益生菌國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀

1、 獸用新生物制品名稱、國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀、選題目的與依據(jù)獸用新生物制品名稱為：動(dòng)物雙歧桿菌、干酪乳桿菌、糞腸球菌、釀酒酵母、枯草芽孢桿菌復(fù)合活菌制劑（preparation of b. animals，l.casei， e.faecalis ，s.cerevisiae and b.subtilis）。1、研究目的及意義目前，提高畜禽動(dòng)物飼料收益，減少畜禽患病率，是飼養(yǎng)者追求的目標(biāo)。歷年來(lái)，人們習(xí)慣把抗生素作為防病促生長(zhǎng)添加劑，并且取得了相應(yīng)的效果。但是，長(zhǎng)期使用抗生素由之而來(lái)的抗生素殘留、耐藥性問(wèn)題、抗生素污染問(wèn)題也愈來(lái)愈受到人們的關(guān)注。因而，研制應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖領(lǐng)域的無(wú)殘藥、無(wú)污染、不產(chǎn)生抗藥性、

2、替代抗生素、預(yù)防動(dòng)物疾病的的微生態(tài)制劑尤為重要。2、國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀： 美國(guó)從20世紀(jì)70年代開始使用飼用微生物。80年代中期，世界各國(guó)，尤其歐洲、日本等發(fā)達(dá)國(guó)家紛紛積極鼓勵(lì)和倡導(dǎo)綠色安全飼料添加劑的研究和推廣。在國(guó)外，飼用微生態(tài)制劑已廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)生產(chǎn)中，在理論及應(yīng)用方面進(jìn)行了深入細(xì)致的研究，取得了豐碩的成果。歐美各國(guó)和日本已將益生菌用于配合飼料的生產(chǎn)，形成了微生態(tài)制劑產(chǎn)業(yè)。從目前的發(fā)展情況看，國(guó)外動(dòng)物微生態(tài)制劑的研究多是圍繞乳酸桿菌屬、枯草桿菌及一些鏈球菌進(jìn)行，商業(yè)所用的產(chǎn)品常為復(fù)合菌劑，市場(chǎng)需求量很大，市場(chǎng)也較為完善。目前在美國(guó)準(zhǔn)許飼喂的微生態(tài)制劑年使用量8000噸以上。日本年產(chǎn)值上億元

3、的公司幾十家，主要是雙歧桿菌類產(chǎn)品。在我國(guó)，動(dòng)物微生態(tài)制劑的研究和應(yīng)用起步較晚，表現(xiàn)出一定的作用與效果，但還處于試驗(yàn)研究階段。而且大部分以芽孢桿菌類產(chǎn)品的研制為主，產(chǎn)品多為單一菌劑，產(chǎn)品質(zhì)量及功效與國(guó)外產(chǎn)品尚有很大差距。中國(guó)專利開號(hào)為cn1103584a涉及一種三株口服液及其制備方法，屬營(yíng)養(yǎng)保健食品，是雙歧桿菌、屎鏈球菌、嗜酸乳桿菌發(fā)酵的保健口服液。但是液體發(fā)酵，口服液穩(wěn)定性較差、活性益生菌存活率低，保存時(shí)間短等缺陷。專利公開號(hào)為cn1223865a涉及的一種雙歧三聯(lián)制劑及其制備方法，該制劑是由兩歧雙歧桿菌，糞鏈球菌、乳酸桿菌冷凍干燥活性粉與保護(hù)劑組成的一種粉末或膠囊制品。食品及保健品類：70

4、年代，雙歧桿菌開始應(yīng)用于食品制作，與乳酸菌一起制作酸奶、奶酪、飲料、奶粉、片劑納豆芽等。自90年代初以來(lái)，形形色色的“益生菌”類保健品風(fēng)靡了整個(gè)世界。與此同時(shí)，“益生菌”的研究業(yè)已成為國(guó)際上的熱門研究課題。國(guó)外已開發(fā)出數(shù)以百計(jì)的益生菌保健產(chǎn)品，其中包括：含益生菌的酸牛奶、酸乳酪、酸豆奶以及含多種益生菌的口服液、片劑、膠囊、粉末劑等等。乳暢敏乳酸菌固體飲料，益康5，漢臣氏益生菌、紐利茲益生菌、金紐曼斯。丹麥科漢森公司生產(chǎn)的nitta益生菌，已通過(guò)美國(guó)fda的gras（大眾安全食品）認(rèn)證。屬嬰兒級(jí)別益生菌，安全可靠，無(wú)副作用，此益生菌已經(jīng)有20多年的功效和安全性臨床研究，國(guó)內(nèi)有諸多產(chǎn)品,如蒙牛的b

5、b12益生菌酸奶、益生菌乳飲料百益多（雙歧桿菌和干酪乳桿菌發(fā)酵），三株口服液、九株濃縮液、雙歧桿菌奶片、益生菌飲用粉、靚穎牌益生菌、樂(lè)桂兒益生菌粉、衡欣益生菌沖劑、活力多等。 獸藥及促生長(zhǎng)類：益生素(probiotic)，又稱促生素、生菌劑、活菌制劑、微生態(tài)調(diào)節(jié)劑，其中文名稱尚無(wú)統(tǒng)一規(guī)定，對(duì)其定義的解釋也不盡一致。首先lilley和stillwell于1965年使用益生素一詞(probiotic)，與抗生素(antibiotic)相對(duì)，兩者的作用矛盾?？股厥侵苯託缁蛞种朴泻L(zhǎng)。1974年美國(guó)reparker認(rèn)為“益生素是維持腸道菌群平衡的微生物或物質(zhì)”。1989年fuller重新定義為

6、“一種可通過(guò)改變腸道微生物平衡而對(duì)動(dòng)物施加有利影響的活的微生物”。1990年h.sossard給益生素的定義是“攝入動(dòng)物體內(nèi)參與腸內(nèi)微生物群落的阻礙作用，或者通過(guò)增強(qiáng)非特異性免疫功能來(lái)預(yù)防疾病而間接地起促進(jìn)作用和提高效率的活的微生物培養(yǎng)物”。1991年我國(guó)學(xué)者又提出了一個(gè)較通俗的概念飼用微生物。益生素常常利用含乳桿菌、需氧芽孢桿菌和雙歧桿菌的復(fù)合制劑。國(guó)內(nèi)如川農(nóng)的周痢生、肥魚生、南農(nóng)的促康生、復(fù)旦的鰻魚食、大連水產(chǎn)的鍵魚生、寵樂(lè)寶、順腸片、等上百種產(chǎn)品。他們對(duì)于家禽的增重、增加產(chǎn)蛋率、降低死耗及食耗、防止常見疾病都有重要的作用。藥品（制劑）：含雙歧桿菌的單菌或復(fù)合制劑國(guó)內(nèi)正式批準(zhǔn)的有金雙歧、麗

7、珠腸樂(lè)、媽咪愛(ài)、培菲康。國(guó)外有近百種產(chǎn)品，德國(guó)有臨床上用于治療志賀氏菌、致病性大腸桿菌、沙門氏菌及彎曲菌等引起腹瀉等疾病有肯定的治療效果。因此益生菌作為治療腹瀉的制劑有這廣泛的前景。其次，對(duì)便秘癥、肝臟疾病如高血氨癥、肝性腦病、保護(hù)腎功能、降低血清膽固醇、血液尿毒氮及3、選題目的與依據(jù)：動(dòng)物雙歧桿菌乳酸亞種,bifidobacterium animalisubs( b. lactic v9 )是由內(nèi)蒙古輕工科學(xué)研究所1988年分離自健康的母乳喂養(yǎng)蒙古族兒童糞便的一株性能優(yōu)異的益生菌, 菌種保藏號(hào)cgmccno.4473。革蘭氏陽(yáng)性，無(wú)芽孢，無(wú)莢膜，顯微鏡下呈多形態(tài)，一段稍膨大，或呈y、v型分叉

8、，或少有彎曲。厭氧培養(yǎng)tpy平板培養(yǎng)基上菌落形態(tài)為：圓形或橢圓形、突起、邊緣整齊、光滑、發(fā)亮、淡黃色或白色、不透明、菌落大小直徑為0.52mm。該菌株具有較強(qiáng)的耐酸、耐膽鹽特性，對(duì)腹瀉致病菌具有良好的拮抗作用 ,能夠抑制小鼠腸道致瀉菌株的生長(zhǎng)繁殖。對(duì)常見抗生素的抗性及相關(guān)耐受基因、質(zhì)粒的檢測(cè)結(jié)果表明：bifidobacterium animalisubs (b. lactic v9)的抗生素抗性較弱，該菌株中無(wú)質(zhì)粒存在。安全性獨(dú)立評(píng)估表明，該菌株無(wú)毒副作用。自從1899年tisser首次從母乳嬰兒糞便中分離出雙歧桿菌近一百年歷史中，國(guó)內(nèi)外學(xué)者便對(duì)其進(jìn)行了廣泛的研究，發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌是 正常人腸道中

9、的優(yōu)勢(shì)菌，對(duì)人體微生態(tài)平衡有巨大作用，特別是在改善胃腸道功能方面，創(chuàng)造了細(xì)菌學(xué)上極其輝煌的篇章。國(guó)外學(xué)者們?cè)缭谄呤甏?，就發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌能夠保護(hù)腸道免受 沙門氏菌屬、志賀菌屬和腸致病性大腸桿菌等感染引起的腹瀉。而雙歧桿菌發(fā)揮抵抗胃腸炎的作用在于一方面阻止長(zhǎng)期定居的侵人性病原體的影響。雙歧桿菌抑菌機(jī)制是與本菌發(fā)酵產(chǎn)酸有關(guān)，比如醋酸、 乳酸。另一方面雙歧桿菌具有廣譜抗菌物質(zhì)，對(duì)普通沙門菌屬、李斯 特菌屬、志賀菌屬都有抑制作用；midolo等研究發(fā)現(xiàn)包括兩歧雙歧桿菌的產(chǎn)酸菌，在乳酸濃度為50150 mmol/l時(shí),能對(duì)幽門螺桿菌 nc產(chǎn)生抑制. gismondo用包含有嗜酸乳桿菌、雙歧桿菌的活菌制劑治

10、療因幽門螺桿菌導(dǎo)致的胃和十二指腸疾病的病人，發(fā)現(xiàn)這種活菌制劑能夠有效地與引起疾病的微生物競(jìng)爭(zhēng)，提高了療效。益生苗( 雙歧桿菌) 可以用來(lái)治療因胃腸道疾病所致的腸微生物失調(diào)和增加腸的滲透性；fwara等發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌產(chǎn)生的蛋白因子可以阻止腸產(chǎn)毒性大腸桿 菌與神經(jīng)節(jié)四聚體順式神經(jīng)酰胺結(jié)合，推論出它可通過(guò)此作用，保護(hù)腸粘膜，抗感染；我國(guó)現(xiàn)有的雙歧桿菌活菌制劑有麗珠腸樂(lè) 、 培菲康、媽咪愛(ài)、金雙歧、乳康生、復(fù)方雙歧桿菌豆奶等品牌，主要以藥品的方式被人們接受，用于治療各種腹瀉；動(dòng)物腹瀉模型和臨床應(yīng)用報(bào)告證實(shí)：雙歧桿菌制劑對(duì)急性腸胃炎、菌痢、病毒性腹瀉、嬰幼兒腹瀉、結(jié)腸炎、抗生素使用不當(dāng)后腹瀉有肯定的治療作

11、用，這種作用機(jī)理在于雙歧桿菌的生物拮抗作用（受體爭(zhēng)奪、生物屏障構(gòu)成、化學(xué)屏障：如代謝產(chǎn)物乳酸、乙酸等、類細(xì)菌素樣物質(zhì)）等有關(guān)。刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)，增強(qiáng)吞噬細(xì)胞作用及siga產(chǎn)生，提高機(jī)體非特異性免疫力；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)：雙歧桿菌具有降低內(nèi)毒素釋放，控制膿毒癥作用。這種作用產(chǎn)生于雙歧桿菌定植后，大腸桿菌、克雷伯氏桿菌等革蘭氏陰性桿菌定植和增殖被抑制，這樣菌胞避脂多糖產(chǎn)生減少，lps釋放自然減少有關(guān)；臨床上除直接使用雙歧桿菌制劑外，還 可甩它的促進(jìn)劑促菌生是雙歧桿菌的生物促進(jìn)劑，它能消耗腸道內(nèi)的氧氣 ，提供有利于雙歧桿菌生長(zhǎng)的低氧環(huán)境22。 乳酸桿菌不僅可以改善機(jī)體代謝，促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)，提高畜禽的生產(chǎn)性能

12、，還可以改善動(dòng)物健康水平，預(yù)防疾病及提高動(dòng)物免疫力等。干酪乳桿菌zhang( lb.casei zhang), 菌種保藏號(hào)為cgmcc no.1697是分離自內(nèi)蒙古自治區(qū)錫林郭勒盟地區(qū)傳統(tǒng)發(fā)酵酸馬奶中的一株益生菌，經(jīng)研究表明，該菌株具有良好的耐酸性，人工胃腸液耐受性及膽鹽耐受性，對(duì)免疫系統(tǒng)具有顯著調(diào)節(jié)作用。lb .casei zhang的全基因組序列測(cè)定和圖譜繪制于2008年5月18日全部完成，安全性獨(dú)立評(píng)估表明，該菌株無(wú)毒副作用。芽孢桿菌由于其具有物理性質(zhì)穩(wěn)定、作用方式獨(dú)特、應(yīng)用效果顯著、無(wú)污染、無(wú)殘留等優(yōu)良特性，作為飼料添加劑主要是通過(guò)調(diào)節(jié)動(dòng)物自身微生物平衡而發(fā)揮其生理作用。芽孢桿菌為需氧

13、菌，在生長(zhǎng)過(guò)程中需要大量的氧氣，進(jìn)入動(dòng)物腸道內(nèi)，消耗大量的游離氧，降低了腸道內(nèi)氧氣濃度和氧化還原電勢(shì)，改善了乳酸桿菌、雙歧桿菌等厭氧菌的生長(zhǎng)環(huán)境，保持腸道微生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)衡，同時(shí)使腸道中原本存在在的需氧腸桿菌等生長(zhǎng)因?yàn)槿毖醵艿揭种?，從而提高?dòng)物機(jī)體抗病能力，減少胃腸道疾病發(fā)生率；酵母菌屬于真菌類，圓形、卵圓形或圓柱形，細(xì)胞大小約為15m530m，最長(zhǎng)可達(dá)100m。酵母菌不是人和動(dòng)物的腸道的固有菌，但可以在消化道內(nèi)代謝，經(jīng)證明酵母能在消化道后段存活并可促進(jìn)植酸酶的產(chǎn)生；作為益生素使用的酵母菌則是以活細(xì)胞的形式存在。曾正清等(2001)研究了不同添加水平的酵母飼料對(duì)肉仔雞腸道主要微生物及免疫機(jī)能的影響，發(fā)現(xiàn)在日糧中添加2的酵母飼料能提高肉仔雞的體增重，增加胸腺小葉數(shù)增強(qiáng)肉仔雞免疫功能。添加1、2的酵母飼料能夠降低糞便中、盲腸食糜中大腸桿