特種蛋白的免疫測定及臨床意義_第1頁
特種蛋白的免疫測定及臨床意義_第2頁
特種蛋白的免疫測定及臨床意義_第3頁
特種蛋白的免疫測定及臨床意義_第4頁
特種蛋白的免疫測定及臨床意義_第5頁
已閱讀5頁,還剩22頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、特定蛋白的免疫測定及臨床意義,特定蛋白的免疫測定方法,基本原理:免疫沉淀反應 免疫透射比濁 免疫散射比濁,免疫沉淀反應的發(fā)展歷史,1897年,Kraus發(fā)現(xiàn)細菌培養(yǎng)液與其相應抗血清混合后出現(xiàn)肉眼可見的沉淀反應 1902年Ascoli建立了環(huán)狀沉淀試驗。 1905年Bechhold將抗體混溶在明膠中,然后再將相應特異抗原加于其上,抗原抗體的特異結合可在明膠中出現(xiàn)沉淀。 1946年Oudin報道了試管單向免疫擴散試驗。( 1965年Mancini又提出了平板單向免疫擴散試驗。) Grabar和Williams在1953年報道了免疫電泳。(對流免疫電泳、火箭免疫電泳和免疫固定電泳) 上述為經(jīng)典免疫沉

2、淀試驗發(fā)展階段,測定范圍窄(10 100 g/ml)、靈敏度低,繁瑣費時,不能自動化,免疫沉淀反應的發(fā)展歷史,1959年,Schultze等報道了透射比濁法(Transmission turbidimetry)。 1967年,Ritchie等報道了散射比濁法(nephelometry)。 1977年,Sternberg等進一步發(fā)展建立了速率散射比濁法(Rate nephelometry)。 免疫比濁測定方法與免疫沉淀方法相比,靈敏度高,重復性好,測定范圍寬,已用于臨床體液特定蛋白含量的測定,現(xiàn)已有多種自動化檢測儀器應用于臨床檢驗,尤其是免疫散射比濁測定,免疫透射比濁,基本原理:一定波長光線通過

3、抗原抗體反應混合液時,被其中的免疫復合物(IC)反射或遮擋、吸收而減弱。在一定范圍內(nèi),透射光被吸收的量與免疫復合物的量呈正比,后者又與相應抗原和抗體的量呈函數(shù)關系??贵w量一定,即可從標準曲線獲知抗原的量。 由于要求抗原抗體復合物的數(shù)量足夠,并且顆粒要足夠大(35100nm),本法的測定靈敏度和準確度相對較低。 缺點,免疫散射比濁,基本原理:光線通過檢測溶液時,被其中所含的抗原抗體復合物折射而部分偏轉(zhuǎn),產(chǎn)生散射光。根據(jù)雷利散射公式,在一定條件下,透射光與微粒濃度成正比,散射光與微粒濃度成反比。 散射比濁可分為終點和速率散射比濁兩種。 光源 熒光:高壓汞燈發(fā)射,入射光波長()355nm,散射夾角(

4、)為90 激光:氦氖燈,=663nm,=1535 碘鎢光:碘鎢燈,=400500nm,=70,免疫散射比濁儀器,得靈、貝克曼等 美國THE BIDING SITE MINIPEPH 德國美創(chuàng)- D-dimer 武漢艾爾夫 深圳國賽,特定蛋白測定的臨床意義,D-二聚體(D-dimer): 生理學背景:纖維蛋白溶解系統(tǒng)FDP 意義: 肺栓塞和深V血栓及A血栓的診斷 溶栓監(jiān)測,胱抑素C,特定蛋白測定的臨床意義,血液中含有多種功能蛋白,如載體蛋白、免疫球蛋白(抗體)、酶、凝血因子等,其含量變化通常與多種疾病有密切關系。 C反應蛋白 (CRP) 、免疫球蛋白及亞類、補體C3和C4、抗鏈球溶血素O (AS

5、O) 、類風濕因子 (RF)、前白蛋白 (Prealbumin) 、白蛋白 (Albumin) 、微白蛋白 (Microalbumin) 2微球蛋白(2Microglobulin) 、 1抗胰蛋白酶 (1AT) 、銅藍蛋白 (Caeruloplasmin) 、結合珠蛋白 (Haptoglobin) 、轉(zhuǎn)鐵蛋白 (Transferrin) 、載脂蛋白A (APO-A1) 、載脂蛋白B (APO-B)等,C反應蛋白 (CRP)-超敏CRP,是一種由肝細胞合成的急性時相反應蛋白,是在炎癥和組織壞死疾病的急性期出現(xiàn)于病人血清中的一種糖蛋白,它能與肺炎雙球菌的莢膜成分C-多糖蛋白質(zhì)起反應,故稱為C-反應

6、蛋白。具有激活補體和促進粒細胞及巨噬細胞吞噬作用。 正常值為:800-8000g/L。 CRP是急性時相反應的一個極為靈敏的指標,血漿中CRP濃度在急性心肌梗死、創(chuàng)傷、感染、炎癥、外科手術、腫癌浸潤時迅速顯著地增高,可達正常水平的2000倍。結合臨床病史,有助于隨訪病程。 特別在炎癥過程中,CRP可作為風濕病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、白血病等的隨訪指標。 細菌和病毒感染鑒別,細菌感染急性期一般均增高,病毒感染多數(shù)不變。 國外有研究認為,CRP是引發(fā)心臟病的最強烈的危險因素,其危險程度是血液中過量膽固醇的2倍。CRP含量高的人患高血壓的危險率比膽固醇高的人大1倍。如果炎癥和過高的膽固醇同時出現(xiàn)的話,那么

7、患心臟病和中風的危險率比正常的人要高出9倍。由此可見,CRP含量高和患心臟病呈正相關。 此外,最近一項研究發(fā)現(xiàn),血中高濃度的CRP是結腸癌發(fā)病的危險因素,并認為CRP可能是結腸癌的一個早期標志物,免疫球蛋白及亞類,其濃度在不同年齡段有所差異,在某些疾病情況下,這些指標的濃度將出現(xiàn)升高或降低,從而具有疾病診斷價值。 IgG:正常情況下,臍血7.617gL, 新生兒7.014.8gL, 0.56月310.0gL ,6月2歲512gL ,26歲513gL, 612歲716.5gL ,1216歲715.5gL ,成人616gL。 在慢性肝病,亞急性或慢性感染,結締組織疾病,骨髓瘤,無癥狀性單克隆病等,

8、出現(xiàn)增高;在遺傳性或獲得性抗體缺乏癥,混合性免疫缺陷綜合癥,選擇性缺乏癥,蛋白丟失性腸病,腎病綜合癥,強直性肌營養(yǎng)不良,免疫抑制劑治療等降低,免疫球蛋白及亞類,IgA:正常情況下,臍血050mgL,新生兒022mgL,0.56月3820mgL,7月2歲1401080mgL,26歲2301900mgL,612歲2902700mgL,1216歲8102320mgL,成人7603900mgL。 在慢性肝病,亞急性或慢性感染性疾病(如結核、真菌感染等),自身免疫性疾?。ㄈ?、類風濕性關節(jié)炎),囊性纖維化,家族性嗜中性粒細胞減少癥,乳腺癌,腎病,骨髓瘤等情況下增高;在遺傳性或獲得性抗體缺乏癥,免疫缺陷病,

9、選擇性缺乏癥,無球蛋白血癥,蛋白丟失性腸病,燒傷等。抗抗體現(xiàn)象,免疫抑制劑治療,妊娠后期等情況下降低,免疫球蛋白及亞類,IgM:正常情況下,臍血40240mgL,新生兒50300mgL,0.56月1501090mgL,6月2歲4302390mgL,26歲5001990mgL,612歲5002600mgL,1216歲4502400mgL,成人4003450mgL。 在胎兒宮內(nèi)感染,新生兒癥群,慢性或亞急性感染,瘧疾,傳染性單核細胞增多癥,支原體肺炎,肝病,結締組織疾病,巨球蛋白血癥,無癥狀性單克隆病等情況下增高。在遺傳性或獲得性抗體缺乏癥,混合性免疫缺陷綜合癥,選擇性缺乏癥,蛋白丟失性腸病,燒傷

10、,抗抗體綜合癥(混合性冷球蛋白血癥),免疫抑制劑治療等情況下降低,IgG和IgA亞類,IgG有四種不同的亞類,IgA有兩種不同的亞類。每種亞類具有不同的功能,其含量過低或過高或者缺陷會導致相應的免疫功能低下,造成相應的疾病的發(fā)生。兒童常見的反復呼吸道感染、經(jīng)常腹瀉、發(fā)育遲緩等癥狀以及經(jīng)常發(fā)生的許多呼吸道疾病如中耳炎、鼻竇炎、肺炎、氣管炎、慢性阻塞性肺疾病、支氣管擴張以及哮喘等疾病,往往都與IgG或IgA亞類缺陷有關,補體C3和C4,正常情況下,C3(1C-球蛋白) 8001550mgL,C4(1E-球蛋白) 130370mgL,血液補體含量與活度在許多病理情況下都會發(fā)生變化。所以,臨床上應動態(tài)

11、觀察補體水平的變化。 補體含量下降并不一定代表免疫功能障礙或免疫缺陷,因為在缺血、凝固性壞死和中毒性壞死時,組織能釋放較多的蛋白分解酶,導致補體溶血活度和補體組分的下降。 血補體濃度升高:見于各種炎癥性疾病及阻塞性黃疸,急性心肌梗塞,潰瘍性結腸炎,糖尿病,急性痛風,急性和急性甲狀腺炎,急性風濕熱,皮肌炎,多發(fā)性肌炎,混合性結締組織病,結節(jié)性動脈周圍炎等,抗鏈球溶血素O (ASO,A群溶血性鏈球菌的代謝產(chǎn)物刺激機體產(chǎn)生的抗體。 ASO升高見于A群溶血性鏈球菌感染及感染后免疫反應所致的疾病,如:感染性心內(nèi)膜炎、扁桃體炎、風濕熱、鏈球菌感染后急性腎小球腎炎。ASO在溶血性鏈球菌感染后一周開始升高,4

12、6周達高峰,并持續(xù)數(shù)月,故ASO增高提示曾有溶血性鏈球菌感染,但不一定是近期感染。鏈球菌感染后ASO動態(tài)升高,結合CRP升高及血沉陽性,有利于風濕熱的診斷。 高膽固醇血癥、巨球蛋白血癥、多發(fā)行骨髓瘤患者,ASO也可升高,類風濕因子 (RF,RF是一種以變性IgG為靶抗原的自身抗體,RF可分為IgM、IgG、IgA、IgE四型。類風濕性關節(jié)炎(RA)患者的陽性率為7080,其中尤其以病變廣泛、病情嚴重、病程長、活動期及有關節(jié)外病變者的陽性率高、滴度高并長久存在。 除類風濕外,還見于正常人和其他疾病,例如正常人,尤其老年人,陽性率占;各種感染性疾病如乙肝、結核病、亞急性細菌性心內(nèi)膜炎和慢性支氣管炎

13、等;結締組織病如紅斑狼瘡、干燥綜合征、皮肌炎、血管炎、硬皮病、預防接種后以及某些惡性疾病。在這些疾病中,的陽性率可達。因此,在RA的診斷上,一般認為RF只有參考價值而無特異性診斷價值,前白蛋白 (Prealbumin,為肝內(nèi)合成的糖蛋白,血中半壽期極短,故可作為營養(yǎng)不良的診斷、檢測及肝病的診斷。作為早期肝功能操作指示,比ALT特異,比白蛋白敏感。 正常參考值范圍:成年男女為250-400mg/L ;兒童 125-200mg/L PA是負性急性時相蛋白。在炎癥和惡病質(zhì)(如惡性腫瘤等)中,CRP和酸性糖蛋白升高時,PA則可見迅速降低。如果前白蛋白繼續(xù)保持低水平或進一步降低,提示預后不良。 在腸道或

14、腎臟的耗蛋白性病變時,血清PA濃度也會相隨降低。 何杰金氏及青春發(fā)育期少年,其血清PA 濃度升高較顯著,白蛋白 (Albumin,正常值:35-55g/L 高:脫水和血液濃縮。降低:白蛋白合成障礙:營養(yǎng)不良、肝臟疾病、慢性消化道疾病。白蛋白消耗或丟失過多:消耗性疾病、惡病質(zhì)、腎病綜合征、急性大出血、嚴重燒傷、腹水形成等。其他:妊娠晚期、遺傳性無白蛋白血癥,2微球蛋白(2Microglobulin,2微球蛋白是體內(nèi)有核細胞產(chǎn)生的一種小分子球蛋白。正常人血液中2微球蛋白濃度很低。 血液中升高:腎小球濾過功能下降。炎癥或腫瘤。 尿液中升高:腎小管受損時,對2微球蛋白2微球蛋白的重吸收減少,尿液中2微

15、球蛋白排出增加,測定時升高,1抗胰蛋白酶 (1AT,1-抗胰蛋白酶是一種特異性抑制絲氨酸蛋白水解酶的蛋白酶抑制物。血液中正常值:23g/L。 缺陷通常有遺傳原因。濃度低于正常水平的30-40%時,肝臟和肺部疾病相關的臨床表現(xiàn)(肝硬化、支氣管擴張、胰腺纖維化)才會明顯出現(xiàn)。兒童通常受到肝臟疾病影響,而成人更多的為肺部疾病。DIC、甲亢和十二指腸潰瘍等,血中1AT可減少。 升高大多數(shù)是由于感染或炎癥的急性期反應引起。這種情況下,1-抗胰蛋白酶濃度較正常情況3倍升高。在妊娠和口服避孕藥后,1-抗胰蛋白酶也可升高,銅藍蛋白 (Caeruloplasmin,CER,屬2糖蛋白,是鐵氧化還原酶,又稱鐵氧化

16、酶,由肝臟合成,含68銅原子而呈藍色,故名銅藍蛋白。 升高者有妊娠、服雌性激素和甲狀腺素者、壞死、傳染(新近感染的一種指標)。惡性腫瘤、矽肺等。CER是塵肺最靈敏的早期診斷指標,早于肺部X線片的改變。 降低者有腎病綜合癥,低蛋白血癥(營養(yǎng)不良,胃腸道患者)、急性肝炎、嚴重肝損傷、多發(fā)性硬化等。Wilson氏?。ǜ胃]狀核變性,是一種遺傳性病變)CRE明顯減少,轉(zhuǎn)鐵蛋白 (Transferrin,Tf,Tf是一種能結合三價鐵的糖蛋白。是血漿中主要的含鐵蛋白質(zhì),代表了機體鐵的貯量。它負責運輸由消化道吸收的鐵和由紅細胞降介釋放的鐵。 正常值:成人為2.20-4.0g/L;新生兒為1.30-2.75g/L 降低可見于如下疾患:急性肝炎(開始;后;)肝病(重癥肝炎肝硬化慢性肝慢遷肝急肝),腎病綜合癥、蛋白丟失癥、甲狀腺疾患。 增高可見于:妊娠、缺鐵性貧血、急肝早期,結合珠蛋白 (Haptoglobin,結合珠蛋白又稱觸珠蛋白,主要由肝臟合成。 降低:血管內(nèi)溶血時,結合珠蛋白與紅細胞溶解釋放出來的血紅蛋白相結合,結合珠蛋白/血紅蛋白復合體很快就會從血中清除,從而導致結合珠蛋白濃度下降,嚴重溶血甚至可消耗光結合珠蛋白,各種溶血時血清結合珠蛋白均有降低,

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論