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文檔簡介
1、 實驗目的實驗目的 1、了解溫度對酶活性的影響; 2、了解pH對酶活性的影響 實驗原理實驗原理 酶的催化作用受溫度的影響,在最適溫度下,酶的反應速度最高。酶的催化作用受溫度的影響,在最適溫度下,酶的反應速度最高。 大多數(shù)動物酶的最適溫度為大多數(shù)動物酶的最適溫度為 37374040。酶對溫度的穩(wěn)定性與其存在形式。酶對溫度的穩(wěn)定性與其存在形式 有關。有些酶的干燥制劑,雖加熱到有關。有些酶的干燥制劑,雖加熱到100100,其活性并無明顯改變,但在,其活性并無明顯改變,但在 100100的溶液中卻很快地完全失去活性。低溫能降低或抑制酶的活性,但的溶液中卻很快地完全失去活性。低溫能降低或抑制酶的活性,但
2、 不能使酶失活。不能使酶失活。 淀粉和可溶性淀粉遇碘呈藍色。在不同溫度下,淀粉被唾液淀粉酶水淀粉和可溶性淀粉遇碘呈藍色。在不同溫度下,淀粉被唾液淀粉酶水 解的程度,可由水解混合物遇碘呈現(xiàn)的顏色來判斷。解的程度,可由水解混合物遇碘呈現(xiàn)的顏色來判斷。 酶的活力受環(huán)境酶的活力受環(huán)境pHpH的影響極為顯著。不同酶的最適的影響極為顯著。不同酶的最適pHpH值不同。本值不同。本 實驗觀察實驗觀察pHpH對唾液淀粉酶活性的影響,唾液淀粉酶的最適對唾液淀粉酶活性的影響,唾液淀粉酶的最適pHpH約為約為6.86.8。 1 1、0.2%0.2%淀粉的淀粉的0.3%0.3%氯化鈉溶液氯化鈉溶液 2 2、淀粉酶或稀釋
3、、淀粉酶或稀釋5050100100倍的唾液倍的唾液 用蒸餾水漱口,以清除食物殘渣,再含一口蒸餾水,半分用蒸餾水漱口,以清除食物殘渣,再含一口蒸餾水,半分 鐘后使其流入量筒并稀釋鐘后使其流入量筒并稀釋50-10050-100倍,倍,( (稀釋倍數(shù)可根據(jù)各人唾液淀稀釋倍數(shù)可根據(jù)各人唾液淀 粉酶活性調整粉酶活性調整) )混勻備用?;靹騻溆?。 3 3、碘化鉀、碘化鉀- -碘溶液碘溶液 1、試管及試管架 2、恒溫水浴 3、冰浴 4、沸水浴 搖勻后,將搖勻后,將 1 1號、號、3 3號兩試號兩試 管放入管放入3737恒溫水浴中,恒溫水浴中,2 2號試管號試管 放入冰水中。放入冰水中。10min10min后
4、取出,將后取出,將2 2 號管內液體分為兩半,用碘化鉀號管內液體分為兩半,用碘化鉀- -碘碘 溶液來檢驗溶液來檢驗1 1、2 2、3 3管內淀粉被唾管內淀粉被唾 液淀粉酶水解的程度。記錄并解釋液淀粉酶水解的程度。記錄并解釋 結果。將二號管剩下的一半溶液放結果。將二號管剩下的一半溶液放 入入3737水浴中繼續(xù)保溫水浴中繼續(xù)保溫10min10min后,后, 再用碘液實驗,結果如何再用碘液實驗,結果如何? ? 管號管號淀粉溶液淀粉溶液 (ml) 淀粉酶淀粉酶 (ml) 煮沸的淀煮沸的淀 粉酶(粉酶(ml) 11.51 21.51 31.51 取取 3支試管,編號后按下表加入試劑支試管,編號后按下表加
5、入試劑: 1、溫度對酶活性的影響、溫度對酶活性的影響 1. 取取1個淀粉瓊脂培養(yǎng)基,分個淀粉瓊脂培養(yǎng)基,分3個區(qū)域并編號;個區(qū)域并編號; 2. 用剪刀將濾紙剪成相同大小直徑用剪刀將濾紙剪成相同大小直徑1cm以內的濾紙片以內的濾紙片3片;片; 3. 將濾紙片分別蘸取將濾紙片分別蘸取 鹽酸溶液、蒸餾水、氫氧化鈉鹽酸溶液、蒸餾水、氫氧化鈉 溶溶 液,放置于液,放置于 淀粉培養(yǎng)基淀粉培養(yǎng)基3個區(qū)域個區(qū)域 4. 將淀粉培養(yǎng)基放置于將淀粉培養(yǎng)基放置于37 恒溫箱培養(yǎng)十分鐘恒溫箱培養(yǎng)十分鐘 5. 取出淀粉培養(yǎng)基,加入碘液。檢測不同取出淀粉培養(yǎng)基,加入碘液。檢測不同pH下淀粉酶下淀粉酶 活性?;钚浴?2、pH對酶活性的影響對酶活性的影響 注意事項注意事項 1 1加入酶液后,要充分搖勻,保證酶液與全部淀加入酶液后,要充分搖勻,保證酶
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