中藥藥理學(xué)學(xué)科的研究進(jìn)展及展望.doc

中藥藥理學(xué)學(xué)科的研究進(jìn)展及展望中藥藥理學(xué)是在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)研究中藥與機(jī)體相互作用和作用機(jī)制的科學(xué)。其研究的基本內(nèi)容是中藥與機(jī)體相互作用及其規(guī)律，而研究方法是現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，例如：中藥血清藥理學(xué)方法，綜合集成的中藥藥性理論研究方法，病證動(dòng)物模型方法等，其方法與一般藥理學(xué)有一定的區(qū)別；主要研究對(duì)象是中藥單味藥及其復(fù)方，無論單味藥還是復(fù)方，其所含的化學(xué)成分都很復(fù)雜。中藥藥理學(xué)是中藥學(xué)的一門分支學(xué)科，也是藥理學(xué)的一門分支學(xué)科。它是中藥學(xué)與藥理學(xué)的橋梁學(xué)科，是中西醫(yī)結(jié)合的產(chǎn)物，是中藥現(xiàn)代化研究和指導(dǎo)臨床合理用藥的重要學(xué)科，也是將中藥推向世界，為世界人民掌握中藥的理論，知識(shí)和應(yīng)用的一門新興學(xué)科。因此，對(duì)中藥藥理學(xué)進(jìn)行研究具有重要意義，同時(shí)也具備挑戰(zhàn)，然而，需要我們的不懈努力。以下是對(duì)中藥藥理學(xué)熱點(diǎn)研究方面的顯著研究進(jìn)展及學(xué)科展望的綜述。1血清藥理學(xué)方法研究血清藥理學(xué)是指用含有藥物成分的血清施加于體外實(shí)驗(yàn)反應(yīng)體系的一種半體內(nèi)實(shí)驗(yàn)方法。目前已經(jīng)廣泛運(yùn)用于對(duì)中藥復(fù)方的藥理作用和作用機(jī)理的探討。其研究進(jìn)展如下： 1.1在動(dòng)物的選擇一般多選用大鼠、家兔、豚鼠等動(dòng)物來制備含藥血清，但不同種屬的動(dòng)物，其血清成分不同，因此在選擇動(dòng)物時(shí)應(yīng)盡量選用與人類生物學(xué)活性近似的物種。劉成海等提出在體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中宜采用同一種單一血清，既為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，又為藥物提供載體，還避免了多種血清的干擾醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理，一般家兔和大鼠應(yīng)為首選。1.2灌胃次數(shù)與時(shí)間間隔有710d法（1次/d，連用710d），3次給藥法（連續(xù)給藥3次，笫1、2次間隔20h，第2、3次間隔4h），2次給藥法（第1次給藥后2h，再以相同劑量重復(fù)1次）等。各種給藥方式都是為了達(dá)到穩(wěn)態(tài)血藥濃度，從而便于藥物作用機(jī)理的研究。不過嚴(yán)格地說應(yīng)該按藥物半衰期給藥，連續(xù)57個(gè)半衰期達(dá)到穩(wěn)態(tài)血藥濃度，但由于中藥及其復(fù)方成分復(fù)雜，半衰期很難測(cè)定，所以710d給藥為權(quán)宜之計(jì)。如果對(duì)藥物血清時(shí)效關(guān)系進(jìn)行研究，則應(yīng)另當(dāng)別論。1.3給藥劑量在實(shí)驗(yàn)中，由于含藥血清加入體外反應(yīng)系統(tǒng)后，濃度將被稀釋，從而達(dá)不到在體條件下的藥物濃度，反應(yīng)系統(tǒng)可能出現(xiàn)假陰性反應(yīng)，針對(duì)此種情況，李氏等提出按新藥藥理研究的技術(shù)要求設(shè)計(jì)劑量給藥，將含藥血清制成冷凍干燥粉（凍干粉），以凍干粉形式加入反應(yīng)系統(tǒng)，使之達(dá)到所需要的濃度。劉平認(rèn)為給藥劑量應(yīng)以整體模型動(dòng)物的有效劑量（即為臨床成人劑量的818倍量）為妥。1.4含藥血清的采集大鼠一般給藥12h后血藥濃度達(dá)峰值，此時(shí)血清為最佳含藥血清，超過一天的時(shí)間，大部分藥物成分已經(jīng)被代謝和排泄，藥物的直接作用消失，此時(shí)的血清為機(jī)體功能狀態(tài)血清。醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理當(dāng)然還要考慮例外，因此最好是通過預(yù)實(shí)驗(yàn)來確定最佳采血時(shí)間。1.5含藥血清滅活與否許多學(xué)者觀點(diǎn)不一。有的將含藥血清經(jīng)5630min滅活，但也有的不經(jīng)滅活，直接進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)。劉成海等發(fā)現(xiàn)正常大鼠血清無論滅活與否均可維持大鼠肝貯脂細(xì)胞的貼壁生長(zhǎng)，兩組大鼠血清對(duì)肝貯脂細(xì)胞內(nèi)3H-TdR摻入的影響無明顯差異，劉氏主張血清經(jīng)5630min滅活，可排除非藥理性干擾。但徐海波等認(rèn)為藥物血清不宜滅活，因血清經(jīng)滅活以后，血清中含有的機(jī)體在藥物作用下產(chǎn)生的內(nèi)源性有效成分將減少或喪失，生物活性降低，會(huì)影響藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果，而且與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和臨床用藥情況也不相符。對(duì)于血清非藥理性干擾可采取空白對(duì)照來衡定和排除，而細(xì)胞培養(yǎng)中的微生物感染，也可用微孔濾膜除菌法來防止。2.復(fù)方藥理學(xué)研究復(fù)方是中醫(yī)用藥的主要形式，以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo)，運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)手段，對(duì)古方和現(xiàn)代經(jīng)驗(yàn)方進(jìn)行多指標(biāo)的系統(tǒng)藥理研究，可以在更深的層次揭示方劑的治療原理，有效地指導(dǎo)臨床用藥和中藥新產(chǎn)品研創(chuàng)。近年來，中藥復(fù)方在藥效學(xué)、藥代動(dòng)力學(xué)和分子藥理研究等方面取得了較好的進(jìn)展。近年古方的藥理研究有數(shù)十首，其中桂枝湯、六味地黃湯、四君子湯、四物湯、大承氣湯、 補(bǔ)中益氣湯、當(dāng)歸補(bǔ)血湯等研究較多。在古方研究中較多地探討了方劑的作用機(jī)制，給方劑 的傳統(tǒng)功效描述賦予現(xiàn)代藥理學(xué)內(nèi)容。如桂枝湯可能通過影響興奮胃腸運(yùn)動(dòng)的胃泌素、胃動(dòng)素、P物質(zhì)以及抑制胃腸運(yùn)動(dòng)的生長(zhǎng)抑素、 血管活性腸肽等在下丘腦和胃腸道中的含量來調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)；桂枝湯 對(duì)與呼吸道感染有關(guān)的10株病毒致細(xì)胞病變均有不同程度的抑制作用，其含 藥血清能抑制單純皰疹病毒等4株病毒對(duì)Hep-2細(xì)胞的增殖。當(dāng)歸補(bǔ)血湯 含藥血清隨給藥劑量增加可使造血祖細(xì)胞集落數(shù)明顯增多。將六味地黃湯 方視為一個(gè)整體，以活性評(píng)價(jià)為導(dǎo)向，從六味地黃湯中定向追蹤分離 ，獲得了具有調(diào)節(jié)免疫功能的活性部位，該部位對(duì)TH及TC的功能有調(diào)節(jié) 作用。這些研究都在一定程度上說明了方劑的作用原理。經(jīng)驗(yàn)方的藥理研究 開展得更為廣泛，其研究?jī)?nèi)容多結(jié)合新藥研究的有關(guān)要求，著重于藥效及安全性評(píng)價(jià)，不少 方劑已經(jīng)或即將開發(fā)為新藥。 配伍是中醫(yī)用藥的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)所在，用藥理研究方法觀察方劑配伍與藥理效應(yīng)變化之間的關(guān)系，探討方劑的配伍規(guī)律，仍然是復(fù)方藥理研究的重要內(nèi)容。近年雖然還是以方劑藥味加減 、正交設(shè)計(jì)等方法為主，但在應(yīng)用中也有明顯提高，采用一些新方法來更好地分析方劑的配伍問題。關(guān)于復(fù)方配伍規(guī)律的基礎(chǔ)研究99年納入國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)研究 項(xiàng)目，強(qiáng)調(diào)運(yùn)用高新技術(shù)手段探討方劑的物質(zhì)基礎(chǔ)，綜合分析配伍-化學(xué)成分變化-藥理效 應(yīng)三者之間的聯(lián)系，闡明配伍內(nèi)涵，成為新的探索方向。生脈散復(fù)方化學(xué)動(dòng)態(tài)變化與藥效關(guān) 系研究表明，各藥配伍后藥效的變化可能與產(chǎn)生新物質(zhì)有關(guān)。以方劑的物質(zhì) 基礎(chǔ)研究為核心，注重方劑配伍理論與現(xiàn)代藥理交互作用理論結(jié)合，物質(zhì)基礎(chǔ)分析與藥理效 應(yīng)觀察相結(jié)合，從組成方劑的單味藥、方劑的化學(xué)部分以及化學(xué)成分三個(gè)層次探討方劑的配 伍與物質(zhì)基礎(chǔ)的變化的關(guān)系，在整體動(dòng)物、器官組織、細(xì)胞亞細(xì)胞及分子生物學(xué)四個(gè)水平上 探討方劑的配伍、物質(zhì)基礎(chǔ)的變化與藥理效應(yīng)間的聯(lián)系，已成為復(fù)方配伍研究的基本思路 。中藥的藥物代謝動(dòng)力學(xué)的研究與西藥相比有很多不同的地方，因此決定了其研究方法也存在一定的差異。一般按有效成分明確的中藥及其制劑的藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究和有效成分不明的中藥及其制劑的藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究?jī)煞N情況來進(jìn)行評(píng)述。 3.藥代動(dòng)力學(xué)研究3.1有效成分明確的中藥及其制劑的藥代動(dòng)力學(xué)現(xiàn)狀 有效成分明確的中藥及其制劑的藥代動(dòng)力學(xué)研究方法與西藥類似。隨著對(duì)中藥中有效成分的研究方法和檢測(cè)技術(shù)的改進(jìn)和完善，目前許多中藥特別是單味中草藥的有效成分已相當(dāng)明確，據(jù)統(tǒng)計(jì)在九十年代前就已對(duì)120多種中藥的有效成分進(jìn)行過研究。并已對(duì)相當(dāng)一部分進(jìn)行了體內(nèi)外代謝的研究，且得出了明確的代謝產(chǎn)物，并對(duì)其體外藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)進(jìn)行了研究。如畢惠嫦研究了丹參酮_A在大鼠肝微粒體酶中的代謝動(dòng)力學(xué)，指出了參與丹參酮_A體內(nèi)代謝的肝微粒體酶。艾路等對(duì)復(fù)方中藥中烏頭生物堿在人體內(nèi)的代謝產(chǎn)物進(jìn)行了研究，采用液相色譜-電噴霧離子阱多級(jí)質(zhì)譜(LC-ESI-MSn)法檢測(cè)出5種烏頭生物堿代謝產(chǎn)物。陳勇等對(duì)葫蘆巴堿在大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物進(jìn)行了推測(cè)，從大鼠尿中檢測(cè)出原藥及其三種代謝產(chǎn)物。 3.2 中藥復(fù)方及其制劑的藥代動(dòng)力學(xué)研究現(xiàn)狀 到目前為止還有許多中藥及其復(fù)方制劑或因化學(xué)結(jié)構(gòu)不明，或由于是混合物而非單體，無法用化學(xué)分析方法測(cè)定有效成分含量，因而給其藥物代謝動(dòng)力學(xué)的研究帶來困難。大部分人用復(fù)方或其制劑中的某一單體來代替整方的藥物代謝過程。如李再新5等將補(bǔ)陽還五湯水提醇沉液給予家兔靜脈注射后，以川芎嗪為指標(biāo)來測(cè)定其在體內(nèi)的代謝過程；但此法只能說明此單體在體內(nèi)的過程而不能說明全部成分的代謝過程。中藥制劑化學(xué)成分往往十分復(fù)雜，相當(dāng)于一個(gè)天然的化學(xué)成分組合庫(kù)，用其中的一具或數(shù)個(gè)化學(xué)成分作為檢測(cè)指標(biāo)，得出的藥動(dòng)參數(shù)與藥的實(shí)際藥動(dòng)學(xué)相比可能有一定的偏差。也有人采用生物效應(yīng)法進(jìn)行藥物代謝動(dòng)力學(xué)的研究，但此法不夠精確，只能粗略看出體內(nèi)藥物濃度變化的過程。生物效應(yīng)法認(rèn)為，在一定條件下，體內(nèi)藥量與藥物的效應(yīng)有一定對(duì)應(yīng)關(guān)系，從藥效的變化可以推知不同時(shí)間內(nèi)體內(nèi)藥量變化。常用的生物效應(yīng)法有以下幾類： (1) Smolen。此法是目前我國(guó)醫(yī)藥研究者最為廣泛采用的一種進(jìn)行中藥單味藥及復(fù)方藥藥動(dòng)學(xué)研究的方法。其要義是將量效關(guān)系曲線作為用藥后各時(shí)間作用強(qiáng)度與藥物濃度的換算曲線，從而推算出藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。盧賀起6等以血小板聚集抑制率為藥理效應(yīng)指標(biāo)，對(duì)家兔進(jìn)行了四物湯的藥動(dòng)學(xué)研究，結(jié)果表明四物湯屬靜脈外給藥一級(jí)動(dòng)力學(xué)消除，開放的一室模型，并計(jì)算出藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。 (2)藥物累積法。其基本原理是將藥物代謝動(dòng)力學(xué)中的血藥濃度多點(diǎn)測(cè)定原理與用動(dòng)物急性死亡率測(cè)定藥物蓄積性的方法結(jié)合起來；是用多組動(dòng)物按不同時(shí)間間隔給藥，求出不同時(shí)間體內(nèi)藥物的存留百分率的動(dòng)態(tài)變化，據(jù)此計(jì)算藥物的表觀半衰期；又稱為毒理效應(yīng)法。黃衍民7等對(duì)烏頭注射液對(duì)小鼠的毒效動(dòng)力學(xué)研究，得出藥物的消除級(jí)動(dòng)力學(xué)過程，并符合一室模型，其表觀半衰期為59.23min。從而指出目前臨床一日2次給藥間隔時(shí)間太長(zhǎng)，如果每8小時(shí)給藥1次且首次倍量，可能會(huì)進(jìn)一步提高療效降低毒副作用。陳長(zhǎng)勛8等應(yīng)用LD50補(bǔ)量法測(cè)定小鼠的附子表觀參數(shù)，結(jié)果認(rèn)為符合二室開放模型并得出了主要的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。利用此種方法進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)研究的中藥還有陸英煎劑9、小活絡(luò)丸10、九分散11、桑菊飲12等。但此法實(shí)際上反映的是藥物的毒性效應(yīng)動(dòng)力學(xué)過程，當(dāng)毒性成分與藥效成分不一時(shí)，所得動(dòng)力學(xué)參數(shù)將難以用作臨床用藥指導(dǎo)，在致死劑量作用下，機(jī)體已受到損害，可能對(duì)藥物在體內(nèi)的動(dòng)力學(xué)過程產(chǎn)生較大影響，使得所得結(jié)果不能表征生理藥動(dòng)學(xué)過程。 (3)藥理效應(yīng)法。該法以給藥后藥效強(qiáng)度的變化為依據(jù)，通過適當(dāng)劑量的時(shí)間-效應(yīng)曲線，進(jìn)行藥效動(dòng)力學(xué)參數(shù)計(jì)算，其消除半衰期稱為藥效半衰期或藥效清除半衰期。本法先選擇適當(dāng)?shù)乃幚硇?yīng)作為觀測(cè)指標(biāo)，得出劑量-效應(yīng)曲線、時(shí)間-效應(yīng)曲線和時(shí)間-體存藥量曲線，并據(jù)此得出藥代參數(shù)。富杭育13等按足趾汗腺分泌的觀察方法，應(yīng)用本法觀測(cè)大鼠麻黃湯的藥代動(dòng)力學(xué)。通過量效、時(shí)效和曲線的轉(zhuǎn)換，得體存量-時(shí)間曲線，從曲線分析屬二室模型。另外趙智強(qiáng)14等也報(bào)道了天麻鉤藤飲用此法所得藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。此法要求復(fù)方及其制劑藥效強(qiáng)且可逆重現(xiàn)、反應(yīng)靈敏、可定量檢測(cè)，因而限制了其應(yīng)用。4)微生物法。此法僅適用于具抗病原微生物作用的復(fù)方，通常用瓊脂擴(kuò)散法測(cè)得相關(guān)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。它具有方法簡(jiǎn)便、操作容易、樣品用量少等優(yōu)點(diǎn)，但機(jī)體內(nèi)外抗菌效應(yīng)作用機(jī)制的差異，細(xì)菌選擇的得當(dāng)與否，可在一定程度上影響藥代參數(shù)的準(zhǔn)確性。王西發(fā)15等用此法測(cè)定了鹿蹄草素在兔體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，其選取用的是金黃色葡萄球菌為實(shí)驗(yàn)菌株，研究表明鹿蹄草素屬于二室分布模型。綜上，近年中藥藥理研究取得了可喜的成績(jī)，成為中醫(yī)藥現(xiàn)代研究極為活躍的領(lǐng)域。然而中醫(yī)藥現(xiàn)代化、科學(xué)化研究任重而道遠(yuǎn)，中藥藥理研究人員應(yīng)與化學(xué)、制劑、臨床等相關(guān)學(xué)科 密切配合，共創(chuàng)輝煌。 目前，血清藥理學(xué)已經(jīng)應(yīng)用到越來越多的研究領(lǐng)域中，為中藥復(fù)方的研究方法開