免疫學檢測論文（8篇知網(wǎng)范文）

1、免疫學檢測論文（8篇知網(wǎng)范文）免疫學檢測是指利用免疫學原理與技術(shù)，檢測患者抗原、抗體、補體等免疫指標，并通過對這些指標的分析，為疾病進行臨床診斷、治療和處理，以及對預(yù)后的判斷提供重要的參考。本文精選了8篇免疫學檢測論文范文;，以供參考。免疫學檢測論文（8篇知網(wǎng)范文）之第一篇：2,4-D殘留免疫學檢測方法研究進展關(guān)鍵詞：2,4-D,免疫學檢測,殘留,研究進展2, 4-D又稱為2, 4-滴、2, 4-D酸, 化學名為2, 4-二氯苯氧乙酸, 低濃度的2, 4-D常用作植物生長調(diào)節(jié)劑, 主要作用是提高坐果, 誘導(dǎo)單性結(jié)實, 促進果實生長, 防止采前落果, 高濃度的2, 4-D常作為除草劑, 還常用作

2、果蔬保鮮劑。2, 4-D屬于低毒性農(nóng)藥, 在自然條件下不易降解, 并且水溶性差, 吸附性較強, 易殘留于植物表面1, 使用不當會造成藥害, 甚至造成環(huán)境污染。2, 4-D可在生物體內(nèi)積累, 在較高劑量時具有致畸性, 同時它具有潛在的致癌性、致突變性, 是一種內(nèi)分泌干擾物質(zhì), 對免疫系統(tǒng)和生育系統(tǒng)具有不良影響2,3,4,5,6。因此, 尋找一種高效、便捷、快速的殘留檢測方法具有非常重要的意義。我國規(guī)定生活飲用水中2, 4-D限量為0.03 mg/L7, 檢測方法為GC-ECD法8;還制定了食品中2, 4-D的限量9和GC-ECD和HPLC-MS的檢測標準10,11。目前, 國內(nèi)外的2, 4-D殘

3、留檢測方法絕大多數(shù)為GC-ECD或HPLC-UV檢測。GC法不僅需要對樣品進行預(yù)處理, 而且需要衍生化, 較為繁瑣;HPLC-UV檢測成本相對較低, 但是對于痕量檢測, 紫外檢測器的定性能力不足, 必須消除基質(zhì)的干擾, 其可靠性不如MS檢測器。HPLC-MS定性準確, 靈敏度好, 但設(shè)備昂貴, 同時必須考慮基質(zhì)效應(yīng)對目標分子離子化效率的影響。總之, 儀器檢測方法不僅儀器昂貴, 檢測費用高, 樣品前處理方法繁瑣, 并且需要專業(yè)的技術(shù)人員操作, 而近些年來新興起的免疫學分析技術(shù)在這方面具有很大的發(fā)展前景。1 免疫學檢測方法免疫分析法 (IA) 是利用抗體對目標檢測物抗原進行特異性識別的特性, 從而

4、達到定性和定量分析的分析技術(shù)。1.1 酶聯(lián)免疫吸附分析法 (ELISA)酶聯(lián)免疫吸附測定是將抗原或抗體吸附在固相載體表面, 通過加入酶標抗體或抗原, 進行抗原抗體反應(yīng), 形成酶標免疫復(fù)合物, 洗滌后, 游離的酶標抗體或抗原被洗掉, 再加入酶底物與免疫復(fù)合物結(jié)合顯色, 進而進行定性或定量測定。于基成等12通過活化酯法和混合酸酐法合成2, 4-D-BSA和2, 4-D-OVA, 再分別采用UV法和間接ELISA法進行鑒定。結(jié)果是2種方法合成的完全抗原中2, 4-D和蛋白質(zhì)的偶聯(lián)比分別為241和171, 抗血清效價為1.28×1042.56×104, 成功合成了2, 4-D的

5、完全抗原。許艇等13制備了2, 4-D特異性多克隆抗體, 用間接ELISA法檢測抗血清效價和競爭性ELISA法檢測2, 4-D。結(jié)果2, 4-D與BSA和OVA的偶聯(lián)比率分別為321和181, 抗血清效價6.4×105, 在優(yōu)化條件下2, 4-D檢測限達37 ng/m L。李會娜等14也做了相關(guān)研究, 獲得的抗血清效價達1.6×105, 2, 4-D檢測限達50ng/m L, 李會娜等15隨后又用該方法測定了地下水、蔬菜和原糧等樣品中的2, 4-D含量。檢測樣品中的2, 4-D含量變異系數(shù)1.2 化學發(fā)光免疫分析技術(shù) (CLIA)化學發(fā)光免疫分析是將具有高靈敏度的化學發(fā)

6、光測定技術(shù)與高特異性的免疫反應(yīng)結(jié)合的新型免疫測定技術(shù)。張靜24首次獲得雞卵黃抗2, 4-D多克隆抗體, 并用自制的10, 10′-二烯丙基-3, 3′-二氨基-9, 9′雙吖啶標記抗2, 4-D雞卵黃抗體, 建立了2, 4-D的雙抗夾心化學發(fā)光免疫分析新方法, 2, 4-D測定的線性范圍為7.5×10-107.5×10-8g/m L, 檢測限為2.04 ng/m L, 土壤樣品中的2, 4-D含量為24.48 pg/m L, 回收率在96%101%之間。CLIA技術(shù)具有特異性強、靈敏度高、線性范圍寬、儀器簡單、操作方便、無放射性污染等

7、優(yōu)點, 完全能夠滿足樣品中2, 4-D快速檢測的要求。1.3 酶聯(lián)熒光免疫分析技術(shù) (ELFIA)酶聯(lián)熒光免疫分析技術(shù)是在酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的將酶系統(tǒng)與熒光免疫分析結(jié)合的快速檢測技術(shù)。它是利用理想的熒光底物代替生色底物, 實現(xiàn)了提高檢測靈敏度, 擴大測量范圍以及減少試劑用量。余宇燕等25采用活化酯法合成人工抗原2, 4-D-BSA, 通過免疫新西蘭白兔獲得抗血清2, 4-D-Ig G, 再用異硫氛酸熒光素 (FITC) 標記, 得到熒光抗體。采用雙抗夾心熒光免疫分析法通過考察抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)的抑制活性來反映抗體與標記抗體對2, 4-D的競爭結(jié)合能力。用方陣滴定方法對雙抗夾心熒光法

8、中抗體和標記抗體的工作濃度進行篩選和確定。其線性范圍為0.210.0μg/L, IC50=2.28, 檢測限IC20=0.089μg/L。該法制備的熒光抗體僅對2, 4-D具有特異性識別能力, 而對其他類似物的交叉反應(yīng)率都較低。1.4 膠體金層析技術(shù) (GLCA)膠體金層析技術(shù)是以膠體金作為示蹤標記物應(yīng)用于免疫反應(yīng)的新型免疫標記技術(shù)。王寶芹26通過優(yōu)化2, 4-D膠體金探針的最佳偶聯(lián)條件, 制備出2, 4-D膠體金試紙條, 能夠在12 min內(nèi)出線, 從而得到一種快速檢測2, 4-D的方法, 檢測限為10.0 ng/m L;還制備出不同2, 4-D抗體標記的磁性探針和2, 4-D-

9、OVA標記的熒光探針, 探討出磁性探針最佳優(yōu)化條件, 得到檢測限為260 mg/m L。在此基礎(chǔ)上將磁性微球換成金磁微粒, 得到檢測限達30.907 ng/m L。利用膠體金試紙條原理, 初步探究了制備金磁試紙條的方法。金磁標記的層析試紙條既具有膠體金的光學性質(zhì), 能夠通過肉眼直接進行定性分析, 又具有磁性微粒的磁性, 可以通過檢測磁信號進行定量分析, 大幅度提高了檢測的靈敏度, 方法更簡捷、效果更直觀, 并且無需昂貴儀器檢測, 適用于2, 4-D樣品的快速檢測、臨場檢測以及高通量檢測。1.5 免疫傳感器技術(shù)免疫傳感器的結(jié)構(gòu)與傳統(tǒng)的生物傳感器相似, 可分為生物敏感膜、換能器和信號數(shù)據(jù)處理器3個

10、部分, 其中生物敏感膜的構(gòu)建是決定免疫分析的關(guān)鍵。當待測物與分子識別元件特異性結(jié)合后, 所產(chǎn)生的復(fù)合物通過信號轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)變?yōu)榭梢暂敵龅碾娦盘?、光信? 從而達到分析檢測的目的。蔡強等27以EDC作為交聯(lián)劑, 制備偶聯(lián)物 (2, 4-D-BSA以及2, 4-D-PLL) , 以2, 4-D偶聯(lián)物=116制備兔抗血清。采用絲網(wǎng)印刷工藝制備電極, 通過酶促反應(yīng)檢測還原電流的原理研制出安培型免疫傳感器, 并將該傳感器與傳統(tǒng)的間接競爭ELISA法進行比較。該方法2, 4-D的檢出限達到1.69 ng/m L, 線性區(qū)間1.6930 000 ng/m L, 適合飲用水中2, 4-D的檢測要求。時巧翠28將亞

11、鐵氰化鉀溶液包埋于脂質(zhì)體中, 脂質(zhì)體中的亞鐵氰化鉀溶液, 通過戊二醛溶液的作用, 與2, 4-D免疫抗體溶液交聯(lián)。采用自制MWNT′s修飾的石墨電極插入脂質(zhì)體抗體吡咯溶液中, 通過方波伏安法測定電流值。應(yīng)用該法檢測尿樣中2, 4-D, 其線性范圍在0.052.50 mg/L之間, 檢出限為15.4μg/L。免疫傳感器具有靈敏度高、儀器簡單、方法靈活多樣等優(yōu)點, 但是自制設(shè)備之間往往存在差異。1.6 納米金技術(shù)納米金技術(shù)是以納米金為免疫標記物的檢測技術(shù), 其本質(zhì)是蛋白質(zhì)等高分子被吸附到納米金顆粒表面的包被過程。鐘菲菲等29利用靜電吸附作用, 將2, 4-D抗體固定在由自組裝L-

12、半胱氨酸和靜電吸附納米金修飾的金電極表面, 制備出無試劑型的免疫傳感器, 通過交流阻抗技術(shù)考察了電極的電化學特性。2, 4-D的檢測范圍為15 000 ng/m L, 檢出限為0.5 ng/m L。該方法提高了2, 4-D抗體的固定量, 增強了傳感器的靈敏度和穩(wěn)定性。魯哲1采用壓電間接競爭免疫法來檢測2, 4-D, 通過使用納米金作二抗標記物以放大響應(yīng)信號, 2, 4-D檢出限為13.0 ng/m L, 該傳感器再生性較好, 可重復(fù)使用9次以上且其靈敏度沒有明顯降低;之后也采用自組裝技術(shù)與免疫競爭技術(shù)相結(jié)合, 構(gòu)建安培型生物免疫傳感器, 檢測2, 4-D。通過在電極上進行競爭免疫反應(yīng), 用納米

13、金標記的羊抗鼠lg G抗體將信號進一步放大, 提高檢測靈敏度, 使用交流伏安法進行檢測。2, 4-D檢出限為0.1 ng/m L。以納米金為標記物的免疫分析快速檢測技術(shù)具有簡單、快速、靈敏度高、特異性強、樣品用量少等優(yōu)點。2 展望免疫學分析技術(shù)應(yīng)用抗原抗體的特異性結(jié)合制備的高特異性多克隆抗體或單克隆抗體來快速檢測樣品中2, 4-D的殘留, 可達到比儀器檢測更高的靈敏度。該技術(shù)在樣品前處理方面有著獨特的優(yōu)勢, 大多數(shù)水樣只需離心或微孔濾膜過濾后就可直接檢測, 土壤或農(nóng)作物樣品經(jīng)過有機溶劑提取后, 適度稀釋就能很好地消除基質(zhì)影響。但是, 該類方法尚未成熟, 存在假陰性率和假陽性率高的問題, 有待于

14、進一步開發(fā)研究。目前, 國外已經(jīng)研制出2, 4-D的免疫檢測試劑盒和試紙條, 而我國正處于研發(fā)階段, 若能研制成功, 使其商業(yè)化, 不僅降低了檢測成本, 而且便于普及, 更加省時、省力、經(jīng)濟、環(huán)保, 為國民安全飲食、中毒事件的甄別、環(huán)境保護等方面做出巨大貢獻。參考文獻1魯哲.基于納米金修飾的2, 4-D和IAA生物免疫傳感器研究D.長沙:湖南農(nóng)業(yè)大學, 2011.2張夢云.2, 4-二氯苯氧乙酸的毒理學及流行病學研究進展J.毒理學雜志, 2014, 28 (2) :156-159.3劉鑫, 李德紅, 李玲, 等.2, 4-二氯苯氧乙酸的研究進展J.生命科學研究, 2004, 8 (4) :71

15、-75.4薄存香, 張振嶺, 戈揚, 等.2, 4-二氯苯氧乙酸毒性效應(yīng)研究進展J.中國職業(yè)醫(yī)學, 2011, 38 (1) :75-76.5徐愛東.我國蔬菜中常用植物生長調(diào)節(jié)劑的毒性及殘留問題研究進展J.中國蔬菜, 2009 (8) :1-6.6郭瀟, 趙文.植物生長調(diào)節(jié)劑的安全性分析C/中國中部地區(qū)農(nóng)產(chǎn)品加工產(chǎn)學研研討會論文集, 2007.7GB 57492006生活飲用水衛(wèi)生標準S.北京:中國標準出版社, 2006.免疫學檢測論文（8篇知網(wǎng)范文）之第二篇：甲狀腺激素的免疫學檢測方法及進展關(guān)鍵詞：甲狀腺激素,免疫學方法,檢測方法臨床檢測甲狀腺激素的方法多為免疫標記法, 測定患者血液中的激素

16、含量2。放射免疫分析法 (RIA) 的建立為激素等超微量物質(zhì)分析史的重大技術(shù)性的突破, 使過去難以精確定量的極微量物質(zhì)得以確定, 大大推進了我國生命科學的進步與發(fā)展3。隨著我國免疫學檢測技術(shù)的不斷進步與發(fā)展, 技術(shù)的發(fā)展, 電化學發(fā)光免疫分析技術(shù)相繼的誕生, 其檢測更具敏感性、特異性、快速性及準確性, 可在短時間內(nèi)準確的檢測出血液內(nèi)各種激素的準確水平4。1 方法學進展R I A技術(shù)的發(fā)展共經(jīng)歷了5代。第一代為Yalow與Berson共同創(chuàng)建的具有競爭性的抑制免疫反應(yīng)為原理的檢測方法, 開辟了檢驗史上新思路;第二代的標記為游離標記抗原分離技術(shù)和抗原-抗體復(fù)合物;第三代的標志為半抗原制備抗體技術(shù)的

17、運用及建立;第四代的標志是單克隆技術(shù)的建立。第五代的標志則為抗體固磁性微粒子, 極大簡化檢測操作的程序, 縮短檢測用時, 為實現(xiàn)檢測技術(shù)的全自動分析奠定了良好的基礎(chǔ)。在RIA檢測技術(shù)的基礎(chǔ)上, 相繼發(fā)展了化學發(fā)光免疫分析技術(shù) (CLIA) 、酶聯(lián)免疫分析 (EIA) 等, 使檢測的特異性及靈敏性得到進一步提升。2 免疫學檢測方法2.1 RIARIA是由美國科學家Yallow建立的, RIA的建立使定量分析取得了劃時代的進步, 使微量生物的樣品最小檢出量由之前的微克提升至皮克級的水平, 為臨床檢測實踐及生物醫(yī)學的基礎(chǔ)理論提供了新的方法及思路, 為推動世界生物醫(yī)學的發(fā)展做出了巨大的貢獻。RIA的檢

18、測原理是運用放射性的核素標記激素中的抗體及抗原, 將待測抗體或者抗原與特異性做結(jié)合而形成復(fù)合物展開檢測的的先進分析方法。目前我國多數(shù)實驗室運用該方法測定血清中的游離甲狀腺素 (FT4) 、游離三碘甲狀腺原氨酸 (FT3) 及促甲狀腺激素 (TSH) , 上述檢測項目使用的試劑均為RIA的試劑盒。2.2 CLIACLIA是1977年誕生的, 在RIA原理的基本上, 將高靈敏化學發(fā)光和特異性強的免疫反應(yīng)進行結(jié)合, 是檢測微量抗體及抗原的一種非放射的免疫分析方法。早期的CLIA顯示的特異性和RIA極為相似, 但因其光信號的持續(xù)時間較短, 因此在靈敏度方面低于RIA, 難以滿足臨床檢測需求。上個世紀9

19、0年代初, 英國Amersham公司率先在過氧化物酶催化Luminol發(fā)光反應(yīng)中將微量碘酚加入其中, 將其作為發(fā)光的穩(wěn)定劑, 檢測發(fā)光信號結(jié)果顯示, 發(fā)光信號持續(xù)了20至30分鐘, 然后進行了試劑盒研究, 研制了相應(yīng)的試劑盒, 標志著CLIA正式運用以臨床檢測。2.3 EIAEIA技術(shù)誕生以上個世紀60年代, 有醫(yī)學研究者將酶的催化作用和抗原抗體的特異性免疫反應(yīng)進行了結(jié)合, 運用特定的酶作為抗體及抗原的標記, 使其成為示蹤活性性能的免疫酶, 定性及定量測定的標準是根據(jù)免疫酶中催化底物的顯色, 建立EIA免疫檢測方法。EIA長期存在的過程中不會生產(chǎn)放射性的污染, 還具有操作簡單、設(shè)備安全的優(yōu)勢。但由于酶的穩(wěn)定性還存在一定限制, 在比色法及偏振光技術(shù)中其測量范圍較窄、靈敏度較差加上定量較為困難, 因此運用該方法進行檢測漏診及假陽性的發(fā)生率較高, 限制了其在臨床的使用及推廣。3 總結(jié)RIA技術(shù)的發(fā)展歷史悠久, 該技術(shù)的不斷發(fā)展與突破為實現(xiàn)檢測技術(shù)的全自動分析奠定了良好的基礎(chǔ), 為推動世界生物醫(yī)學的發(fā)展做出了巨大的貢獻。在RIA檢測技術(shù)的基礎(chǔ)上, 相繼發(fā)展了化學發(fā)光免疫分析技術(shù) (CLIA) 、酶聯(lián)免疫分析 (EIA) 等檢測技術(shù),