人教版微生物培養(yǎng)與利用單元檢測

1、2017屆人教版微生物培養(yǎng)與利用單元檢測（ ）都需要在火焰旁進(jìn)行接種 正確；平板劃線法采用接 錯誤；純化時，要進(jìn)行無1 用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時 可以用相同的培養(yǎng)基都需要使用接種針進(jìn)行接種都可以用來計(jì)數(shù)活菌A .B .C.D .解析 平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基，故 種針進(jìn)行操作，而稀釋涂布平板法采用涂布器進(jìn)行操作，故菌操作，需要在火焰旁接種，避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基，故正確；平板劃線法一般用于分離而不是計(jì)數(shù)，故錯誤。答案 C2 .下列有關(guān)培養(yǎng)基和菌種鑒定的敘述不正確的是（）A .植物組織培養(yǎng)常用的是固體培養(yǎng)基B .可利用固體培養(yǎng)基上菌落的特征來判斷和鑒別細(xì)

2、菌的類型C.利用剛果紅培養(yǎng)基上是否形成透明圈來篩選纖維素分解菌D .在無氮培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌 解析 在只含有尿素作為氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌。答案 D3.通過實(shí)驗(yàn)測定土壤中的細(xì)菌數(shù)量，下列與此操作有關(guān)的敘述中，不正確的是（ ）A .用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B .取104、105倍的土壤稀釋液0.1 mL,分別涂布于各組平板上C .將培養(yǎng)皿倒置，37C恒溫培養(yǎng)2448小時D .選擇菌落數(shù)在300個以上的培養(yǎng)皿進(jìn)行計(jì)數(shù)解析 檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)，用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后 倒平板，取104、105、106倍的

3、土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL,分別涂布于各組平板上，將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置，37C恒溫培養(yǎng)2448小時，在確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。答案 D4 .用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確的是（）A .涂布了一個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230B .涂布了兩個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是215和260,取平均值238C.涂布了三個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、212和256,取平均值163D .涂布了三個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、240和250,取平均值233解析 在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時，一定要涂布至少3個平板作為

4、重復(fù)組，才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性，所以A、B不正確。C項(xiàng)雖涂布了 3個平板，但是，其中 1個平板的計(jì)數(shù)結(jié)果 與另兩個相差太遠(yuǎn)，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，此時，不能簡單地將3個平板的計(jì)數(shù)值用來求平均值。答案 D5下表為某培養(yǎng)基的配方，下列敘述正確的是（）成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊紅美藍(lán)蒸餾水含量10 g10 g2 g0.4 g0.065 g1 000 mLA. 從物理性質(zhì)看該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基，從用途看該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基B. 該培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖，屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨C. 該培養(yǎng)基缺少提供生長因子的物質(zhì)D. 該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)合適的pH后就可以接種使用答案 B解析

5、分析表中成分可知，該培養(yǎng)基中沒有凝固劑，為液體培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分齊 全，但存在伊紅、美藍(lán)等鑒別物質(zhì)，屬于鑒別培養(yǎng)基，A項(xiàng)錯誤；該培養(yǎng)基中的蛋白胨既是唯一的氮源，也是碳源，而葡萄糖是絕大多數(shù)生物最常利用的碳源，B項(xiàng)正確；該培養(yǎng)基中存在的無機(jī)鹽和蛋白胨中的某些物質(zhì)可以看作是生長因子，C項(xiàng)錯誤；培養(yǎng)基調(diào)節(jié)完 pH還要進(jìn)行滅菌等操作后，才能使用，D項(xiàng)錯誤。6微生物培養(yǎng)過程中，要十分重視無菌操作。現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的許多方面也要進(jìn)行無菌操作，防止雜菌污染。請分析下列操作中錯誤的是（） 煮沸消毒可以殺死微生物的營養(yǎng)細(xì)胞和部分芽孢 接種操作要在酒精燈火焰附近進(jìn)行 無菌繁殖脫毒苗時，植物的外植體要進(jìn)行消

6、毒 家庭制作葡萄酒時要將容器和葡萄進(jìn)行滅菌 培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌A. B. C. D.答案 D解析 無菌操作包括消毒和滅菌。需進(jìn)行消毒處理的有植物的外植體及操作人員的雙手等， 需進(jìn)行滅菌的有器皿、培養(yǎng)基、添加劑（指示劑或染色劑）等。煮沸可以殺死微生物的營養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢，屬于消毒；為防止空氣中雜菌污染，接種時要在酒精燈火焰附近進(jìn)行；家 庭制作葡萄酒時所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌，故不能滅菌；培養(yǎng)基常進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。故 操作錯誤。7細(xì)菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理，這些方法依次 用于殺滅哪些部位的雜菌 （）A. 接

7、種環(huán)、手、培養(yǎng)基C.培養(yǎng)基、手、接種環(huán) 答案 CB. 高壓鍋、手、接種環(huán)D.接種環(huán)、手、高壓鍋解析滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠(yuǎn)喪失生長繁殖的能力，對于培養(yǎng)基、操作器皿和接種環(huán)等都需要滅菌。消毒僅指殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的病原菌而對被消毒的物體基本無害，如操作者的手和衣著需要消毒處理。高壓蒸汽通常用于培養(yǎng)基的滅菌。用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法。火焰灼燒可以迅速徹底地滅菌，適用于微生物的接種工具， 如接種環(huán)。8. 下圖中甲是稀釋涂布平板法中的部分操作，乙是平板劃線法的操作結(jié)果。ImL ImL ImL ImL ImL 1ml-書液旨目目目旨豈稀悴液 稀釋液歸祥液怖禪液怖悴液怖秫液屮下

8、列敘述中錯誤的是（）A. 甲中涂布前要將涂布器灼燒，冷卻后才能取菌液B. 對于濃度較高的菌液，如甲中的稀釋倍數(shù)僅為102，則所得的菌落不一定是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成C. 乙培養(yǎng)皿中所得的菌落都符合要求D. 乙中的連續(xù)劃線的起點(diǎn)是上一次劃線的末端答案 C解析 灼燒后的涂布器如果沒有冷卻就接觸菌種， 會將菌體殺死， A 正確。 稀釋倍數(shù)過低會 導(dǎo)致多個菌體聚集在一起繁殖成菌落，B 正確。 平板劃線法中最后一次劃線的末端處形成的菌落才是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成，這種菌落才符合要求， C 錯誤。連續(xù)劃線中，除了 第一次劃線外， 每一次劃線的起點(diǎn)是上一次劃線的末端， 目的是使得菌體密度越來越小，

9、保 證最后劃線末端處的菌落是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成。9. 選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某一種或某一類微生物的特殊營養(yǎng)要求或?qū)σ恍┪锢怼?化學(xué)抗性而設(shè)計(jì) 的培養(yǎng)基。 利用這種培養(yǎng)基可以將所需要的微生物從混雜的微生物中分離出來。 為選擇酵母 菌和硝化細(xì)菌，應(yīng)選用的培養(yǎng)基分別為 （ ）A. 伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基、含青霉素培養(yǎng)基B .含青霉素培養(yǎng)基、含氨的無機(jī)培養(yǎng)基C. 含氨的無機(jī)培養(yǎng)基、含青霉素培養(yǎng)基D. 含青霉素培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基答案 B解析 酵母菌是真菌， 通?？梢杂煤嗝顾氐呐囵B(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)， 因?yàn)榍嗝顾匾种萍?xì)菌生 長，但不能抑制真菌生長。 硝化細(xì)菌為自養(yǎng)型生物， 能夠利用氨轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯跛岷拖跛崴尫?

10、的能量， 把無機(jī)物轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)物以維持自身生命活動， 利用含氨的無機(jī)培養(yǎng)基可進(jìn)行選擇培 養(yǎng)。10. （2015江蘇，19）做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時，下列敘述正確的是（）A. 高壓滅菌加熱結(jié)束時，打開放氣閥使壓力表指針回到零后，開啟鍋蓋B. 倒平板時，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C. 為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D. 用記號筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時，應(yīng)標(biāo)記在皿底上答案 D解析 A 項(xiàng)錯，高壓滅菌加熱結(jié)束后，讓其自然冷卻，待壓力表的壓力降到零時，再慢慢打 開排氣閥以排除余氣， 然后才能開蓋取物； B 項(xiàng)錯，倒平板時左手拿培養(yǎng)皿， 右手拿錐形瓶， 左手將培養(yǎng)皿打

11、開一條稍大于瓶口的縫隙， 倒入培養(yǎng)基后立即蓋上培養(yǎng)皿皿蓋； C 項(xiàng)錯， 灼 燒接種環(huán)之后，要在火焰旁冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種；D 項(xiàng)對，在微生物的培養(yǎng)中，一般將培養(yǎng)皿倒臵，在皿底上用記號筆做標(biāo)記。11. （2013江蘇，18）某研究小組從有機(jī)廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是（）A. 培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌B. 轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線C. 接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D. 培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次答案 B解析 培養(yǎng)基滅菌后再分裝到培養(yǎng)皿中； 轉(zhuǎn)換劃線角度后要灼燒接種環(huán)， 冷卻后再從上次劃 線的末端開始進(jìn)行劃線； 接種后的培養(yǎng)皿必須放在恒

12、溫箱中進(jìn)行培養(yǎng)，一般每隔12 h或24 h觀察一次。12. （2012北京，5）高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，在接種時不進(jìn)行嚴(yán)格無菌操作對實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響最大的一項(xiàng)是 （）A. 將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中B. 將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上C. 將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上D. 將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上答案 C解析 在釀制葡萄酒的過程中， 如果滅菌不徹底會影響葡萄酒的品質(zhì)， 但影響不大； 在制作 腐乳的過程中，發(fā)酵過程有多種微生物的參與，所以該過程不進(jìn)行嚴(yán)格的無 菌操作對結(jié)果影響不大； 在植物組織培養(yǎng)過程中， 如果滅菌不徹底， 雜菌產(chǎn)生的物質(zhì)會影響 外植體的生長， 甚至殺死外植體，

13、導(dǎo)致培養(yǎng)失敗， 對結(jié)果影響最大；土壤浸出液本身就含有 大量的雜菌， 另外在選擇培養(yǎng)基上只能生存我們所要篩選的細(xì)菌， 所以無菌操作不嚴(yán)格， 對 結(jié)果影響也不會太大。13下列關(guān)于微生物的分離和培養(yǎng)的敘述中，正確的是（）A. 進(jìn)行微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)瓶進(jìn)行消毒處理B. 對細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)可用平板劃線法和稀釋涂布平板法C. 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染D. 用含剛果紅的尿素培養(yǎng)基篩選鑒別出能分解尿素的菌株答案 C解析 選項(xiàng)A，應(yīng)對培養(yǎng)瓶進(jìn)行滅菌處理。選項(xiàng)B,對細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時不能用平板劃線法。選項(xiàng)D，用含酚紅的尿素培養(yǎng)基篩選和鑒別出分解尿素的菌株。14用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設(shè)置

14、的對照是（）A. 未接種的選擇培養(yǎng)基B. 未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C. 接種了的選擇培養(yǎng)基D. 接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基答案 D解析 選擇的目的是為了分離、 篩選，對照遵循的原則是單一變量，因此用接種了的普通培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基進(jìn)行對照， 在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng) 基上的數(shù)目。15、在農(nóng)田土壤的表層自生固氮菌較多，用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可將自生固氮菌與其他細(xì)菌分開，對培養(yǎng)基的要求是（）加抗生素不加抗生素加氮素不加氮素加葡萄糖不加葡萄糖 37 C恒溫箱中培養(yǎng) 2830 C溫度下培養(yǎng)A. B.C.D.答案 C解析 細(xì)菌對抗生素敏感， 故培養(yǎng)基

15、中應(yīng)不加抗生素；自生固氮菌有固氮功能，故培養(yǎng)基中不需要加氮素；自生固氮菌是異養(yǎng)的， 故培養(yǎng)基中應(yīng)該加葡萄糖；其生長繁殖的適宜溫度是2830 C。16、 下面關(guān)于土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)的敘述中，正確的是（）A. 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素B. 篩選分解尿素的細(xì)菌時應(yīng)以尿素作為培養(yǎng)基中的唯一營養(yǎng)物質(zhì)C. 統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)目時一般用平板劃線法D. 在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變藍(lán)，則表明篩選到了分解尿素的細(xì)菌答案 A解析 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，A正確；篩選分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中，采用的是以尿素為唯一 “氮源”的培養(yǎng)基，B錯誤；統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌

16、數(shù)目一般用稀釋涂布平 板法，C錯誤；在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果 pH升高，指示劑變紅，這樣就能初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素，D錯誤。17、 .下列關(guān)于微生物接種的描述，正確的是（）A. 平板劃線法只用于固體培養(yǎng)基的接種，而稀釋涂布平板法只用于液體培養(yǎng)基的接種B. 平板劃線法不能用于微生物的計(jì)數(shù)，而稀釋涂布平板法可用于微生物的計(jì)數(shù)C. 利用平板劃線法不能得到單菌落，而利用稀釋涂布平板法能得到單菌落D. 平板劃線法所用的接種工具不需要滅菌，而稀釋涂布平板法所用的接種工具需要滅菌 答案 B解析這兩種接種方法都可用于固體培養(yǎng)基的接種，都能用于形成單菌落，接種器具都

17、要進(jìn)行嚴(yán)格滅菌處理，A、C、D錯誤。18、分離土壤中分解選項(xiàng)尿素瓊脂糖葡萄糖硝酸鹽A+B一一一一C+一D+一一+注：“ + ”表示加入，一”表示未加入。答案 C解析 分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，培養(yǎng)基中要有碳源， 且尿素作為唯一的氮源， 不能添加硝酸鹽。19、下列培養(yǎng)基配方中能作為選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基的依次是()原料蛋白胨(g)10101010乳糖(g)5555 蔗糖(g)5555KH2PO4(g)2222 丁伊紅(g)0.4美藍(lán)(g)0.065瓊脂(g)1020NaCI(g)20蒸餾水(mL)1 0001 0001 0001 000 B.A.C.D.答案 D解析在培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍(lán)，可以

18、用來鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌，有伊紅和美藍(lán)的培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基。高濃度的食鹽可以抑制多種細(xì)菌的生長，但不影響金黃色葡萄球菌的生長，從而可以將金黃色葡萄球菌分離出來，有高濃度食鹽的培養(yǎng)基為選擇培 養(yǎng)基。20、 下列關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述中，不正確的是()A. 用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高壓蒸汽滅菌后倒平板B. 取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL涂布到不同平板上培養(yǎng)C將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置，37 C恒溫培養(yǎng)2448小時D. 確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)答案 D解析 制備培養(yǎng)基時，需要將培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌，

19、A正確；接種方法為稀釋涂布平板法，即需要制備不同的土壤稀釋液，B正確；對照組和實(shí)驗(yàn)組需要放臵在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，C正確；一般選擇菌落數(shù)在30300間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，D錯誤。21. 下面從土壤中篩選纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)步驟，正確的是() 土壤取樣 稱取10 g 土壤加入盛有90 mL無菌水的錐形瓶中 吸取0.1 mL進(jìn)行平板涂布 依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度A.tttB.tttC. TTTD.TTT答案 C解析 在分離土壤中某細(xì)菌時，應(yīng)先選取土樣 (10 g)，然后加無菌水獲得土壤浸出液，并進(jìn) 行不同倍數(shù)稀釋，最后將稀釋液涂布到培養(yǎng)基表面進(jìn)行培養(yǎng)，并分離和

20、計(jì)數(shù)。22、.以下有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐的敘述中，不正確的是()A. 在大腸桿菌的分離和培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，劃線后蓋好培養(yǎng)皿，再將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)B. 在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌，符合生物與環(huán)境相適應(yīng)的生物學(xué)觀點(diǎn)C. 在釀酒生產(chǎn)上，常向發(fā)酵罐中加少量尿素，其目的是作為氮源，用于酵母菌合成蛋白質(zhì)和核酸D. 不能用稀釋涂布平板法來測定土壤溶液中某活菌數(shù)目答案 D 23、高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩選出了能高效生產(chǎn)高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示。挑出蔭落=I號培養(yǎng)基從物理狀態(tài)來看，屬于固體培養(yǎng)基，配制時要加入作為凝固劑，從用途來看屬于選擇培養(yǎng)基，應(yīng)以 作為唯一碳源

21、。(2) 配置固體培養(yǎng)基的基本步驟是()A. 計(jì)算、稱量、倒平板、溶化、滅菌B. 計(jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌C計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板D. 計(jì)算、稱量、滅菌、溶化、倒平板(3) 溶化時，燒杯中加入瓊脂后要不停地 ，防止瓊脂糊底引起燒杯破裂。對培養(yǎng)基滅菌的方法一般為 。(4) 過程是 ，過程所使用的接種方法是 法。(5) 部分嗜熱菌在I號培養(yǎng)基上生長時可釋放 分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈，挑選相應(yīng)的菌落，接種到n號培養(yǎng)基進(jìn)一步分離純化后，再對菌種進(jìn)行培養(yǎng)。答案(1)瓊脂 淀粉(2)C(3)攪拌 高壓蒸氣滅菌(4)稀釋 涂布分離(5)淀粉酶 擴(kuò)大解析固體培養(yǎng)基通常加入瓊脂作為

22、凝固劑。本實(shí)驗(yàn)的目的是獲得產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，故其選擇培養(yǎng)基中應(yīng)以淀粉作為唯一碳源。配臵固體培養(yǎng)基的基本步驟是計(jì)算、稱量、 溶化、滅菌、倒平板。配臵培養(yǎng)基時加熱溶化時，要注意加入瓊脂后要不斷攪拌，防止瓊脂 糊底和溢出。對培養(yǎng)基的滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌。仔細(xì)觀察題圖可知， 過程是菌液稀釋，過程是采用涂布法接種的。 能產(chǎn)生淀粉酶的部分細(xì)菌能分解利用淀粉，其菌落周圍會出現(xiàn)透明圈，取這樣的菌落再分離純化可獲得相應(yīng)菌種，以后可以擴(kuò)大培養(yǎng)用于生產(chǎn)。24、下圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法，請回答相關(guān)問題。圖甲團(tuán)己(1) 圖甲是利用 法進(jìn)行微生物接種，圖乙是利用 法進(jìn)行微生物接種。這兩種方法所用的接

23、種工具分別是 和;對這兩種接種工具進(jìn)行滅菌和消毒的方法依次是 和酒精消毒。(2) 接種操作為什么一定要在火焰附近進(jìn)行？(3) 接種后，在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)細(xì)菌時為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng)?(4) 如圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，其接種方法是(填“圖甲”或“圖乙”)。(2) 火焰附近存在著無菌區(qū)域(3) 避免培養(yǎng)過程產(chǎn)生的水分影響微生物的生長(4) 圖乙解析 圖甲和圖乙分別是平板劃線法和稀釋涂布平板法，這兩種方法所用的接種工具分別是接種環(huán)和涂布器。由于在酒精燈火焰附近存在著無菌區(qū)域，因此接種常在火焰附近進(jìn)行。在微生物培養(yǎng)過程中會產(chǎn)生水，對微生物的生長造成影響，故需要倒臵培養(yǎng)。25、.苯酚是工業(yè)

24、生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn) 生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，為土壤樣品。請回答下列問題： (1) 中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入 作為碳源，中不同濃度碳源的培養(yǎng)基(A.影響；B.不影響)細(xì)菌的數(shù)量，如果要測定中活細(xì)菌數(shù)量，常采用法。(2) 為對照，微生物在中不生長，在中生長，與培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于使用法可以在上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時進(jìn)行倒置培養(yǎng)的原因是 實(shí)驗(yàn)過程中如何防止其他微生物的污染?答案(1)苯酚 A 稀釋涂布平板的培養(yǎng)基沒有加入苯酚作為碳源，的培

25、養(yǎng)基加入了苯酚作為碳源稀釋涂布平板法或平板劃線防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基(3) 培養(yǎng)基滅菌，接種環(huán)境滅菌，接種過程進(jìn)行無菌操作解析 根據(jù)微生物對營養(yǎng)的需求，在培養(yǎng)基中加入或不加某些物質(zhì)以達(dá)到促進(jìn)目的菌生長， 抑制或阻止其他雜菌生長的目的，然后再用稀釋涂布平板法、平板劃線法或其他方法篩選出單個目的菌落，再接種培養(yǎng)即可獲得純目的菌。為防止培養(yǎng)基中水分蒸發(fā)形成的水珠落入培養(yǎng)基中影響菌體生長，所以要將培養(yǎng)皿倒臵。在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)中要注意單一變量原則和對照原則， 操作中要嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作。26、.下表是某同學(xué)列出的分離土壤中微生物培養(yǎng)基的配方，據(jù)此回答下列問題：培養(yǎng)基配方KH 2PO41.4

26、 gNa2HPO42.1 gMgSO4 7H2O0.2 g葡萄糖10.0 g尿素1.0 g 1瓊脂15.0 g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL(1) 從作用上看，該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基，提供氮源的物質(zhì)是 ，細(xì)菌能利用該氮源是由于體內(nèi)能合成 酶。(2) 在對分離的能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行鑒定時，還需在培養(yǎng)基中加入指示劑，若指示劑變，說明有目的菌株存在。為了測定微生物的數(shù)量，接種時應(yīng)采用 法，某同學(xué)在 4個培養(yǎng)基上分別接種稀釋倍數(shù)為 106的土壤樣液0.1 mL,培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為 180、155、176、129個, 則每毫升原土壤樣液中上述微生物的數(shù)量為，測定的活菌數(shù)比實(shí)際活菌數(shù)（填“

27、低” “高” “基本一致”）。答案（1）選擇 尿素 脲（催化尿素分解的）（2）酚紅紅（3）稀釋涂布平板1.6X 109低解析（1）題干指出表中是分離土壤中微生物的培養(yǎng)基配方，其中尿素是唯一氮源，能生長 的菌落說明能利用尿素中的氮源，所以甲從用途上屬于選擇培養(yǎng)基。以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可以選擇尿素分解菌。（2）在對分離的能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行鑒定時，還需在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，說明有目的菌株存在。（3）純化微生物可以用稀釋涂布平板法和平板劃線法，其中稀釋涂布平板法能用于微生物的計(jì)數(shù)。1 mL原土壤樣液中上述微生物數(shù)量=（180+ 155 + 176 + 129）嗚X 106x 1

28、0= 1.6 X 109個；用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物 的計(jì)數(shù)，但統(tǒng)計(jì)的數(shù)量比實(shí)際數(shù)量會偏少，原因是當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。27、.植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問題：（1）分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分形成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將分解成。（2）在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅（CR）染料時，CR可與纖維素形成 色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的。（3）為從富含纖維素分解菌的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落并加以鑒定，某同學(xué)設(shè) 計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基：酵母膏無機(jī)

29、鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲+一+一+培養(yǎng)基乙+一+、宀“ ” i-t- k a -7- ”a ” i- k a ”注： + 表示 有， 一表示 尢 。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲 （填“能”或“不能”）用于分離纖維素分解菌，原因是;培養(yǎng)基乙（填“能”或“不能”） 用于鑒定纖維素分解菌，原因是 。答案（1）纖維二糖葡萄糖（2）紅透明圈（3）不能液體培養(yǎng)基不能分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒有纖維素（不能形成CR-纖維素紅色復(fù)合物）解析（1）葡萄糖苷酶可將纖維二糖分解成葡萄糖。（2）剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無法形成， 出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，可以通過是否

30、產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。（3）纖維素分解菌分離和鑒別培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，而培養(yǎng)基甲中沒有瓊脂，是液體培養(yǎng)基，要分離和鑒別纖維素分解菌，需要以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基乙沒有纖維素，不能形成CR-纖維素紅色復(fù)合物，無法鑒定纖維素分解菌。28、.（2015全國I , 39）已知微生物 A可以產(chǎn)生油脂，微生物 B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和 油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)。回答有關(guān)問題：（1）顯微觀察時，微生物 A菌體中的油脂通常可用 染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用 （填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”）從菌體中提取。（2）為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落，可從含有油料作物

31、種子腐爛物的土壤中取樣，并應(yīng)選用以 為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。（3）若要測定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用 直接計(jì)數(shù)；若要測定其活菌數(shù)量，可選用 法進(jìn)行計(jì)數(shù)。為了確定微生物 B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度，某同學(xué)測得相同時間內(nèi)，在35 C、40 C、45 C溫度下降解 10 g油脂所需酶量依次為4 mg、1 mg、6 mg，則上述三個溫度中， C條件下該酶活力最小。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)圍繞 C設(shè) 計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。答案 （1）蘇丹川（或蘇丹W ）萃取法（2）油脂 （3）血細(xì)胞計(jì)數(shù)板稀釋涂布平板（4）4540解析（1）生物組織中的油脂能被蘇丹川（或蘇丹IV ）染成橘黃色（或紅色）。（

32、2）為了篩選出能產(chǎn)生脂肪酶的微生物 B的單菌落，我們應(yīng)選用只能讓該菌落生長的選擇性培養(yǎng)基，因此培養(yǎng) 基中只能選用油脂作為唯一碳源的固體培養(yǎng)基。（3）血細(xì)胞計(jì)數(shù)板可用于直接計(jì)數(shù)培養(yǎng)液中的菌體數(shù)，但是不分死活，因此要計(jì)數(shù)活菌數(shù)量要通過稀釋涂布平板法來計(jì)數(shù)。（4）溫度影響酶的活性，在三個溫度中，45 C需酶量最高，說明酶活性最低；在三個溫度實(shí)驗(yàn)中40 C所需酶量最少，低于35 C和45 C所用酶量，說明酶的最適溫度介于35 C和45 C之間，因此應(yīng)圍繞40 C設(shè)計(jì)不同溫度梯度，進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。29、在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)研究上，常需要進(jìn)行微生物的分離和計(jì)數(shù)。（1）下表為兩種微生物的培養(yǎng)基配方：A組KH 2PO4N

33、a2HPO4MgSO4 7H2OP葡萄糖尿素瓊脂1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g15.0 g纖維 素粉NaNO3Na2HPO4 7H2OKH 2PO4MgSO47H2OKCI酵母膏水解 酪素5 g1 g1.2 g0.9 g0.5 g0.5 g0.5 g0.5 g注：上述兩種培養(yǎng)基中的物質(zhì)溶解后，均用蒸餾水定容至1 000 mL。 從功能上來看，上述兩種培養(yǎng)基均屬于 培養(yǎng)基。 如果要對土壤中分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行分離，則需要選擇培養(yǎng)基（填“A”或“ B ”），該培養(yǎng)基中的碳源是 。 在分離尿素分解菌所用的培養(yǎng)基中可加入 指示劑，根據(jù)指示劑的顏色可鑒定某種細(xì)菌能否分解尿素，若有分解

34、尿素的細(xì)菌，培養(yǎng)基將會呈現(xiàn) 。（2）下圖是某同學(xué)采用的接種微生物的方法，請回答下列問題:本實(shí)驗(yàn)采用的接種微生物的方法是法，把聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面，為達(dá)到這一目的，操作上應(yīng)注意：（至少答2項(xiàng)）。三位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中細(xì)菌數(shù)量，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下統(tǒng)計(jì)結(jié)果:甲同學(xué)涂布了兩個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是 乙同學(xué)涂布了三個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是 丙同學(xué)涂布了三個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是236和260,取平均值248;210、240和250,取平均值 233;21、212和256，取平均值163;在三位同學(xué)的統(tǒng)計(jì)中， 同學(xué)的統(tǒng)計(jì)是正確的。答案（1）選擇 A 葡萄糖

35、 酚紅 紅色（2）平板劃線稀釋 每次劃線前接種環(huán)要灼燒；冷卻后從上一次劃線的末端開始劃線乙解析（1）據(jù)題表中的培養(yǎng)基的配方分析，A組中的氮源為尿素，應(yīng)該是篩選尿素分解菌的選擇培養(yǎng)基。B組中的碳源是纖維素，應(yīng)該是篩選纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基。對土壤中分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行分離，需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，應(yīng)當(dāng)選擇A組培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中的碳源是葡萄糖。尿素分解菌可以用酚紅指示劑進(jìn)行鑒定。尿素分解菌產(chǎn)生的脲酶能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘倍筽H升高，使酚紅指示劑呈紅色。（2）據(jù)圖分析，圖示表示平板劃線法接種， 是把聚集的菌種逐步稀釋到培養(yǎng)基的表面，操作上應(yīng)注意每次劃線前接種環(huán)要灼燒；冷卻后從上一次劃線的

36、末端開始劃線。在進(jìn)行平板菌落計(jì)數(shù)時， 應(yīng)選擇菌落數(shù)在30300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，同時為避免誤差應(yīng)選擇至少 3個或3個以上的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)并取平均值。30、.炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病，炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列, 菌落呈卷發(fā)狀，對炭疽病疑似患者，可根據(jù)噬菌體的宿主專一性，通過實(shí)驗(yàn)確診。 細(xì)菌培養(yǎng)：采集疑似患者的樣本，分離培養(yǎng)，獲得可疑菌落。挑選可滅菌；實(shí)驗(yàn)所用液體培養(yǎng)基的碳源為 細(xì)菌鑒定：實(shí)驗(yàn)流程如圖所示。(1) 挑選可疑菌落制片后，用)。或“有機(jī)碳”24 h，液體培養(yǎng)基變混濁，原因是 。對，與實(shí)驗(yàn)組同時培養(yǎng) 6h后，若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的混濁(填“高”或“低”)，則可明確疑

37、似患者被炭疽桿菌感染； 等量生理鹽水(2) 對配制的液體培養(yǎng)基等需采取 (填“無機(jī)碳”(3) 接種可疑菌落后，35 C培養(yǎng)照組試管中應(yīng)加入 度比對照組 (填“高”或“低”),則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。答案(1)顯微鏡 (2)高壓蒸汽 有機(jī)碳 (3)細(xì)菌大量繁殖等量生理鹽水低解析(1)炭疽桿菌是原核單細(xì)胞生物，觀察它的結(jié)構(gòu)應(yīng)借助顯微鏡。(2)微生物培養(yǎng)基需采用高壓蒸汽滅菌。實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基的碳源應(yīng)為有機(jī)碳，因?yàn)樘烤覘U菌為異養(yǎng)型微生物。(3) 35 C培養(yǎng)24 h,細(xì)菌大量繁殖會導(dǎo)致液體培養(yǎng)基變混濁，對照組不能含有細(xì)菌， 根據(jù)等量原則應(yīng)加入等量的生理鹽水，實(shí)驗(yàn)組加入噬菌體液后，由于

38、噬菌體能夠使炭疽桿菌死亡，故實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的混濁度比對照組低。31、.某些農(nóng)作物秸稈富含纖維素，纖維素經(jīng)過水解可以形成葡萄糖，葡萄糖再經(jīng)過發(fā)酵可 以生產(chǎn)酒精。如圖是利用農(nóng)作物秸稈生產(chǎn)酒精的大致流程，請回答下列問題：農(nóng)作物陸桿 煎處理、爪解肺荀撫|酬酒稍(1) 農(nóng)作物秸稈含有豐富的纖維素，纖維素可以經(jīng)過纖維素分解菌分解成葡萄糖。人們常常從土壤中分離纖維素分解菌。篩選纖維素分解菌常用的方法是 。其實(shí)驗(yàn)流程是：土壤取樣t選擇培養(yǎng)tt將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上t挑選產(chǎn)生的菌落。(2) 纖維素分解菌能合成纖維素酶，纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少含有三種組分，即。前兩種酶使纖維素分解成

39、 ,第三種酶繼續(xù)分解成葡萄糖。(3) 圖中發(fā)酵階段常用的菌種是酵母菌，在酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在C。發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用 來檢驗(yàn)。(4) 利用葡萄能生產(chǎn)果酒，進(jìn)而生產(chǎn)果醋，生產(chǎn)果醋常用的菌種是醋酸桿菌，醋酸桿菌與酵母 菌 在 代 謝 類 型 上 的 區(qū) 別 是答案(1)剛果紅染色法梯度稀釋透明圈(2) C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶纖維二糖(3) 1825 酸性重鉻酸鉀(4) 醋酸(桿)菌是好氧型，酵母菌是兼性厭氧型解析(3)果酒發(fā)酵一般將溫度控制在1825 C ,酒精可用酸性條件下的重鉻酸鉀來檢測。(4) 醋酸菌是需氧型，酵母菌是兼性厭氧型。32、.如表所示為分離分解尿素的細(xì)菌所用的培

40、養(yǎng)基配方：|KH2PO4I1.4 gNa2HPO42.1 gMgS04 7H2O0.2 g葡萄糖10.0 g尿素1.0 g瓊脂15.0 g自來水定容至1 000 mL請根據(jù)以上配方，回答下列問題。(1) 該培養(yǎng)基含有微生物所需要的 類營養(yǎng)物質(zhì)。其中最主要的碳源是葡萄糖，氮源是尿素。(2) 該培養(yǎng)基按物理性質(zhì)劃分是 培養(yǎng)基；按培養(yǎng)基的作用劃分是選擇培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基具有選擇作用的原因是 、。(3) 在該培養(yǎng)基中，可通過檢測pH的變化來判斷尿素是否被分解，依據(jù)的原理是若用該培養(yǎng)基來鑒定某種細(xì)菌是否能夠分解尿素，可在培養(yǎng)基中加入指示齊山尿素被分解后指示劑變 色。(5) 某同學(xué)嘗試使用罐頭瓶在常溫下制作果酒，開始時向消過毒的罐頭瓶中加入了新鮮的葡萄汁和酵母菌，添加酵母菌的原因是 ，添加葡萄汁的目的是為酵母菌的生長發(fā)育提供。答案 (1)4(2) 固體該培養(yǎng)基中唯一的氮源是尿素，只有能分解尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長和繁殖(3) 在細(xì)