血紅蛋白含量測定

1、.血紅蛋白含量測定 血紅蛋白生理概要血紅蛋白是紅細(xì)胞的主要成分，在正常情況下，每個紅細(xì)胞均含有一定量的血紅蛋白。血紅蛋白是由珠蛋白和亞鐵血紅素組成的結(jié)合蛋白質(zhì)。血紅蛋白除能與氧結(jié)合形成氧合血紅蛋白外，尚能與某些物質(zhì)作用形成多種血紅蛋白衍生物。它們具有特定的色澤和吸光譜，在臨床上，可用以診斷某些變性血紅蛋白血癥和血紅蛋白的定量測定。 血球分析儀器法l 儀器型號：sysmex kx-21型多項(xiàng)目自動血球計數(shù)儀器sysmex xe-2100型多項(xiàng)目自動血球分析裝置l 檢測原理：一、sysmex kx-21在自動檢測法中的血紅蛋白測量以氰化正鐵血紅蛋白法或氧合血紅蛋白法為主流。但這種方法血紅蛋白轉(zhuǎn)化速

2、度慢，其處理液應(yīng)進(jìn)行妥善處理，以及環(huán)境方面的考慮，并不是一種令人滿意的測量法。無氰hgb測量法與氧合血紅蛋白法相同，其血液中的血紅蛋白轉(zhuǎn)化成氧合血紅蛋白，且不含劇毒物。另外，由于可以測量正鐵血紅蛋白，如質(zhì)控血那樣的含有正鐵血紅蛋白的血液也可正確進(jìn)行測量。二、sysmex xe-2100集中于氰化高鐵血紅蛋白測定法和氧化血紅蛋白測定法的優(yōu)點(diǎn)，不使用毒性物質(zhì)，使該方法成為自動檢測的一個合適的方法。同時，由于該方法可以用測量氰化高鐵血紅蛋白，所以該方法也可以準(zhǔn)確的測量含有高鐵血紅蛋白的血液。精品.l 試劑：一、sysmex kx-21稀釋液wbc/hgb用溶血劑2edta二鉀溶液二、sysmex x

3、e-2100cellpack（epk）sulfolyser（sls）l 標(biāo)本吸入量： 一、sysmex kx-21: 全血模式50二、sysmex xe-2100：手工模式130自動進(jìn)樣器模式200l 靜脈血采血方法：抽取病人靜脈血2ml，于edta三鉀抗凝的真空采血管中（1.5mgedta-k3ml）24小時室溫保存。l 操作步驟：一、sysmex kx-21儀器在全血模式（wb）下要在允許空白值內(nèi)：wbcrbchgbplt0.3109/l0.021012/l1g/l10109/l精品.檢測質(zhì)控數(shù)值合格。標(biāo)本的測量：將待測標(biāo)本充分混均，然后將吸液管放進(jìn)待測標(biāo)本試管中并按下開始鍵。蜂鳴器“笛笛

4、”響兩聲之后，當(dāng)lcd畫面上顯示“正在測量”狀態(tài)時可將試管取下。結(jié)果顯示：標(biāo)本被吸入后儀器將進(jìn)行自動測量，約1分鐘左右測量結(jié)束，被測標(biāo)本的結(jié)果自動顯示出來。同時lcd畫面自動切換至“準(zhǔn)備測量”狀態(tài)，此時可進(jìn)行下一份標(biāo)本的測量。二、sysmex xe-2100當(dāng)機(jī)器經(jīng)過電源接通和一系列自檢無誤后，在機(jī)器左上放狀態(tài)欄顯示“ready”及確認(rèn)“ready led”（準(zhǔn)備狀態(tài)燈）呈綠色時，機(jī)器進(jìn)入準(zhǔn)備測量狀態(tài)。要在允許空白值內(nèi)：wbcrbchgbplt0.3109/l0.021012/l1g/l10109/l檢測質(zhì)控數(shù)值合格。標(biāo)本的測量：手工模式：在準(zhǔn)備測量狀態(tài)下，按下屏幕最上一行manual鍵，利用

5、數(shù)字鍵輸入標(biāo)本的編號，按enter鍵確認(rèn)。將待測標(biāo)本充分混均，然后將吸液管放進(jìn)待測標(biāo)本試管中并按下開始鍵。吸液管吸液完畢后聽到三聲報警聲，將試管移開。進(jìn)樣器自動模式：在準(zhǔn)備測量狀態(tài)下，按下屏幕最上一行manual鍵，利用數(shù)字鍵輸入標(biāo)本的編號，按enter鍵確認(rèn)。將試管加放在自動進(jìn)樣器工作臺上。機(jī)器開始自動混均、吸引和分析標(biāo)本。精品.結(jié)果顯示：標(biāo)本被吸入后儀器將進(jìn)行自動測量，被測標(biāo)本的結(jié)果自動顯示出來。同時屏幕切換至“準(zhǔn)備測量”狀態(tài)，此時可進(jìn)行下一份標(biāo)本的測量。 氰化高鐵血紅蛋白測定法l 檢測原理：血紅蛋白被高鐵氰化鉀氧化為高鐵血紅蛋白，再與氰結(jié)合成穩(wěn)定的棕紅色氰化高鐵血紅蛋白，在規(guī)定的波長和液

6、層厚度的條件下，具有一定的吸光系數(shù)，根據(jù)吸光度，即可求得細(xì)胞蛋白濃度。l 試劑：氰化高鐵血紅蛋白轉(zhuǎn)化液：氰化鉀0.05g、高鐵氰化鉀0.2g、無水磷酸二氫鉀0.14g、tritonx-100（或其他非離子型表面活性劑）1.0ml、蒸餾水加至1000ml。l 末梢血采集方法：采血部位必須無凍瘡、炎癥、水腫、充血及循環(huán)障礙。成人以無名指為宜，半歲以上兒童手指為好，半歲以下嬰幼兒通常自拇指或足跟兩側(cè)采血。輕輕按摩采血部位，使其自然充血，用75乙醇棉球消毒局部皮膚待干。緊控刺血部位，用采血針穿刺取血，動作應(yīng)迅速，深度約2-3mm，稍加擠壓，以血液能流出為宜。用干棉球擦去第一滴血，毛細(xì)吸管吸血120于抗凝管中混均，6小時內(nèi)測定完畢。采血完畢，用干棉球壓住傷口，血止為止。精品.l 標(biāo)本吸入量：末梢血模式20l 抗凝管的制備：取上述edta二鉀溶液10微升，加入小試管內(nèi)于70以下干燥備用。l 操作步驟：取轉(zhuǎn)化液5ml，加末梢血20，混均后靜置5min。已校正過波長和靈敏度的分光光度計，波長5401nm，光徑1.000cm，譜帶寬度1nm，20-25杯溫等條件，轉(zhuǎn)化液為空白，測定其吸光度。l 計算：血紅蛋白g/l 正常參考范圍男：120160g/l女：110150g/l新生兒：170200g/l 臨床意