(tài)極其微小，只有在電鏡下才能觀察到； u非細(xì)胞結(jié)構(gòu)非細(xì)胞結(jié)構(gòu) u含有一種核酸，含有一種核酸，DNA或或RNA(除朊病毒外）除朊病毒外） u專性活細(xì)胞寄生專性活細(xì)胞寄生 u在細(xì)胞外以大分子形式存在，無生命現(xiàn)象在細(xì)胞外以大分子形式存在，無生命現(xiàn)象 u對一般抗生素不敏感對一般

6、抗生素不敏感 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 7 病毒的發(fā)現(xiàn) u1892年從事煙草病工作的年青的俄國科學(xué)家伊年從事煙草病工作的年青的俄國科學(xué)家伊 萬諾夫斯基萬諾夫斯基(Ivanovski)發(fā)現(xiàn)感受花葉病的葉汁，發(fā)現(xiàn)感受花葉病的葉汁， 即使經(jīng)過即使經(jīng)過Chamberland氏燭形濾器的過濾也仍氏燭形濾器的過濾也仍 具有傳染的性質(zhì)具有傳染的性質(zhì)。這項觀察提示了存在一種比。這項觀察提示了存在一種比 以前所知的

7、任何一種都小的病原，他認(rèn)為該病以前所知的任何一種都小的病原，他認(rèn)為該病 是由產(chǎn)生毒素的細(xì)菌引起的。是由產(chǎn)生毒素的細(xì)菌引起的。 病毒的發(fā)現(xiàn)病毒的發(fā)現(xiàn) u1935年，美國生化學(xué)家年，美國生化學(xué)家斯坦利（斯坦利（Stanley）發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn) 煙草花葉病毒的侵染性能被胃蛋白酶破壞，在煙草花葉病毒的侵染性能被胃蛋白酶破壞，在 這一現(xiàn)象的啟示下，他幾乎磨了上噸重的感染這一現(xiàn)象的啟示下，他幾乎磨了上噸重的感染 花葉病的煙葉，企圖用提酶的方法把病毒提純花葉病的煙葉，企圖用提酶的方法把病毒提純 出來。他得到了一小匙在顯微鏡下看來是針狀出來。他得到了一小匙在顯微鏡下看來是針狀 結(jié)晶的東西，把結(jié)晶物放在少量水中，水就出

8、結(jié)晶的東西，把結(jié)晶物放在少量水中，水就出 現(xiàn)乳光了，用手指沾一點這溶液，在健康煙葉現(xiàn)乳光了，用手指沾一點這溶液，在健康煙葉 上磨擦幾下，一星期以后這棵煙草也得了同樣上磨擦幾下，一星期以后這棵煙草也得了同樣 類型的花葉病?？梢娞峒兊臇|西的確是有侵染類型的花葉病。可見提純的東西的確是有侵染 性的煙草花葉病毒。今天在美國加州大學(xué)的原性的煙草花葉病毒。今天在美國加州大學(xué)的原 來斯坦利實驗室里，仍然保留著一個標(biāo)注著來斯坦利實驗室里，仍然保留著一個標(biāo)注著 “Tob. Mos.”字樣的瓶子，其中就盛著當(dāng)年第字樣的瓶子，其中就盛著當(dāng)年第 一次提純的煙草花葉病毒（簡稱一次提純的煙草花葉病毒（簡稱TMV），。），

9、。 1946年獲年獲 得諾貝爾得諾貝爾 獎獎 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 9 貝杰林克貝杰林克(Beijerinck) u1898年，荷蘭科學(xué)家年，荷蘭科學(xué)家貝杰林克貝杰林克(Beijerinck)重復(fù)重復(fù) 了伊萬諾夫的實驗，他從患花葉病的煙草葉中了伊萬諾夫的實驗，他從患花葉病的煙草葉中 擠出汁液，并使之通過擠出汁液，并使之通過Chamberland氏濾器。氏濾器。 表明濾液仍有侵染性。貝杰林克相信

10、他的濾器表明濾液仍有侵染性。貝杰林克相信他的濾器 阻擋住了細(xì)菌。將汁液置于瓊脂凝膠塊的表面阻擋住了細(xì)菌。將汁液置于瓊脂凝膠塊的表面 時，發(fā)現(xiàn)侵染性物質(zhì)在凝膠中以適當(dāng)?shù)乃俣葦U(kuò)時，發(fā)現(xiàn)侵染性物質(zhì)在凝膠中以適當(dāng)?shù)乃俣葦U(kuò) 散，而細(xì)菌仍滯留于瓊脂的表面。因此認(rèn)為這散，而細(xì)菌仍滯留于瓊脂的表面。因此認(rèn)為這 種侵染性物質(zhì)要比通常的細(xì)菌小。貝杰林克用種侵染性物質(zhì)要比通常的細(xì)菌小。貝杰林克用 “病毒病毒(Virus)”來命名這種史無前例的小病原來命名這種史無前例的小病原 體。體。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just

11、 keep my standards high and work hard on them. 10 病毒是如何發(fā)現(xiàn)的？病毒是如何發(fā)現(xiàn)的？ 1892年俄國伊凡諾夫斯年俄國伊凡諾夫斯 基報道，煙草花葉病的基報道，煙草花葉病的 病原體能通過細(xì)菌濾器。病原體能通過細(xì)菌濾器。 1898年荷蘭學(xué)者年荷蘭學(xué)者 Beijerinck重復(fù)并證實重復(fù)并證實 這一發(fā)現(xiàn)，命名為病毒。這一發(fā)現(xiàn)，命名為病毒。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on

12、them. 11 第一節(jié)第一節(jié) 病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu) 與化學(xué)組成與化學(xué)組成 u一一 病毒大小與形態(tài)病毒大小與形態(tài) uVirus Size: 20 nm to 300 nm uLargest virus:最大的病毒是痘病毒最大的病毒是痘病毒, 其大其大 小為小為300250100nm uSmallest virus:煙草壞死病毒的衛(wèi)星病毒煙草壞死病毒的衛(wèi)星病毒 或雙立病毒或雙立病毒,其大小為其大小為15nm或或18nm You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards

13、high and work hard on them. 12 病毒：細(xì)菌：真菌病毒：細(xì)菌：真菌1：10：100 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 13 細(xì)菌細(xì)菌 放大放大10-100倍倍 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on the

14、m. 14 電鏡 放大1000以上 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 15 一一 病毒大小與形態(tài)病毒大小與形態(tài) u1. 球形球形 人、動物、真菌的病毒多為球形，人、動物、真菌的病毒多為球形， 其直徑其直徑2030nm不等，如流感病毒、腺不等，如流感病毒、腺 病毒、皰疹病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、花病毒、皰疹病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、花 椰菜花葉病毒、噬菌體椰菜花葉病毒、噬菌體MS2等。等。 u 2.桿狀或絲狀桿狀或

15、絲狀 是某些植物病毒的固有特是某些植物病毒的固有特 征，如煙草花葉病毒、苜?；ㄈ~病毒，征，如煙草花葉病毒、苜?；ㄈ~病毒， 甜菜黃化病毒等。人和動物的某些病毒甜菜黃化病毒等。人和動物的某些病毒 也有呈絲狀的，如流感病毒、麻疹病毒、也有呈絲狀的，如流感病毒、麻疹病毒、 家蠶核型多角體病毒等，其絲長短不一，家蠶核型多角體病毒等，其絲長短不一， 直徑直徑1522nm，長度可達(dá)，長度可達(dá)70nm。 u3. 蝌蚪狀蝌蚪狀 是大部分噬菌體的典型特征。是大部分噬菌體的典型特征。 有一個六角形多面體的有一個六角形多面體的“頭部頭部”和一條和一條 細(xì)長的細(xì)長的“尾部尾部”，但也有一些噬菌體無，但也有一些噬菌體無

16、尾。尾。 4.磚形磚形 這是各類痘病毒的特性。病毒粒子呈長方這是各類痘病毒的特性。病毒粒子呈長方 形，很像磚塊。其體積約形，很像磚塊。其體積約 300nm200nm100nm，是病毒中較大的一類。，是病毒中較大的一類。 5.彈狀彈狀 見于狂犬病毒、動物水泡性口腔炎病毒和見于狂犬病毒、動物水泡性口腔炎病毒和 植物彈狀病毒等。這類病毒粒子呈圓筒形，一端植物彈狀病毒等。這類病毒粒子呈圓筒形，一端 鈍圓，另一端平齊，直徑約鈍圓，另一端平齊，直徑約70nm，長約，長約180nm， 略似棍棒。略似棍棒。 狂犬病病毒狂犬病病毒 u(一一)螺旋對稱螺旋對稱 u有些病毒粒子呈桿狀或絲狀，其衣殼形似一中有些病毒粒

17、子呈桿狀或絲狀，其衣殼形似一中 空柱，電鏡觀察可見其表面有精細(xì)螺旋結(jié)構(gòu)。空柱，電鏡觀察可見其表面有精細(xì)螺旋結(jié)構(gòu)。 在螺旋對稱衣殼中，病毒核酸以多個弱鍵與蛋在螺旋對稱衣殼中，病毒核酸以多個弱鍵與蛋 白質(zhì)亞基相結(jié)合，能夠控制螺旋排列的形式及白質(zhì)亞基相結(jié)合，能夠控制螺旋排列的形式及 衣殼長度，核酸與衣殼的結(jié)合也增加了衣殼結(jié)衣殼長度，核酸與衣殼的結(jié)合也增加了衣殼結(jié) 構(gòu)的穩(wěn)定性。煙草花葉病毒構(gòu)的穩(wěn)定性。煙草花葉病毒(TMV是螺旋對稱是螺旋對稱 的典型代表。的典型代表。 二、病毒結(jié)構(gòu)的對稱性二、病毒結(jié)構(gòu)的對稱性 You have to work harder if you want to impress

18、the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 20 煙草花葉病毒的結(jié)構(gòu)示意圖 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 21 u(二二)立體對稱立體對稱 u有些病毒的外形呈有些病毒的外形呈“球狀球狀”，實際上是，實際上是 一個立體對稱的多面體，一般為二十面一個立體對稱的多面體，一般為二十面 體。它由體。它由20個等邊三角形組成，

19、具有個等邊三角形組成，具有12 個頂角，個頂角，20個面和個面和30條棱。腺病毒（圖條棱。腺病毒（圖 3-4）是二十面體對稱的典型代表。二十）是二十面體對稱的典型代表。二十 面體病毒有的也具有包膜。面體病毒有的也具有包膜。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 22 腺病毒體的表面結(jié)構(gòu)模式 You have to work harder if you want to impress the world. Il

20、l just keep my standards high and work hard on them. 23 (三三)復(fù)合對稱復(fù)合對稱 兩種對稱方式同時存在：兩種對稱方式同時存在：T噬菌體，頭部噬菌體，頭部 呈立體對稱（二十面體），尾部為螺旋呈立體對稱（二十面體），尾部為螺旋 對稱。對稱。 逆轉(zhuǎn)錄病毒內(nèi)部是螺旋形的核心，外部是逆轉(zhuǎn)錄病毒內(nèi)部是螺旋形的核心，外部是 二十面體的外殼，是復(fù)合對稱型病毒。二十面體的外殼，是復(fù)合對稱型病毒。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standa

21、rds high and work hard on them. 24 大腸桿菌T4噬菌體結(jié)構(gòu)模式圖 周德慶P67圖34基板的擴(kuò)張 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 25 三、病毒的化學(xué)組成 u核酸、蛋白、脂類、糖類等核酸、蛋白、脂類、糖類等 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standard

22、s high and work hard on them. 26 各成分所占比例 核酸核酸: : 1-30%, 分為分為RNA或或DNA, 分子量在分子量在 3.5kb-280kb之間，攜帶基因數(shù)量在之間，攜帶基因數(shù)量在3 100個之間個之間. 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì): : 5-80%, 部分病毒僅有一種結(jié)構(gòu)蛋部分病毒僅有一種結(jié)構(gòu)蛋 白白(capsid), 存在于病毒顆粒表面存在于病毒顆粒表面(如多數(shù)如多數(shù) 植物病毒植物病毒),而另一部分則具有兩種或更多而另一部分則具有兩種或更多 種類的結(jié)構(gòu)蛋白種類的結(jié)構(gòu)蛋白(capsid,glycoprotein等等), 構(gòu)成病毒粒子的不同結(jié)構(gòu)或功能區(qū)域。構(gòu)成病毒粒子

23、的不同結(jié)構(gòu)或功能區(qū)域。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 27 各成分所占比例 脂類脂類: : 0-20%, 存在于包膜病毒存在于包膜病毒, 來源來源 于寄主細(xì)胞于寄主細(xì)胞 碳水化合物碳水化合物: : 0-3%, 多結(jié)合形成包膜多結(jié)合形成包膜 病毒的糖蛋白病毒的糖蛋白 水：水： 50%, 以結(jié)合態(tài)存在于病毒粒以結(jié)合態(tài)存在于病毒粒 子中子中 核酸的功能（P65） u遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì): 每一種病毒含有一種核酸

24、每一種病毒含有一種核酸DNA or RNA u分類依據(jù)分類依據(jù) uDNA病毒病毒 RNA病毒病毒 u單鏈病毒單鏈病毒 雙鏈病毒雙鏈病毒 u線性或環(huán)狀線性或環(huán)狀 u閉環(huán)或缺口環(huán)閉環(huán)或缺口環(huán) u。 植物病毒植物病毒 ssRNA病毒為主，病毒為主， 動物病毒動物病毒ssRNA或或dsDNA病病 毒為主，毒為主， 噬菌體以噬菌體以dsDNA病毒居多病毒居多 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 29 蛋白質(zhì)功能 u結(jié)

25、構(gòu)功能：構(gòu)成病毒粒子外殼，保護(hù)核酸結(jié)構(gòu)功能：構(gòu)成病毒粒子外殼，保護(hù)核酸 u吸附：決定病毒感染的特異性吸附：決定病毒感染的特異性 u參與病毒大分子合成（酶類）參與病毒大分子合成（酶類） u破壞宿主細(xì)胞膜與細(xì)胞壁，破壞宿主細(xì)胞膜與細(xì)胞壁， u具有抗原性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體具有抗原性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體 二、病毒的結(jié)構(gòu)二、病毒的結(jié)構(gòu) 病毒粒子（病毒粒子（Virion）：一個結(jié)構(gòu)齊全、功能完整而有感染性的單）：一個結(jié)構(gòu)齊全、功能完整而有感染性的單 個病毒，也叫病毒粒，病毒顆粒。不能叫作個病毒，也叫病毒粒，病毒顆粒。不能叫作“單細(xì)胞單細(xì)胞”。 1.核心（基因組）核心（基因組）：核心含遺傳信息、：核心含遺

26、傳信息、DNA或或RNA 2. 衣殼：衣殼： 保護(hù)功能保護(hù)功能 介導(dǎo)進(jìn)入細(xì)胞介導(dǎo)進(jìn)入細(xì)胞 抗原性。抗原性。 3. 囊膜：有囊膜的病毒具有，與吸附細(xì)胞有關(guān)囊膜：有囊膜的病毒具有，與吸附細(xì)胞有關(guān) You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 31 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards hig

27、h and work hard on them. 32 第二節(jié) 病毒的增殖 吸附吸附 侵入與脫殼侵入與脫殼 增殖（大分子合成）增殖（大分子合成） 成熟（裝配）成熟（裝配） 裂解（釋放）裂解（釋放） u一、增殖過程： You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 33 T4 噬菌體離子侵染大腸桿菌細(xì)胞壁并注入噬菌體離子侵染大腸桿菌細(xì)胞壁并注入 DNA(movie) You have to work harder if

28、you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 34 吸附 u2.具有整合能力；具有整合能力； u3.具有同步復(fù)制能力。具有同步復(fù)制能力。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 56 溫和噬菌體的溶源性反應(yīng)：溫和噬菌體的溶源性反應(yīng)：P71 整合于細(xì)菌染色體或以質(zhì)粒形成存在的溫和噬菌體整合

29、于細(xì)菌染色體或以質(zhì)粒形成存在的溫和噬菌體 基因組稱做原噬菌體（基因組稱做原噬菌體（prophage） 在原噬菌體階段，噬菌體的復(fù)制被抑制，宿主細(xì)胞 正常地生長繁殖，而噬菌體基因組與宿主細(xì)菌染色 體同步復(fù)制，并隨細(xì)胞分裂而傳遞給子代細(xì)胞。 細(xì)胞中含有以原噬菌體狀態(tài)存在的溫和噬菌體基因組 的細(xì)菌稱做溶源性細(xì)菌（lysogenic bacteria） 溶源性細(xì)菌經(jīng)溶源性細(xì)菌經(jīng)自發(fā)裂解自發(fā)裂解或或誘發(fā)裂解誘發(fā)裂解，進(jìn)入裂解循環(huán)，進(jìn)入裂解循環(huán) You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standa

30、rds high and work hard on them. 57 (二）溶原性細(xì)菌及其檢出 1.溶原性細(xì)菌具有的特征溶原性細(xì)菌具有的特征 u前噬菌體與細(xì)菌基因組復(fù)制一起復(fù)制前噬菌體與細(xì)菌基因組復(fù)制一起復(fù)制 u有裂解情況有裂解情況 u免疫性：對其感染的噬菌體及其相關(guān)的噬菌體免疫性：對其感染的噬菌體及其相關(guān)的噬菌體 u復(fù)愈：經(jīng)過誘發(fā)裂解后存活下來的細(xì)菌復(fù)愈：經(jīng)過誘發(fā)裂解后存活下來的細(xì)菌 u溶原性轉(zhuǎn)變：獲得新性狀溶原性轉(zhuǎn)變：獲得新性狀 u局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)：整合到一個細(xì)菌基因組中的噬菌局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)：整合到一個細(xì)菌基因組中的噬菌 體體DNA把宿主菌個別鄰近基因轉(zhuǎn)移到另一個細(xì)把宿主菌個別鄰近基因轉(zhuǎn)移到另一個細(xì)

31、 菌中去的現(xiàn)象。菌中去的現(xiàn)象。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 58 （二）溶原性細(xì)菌及其檢出 2.溶原性細(xì)菌的檢出溶原性細(xì)菌的檢出 u與敏感性指示菌混合培養(yǎng)與敏感性指示菌混合培養(yǎng) u經(jīng)紫外線照射，培養(yǎng)后，慮除細(xì)菌的慮經(jīng)紫外線照射，培養(yǎng)后，慮除細(xì)菌的慮 液再與敏感性指示菌混合培養(yǎng)液再與敏感性指示菌混合培養(yǎng) 增殖性感染（增殖性感染（productive infection）：）： 病毒感染宿主細(xì)胞，可完成

32、其復(fù)制循環(huán)過程，產(chǎn)病毒感染宿主細(xì)胞，可完成其復(fù)制循環(huán)過程，產(chǎn) 生感染性的子代病毒生感染性的子代病毒 此類宿主細(xì)胞成為該病毒的允許性細(xì)胞。此類宿主細(xì)胞成為該病毒的允許性細(xì)胞。 非增殖性感染（非增殖性感染（nonproductive infection）： 感染由于病毒、或是細(xì)胞的原因，致使病毒的復(fù)制在感染由于病毒、或是細(xì)胞的原因，致使病毒的復(fù)制在 病毒進(jìn)入敏感細(xì)胞后的某一階段受阻，結(jié)果導(dǎo)致病毒病毒進(jìn)入敏感細(xì)胞后的某一階段受阻，結(jié)果導(dǎo)致病毒 感染的不完全循環(huán)。在此過程中，由于病毒與細(xì)胞的感染的不完全循環(huán)。在此過程中，由于病毒與細(xì)胞的 相互作用，雖然亦可能導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生某些變化，甚至相互作用，雖然亦可

33、能導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生某些變化，甚至 產(chǎn)生細(xì)胞病變，但在受染細(xì)胞內(nèi)，產(chǎn)生細(xì)胞病變，但在受染細(xì)胞內(nèi)，不產(chǎn)生有感染性的不產(chǎn)生有感染性的 病毒子代。病毒子代。 四四 非增殖性感染非增殖性感染 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 60 流產(chǎn)感染（流產(chǎn)感染（abortive infectionabortive infection）；）； 限制性感染（限制性感染（restrirestrictive infection）；）；

34、潛伏感染（潛伏感染（latent infection）；）； 病毒的非增殖性感染：病毒的非增殖性感染：P72P72 請自學(xué)掌握基本概念 四四 非增殖性感染非增殖性感染 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 61 第三節(jié) 病毒學(xué)研究的基本方法 一、病毒的培養(yǎng)一、病毒的培養(yǎng) 病毒與細(xì)菌不同，病毒是嚴(yán)格的活細(xì)胞內(nèi)寄生病毒與細(xì)菌不同，病毒是嚴(yán)格的活細(xì)胞內(nèi)寄生 的，因此分離培養(yǎng)病毒應(yīng)采用寄主接種法、雞的，因此分離培養(yǎng)病

35、毒應(yīng)采用寄主接種法、雞 胚培養(yǎng)法或細(xì)胞培養(yǎng)法，而且還必須根據(jù)不同胚培養(yǎng)法或細(xì)胞培養(yǎng)法，而且還必須根據(jù)不同 病毒的要求進(jìn)行選擇，才能得到滿意的結(jié)果。病毒的要求進(jìn)行選擇，才能得到滿意的結(jié)果。 u寄主接種法寄主接種法 噬菌體細(xì)菌噬菌體細(xì)菌 動物病毒動物細(xì)胞或?qū)嶒瀯游飫游锊《緞游锛?xì)胞或?qū)嶒瀯游?植物病毒植物細(xì)胞或植物葉片植物病毒植物細(xì)胞或植物葉片 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 62 二、病毒的鑒定 u（一）噬

36、菌斑細(xì)菌病毒（一）噬菌斑細(xì)菌病毒 u（二）蝕斑和感染病灶動物病毒（二）蝕斑和感染病灶動物病毒 u（三）（三） 壞死斑植物病毒壞死斑植物病毒 u（四）血凝現(xiàn)象及干擾現(xiàn)象（四）血凝現(xiàn)象及干擾現(xiàn)象 u（五）細(xì)胞病變效應(yīng)（五）細(xì)胞病變效應(yīng) u（六）其它方法（電鏡、分子生物學(xué)）（六）其它方法（電鏡、分子生物學(xué)） 雙層平板法噬菌斑測定 u噬菌斑噬菌斑(plaque)測定一般采用雙層平板法，將測定一般采用雙層平板法，將 一定量經(jīng)稀釋的噬菌體懸液與高濃度敏感菌懸一定量經(jīng)稀釋的噬菌體懸液與高濃度敏感菌懸 液及半固體瓊脂培養(yǎng)基液及半固體瓊脂培養(yǎng)基(1瓊脂瓊脂)混合均勻后，混合均勻后， 然后倒入含底層瓊脂培養(yǎng)基然后

37、倒入含底層瓊脂培養(yǎng)基(2瓊脂瓊脂)的平板，的平板， 經(jīng)過一段時間培養(yǎng)后，在細(xì)菌菌苔上會出現(xiàn)一經(jīng)過一段時間培養(yǎng)后，在細(xì)菌菌苔上會出現(xiàn)一 個個圓形局部透明區(qū)域，即噬菌斑。個個圓形局部透明區(qū)域，即噬菌斑。 u可以認(rèn)為，每個噬菌斑是一個噬菌體侵染的結(jié)可以認(rèn)為，每個噬菌斑是一個噬菌體侵染的結(jié) 果，一個噬菌斑中的噬菌體遺傳性都相同，故果，一個噬菌斑中的噬菌體遺傳性都相同，故 通過多次重復(fù)接種，可獲得純系噬菌體。通過多次重復(fù)接種，可獲得純系噬菌體。 u因每種噬菌體的噬菌斑有一定的大小、形狀、因每種噬菌體的噬菌斑有一定的大小、形狀、 邊緣和透明度，故可作為鑒定的指標(biāo)。此外，邊緣和透明度，故可作為鑒定的指標(biāo)。此

38、外， 噬菌斑亦可用于病毒的定量。噬菌斑亦可用于病毒的定量。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 64 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 65 （四）血凝現(xiàn)象及干擾現(xiàn)象 u血凝現(xiàn)象：血凝現(xiàn)象：指許多病毒能吸附于一定種類哺

39、乳動物指許多病毒能吸附于一定種類哺乳動物 或禽類的紅細(xì)胞表面而產(chǎn)生凝集的現(xiàn)象。如流感病毒、或禽類的紅細(xì)胞表面而產(chǎn)生凝集的現(xiàn)象。如流感病毒、 天花病毒等?？筛鶕?jù)病毒凝集的血細(xì)胞種類及凝集條天花病毒等?？筛鶕?jù)病毒凝集的血細(xì)胞種類及凝集條 件不同而鑒定病毒。件不同而鑒定病毒。 u干擾現(xiàn)象干擾現(xiàn)象:兩種不同的病毒同時或先后感染同一宿兩種不同的病毒同時或先后感染同一宿 主細(xì)胞時，一種病毒抑制另外一種病毒增殖的現(xiàn)象，主細(xì)胞時，一種病毒抑制另外一種病毒增殖的現(xiàn)象， 稱為病毒的干擾現(xiàn)象稱為病毒的干擾現(xiàn)象(interference)(interference)。如乙型腦炎病。如乙型腦炎病 毒能干擾脊髓灰質(zhì)炎病毒

40、，流感病毒能干擾西方型馬毒能干擾脊髓灰質(zhì)炎病毒，流感病毒能干擾西方型馬 腦炎病毒的增殖等。腦炎病毒的增殖等。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 66 （五）細(xì)胞病變效應(yīng) u細(xì)胞融合現(xiàn)象細(xì)胞融合現(xiàn)象(phenomenon of cell fusion) 指由于病毒感染宿主細(xì)胞而出現(xiàn)的多核細(xì)胞現(xiàn)象。其指由于病毒感染宿主細(xì)胞而出現(xiàn)的多核細(xì)胞現(xiàn)象。其 發(fā)生決定于病毒和細(xì)胞的種類，也受病毒數(shù)量、溫度、發(fā)生決定于病毒

41、和細(xì)胞的種類，也受病毒數(shù)量、溫度、 離子強(qiáng)度等因素的影響。離子強(qiáng)度等因素的影響。 u包涵體包涵體 某些細(xì)胞在感染病毒后，出現(xiàn)于細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核內(nèi)的，某些細(xì)胞在感染病毒后，出現(xiàn)于細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核內(nèi)的， 在光鏡下可見的，大小、形態(tài)和數(shù)量不等的小體稱為在光鏡下可見的，大小、形態(tài)和數(shù)量不等的小體稱為 包涵體包涵體(Inclusion body)(Inclusion body) You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 67

42、包涵體 u由于不同病毒包涵體的大小、形狀、組分以及存在于由于不同病毒包涵體的大小、形狀、組分以及存在于 宿主細(xì)胞中的部位均不同，所以包涵體可用于病毒的宿主細(xì)胞中的部位均不同，所以包涵體可用于病毒的 快速鑒別和某些病毒疾病的輔助診斷指標(biāo)?？焖勹b別和某些病毒疾病的輔助診斷指標(biāo)。 u煙草花葉病毒與馬鈴薯煙草花葉病毒與馬鈴薯Y病毒的形態(tài)極其相似，但它病毒的形態(tài)極其相似，但它 們的包涵體形態(tài)截然不同，前者為三角形，后者為矩們的包涵體形態(tài)截然不同，前者為三角形，后者為矩 形；形； 三 病毒定量的幾個概念 u1. 病毒感染單位病毒感染單位 能夠引起宿主或宿主細(xì)胞發(fā)生一定特異性反應(yīng)的病毒能夠引起宿主或宿主細(xì)胞

43、發(fā)生一定特異性反應(yīng)的病毒 最小劑量稱病毒感染單位（最小劑量稱病毒感染單位（IU) u2.病毒的效價或毒力病毒的效價或毒力 病毒的效價是指單位體積病毒的效價是指單位體積(ml)(ml)病毒懸液的感染單位數(shù)病毒懸液的感染單位數(shù) 目目(IU(IUml)ml)或稱毒力?；蚍Q毒力。 噬菌體的效價是指能使感染細(xì)菌裂解，產(chǎn)生噬菌斑的噬菌體的效價是指能使感染細(xì)菌裂解，產(chǎn)生噬菌斑的 噬菌體數(shù)，或形成噬菌斑單位數(shù)（噬菌體數(shù)，或形成噬菌斑單位數(shù)（pfu)pfu)。 因為病毒粒子對細(xì)菌細(xì)胞感染率不會超過因為病毒粒子對細(xì)菌細(xì)胞感染率不會超過100100，所以，所以 根據(jù)噬菌斑或空斑計算出的病毒粒子數(shù)總比噬菌體電根據(jù)噬菌

44、斑或空斑計算出的病毒粒子數(shù)總比噬菌體電 鏡下直接計數(shù)低。鏡下直接計數(shù)低。pfupfu與噬菌體的真實數(shù)目之比即成斑與噬菌體的真實數(shù)目之比即成斑 率率(EoP)(EoP)。 三 病毒定量的幾個概念(自學(xué)) u3.半致死劑量半致死劑量 使半數(shù)宿主細(xì)胞死亡的病毒劑量稱半致死劑量使半數(shù)宿主細(xì)胞死亡的病毒劑量稱半致死劑量 (LD50)。 u4.半數(shù)感染劑量半數(shù)感染劑量 使半數(shù)宿主細(xì)胞發(fā)生感染的病毒劑量稱半數(shù)感使半數(shù)宿主細(xì)胞發(fā)生感染的病毒劑量稱半數(shù)感 染劑量染劑量(ID50) u5.半數(shù)組織培養(yǎng)感染劑量半數(shù)組織培養(yǎng)感染劑量 使半數(shù)組織培養(yǎng)物發(fā)生感染，產(chǎn)生細(xì)胞病變效應(yīng)使半數(shù)組織培養(yǎng)物發(fā)生感染，產(chǎn)生細(xì)胞病變效應(yīng)

45、 的病毒劑量稱半數(shù)組織培養(yǎng)感染劑量的病毒劑量稱半數(shù)組織培養(yǎng)感染劑量(TCID50)。 。 參見沈萍參見沈萍微生物學(xué)微生物學(xué)P163 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 70 第四節(jié) 病毒的分類與命名 u分類學(xué)的知識，自學(xué)分類學(xué)的知識，自學(xué) u3個病毒目，個病毒目，62病毒科病毒科 u命名亂命名亂 You have to work harder if you want to impress the world

46、. Ill just keep my standards high and work hard on them. 71 用于病毒分類的指標(biāo) u形態(tài)學(xué)形態(tài)學(xué) u理化性質(zhì)理化性質(zhì) u基因組結(jié)構(gòu)特點基因組結(jié)構(gòu)特點 u基因組組成及復(fù)制方式基因組組成及復(fù)制方式 u病毒的蛋白質(zhì)病毒的蛋白質(zhì) u宿主范圍宿主范圍 u抗原性抗原性 u致病性致病性 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 72 第五節(jié) 亞病毒因子 You have

47、 to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 73 什么是病毒? You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 74 病毒的分類 You have to work harder if you want to impress the world. Ill j

48、ust keep my standards high and work hard on them. 75 亞病毒因子 u凡在核酸和蛋白質(zhì)兩種成分中，只含有凡在核酸和蛋白質(zhì)兩種成分中，只含有 其中之一。其中之一。 u包括包括 類病毒、擬病毒（衛(wèi)星類病毒、擬病毒（衛(wèi)星RNA）和朊）和朊 病毒。病毒。 u在亞病毒中，僅類病毒和朊病毒能獨立在亞病毒中，僅類病毒和朊病毒能獨立 復(fù)制，衛(wèi)星病毒及衛(wèi)星復(fù)制，衛(wèi)星病毒及衛(wèi)星RNA必須依賴輔必須依賴輔 助病毒進(jìn)行復(fù)制。助病毒進(jìn)行復(fù)制。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill ju

49、st keep my standards high and work hard on them. 76 類病毒 u一類只含有侵染性一類只含有侵染性RNARNA（單鏈共價閉合環(huán)單鏈共價閉合環(huán) 狀狀RNA分子）分子）一種成分，專性活細(xì)胞內(nèi)一種成分，專性活細(xì)胞內(nèi) 寄生的分子病原體。僅在植物中發(fā)現(xiàn)。寄生的分子病原體。僅在植物中發(fā)現(xiàn)。 u大小僅為最小病毒的大小僅為最小病毒的120，這種，這種RNA能能 在敏感細(xì)胞內(nèi)自我復(fù)制，不需要輔助病在敏感細(xì)胞內(nèi)自我復(fù)制，不需要輔助病 毒，其結(jié)構(gòu)和性質(zhì)都與已知病毒不同，毒，其結(jié)構(gòu)和性質(zhì)都與已知病毒不同， 故名類病毒。故名類病毒。 You have to work ha

50、rder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 77 馬鈴薯紡錘形塊莖病類病毒馬鈴薯紡錘形塊莖病類病毒(PSTV)是發(fā)現(xiàn)的第一是發(fā)現(xiàn)的第一 個類病毒，它是由個類病毒，它是由359個核苷酸組成的單鏈環(huán)狀個核苷酸組成的單鏈環(huán)狀 RNA分子，是由高度堿基配對的雙鏈區(qū)與未配對分子，是由高度堿基配對的雙鏈區(qū)與未配對 的環(huán)狀區(qū)相間排列而成的桿狀構(gòu)型的環(huán)狀區(qū)相間排列而成的桿狀構(gòu)型 馬鈴薯紡錘形塊莖病類病毒馬鈴薯紡錘形塊莖病類病毒(PSTV)的結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu) You have

51、 to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 78 類病毒感染的特點 u類病毒類病毒RNA能自我復(fù)制，但不能編碼蛋能自我復(fù)制，但不能編碼蛋 白質(zhì)，迄今已知的類病毒只存在于高等白質(zhì)，迄今已知的類病毒只存在于高等 植物中，其核酸都是植物中，其核酸都是RNA型；型； u類病毒的傳染力很強(qiáng)，但大多數(shù)呈不顯類病毒的傳染力很強(qiáng)，但大多數(shù)呈不顯 性感染；性感染； u類病毒感染潛伏期很長，馬鈴薯在感染類病毒感染潛伏期很長，馬鈴薯在感染 后幾個月甚至

52、第二代才出現(xiàn)塊莖呈紡錘后幾個月甚至第二代才出現(xiàn)塊莖呈紡錘 形的癥狀，嚴(yán)重減產(chǎn)。形的癥狀，嚴(yán)重減產(chǎn)。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 79 衛(wèi)星病毒 u衛(wèi)星病毒衛(wèi)星病毒(satellite virus)是一類基因組缺是一類基因組缺 損、需要依賴輔助病毒，基因才能復(fù)制損、需要依賴輔助病毒，基因才能復(fù)制 和表達(dá)，才能完成增殖的亞病毒。和表達(dá)，才能完成增殖的亞病毒。 u即是一個小片斷的即是一個小片斷的RNA或或

53、DNA。它們完。它們完 全依賴于另一種病毒的同時感染才能完全依賴于另一種病毒的同時感染才能完 成它的復(fù)制過程。成它的復(fù)制過程。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 80 大腸肝菌噬菌體P4 u如大腸肝菌噬菌體如大腸肝菌噬菌體P4，缺乏編碼衣殼蛋，缺乏編碼衣殼蛋 白的基因，需輔助病毒大腸桿菌噬菌體白的基因，需輔助病毒大腸桿菌噬菌體 P2同時感染，且依賴同時感染，且依賴P2合成的殼體蛋白合成的殼體蛋白 裝配成含

54、裝配成含P2殼體殼體13左右的左右的P4殼體，與殼體，與 較小的較小的P4 DNA組裝成完整的組裝成完整的P4顆粒，完顆粒，完 成增殖過程。成增殖過程。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 81 丁型肝炎病毒(HDV)等 u丁型肝炎病毒丁型肝炎病毒(HDV)必須利用乙型肝炎必須利用乙型肝炎 病毒的包膜蛋白才能完成復(fù)制周期，病毒的包膜蛋白才能完成復(fù)制周期， u常見的衛(wèi)星病毒還有腺聯(lián)病毒常見的衛(wèi)星病毒還有腺聯(lián)病

55、毒(AAV)、衛(wèi)、衛(wèi) 星煙草花葉病毒星煙草花葉病毒(STMV)、衛(wèi)星玉米白線、衛(wèi)星玉米白線 花葉病毒花葉病毒(SMWLMV)、衛(wèi)星稷子花葉病、衛(wèi)星稷子花葉病 (SPMV)等等 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 82 衛(wèi)星衛(wèi)星RNA u衛(wèi)星衛(wèi)星RNA(sat-RNA)是一類寄生于輔助病是一類寄生于輔助病 毒殼體內(nèi)，雖然與輔助病毒基因組無同毒殼體內(nèi)，雖然與輔助病毒基因組無同 源性，但必須依賴于輔助病毒才能復(fù)制

56、源性，但必須依賴于輔助病毒才能復(fù)制 的的RNA分子片段。有人也稱之為擬病毒分子片段。有人也稱之為擬病毒 (virusoid)。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 83 衛(wèi)星病毒 VS. 衛(wèi)星RNA u衛(wèi)星病毒：能編碼自身外殼蛋白；衛(wèi)星病毒：能編碼自身外殼蛋白； u衛(wèi)星衛(wèi)星RNA：不能編碼自身蛋白外殼，而：不能編碼自身蛋白外殼，而 是應(yīng)用相關(guān)病毒的外殼蛋白。是應(yīng)用相關(guān)病毒的外殼蛋白。 You have to

57、 work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 84 朊病毒朊病毒 u朊病毒朊病毒(prion)是一類具有侵染性并能在是一類具有侵染性并能在 宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的小分子無免疫性疏水宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的小分子無免疫性疏水 蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)。 u如人的庫魯病如人的庫魯病(Kuru)(Kuru)、羊搔癢病、羊搔癢病 (scrapie)(scrapie)、牛海綿狀腦病、牛海綿狀腦病(spongiform (spongiform encephalopathp)

58、encephalopathp)、雅氏病、雅氏病(CJD)(CJD)等病的等病的 病原體均為朊病毒。病原體均為朊病毒。 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 85 What is prion uProtienous uInfectious uParticle You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my st

59、andards high and work hard on them. 86 Nobel prize D. Carleton Gajdusek S. B. Prusiner You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 87 朊病毒蛋白朊病毒蛋白 PrPc PrPSc You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my

60、standards high and work hard on them. 88 朊病毒疾病的感染 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 89 感染瘋牛病的牛 You have to work harder if you want to impress the world. Ill just keep my standards high and work hard on them. 90 The mechan