高考生物一輪精品復(fù)習(xí)專題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)學(xué)案新人教版選修1

1、【高考新動向】1蛋白質(zhì)的提取和分離2、PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用【考綱全景透析】一、DNA的粗提取與鑒定1、實(shí)驗(yàn)原理：(1)DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，在 0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解 度最低。(2) DNA不溶于酒精溶液。(3) DNA不被蛋白酶所水解。(4) DNA在沸水浴條件下可被二苯胺染成藍(lán)色。2. DNA與蛋白質(zhì)在不同 NaCl溶液中溶解度不同2 mol/ LNM3 溶液0.14 mol/I MCI 溶 液溶解規(guī)律DNA溶解析出W -0.14 mol/L NaCl溶液蛋白質(zhì)部分發(fā) 生鹽析 沉淀祐Stad溶液從2 moVL降低 過程中，溶解度逐漸増大3.

2、DNA的析出與鑒定(1) 析出：將處理后的溶液過濾，加入與濾液等體積的冷卻酒精溶液(體積分?jǐn)?shù)為95%)靜置23 min ,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物 (此即粗提取的DNA),用玻璃棒沿一個方向攪拌卷起絲狀物。鑒定比較加入物質(zhì)結(jié)果 圖示實(shí)驗(yàn)對照組均加入： 4譏二苯胺試劑 2 mobL MCI溶液5絲狀物(D5A)溶液逐漸變藍(lán)不變藍(lán)、多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增 DNA片段1、PCR多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的簡稱，是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。原理：DNA的熱變性XJJ鏈加熱(0 t100 八戲熾旋結(jié)構(gòu)餅體單鏈DMY緩慢広馭分離的)百儺乂就新菇DNA2、PCF反應(yīng)過程(1) 變性：當(dāng)溫度上升到 90 C以上時，雙鏈

3、 DNA解聚為單鏈(2) 復(fù)性：溫度下降到 50 C左右時，兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對與兩條單鏈DNA吉合(3) 延伸：溫度上升到 72C左右時，溶液中 的4種脫氧核苷酸(A,T,C,G )在DNA聚合酶的作用下, 根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則合成新的DNA鏈。3、 PCR結(jié)果：DNA聚合酶只能特異地復(fù)制處于兩個引物之間的DNA序列，使這段固定長度的序列呈指 數(shù)擴(kuò)增。三、血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)1、方法及原理方法原理凝膠色譜法根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)電泳法各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不冋來分離蛋白質(zhì)2、操作程序：(1) 樣品處理：紅細(xì)胞的洗滌t血紅蛋白的釋放t分離血紅蛋白溶液(

4、2) 粗分離一一透析：除去樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。(3 )純化：一般采用凝膠色譜法對血紅蛋白進(jìn)行分離和純化。(4) 純度鑒定：一般用 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法來測定蛋白質(zhì)的分子量，即對血紅蛋白進(jìn)行純度鑒定。3、細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制與PCF技術(shù)的比較細(xì)胞內(nèi)DNAM制PCR不解旋在解旋酶作用下邊解旋邊復(fù)制80 C 100 C高溫解旋，雙同鏈分開占八、酶DNA解旋酶、DNA聚合酶TaqDNA聚 合酶引物RNADNA或 RNA溫度體內(nèi)溫和條件高溫相(1)需提供DNA復(fù)制的模板同占八、(2) 四中脫氧核苷酸作原料(3) 子鏈延伸的方向都是從 5 /端到3 /端(4) 都需要酶的催化【熱點(diǎn)難點(diǎn)全析】

5、-、DNA和蛋白質(zhì)的技術(shù)1、比較細(xì)胞內(nèi) DNA復(fù)制與DNA擴(kuò)增(PCR爭聃內(nèi)NA貝制體外 DNA rfflfPCR)so r-ioo 科知斛嵐.瞑魁完全*開IJXA林詢、小JA舉合卿iaa strewTag nSA聚合拠引物RXA1 iXA rxa溫度體內(nèi)溫和於件ATP十物體1*1葉牡制爹撫椰同點(diǎn)提供DMA欖fib L種脫氣珂(T盹為臨料，fntif 伸的方向:邵從越薊丫諸2.血紅蛋白的提取和分離方法(1) 凝膠色譜法 含義：根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的方法。 原理a. 相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長，移動速度較慢。b. 相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部

6、的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度 較快。(2) 電泳法 含義：帶電粒子在電場作用下發(fā)生遷移的過程。 原理：利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異和分子本身大小、形狀不同，使帶電分子產(chǎn)生 不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。(3) 緩沖溶液 組成：12種緩沖劑溶解于水中配制而成。 作用：在一定范圍內(nèi)抵制外界的酸和堿對溶液pH的影響，維持pH基本不變，確保實(shí)驗(yàn)室條件下能準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的代謝過程?！靖呖剂憔嚯x】1、 （2012 江蘇高考） 下列關(guān)于“ DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”的敘述，正確的是（）A. 洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加 DNA在NaCI溶液中的溶解度B. 將DNA絲

7、狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍(lán)C. 常溫下菜花勻漿中有些酶類會影響DNA的提取D. 用玻棒緩慢攪拌濾液會導(dǎo)致 DNA獲得量減少【解析】洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但不能增加DNA的溶解度，A錯；將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴中變藍(lán)，不需要冷卻，B錯；常溫下菜花勻漿中有些酶類可破壞DNA而影響DNA的提取，C正確；用玻棒緩慢攪拌濾液并不影響DNA的含量，而在粗提取時，緩慢撐拌有利于DNA附著，D錯【答案】C2、 （2011 江蘇高考）在利用雞血進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中，相關(guān)敘述正確的是（）A. 用蒸餾水將NaCI溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L ，濾去析出物B. 調(diào)節(jié)NaCI溶

8、液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì)C. 將絲狀物溶解在2 mol/L NaCI溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色D. 用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料，其實(shí)驗(yàn)操作步驟相同【解析】A項，用蒸餾水將NaCI溶液濃度調(diào)至0.14 mol/ L,使DNA析出。B項，NaCI溶液為2mol/L, 過濾除去不溶的雜質(zhì)，木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)。C項，在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。D項，如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜?！敬鸢浮緽3、（2010 廣東高考）新技術(shù)的建立和應(yīng)用對生物學(xué)發(fā)展至關(guān)重要。下列技術(shù)（或儀器）與應(yīng)用匹配正確的是A. PCR技術(shù)一一擴(kuò)增蛋白質(zhì)B. 雜交瘤技術(shù)一

9、一制備單克隆抗體C. 光學(xué)顯微鏡一一觀察葉綠體的基粒D. 花粉離體培養(yǎng)一一培育單倍體植物【解析】本題主要考查學(xué)生的理解能力。PCR技術(shù)只能用來擴(kuò)增核酸，不能用來擴(kuò)增蛋白質(zhì)；利用光學(xué)顯微鏡無法觀察到葉綠體?！敬鸢浮緽D4、 （2010 江蘇高考）某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動。具體步驟如下：材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份每份I0 g。剪碎后分成兩組，一組置于20C、另一組置于一 20C條件下保存24 h。DNA粗提?。旱谝徊剑簩⑸鲜霾牧戏謩e放人研缽中，各加入15 mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾取濾液備用。第二步：先向6只小燒杯中分別注人 10mL濾液，再加人20

10、mL體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液，然后 用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。第三步：取6支試管，分別加入等量的 2 mol /L NaCI溶液溶解上述絮狀物。DNA檢測：在上述試管中各加入 4 mL二苯胺試劑。混合均勻后，置于沸水中加熱5 min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結(jié)果如下表。- VV V 材料保療溫度花菜WPS+ + + +-20t+ + +* * (注I越夢表示藍(lán)色越深)分析上述實(shí)驗(yàn)過程，回答下列問題：(1) 該探究性實(shí)驗(yàn)課題名稱是。(2) 第二步中”緩緩地”攪拌，這是為了減少。(3) 根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出結(jié)論并分析。 結(jié)論1:與20C相比，相同實(shí)驗(yàn)材料在 -

11、20C條件下保存，DNA的提取量較多。結(jié)論2：。 針對結(jié)論I 請?zhí)岢龊侠淼慕忉專骸?4) 氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對 DNA影響極小。為了進(jìn)一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性.在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是：。然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液使 DNA析出?！窘馕觥勘绢}考查了 DNA粗提取技術(shù)的原理、操作過程及同學(xué)分析、判斷能力，從題目實(shí)驗(yàn)看出，該 實(shí)驗(yàn)的課題是探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響。在試用第二步中，為了防止DNA斷裂,DNA降解慢，使得相同材料在低溫保存要緩緩的攪拌，從表中結(jié)果看出，由于低溫抑制了相關(guān)酶的活性,下，D

12、NA提取量大，在相同條件先，蒜黃藍(lán)色最深，說明相同條件下從蒜黃中提取的DNA量最大，由于氯仿密度比水大，可使蛋白質(zhì)變性后沉淀，而與水、混合，靜置一段時間，吸取上清液即可得到較純凈的【答案】(1)探究不同材料和不同保存溫度對DNA不相溶，這樣可將第三步獲得的溶液與等量的氯仿DNADNA提取量的影響15DNA1最多(2) DNA斷裂(3) 等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃提取的低溫抑制了向光酶的活性，DNA降解速度慢（4 ）將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時間，吸取上清液【考點(diǎn)提升訓(xùn)練】一、選擇題1、 下列有關(guān)蛋白質(zhì)提取和分離的說法，錯誤的是（）A. 透析法分離蛋白

13、質(zhì)的原理是利用蛋白質(zhì)不能通過半透膜的特性B. 采用透析法使蛋白質(zhì)與其他小分子化合物分離開來C. 離心沉降法通過控制離心速率使分子大小、密度不同的蛋白質(zhì)分離D. 蛋白質(zhì)在電場中可以向與其自身所帶電荷相同的電極方向移動【解析】在電場的作用下，帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動。【答案】D2、 對“ DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A. 利用DNA能溶于酒精溶液，而蛋白質(zhì)不溶于酒精溶液，可將DNA與蛋白質(zhì)分離B. 利用高溫能使蛋白質(zhì)變性，卻對DNA沒有影響的特性，可將 DNA與蛋白質(zhì)分離C. 在溶有DNA的 2 mol/L氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水，輕輕攪拌后過濾，取濾液進(jìn)行以后

14、的實(shí)驗(yàn)D. 在DNA濾液中加入嫩肉粉，通過木瓜蛋白酶的作用，可將DNA與蛋白質(zhì)分離【解析】利用DNA不溶于酒精溶液，蛋白質(zhì)溶于酒精溶液的特點(diǎn)，可將DNA與蛋白質(zhì)分離；高溫能使蛋白質(zhì)、DNA變性，蛋白質(zhì)在6080C可變性，而DNA在 80C以上也會變性，所以高溫對 DNA有影響；在 溶有DNA的 2 mol/L氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水，輕輕攪拌后過濾，得到DNA黏稠物，用DNA黏稠物進(jìn)行以后的實(shí)驗(yàn)；在 DNA濾液中加入嫩肉粉，通過木瓜蛋白酶的專一性作用，可將DNA與蛋白質(zhì)分離。【答案】D3、紅細(xì)胞中含有大量血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)來提取和分離血紅蛋白。下列對

15、血紅蛋白提取和分離的敘述，錯誤的是（）A. 血紅蛋白提取和分離一般按照樣品處理t粗分離t純化t純度鑒定的順序進(jìn)行B. 純化過程中要用生理鹽水充分溶脹凝膠來配制凝膠懸浮液C. 粗分離時透析的目的是去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)D. 可經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定【解析】蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定，提取和分離血紅 蛋白時，首先通過洗滌紅細(xì)胞、血紅蛋白的釋放、離心等操作收集到血紅蛋白溶液，即樣品處理；再通過 透析法除去相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，即樣品的粗分離；然后通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量較大的雜蛋 白除去，即樣品純化，純化過程中凝膠應(yīng)用蒸餾水充分溶脹后

16、，配制成凝膠懸浮液，而不是用生理鹽水；最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定?！敬鸢浮緽4、 （2012 南京模擬）下列關(guān)于DNA和血紅蛋白的提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述中，錯誤的是（）A. 可用蒸餾水漲破細(xì)胞的方法從豬的紅細(xì)胞中提取到DNA和蛋白質(zhì)B. 用不同濃度的NaCI溶液反復(fù)溶解與析出 DNA可除去部分雜質(zhì)C. 透析法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是蛋白質(zhì)不能通過半透膜D. 進(jìn)一步分離與純化血紅蛋白時可用凝膠色譜法、離心法和電泳法等【解析】豬是哺乳動物，哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中無細(xì)胞核和線粒體，不能從其紅細(xì)胞中提取出DNA【答案】A5、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR技術(shù)）是體外酶促合成特異 DNA片段的一種方法

17、，由高溫變性、低溫退火及適 溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個周期，循環(huán)進(jìn)行，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增，其簡要過程如下圖所示。下列關(guān)于PCR技術(shù)敘述不正確的是（）UNA互補(bǔ)鏈分離成為單鏈 r 以單鏈為模板合成于代DNAA. PCR技術(shù)是在實(shí)驗(yàn)室中以少量 DNA制備大量DNA勺技術(shù)B. 反應(yīng)中新合成的 DNA又可以作為下一輪反應(yīng)的模板C. PCR技術(shù)中以核糖核苷酸為原料，以指數(shù)方式擴(kuò)增D. 應(yīng)用PCR技術(shù)與探針雜交技術(shù)可以檢測基因突變【解析】PCR技術(shù)是人工合成DNA的方法，原料是脫氧核苷酸而不是核糖核苷酸?！敬鸢浮緾6、蛋白質(zhì)的提取和分離分為哪幾步 （）A. 樣品處理、凝膠色譜操作、SDS-聚丙烯酰胺凝

18、膠電泳B. 樣品處理、凝膠色譜操作、純化C. 樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定D. 樣品處理、純化、粗分離、純度鑒定【解析】蛋白質(zhì)的提取和分離分為樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定四步。A中凝膠色譜操作及 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳為實(shí)驗(yàn)操作過程的技術(shù)?！敬鸢浮緾7、 （2012 徐州模擬）PCR是種體外迅速擴(kuò)增 DNA片段的技術(shù)，下列有關(guān)PCF過程的敘述，不正確的A. 變性過程中破壞的是 DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵B. 復(fù)性過程中引物與 DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對原則完成的C. 延伸過程中需要 DNA聚合酶、ATP和四種核糖核苷酸D. PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度

19、較高【解析】PCR是一種體外迅速擴(kuò)增 DNA片段的技術(shù)，其延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP和四種脫氧核苷酸。【答案】C&蛋白質(zhì)的分離與純化技術(shù)是蛋白質(zhì)研究的重要技術(shù)。下列有關(guān)敘述不正確的是（）A. 根據(jù)蛋白質(zhì)分子不能透過半透膜的特性，可將樣品中各種不同的蛋白質(zhì)分離B. 根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小等，可通過電泳分離蛋白質(zhì)C. 根據(jù)蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小，可通過凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)D. 根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同，可通過離心沉降法分離蛋白質(zhì)【解析】蛋白質(zhì)分子不能透過半透膜，而溶液中的小分子物質(zhì)則可以透過半透膜，因此可以將蛋白質(zhì) 和溶液中的小分子物質(zhì)分離?！敬鸢浮緼9、 以下關(guān)于

20、血紅蛋白提取和分離的過程及原理敘述正確的是（）A. 紅細(xì)胞洗滌過程中要加入5倍體積的蒸餾水，重復(fù)洗滌3次B. 將血紅蛋白溶液放在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCI溶液中透析12小時C. 凝膠裝填在色譜柱內(nèi)要均勻，不能有氣泡存在D. 蛋白質(zhì)通過凝膠時，相對分子質(zhì)量較大的移動速度慢【解析】紅細(xì)胞洗滌過程中要加入5倍體積的生理鹽水，重復(fù)洗滌3次目的是除去雜蛋白。透析時使用物質(zhì)的量濃度為 20 mmol/L的磷酸緩沖液，而不是用0.9%的NaCI溶液。蛋白質(zhì)通過凝膠時，相對分子質(zhì)量較大的在凝膠外部移動，移動速度快。在裝填凝膠柱時，不得有氣泡存在，氣泡會攪亂洗脫液中蛋白 質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果?！敬鸢浮緾

21、10、 下圖是用除去DNA的濾液進(jìn)行血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)的裝置，下列有關(guān)敘述不正確的是 （）A. 首先用圖甲裝置對濾液進(jìn)行處理，其目的是去除相對分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)B. 圖乙裝置的試管中收集到的液體中最先得到的是相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)C. 用圖乙裝置分離血紅蛋白時，待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時，用試管收集流出液，每管收集5 mL連續(xù)收集D. 圖丙裝置中電泳法分離提純血紅蛋白的原理是血紅蛋白帶有一定量的電荷，在電場的作用下向一極移動【解析】用圖甲裝置對濾液進(jìn)行處理，其目的是去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。圖乙裝置表示通過凝 膠色譜法分離蛋白質(zhì)的過程。蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量較大，被排阻在凝膠顆粒的

22、外面，在顆粒之間迅速通 過?！敬鸢浮緼11、下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）試劑操作作用檸檬酸鈉溶液與雞血混合防止血液凝固B 蒸餾水與雞血細(xì)胞混合保持細(xì)胞形狀C 蒸餾水加入到溶解有DNA的 NaCl溶液中析出蛋白質(zhì)冷卻的酒精加入到過濾后含 DNA的 NaCl溶液中產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)【解析】檸檬酸鈉溶液有抗凝血的作用。第一次加入蒸餾水是為了讓細(xì)胞吸水漲破。在濃NaCI溶液（2 mol/L）中，DNA核蛋白的溶解度很大，而 RNA核蛋白的溶解度很小，在稀 NaCI溶液（0.14 mol/L）中DNA 的溶解度最低，蛋白質(zhì)的溶解度很高，而出現(xiàn)鹽溶現(xiàn)象。用乙醇沉淀法可使其他物質(zhì)溶于酒

23、精而進(jìn)一步純化DNA但不會出現(xiàn)顏色反應(yīng)?！敬鸢浮緼12、PCR般要經(jīng)過三十多次循環(huán)，從第二輪循環(huán)開始，上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參與反應(yīng)，由引物I延伸而成的 DNA單鏈做模板時將（）A. 仍與引物I結(jié)合進(jìn)行 DNA子鏈的延伸B. 無需與引物結(jié)合，在酶的作用下從頭合成子鏈C. 同時與引物I和引物H結(jié)合進(jìn)行子鏈延伸D. 與引物H結(jié)合進(jìn)行 DNA子鏈的延伸【解析】PCR擴(kuò)增中，從第二輪循環(huán)開始由引物I延伸而成的DNA單鏈做模板時將與引物H結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延伸；由引物H延伸而成的DNA單鏈做模板時將與引物I結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延伸?！敬鸢浮緿13、 PCR多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)是一項在生物體外復(fù)制特

24、定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，如圖表示合 成過程。下列說法錯誤的是 （）94 T：二551172乜B1CDNA樣品兩個DNA分子A. A過程高溫使DNA變性解旋，該過程不需要解旋酶的作用B. C過程要用到的酶在高溫下失活，因此在PCRF增時需要再添加C. 如果把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記，游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記，控制“94C55C72C”溫度循環(huán)3次，則在形成的子代 DNA中含有15N標(biāo)記的DNA占25%D. PCR中由堿基錯配引起的變異屬于基因突變【解析】高溫所起的作用類似于解旋酶，使雙鏈DNA變?yōu)閱捂?。C過程為PCR技術(shù)的延伸階段，當(dāng)系統(tǒng)溫度上升至72C左右時，溶液中的四種脫氧核苷酸

25、在DNA聚合酶的作用下合成新的DNA鏈。Taq DNA聚合酶是耐熱的，高溫下不變性，所以一次性加入即可。PCR技術(shù)遵循半保留復(fù)制的特點(diǎn)。經(jīng)過三次循環(huán)，共產(chǎn)生23個DNA分子，其中有2個DNA分子含有15N標(biāo)記?；蛑械膲A基對改變屬于基因突變。【答案】B14、 在采用雞血為材料對 DNA進(jìn)行粗提取的實(shí)驗(yàn)中，如果需要進(jìn)一步提取雜質(zhì)較少的DNA可以依據(jù) 的原理是（）A. 在物質(zhì)的量濃度為 0.14 mol/L的氯化鈉溶液中 DNA的溶解度最小B. DNA遇二苯胺在沸水浴的條件下會變成藍(lán)色C. DNA不溶于酒精而細(xì)胞中的一些物質(zhì)易溶于酒精D. 質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的檸檬酸鈉溶液具有抗凝血作用【解

26、析】由于DNA不溶于酒精，而混雜在 DNA中的某些細(xì)胞中的物質(zhì)易溶于酒精，所以向含有雜質(zhì)的DNA中加入95%勺冷酒精，可以進(jìn)一步提純 DNA【答案】C15、 下圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實(shí)驗(yàn)裝置。下列相關(guān)敘述正確的是（）A. 血紅蛋白在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有調(diào)節(jié)功能B. 甲裝置中A是蒸餾水，乙裝置中 C溶液的作用是洗脫血紅蛋白C. 甲裝置的目的是去除樣品中分子量較大的雜質(zhì)D. 乙裝置分離時，待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時，用試管收集流出液【解析】血紅蛋白在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有運(yùn)輸功能；甲裝置中A應(yīng)是磷酸緩沖液；甲裝置的目的是去除樣品中分子量較小雜質(zhì)?！敬鸢浮緿二、非選擇題

27、16、紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成，血紅蛋白的主要功能是攜帶02或CO2我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來提取和分離血紅蛋白。請回答下列 有關(guān)問題： 血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步： 、和。（2）實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。 加入檸檬酸鈉的目的是 一。 在樣品處理中包括紅細(xì)胞的洗滌、 、分離血紅蛋白溶液、透析。 洗滌紅細(xì)胞的目的是 ，你如何知道紅細(xì)胞已洗滌干凈? 分離紅細(xì)胞時對離心速度和離心時間的要求是 若離心速度過高和時間過長結(jié)果會怎樣？ 。(3) 收集的血紅蛋白溶液在透析袋中透析，這就是樣品的粗分離。 透析的目的是。 透析的原理是。(4) 然后通過凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。 樣品純化的目的是。 血紅蛋白有什么特點(diǎn)？ 。這一特點(diǎn)對進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離有什么意義？【解析】分離提