尿素分解菌導(dǎo)學(xué)案

1、課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)一、篩選菌株1篩選微生物的原理：人為提供有利于 生長的條件（包括、溫度、等），同時的微生物生 其他種類微生物生長或其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。2、選擇培養(yǎng)基：允許 長，同時的培養(yǎng)基，稱作選擇培養(yǎng)基。唯一氮源，將3、欲得到分離分解尿素的細(xì)菌可以用以的培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)，因為該細(xì)菌可以產(chǎn)生 尿素分解成，使培養(yǎng)基的PH，所以若作進一步的鑒定可向該培養(yǎng)基長加入0二、統(tǒng)計菌落數(shù)目，其 時，培養(yǎng)基1微生物活菌計數(shù)的常用方法是 原理是：當(dāng)樣品的稀釋度足夠 表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約有多少活菌。利用 公式：

2、進行計算。（ C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積，M代表稀釋倍數(shù)）的平 個平板，取菌落2、為了確保結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在 板進行計數(shù)，每個稀釋度下至少涂布數(shù)的，且這三個平板的菌落數(shù)差異過大，3、用這種方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù) 目，因，因此統(tǒng)計結(jié)果為.數(shù)而不是活菌數(shù)來表示。也是測定微生物數(shù)量的常用方4、一般用法。三、設(shè)置對照.對實驗的的土壤設(shè)置對照的主要目的是排除實驗組中 結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的四、實驗設(shè)計1土壤取樣：細(xì)菌適宜在酸堿度接近 土壤中生長，絕大多數(shù)細(xì)菌在距地表約 層。2、樣品稀釋：測定土壤中細(xì)菌的數(shù)量，一般選用 、的稀釋液進

3、行平板培養(yǎng)；測定放線菌的數(shù)量，一般選用、培養(yǎng)；測定真菌的數(shù)量，一般選用 的稀釋液進行平板培養(yǎng)。3、微生物的培養(yǎng)與觀察：細(xì)菌一般在的溫度下培養(yǎng);放線菌一般在的溫度下培4、菌落的特征包括菌落的;真菌一般在的溫度下培等方面。五、操作提示無菌操作：取土樣的小鏟子和盛土樣的信封使用前都需 要;應(yīng)在稀釋過程中，每一步都要在取土樣；在土壤1.分離土壤中分解尿素的細(xì)菌練習(xí)題,對培養(yǎng)基的要求是（加尿素不加尿素加硝酸鹽不加硝酸鹽A.操作。加瓊脂不加瓊脂 加葡萄糖不加葡萄糖B.C.D.2.下圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計數(shù)”實驗中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是F片一、|嚴(yán)、嚴(yán)、忙、U1丄UI理t +TA.

4、3號試管中的菌落稀釋倍數(shù)為103倍門 I in)B. 4號中稀釋液進行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數(shù)恰為5號的10倍C. 5號試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7 X 109個D.該實驗方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目要高3.可以鑒定出分解尿素的細(xì)菌的方法是A 以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B 以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑的稀釋液進行平板C .以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹川試劑D .以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑4. 在農(nóng)田土壤的表層自生固氮菌較多，用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可將自生固氮菌與其他細(xì)菌分開，對培養(yǎng)基的要求是加抗生素不加

5、抗生素加氮素不加氮素加葡萄糖不加葡萄糖37 C恒溫箱中培養(yǎng)2830C溫度下培養(yǎng)A.B. C. D .初唯一的已知胃部細(xì)菌.Hp可產(chǎn)生高活性的尿素酶.5. 從土壤中分離以尿素為氮源的細(xì)菌，下列實驗操作不正確的A.將土壤用無菌水稀釋，制備105103 土壤稀釋液B.將不同濃度的土壤稀釋液涂布于不同平板上C.用加入剛果紅指示劑的選擇培養(yǎng)基篩選分解尿素的細(xì)菌D.從周圍出現(xiàn)紅色環(huán)帶的菌落中挑取能夠分泌脲酶的菌株A.777B .777C .777D .7776. 關(guān)于對分解尿素的細(xì)菌進行分離、計數(shù)的實驗敘述，錯誤的是A統(tǒng)計菌落數(shù)目時，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面的一個菌落，來源于樣品 稀釋液中的一個

6、活菌。B. 統(tǒng)計菌落數(shù)目時，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品大約含有多少活菌。C. 設(shè)置對照的目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的干擾pH的變化，還D. 以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，通過檢測培養(yǎng)基的 不能準(zhǔn)確鑒定培養(yǎng)基中的細(xì)菌就是能夠分解尿素的那種。7. 下列關(guān)于從土壤中分離細(xì)菌的操作步驟中，正確的是土壤取樣稱取10g 土壤取出加入盛有 90mL無菌水的錐形瓶中吸取O.ImL進行平板涂布依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107 稀釋A.KHPO、NatHPO、MgS0 7H20、B.KHPO、NatHPO、MgS0 7H20、C.KHPO、NaH

7、PQ、MgSQ 7H20、D.KHPO、NaHPQ、MgSQ 7H20、8.下列能選擇出分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基是葡萄糖、瓊脂、水尿素、瓊脂、水牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水;21世紀(jì)9.幽門螺桿菌簡稱 Hp,主要寄生在胃幽門、胃竇等附近的黏膜上，是人類至(1)制備幽門螺桿菌培養(yǎng)基時，需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至性.培養(yǎng)皿進行滅菌的常用方法是倒平板時要待平板冷凝后，將平板倒置，其主要原因是(2)圖表示的是用法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果圖是在純化過程中通過法分離培養(yǎng)的結(jié)果,在培養(yǎng)基上接種時接種環(huán)需通過灼燒滅菌，完成圖中劃線操作，至少需要灼燒接種環(huán)次.(3)為檢測某人體內(nèi)是否感染了Hp,可讓其服用14C標(biāo)記的氣體，通過分析呼氣中14c標(biāo)記的CO的含量即可判斷該檢測方法和卡爾文研究光合，定時收集呼出的作用的方法一樣可稱為法.10.尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥。但是，尿素CO (NH) 2并不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。下圖為從土壤中分離出 能夠分解尿素的細(xì)菌的主要步驟。置)，其目的是O(1)本實驗所需培養(yǎng)基按功能劃分，屬于培養(yǎng)基，唯一氮源應(yīng)為(2)在配制該培養(yǎng)基時，依次進行如下操作：配制培養(yǎng)液、分裝、包扎、擱置斜面。(3)使用法可以獲得