加樣回收率之歐陽地創(chuàng)編

1、加樣回收率液色迷人時(shí)間：2021.03. 04創(chuàng)作：歐陽地加標(biāo)回收率的測(cè)定可以反映測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確度。進(jìn)行加標(biāo)回收率測(cè)定時(shí)應(yīng)注意以下問題：1）加標(biāo)物的形態(tài)應(yīng)和待測(cè)物的形態(tài)一致。2）加標(biāo)量應(yīng)盡量與樣品中待測(cè)物含量相近，并注意對(duì)樣 品容積的影響。3）加標(biāo)后的測(cè)定值不應(yīng)超過方法的測(cè)定上限的90%o計(jì)算方法一：（測(cè)定量-已含量）/加入量 乘以100%計(jì)算方法二：測(cè)定量/（已含量+加入量）乘以100%以上兩種計(jì)算方法不知哪種是可行的，還是都可以使用？我認(rèn)為方法一可行，更準(zhǔn)確些加樣回收率（%）二（測(cè)得量一原有量）/加入量 x 100%=實(shí)際測(cè)得加入量/理論加入量方法二不可行加樣回收率（%）二測(cè)定量/（已含量

2、+加入量）x 100%=實(shí)際測(cè)得總量/理論總量從誤差傳遞的角度，以第一種為宜我認(rèn)為方法一可行，2005年版藥典一部附錄加樣回收 率也是這樣要求的。關(guān)于加樣回收率的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：1. 高中低三個(gè)濃度的選取原則：高濃度應(yīng)為樣品濃度的 120%左右、中濃度應(yīng)為樣品濃度的100%左右、低濃度應(yīng)為樣品濃度的80%左右。2. 高中低三個(gè)濃度樣品的制備：最好采用加入50%量的 樣品，然后分別加入70%、50%、30%量的對(duì)照品儲(chǔ)備液，制成供試樣品，每個(gè)濃度三 份。3. 測(cè)定：采用測(cè)定方法分別測(cè)定，這個(gè)時(shí)候要注意你之 前制定的標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍（線性范圍），是否能涵蓋這九份樣品的濃度范圍？也就是 說這九份樣品的濃度都

3、應(yīng)該在你的標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)。4. 得到測(cè)定結(jié)果后的結(jié)算：應(yīng)采用你的結(jié)果值，也就是 每份樣品的最終計(jì)算結(jié)果，而不是測(cè)定過程中沒有經(jīng)過計(jì)算的數(shù)據(jù)，因?yàn)槟愕募訕踊?收率要體現(xiàn)的是全部操作過程的準(zhǔn)確與變異程度，其中也包括數(shù)據(jù)計(jì)算。關(guān)于藥物定量分析中加樣回收率實(shí)驗(yàn)的再探討回收率包括絕對(duì)回收率和相對(duì)回收率。絕對(duì)回收率考 察的是經(jīng)過樣品處理后能用于分析的藥物的比例。因?yàn)?不論是生物基質(zhì)還是制劑輔料中的藥物，經(jīng)過樣品處理 都有一定的損失。做為一個(gè)分析方法，絕對(duì)回收率一般 要求大于50%才行。它是在空白基質(zhì)中定量加入藥物，經(jīng) 處理后與標(biāo)準(zhǔn)品的比值。標(biāo)準(zhǔn)品為流動(dòng)相直接稀釋而 來，而不是同樣品一樣處理。若一樣，只是不

4、加基質(zhì)來 處理，可能會(huì)有很多影響因素被此屏蔽掉。如全部轉(zhuǎn)移 有機(jī)相時(shí)只轉(zhuǎn)移了 98%等。也就因此失去了絕對(duì)回收率的 考察初衷。相對(duì)回收率嚴(yán)格來說有兩種。一種是回收試驗(yàn)法， 一種是加樣回收試驗(yàn)法。前者是在空白基質(zhì)中加入藥 品，標(biāo)準(zhǔn)曲線也是同此，這種測(cè)定用得較多，但有標(biāo)準(zhǔn) 曲線重復(fù)測(cè)定的嫌疑。第二種是在已知濃度樣品中加入 藥物，來和標(biāo)準(zhǔn)曲線比，標(biāo)準(zhǔn)曲線也是在基質(zhì)中加藥 物。相對(duì)回收率主要考察準(zhǔn)確度。準(zhǔn)確度系指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或認(rèn)可的參考 值之間接近的程度。有時(shí)也稱真實(shí)度。一定的準(zhǔn)確度為 定量測(cè)定的必要條件，因此涉及到定量測(cè)定的檢測(cè)項(xiàng)目 均需要驗(yàn)證準(zhǔn)確度，如含量測(cè)定、雜質(zhì)定量試驗(yàn)等。準(zhǔn) 確

5、度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)建立，對(duì)于制劑一般以回收率試 驗(yàn)來進(jìn)行驗(yàn)證。試驗(yàn)設(shè)計(jì)需考慮在規(guī)定范圍內(nèi)，制備3 個(gè)不同濃度的試樣，各測(cè)定3次，即測(cè)定9次，報(bào)告已 知加入量的回收率（）或測(cè)定結(jié)果平均值與真實(shí)值之 差及其可信限。1 含量測(cè)定 原料藥可用已知純度的對(duì)照品或符合要 求的原料藥進(jìn)行測(cè)定，或用本法所得結(jié)果與已建立準(zhǔn)確 度的另一方法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行比較。制劑可用含已知量 被測(cè)物的各組分混合物進(jìn)行測(cè)定。如不能得到制劑的全 部組分，可向制劑中加入已知量的被測(cè)物進(jìn)行測(cè)定，必 要時(shí)，與另一個(gè)已建立準(zhǔn)確度的方法比較結(jié)果。一般制 劑的含量測(cè)定的回收率是向輔料中加入處方量80%、 100%. 120%已知含量的主藥，按含

6、量測(cè)定的方法測(cè)定。 溶出度測(cè)定方法的回收率按處方量50%、80%、100%加 入主藥進(jìn)行測(cè)定。2. 雜質(zhì)定量試驗(yàn) 雜質(zhì)的定量試驗(yàn)可向原料藥或制劑 中加入已知量雜質(zhì)進(jìn)行測(cè)定。如果不能得到雜質(zhì)，可用 本法測(cè)定結(jié)果與另一成熟的方法進(jìn)行比較，如藥典方法 或經(jīng)過驗(yàn)證的方法。如不能測(cè)得雜質(zhì)的相對(duì)響應(yīng)因子， 可在線測(cè)定雜質(zhì)的相關(guān)數(shù)據(jù)，如采用二極管陣列檢測(cè)器 測(cè)定紫外光譜，當(dāng)雜質(zhì)的光譜與主成分的光譜相似，則 可采用原料藥的響應(yīng)因子近似計(jì)算雜質(zhì)含量(自身對(duì)照 法)。并應(yīng)明確單個(gè)雜質(zhì)和雜質(zhì)總量相當(dāng)于主成分的重 量比()或面積比() O3. 7重復(fù)性試驗(yàn)取同一批樣品，按供試品溶液方法平行制備5份供試品 溶液，按色譜

7、條件進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算刺楸皂昔A的平均含 量為9. 67mg/g, RSD值為0. 10%,表明方法的重復(fù)性良 好。表8重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果No.峰面積(A)含量(mg/g) (mg/g) RSD (%)1 387411 9. 65 9. 67 0. 102 387968 9. 673 388227 9. 674 387910 9. 675 388434 9. 683. 8加樣回收率試驗(yàn)精密稱取已知含量(9. 67mg/g)的樣品9份，每份0.5g, 分別精密加入刺楸皂昔A對(duì)照品適量，按供試品溶液制 備方法制備，按色譜條件測(cè)定含量。計(jì)算刺楸皂昔A的 平均回收率為98. 98%, RSD值為0. 27%o表9加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果No.稱樣量含量加入量測(cè)得量回收率 RSD(g) (mg) (mg) (mg) (%) (%) (%)1 0. 5002 4. 83694. 819. 5908 98. 83 98. 98 0. 272 0. 5002 4. 83694. 829.6116 99.063 0. 5004 4. 83894. 829. 6008 98. 794 0. 5006 4. 84084. 819.5912 98. 760. 5005 4. 83984. 879.6832 99. 450. 5005 4. 83984. 869. 6554 99.090. 5