培養(yǎng)基及其制備技術(shù)-習(xí)題作業(yè)

1、天津現(xiàn)代職業(yè)技術(shù)學(xué)院培養(yǎng)基及其制備技術(shù)習(xí)題作業(yè)一、填空題1、營養(yǎng)物質(zhì)主要以、方式進入細胞。2、EMB 培養(yǎng)基按培養(yǎng)基功能屬于培養(yǎng)基。3、微生物細胞的化學(xué)成分以_和 _兩種狀態(tài)存在 .4、微生物的營養(yǎng)物質(zhì)按其在機體中的生理作用可區(qū)分為：_、_、_、_、 _、_等六大類。5、微生物營養(yǎng)類型： _、_、_、 _等。6、營養(yǎng)物質(zhì)進入到細胞的四種形式：_、 _、_、 _等7、培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)進行劃分為：_、 _、_。二、應(yīng)用題1、鑒別培養(yǎng)基的定義以及應(yīng)用。2、請寫出選擇培養(yǎng)基并舉例說明。3、請寫出合成培養(yǎng)基以及天然培養(yǎng)基的應(yīng)用以及特點。4、請寫出培養(yǎng)基配制的過程。三、選擇題1、微生物細胞中含量最多的元

2、素是（）A、 CB、 HC、 OD、 N2、瓊脂在培養(yǎng)基中的作用是（）A、碳源B、氮 源 C、凝固劑D、生長調(diào)節(jié)劑3、實驗室常用的培養(yǎng)細菌的培養(yǎng)基是（）A、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基B、馬鈴薯培養(yǎng)基C、高氏一號培養(yǎng)基D、麥芽汁培養(yǎng)基4、在實驗中我們所用到的淀粉水解培養(yǎng)基是一種（）培養(yǎng)基A、基礎(chǔ)培養(yǎng)基B、加富培養(yǎng)基C、選擇培養(yǎng)基D、鑒別培養(yǎng)基5、下列物質(zhì)屬于生長因子的是（）- 1 -天津現(xiàn)代職業(yè)技術(shù)學(xué)院A、葡萄糖B、蛋白胨C、 NaClD、維生素6、培養(yǎng)基進入細胞的方式中運送前后物質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化的是（）A、主動運輸B、被動運輸C、促進擴散D、基團移位7、常用消毒酒精的濃度的（）A、 30%B、70%C、

3、95%D、 100%8、占微生物細胞總物質(zhì)量70%90%以上的細胞組分是（）A、碳素物質(zhì)B、氮素物質(zhì)C、水D、無機鹽9、為縮短細菌培養(yǎng)的延遲期，菌齡應(yīng)控制在（）A、潛伏期B、對數(shù)生長期C、穩(wěn)定期D、衰亡期10、酵母菌常用于釀酒工業(yè)中，其主要產(chǎn)物為（）A、乙酸B、乙醇 C、乳酸D、丙醇11、接種環(huán)常用的滅菌方法是（）A、火焰滅菌B、干熱滅菌C、高壓蒸汽滅菌D、間歇滅菌12、微生物分批培養(yǎng)時，在延遲期（）A、微生物的代謝機能非常不活躍B、 菌體體積增大C、菌體體積不變D、 菌體體積減小13、酵母菌適宜的生長PH 值為（）A、 5.0-6.0B、 3.0-4.0C、8.0-9.0D、7.0-7.5-

4、 2 -天津現(xiàn)代職業(yè)技術(shù)學(xué)院培養(yǎng)基及其制備技術(shù)作業(yè)習(xí)題答案一、填空題：1、單純擴散、促進擴散、主動運輸、基團轉(zhuǎn)位2、鑒別培養(yǎng)基3、有機物、無機物4、碳源、氮源、能源、無機鹽、生長因子、水5、光能自養(yǎng)型、化能自養(yǎng)型、光能異氧型、化能異養(yǎng)型二、應(yīng)用題：1、答：鑒別培養(yǎng)基是用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基中加入某種特殊化學(xué)物質(zhì)，某種微生物在培養(yǎng)基中生長后能產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物，而這種代謝產(chǎn)物可以與培養(yǎng)基中的特殊化學(xué)物質(zhì)發(fā)生特定的化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征性變化，根據(jù)這種特征性變化， 可將該種微生物與其他微生物區(qū)分開來。鑒別培養(yǎng)基主要用于微生物的快速分類鑒定，以及分離和篩選產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物的微生物菌

5、種。2、答：選擇培養(yǎng)基是用來將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基。根據(jù)不同種類微生物的特殊營養(yǎng)需求或?qū)δ撤N化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同，在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長，有利于所需微生物的生長。一種類型選擇培養(yǎng)基是依據(jù)某些微生物的特殊營養(yǎng)需求設(shè)計的， 例如，利用以纖維素或石蠟油作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基， 可以從混雜的微生物群體中分離出能分解纖維素或石蠟油的微生物；利用以蛋白質(zhì)作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，可以分離產(chǎn)胞外蛋白酶的微生物；缺乏氮源的選擇培養(yǎng)基可用來分離固氮微生物。另一類選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)， 這種化學(xué)物質(zhì)沒有營養(yǎng)作用，對所

6、需分離的微生物無害，但可以抑制或殺死其他微生物，例如，在培養(yǎng)基中加入數(shù)滴 10%酚可以抑制細菌和霉菌的生長， 從而由混雜的微生物群體中分離出放線菌；在培養(yǎng)基中加入亞硫酸銨， 可以抑制革蘭氏陽性細菌和絕大多數(shù)革- 3 -天津現(xiàn)代職業(yè)技術(shù)學(xué)院蘭氏陰性細菌的生長，而革蘭氏陰性的傷寒沙門氏菌(Salmomnella typhi) 可以在這種培養(yǎng)基上生長；在培養(yǎng)基中加入染料亮綠(brilliantgreen)或結(jié)晶紫 (crystalvio1et)，可以抑制革蘭氏陽性細菌的生長， 從而達到分離革蘭氏陰性細菌的目的；在培養(yǎng)基中加人青霉素、 四環(huán)素或鏈霉素， 可以抑制細菌和放線菌生長， 而將酵母菌和霉菌分離

7、出來。 現(xiàn)代基因克隆技術(shù)中也常用選擇培養(yǎng)基， 在篩選含有重組質(zhì)粒的基因工程菌株過程中，利用質(zhì)粒上具有的對某種 (些)抗生素的抗性選擇標記，在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)抗生素， 就能比較方便地淘汰非重組菌株， 以減少篩選目標菌株的工作量。3、答： 天然培養(yǎng)基 (complex medium)這類培養(yǎng)基含有化學(xué)成分還不清楚或化學(xué)成分不恒定的天然有機物，也稱非化學(xué)限定培養(yǎng)基(chemically undefined medium)。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和麥芽汁培養(yǎng)基就屬于此類?；蚩寺〖夹g(shù)中常用的LB(Luria Bertani)培養(yǎng)基也是一種天然培養(yǎng)基。牛肉浸膏、蛋白胨及酵母浸膏的來源及主要成分營 養(yǎng) 物來

8、源主要成分質(zhì)牛 肉 浸瘦牛肉組織浸出汁濃縮而成的膏狀富含水溶性糖類、 有機氮化合物、維膏物質(zhì)生素、鹽等蛋白胨將肉、酪素或明膠用酸或蛋白酶水解富含有機氮化合物、 也含有一些維生后干燥而成素和糖類的粉末狀物質(zhì)酵 母 浸酵母細胞的水溶性提取物濃縮而成富含 B 類維生素，也含有有機氮化膏的膏狀物質(zhì)合物和糖類常用的天然有機營養(yǎng)物質(zhì)包括牛肉浸膏、蛋白胨、 酵母浸膏 (表 5.10)、豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、稻草浸汁、羽毛浸汁、胡蘿卜汁、椰子汁等，嗜糞微生物 (coprophilous microorganisms)可以利用糞水作為營養(yǎng)物質(zhì)。天然培養(yǎng)基成本較低，除在實驗室經(jīng)常使用外，也適

9、于用來進行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。 合成培養(yǎng)基 (synthic medium)是由化學(xué)成分完全了解的物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基， 也稱化學(xué)限定培養(yǎng)基 (chemically defined medium)，高氏 I 號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基就屬于此種類型。配制合成培養(yǎng)基時重復(fù)性強，但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高，微生物在其中生- 4 -天津現(xiàn)代職業(yè)技術(shù)學(xué)院長速度較慢，一般適于在實驗室用來進行有關(guān)微生物營養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。4、答：液體培養(yǎng)基的制備（1）稱量根據(jù)培養(yǎng)基配方要求，準確稱取試劑與藥品。（2）溶解 先在燒杯內(nèi)加入所需水量的 2/3左右（可

10、以是自來水、深井水或蒸餾水，根據(jù)項目要求而定） ，將稱取的各種成分放入水中加熱溶解。為避免因沉淀造成營養(yǎng)物質(zhì)的損失， 加入各種成分的順序為： 先加緩沖化合物， 再加主要元素，然后再加微量元素，最后加維生素、生長素等，待完全溶解后加水至量。（3）調(diào)節(jié) pH 用滴管逐滴加入 lmol/L 的 NaOH或lmol/L 的HCl ，邊攪動邊用精密 pH（ 5.5 9.0）試紙測其 pH至所需值為止。（4）過濾 需要過濾的培養(yǎng)基要趁熱用四層紗布過濾。 在發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)中，這一步也可省去，但對培養(yǎng)微生物條件的控制及結(jié)果的觀察的培養(yǎng)基需要過濾。（5）分裝取玻璃漏斗一個，裝在鐵架上。漏斗出口用乳膠管與玻璃管相連

11、接，乳膠管上裝一彈簧夾。 趁熱將培養(yǎng)基放入玻璃漏斗內(nèi)分裝。分裝時用左手拿空管（錐形瓶）或手控制彈簧夾的放和關(guān)。注意不要沾染到試管壁和試管口，以免浸濕棉塞引起雜菌污染。裝入試管（錐形瓶）的液體培養(yǎng)基，根據(jù)試管的大小及需要而定，一般裝量為試管高度的 1/5。（6）包扎、滅菌將分裝好的培養(yǎng)基塞上棉塞，再用牛皮紙包扎，注明培養(yǎng)基的名稱、配制日期、組別等，然后立即進行高壓蒸汽滅菌（ 0.1MPa，121，30min）。固體培養(yǎng)基的制備（1）稱量、溶解、調(diào)節(jié) pH與制備液體培養(yǎng)基的相同。（2）加瓊脂熔化 先加熱配制好的液體培養(yǎng)基， 沸騰后添加 2的瓊脂，不斷攪拌直到完全熔化，然后加水至所需體積。（3）過濾、分裝同液體培養(yǎng)基的制備。但分量要適當(dāng)，如分裝在錐形瓶1 1的量一般為其體積的3 2 ；如用試管作斜面，則每管應(yīng)裝 5mL左右（約為管長11的 5 4 ）。- 5 -天津現(xiàn)代職業(yè)技術(shù)學(xué)院（4）包扎、滅菌將分裝好的培養(yǎng)基塞上棉塞，再用牛皮紙包扎，注明培養(yǎng)基的名稱、配制日期、組別（在此操作中，應(yīng)注意盡量快速， 以免培養(yǎng)基凝固），然后立即進行高壓蒸汽滅菌（