微生物斜面接種

1、微生物斜面接種實驗微生物斜面接種實驗一、一、微生物無菌操作技術(shù)微生物無菌操作技術(shù)無菌操作技術(shù)：無菌操作技術(shù)：指在微生物實驗工作中，控制或防止各類微生物的污染指在微生物實驗工作中，控制或防止各類微生物的污染及其干擾的一系列操作方法和有關(guān)措施。及其干擾的一系列操作方法和有關(guān)措施。u超凈工作臺的使用超凈工作臺的使用u斜面接種的操作方法斜面接種的操作方法二、二、 微生物接種技術(shù)微生物接種技術(shù)超凈工作臺 超凈工作臺是為實驗室工作提供無菌操作環(huán)境的設(shè)施，超凈工作臺是為實驗室工作提供無菌操作環(huán)境的設(shè)施，以保護(hù)實驗免受外部環(huán)境的影響，同時為外部環(huán)境提供以保護(hù)實驗免受外部環(huán)境的影響，同時為外部環(huán)境提供某些程度的

2、保護(hù)以防污染并保護(hù)操作者。某些程度的保護(hù)以防污染并保護(hù)操作者。 原理：超凈工作臺的潔凈環(huán)境是在特定的空間內(nèi)，潔原理：超凈工作臺的潔凈環(huán)境是在特定的空間內(nèi)，潔凈空氣凈空氣( (進(jìn)濾空氣進(jìn)濾空氣) )按設(shè)定的方向流動而形成的。以氣流按設(shè)定的方向流動而形成的。以氣流方向來分，現(xiàn)有的超凈工作臺可分為垂直式，由內(nèi)向外方向來分，現(xiàn)有的超凈工作臺可分為垂直式，由內(nèi)向外式以及側(cè)向式。式以及側(cè)向式。 無菌環(huán)境的要求與保持無菌環(huán)境的要求與保持超凈臺的使用與維護(hù)使用前打開紫外燈照射使用前打開紫外燈照射30min，使用時開啟超凈工作臺照明燈，關(guān)閉紫外燈，并用使用時開啟超凈工作臺照明燈，關(guān)閉紫外燈，并用75%的的酒精擦

3、拭臺面，酒精擦拭臺面，使用完畢，關(guān)閉照明；使用完畢，關(guān)閉照明；重新開啟紫外燈照射重新開啟紫外燈照射30min，定期做無菌試驗，以測定凈化臺是否符合無菌要求。定期做無菌試驗，以測定凈化臺是否符合無菌要求。無菌環(huán)境的要求與保持無菌環(huán)境的要求與保持 斜面接種：斜面接種： 從已生長好的菌種斜面上挑取少量菌種移植至另一新從已生長好的菌種斜面上挑取少量菌種移植至另一新鮮斜面培養(yǎng)基上的接種方法。鮮斜面培養(yǎng)基上的接種方法。 用于用于好氣性微生物好氣性微生物的接種。的接種。2 2、常用的接種方法、常用的接種方法1)標(biāo)記：接種前在試管上注明菌名、接種日期、接種人標(biāo)記：接種前在試管上注明菌名、接種日期、接種人姓名姓

4、名2)點燃酒精燈。點燃酒精燈。3)接種：接種：（1）手持試管）手持試管 將菌種管和待接斜面管用大姆指和其他四將菌種管和待接斜面管用大姆指和其他四指握在左手中，中指位于兩管之間。斜面向上，指握在左手中，中指位于兩管之間。斜面向上，盡量盡量放平放平。（2）旋松管塞）旋松管塞（3）接種環(huán)灼燒滅菌接種環(huán)灼燒滅菌 斜面接種斜面接種 斜面接種斜面接種3）接種：接種：（4）拔管塞：拔管塞： 用右手的用右手的無名指、小指和手掌邊無名指、小指和手掌邊先后取下菌種管和待接先后取下菌種管和待接試管的管塞，讓試管口試管的管塞，讓試管口緩緩過火滅菌緩緩過火滅菌(切勿燒切勿燒得過燙得過燙) 斜面接種斜面接種3）接種：接種

5、：（5）取菌）取菌: 接種環(huán)冷卻，輕沾取接種環(huán)冷卻，輕沾取少量菌體或胞子，然后將接少量菌體或胞子，然后將接種環(huán)移出菌種管，注意不要種環(huán)移出菌種管，注意不要使接種環(huán)碰到管壁，取出后使接種環(huán)碰到管壁，取出后帶菌接種環(huán)不可通過火焰。帶菌接種環(huán)不可通過火焰。 斜面接種斜面接種3）接種：接種： （6）接種）接種: 在火焰旁迅速將沾有菌種的接種環(huán)伸入待接斜面管在火焰旁迅速將沾有菌種的接種環(huán)伸入待接斜面管。從斜面培養(yǎng)基底部向上作。從斜面培養(yǎng)基底部向上作“Z”形來回密集劃線形來回密集劃線，勿劃破培養(yǎng)基。，勿劃破培養(yǎng)基。 有時也可用接種針僅在斜面培養(yǎng)基的中央拉一條直有時也可用接種針僅在斜面培養(yǎng)基的中央拉一條直線作斜面接種，直線接種可觀察不同菌種的生長特線作斜面接種，直線接種可觀察不同菌種的生長特點。點。 斜面接種斜面接種3）接種：接種： (7) 塞管塞：塞管塞： 取出接種環(huán)，灼燒試管口，并在火焰旁將取出接種環(huán)，灼燒試管口，并在火焰旁將管塞旋上。不要用試管去迎棉塞，以免試管在移動時管塞旋上。不要用試管去迎棉塞，以免試管在移動時納入不潔空氣。納入不潔空氣。 (8) 將接種環(huán)灼燒滅菌。放下接種環(huán)，再將棉花塞旋緊。將接種環(huán)灼燒滅菌。放下接種環(huán)，再將棉花塞旋緊。 斜面接種示意圖斜面接種示意圖1 1、什么是無菌技術(shù)？、什么是無菌技術(shù)？2 2、如何做好超凈臺的