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文檔簡介
1、.成績批閱人日期臺 州 學(xué) 院醫(yī)學(xué)院實驗報告班級: 學(xué)號: 姓名: 實驗課程:機能學(xué)實驗實驗項目:消化道平滑肌的生理特性和藥物的影響實驗分室:實驗日期 2015年 6 月 3 日主要內(nèi)容(參考)一、實驗?zāi)康?三、實驗儀器與材料 五、實驗數(shù)據(jù)處理二、實驗原理 四、實驗內(nèi)容、方法與步驟 六、實驗結(jié)果與分析一、 實驗?zāi)康?1、學(xué)習(xí)離體腸段平滑肌的實驗方法。 2、了解腸段平滑肌的生理特性。 3、觀察某些藥物對離體平滑肌的作用二、實驗原理哺乳動物消化管平滑肌與肌肉組織共有的特性,如興奮性、傳導(dǎo)性和收縮性等。但消化管平滑肌又有其特點,即興奮性較低,收縮緩慢,富有伸展性,具有緊張性、自動節(jié)律性,對化學(xué)、溫度
2、和機械牽張刺激較敏感等。這些特性可維持消化管內(nèi)一定壓力,保持胃腸等一定的形態(tài)和位置,適合于消化管內(nèi)容物的理化變化,在體內(nèi)受中樞神經(jīng)系統(tǒng)和體液因素的調(diào)節(jié)。將離體組織器官置于摸擬體內(nèi)環(huán)境的溶液中,可在一定時間內(nèi)保持其功能。本實驗以臺式液作灌流液,在體外觀察及記錄哺乳動物離體腸段的一般生理特性。三、實驗儀器與材料兔、恒溫平滑肌槽、支架、燒杯、20ml注射器、張力傳感器、生物機能實驗系統(tǒng)、溫度計、臺式液、腎上腺素(1:10000)、乙酰膽堿(1:10000)、阿托品針劑(1支)。四、實驗內(nèi)容、方法與步驟1、安裝麥?zhǔn)显〔?恒溫平滑肌浴槽可用來記錄消化道平滑肌的收縮活動,分為外槽和內(nèi)槽,內(nèi)槽用來浸浴實驗標(biāo)
3、本,外槽內(nèi)有恒溫自來水流動以加熱內(nèi)槽中的臺氏液,使其溫度保持在37左右。小腸標(biāo)本一端固定在內(nèi)槽底部的鐵鉤上,另一端連至肌肉張力換能器的懸臂上。換能器與生物信號采集處理系統(tǒng)通道相連并輸入計算機。內(nèi)槽中的臺氏液以剛能淹沒腸管為宜。內(nèi)槽底部還有通空氣和排液的共同開口,通過此開口可排液和供給標(biāo)本所需氧氣。 2、制備離體兔腸段 取禁食24h的健康家兔,一手提后肢使頭部自然下垂,另一手用木槌猛擊兔后頭延髓部,致其昏迷后立即剖開腹腔,找到胃幽門與十二指腸交界處。在十二指腸起始端扎一線,取出十二指腸、空腸、放入冷臺式液內(nèi)。先用20ml注射器沖洗內(nèi)容物,沖洗干凈后剪成若干約1.5cm長的小腸段(每一實驗小組一段
4、)在其兩端結(jié)扎,一端做一短線環(huán)固定在通氣的浴皿內(nèi),另一端扎線與張力傳感器相連,此線不宜過長且必須豎直。將腸段完全浸浴在調(diào)好溫度的平滑肌槽中。3、開啟生物機能實驗系統(tǒng),接通與張力傳感器相連的通道。固定管并調(diào)節(jié)扎線與張力傳感器,使腸段運動自如又能牽動傳感器(注意:扎線不可貼壁或過緊過松)。調(diào)節(jié)增益與掃描速度,使腸段的運動曲線清晰地顯示在顯示器上并記錄腸段活動曲線。4、實驗觀察(1)記錄腸段正常運動曲線,觀察基線水平、收縮幅度、節(jié)律及波形特點。用新鮮37臺式液沖洗,待恢復(fù)正常(注意作好標(biāo)記,下同)。(2)加腎上腺素 在內(nèi)槽臺氏液中加入12滴腎上腺素(1:10000),觀察并記錄曲線變化。曲線變化后立
5、即更換新的38的臺氏液。 (3)加乙酰膽堿 在內(nèi)槽臺氏液中加入12滴乙酰膽堿(1:10000),觀察并記錄曲線變化。依上法沖洗。(4)在內(nèi)槽臺氏液中加入24滴阿托品(1:10000),2min后再加12滴乙酰膽堿(1:10000),記錄并觀察曲線變化,與項目(3)進(jìn)行比較。依上法沖洗。(5)環(huán)境pH的影響 加入HCL34滴,觀察平滑肌收縮活動的改變。在其基礎(chǔ)上再滴34滴NaOH觀察腸平滑肌的反應(yīng)。標(biāo)記,沖洗。 (6)溫度的影響 將內(nèi)槽換成25臺式液,同時關(guān)閉恒溫加熱裝置,使內(nèi)槽臺氏液溫度逐漸降至25,并記錄曲線變化,同時觀察腸段緊張度變化。五、實驗數(shù)據(jù)處理 六、實驗結(jié)果與分析正常小腸:正常情況
6、下,離體小腸平滑肌在臺氏液中可以自由緩慢收縮,但其節(jié)律性不規(guī)則。,受體激動藥,加腎上腺素:在浴槽中加入腎上腺素后,可見離體腸管活動減弱,描計曲線出現(xiàn)收縮頻率變慢,幅度減小以及基線下移。因為腸肌細(xì)胞膜上存在于受體, 前者又分為抑制性受體和興奮性受體,腎上腺素作用于抑制性受體,引起腸肌膜上一種特異性受體活化,使鉀離子外流增多,細(xì)胞膜發(fā)生超極化,腸肌興奮性降低,肌張力下降,同時腎上腺素還作用于受體,它的激活引起腸肌細(xì)胞膜上的cAMP合成增多,激活了腸肌膜及肌漿網(wǎng)上鈣離子泵活動,使肌漿中鈣離子濃度降低使肌張力下降。受體激活后促使鉀離子及鈣離子外流增加,加速膜的超極化,促進(jìn)了肌張力的減低。擬膽堿藥的影響
7、:在浴槽中加入乙酰膽堿后可見離體腸管活動增強,描計曲線出現(xiàn)收縮頻率變快,幅度增加。出現(xiàn)上述現(xiàn)象是因為消化道平滑肌產(chǎn)生動作電位的離子基礎(chǔ)與鈣離子的內(nèi)流有關(guān),乙酰膽堿可與肌膜上的M受體結(jié)合,使得兩類通道開放:一類為電位敏感性鈣離子專用通道,另一類為特異性受體活化鈣離子專用通道。前一類對Ach敏感,小劑量Ach即引起開放;后一類對Ach相對不敏感,只有大劑量才會引起開放。這兩類通道開放都使得肌漿中鈣離子增高,進(jìn)而激活肌纖蛋白肌凝蛋白ATP系統(tǒng),使平滑肌收縮,肌張力增加??鼓憠A藥的影響:當(dāng)加入抗膽堿藥阿托品后,現(xiàn)象消失。因為阿托品為M受體阻斷藥,作用機制為擬膽堿藥的拮抗效應(yīng)。pH的影響:在浴槽中加入鹽
8、酸溶液后,離體腸管活動減弱,描計曲線出現(xiàn)收縮幅度降低,頻率變慢。這是由于細(xì)胞外氫離子升高,鈣離子通道的活性受到抑制,使得鈣離子內(nèi)流減少。氫離子升高能干擾肌肉的代謝和肌絲滑行的生化過程,氫離子能與鈣離子競爭鈣調(diào)蛋白的結(jié)合位點而使肌球蛋白ATP酶活性降低,使肌原纖維對鈣離子的敏感性和鈣離子從肌質(zhì)網(wǎng)的釋放量減少。再加入NaOH后腸管活動出現(xiàn)相反的情況,及腸管活動增強,這是因為NaOH可以中和氫離子,改變細(xì)胞外液的PH值,PH過高過低,收縮幅度及張力都會降低,最適PH時收縮效果最好。溫度的影響:將平滑肌置于25臺氏液可以看出小腸收縮明顯減弱,因為平滑肌收縮需要酶催化,而溫度在一定范圍內(nèi)下降時鈉鉀泵及離
9、子通道的酶的催化活性也會降低,這就可以影響鈉鉀鈣等離子的轉(zhuǎn)運,繼而影響去極化和復(fù)極化的速度,進(jìn)而動作電位的產(chǎn)生速率和幅度就會下降,所以平滑肌的收縮程度會減弱。消化道平滑肌的一般生理特性:1、消化道平滑肌的電興奮性較骨骼肌為低。平滑肌收縮的潛伏期,收縮期和舒張期所占的時間也比骨骼肌的長得多,而且變異很大。2、消化道平滑肌在離體后,臵入適宜的環(huán)境內(nèi),仍能進(jìn)行良好的節(jié)律性運動,但其收縮很緩慢,節(jié)律性遠(yuǎn)不如心肌那樣規(guī)則。3、消化道平滑肌常保持在一種微弱的持續(xù)收縮狀態(tài),即具有一定的緊張性。4、消化道平滑肌能適應(yīng)實際的需要而作很大的伸展。5、消化道平滑肌對電刺激較不敏感,但對于牽張、溫度和化學(xué)刺激則特別敏感,輕微的刺激常可引起強烈地收縮。注意事項:1、恒溫儀中需加滿水,然后打開電源,禁止無水加熱,水銀溫度計應(yīng)避免與硬物碰撞。2、實驗過程中,必須保持標(biāo)本的供氧,供氧速度已出現(xiàn)一個個小氣泡為宜,充氣過猛會導(dǎo)致標(biāo)本較大幅度的擺動。3、每次加要錢,必須先準(zhǔn)備好更換用的3738臺氏液。4、效應(yīng)一旦出現(xiàn),立即換液
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