新鮮血清作為標準品用于國產(chǎn)試劑在AU640的溯源性.doc

新鮮血清作為標準品用于國產(chǎn)試劑在AU640的溯源性作者：左瑞菊,郭愛蘭單位：河北省滄州市人民醫(yī)院檢驗科【關(guān)鍵詞】 溯源性 檢測系統(tǒng) 標準品 標準 新鮮血清隨著醫(yī)療事業(yè)發(fā)展,各種型號和功能不同的全自動生化分析儀不斷涌現(xiàn)，使醫(yī)院臨床生化檢驗實現(xiàn)了自動化，許多實驗室擁有多臺全自動生化分析儀1，但是儀器常是品牌不同,而在品牌分析儀上又用非品牌試劑，使多臺全自動生化分析儀結(jié)果的一致性和溯源性成為我們檢驗工作者討論的熱點。為此,我們做了用新鮮血清作為臨時標準品實現(xiàn)國產(chǎn)試劑在奧林帕斯AU640分析儀上的溯源性。報告如下。1 對象與方法1.1 對象 (1)儀器：羅氏C501全自動生化分析儀奧林巴斯AU640全自動生化分析儀；(2)試劑：羅氏試劑、尿素(3V)、葡萄糖(申能)、總蛋白(科華)、白蛋白(科華)、鈣(利德曼)、膽固醇(科華)、三酰甘油 (科華)；(3)校準品：羅氏校準品cfas(批號：180181121)；(4)質(zhì)控品：羅氏質(zhì)控品(批號：17646903、17628702)；(5)樣本：院門診及住院患者新鮮血標本。1.2 方法 (1)按照操作規(guī)程進行分析前準備,用羅氏校準品cfas校準C501系統(tǒng), 做2個批號羅氏質(zhì)控,重復(fù)測定患者新鮮混合血清8次,除去可疑值,算出平均值,其值作為臨時校準品的值立即校準AU640上的項目。(2)根據(jù)美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)批準的用患者標本進行方法對比及偏倚評估EP9A2指南文件(EP9A2)2每天選取8份患者新鮮血清(其濃度范圍盡可能覆蓋檢測項目的高、中、低)按常規(guī)操作方法分別在羅氏C501全自動生化分析儀和奧林巴斯AU640全自動生化分析儀進行操作。測定順序1、2、3、4、5、6、7、8、8、7、6、5、4、3、2、1，檢測患者新鮮血清的尿素、葡萄糖、總蛋白、白蛋白、鈣、膽固醇、三酰甘油，以上步驟連續(xù)重復(fù)5 d。(3)數(shù)據(jù)收集與處理：按照NCCLS P9A2文件對2種方法實驗結(jié)果進行評估。檢查實驗數(shù)據(jù)中有無離群點，包括同一儀器內(nèi)測得結(jié)果離群點和2臺儀器間測得結(jié)果離群點，若檢驗中有1個離群點，可刪去，有兩個或以上，檢查原因，補充實驗數(shù)據(jù)。若無離群點，則進行統(tǒng)計，應(yīng)用SPSS 15.0軟件進行線性回歸統(tǒng)計，可得到線性方程Y=bX+a以及相關(guān)系數(shù)R。檢查X范圍是否恰當。若R2≥0.95，認為X范圍恰當，即X變量的誤差可由數(shù)據(jù)的范圍予以補償，也說明回歸統(tǒng)計的斜率b和截距a可靠，可用它們估計新鮮血清定標帶來的系統(tǒng)誤差；若R20.95，必須再做實驗擴大數(shù)據(jù)范圍。以美國Satland建議的醫(yī)學決定水平估計的系統(tǒng)誤差(SE)判斷用新鮮血清作為標準品實現(xiàn)2臺生化分析儀結(jié)果的一致性。SE=|(b-1)Xc+a|SE%=|(b-1)Xc+a|/Xc×100%以美國臨床實驗室改進修正法案(CLIA88)對室間質(zhì)評的允許誤差(Enorallowable,Ea)為判斷依據(jù)，若SE不大于Ea，認為此系統(tǒng)誤差可接受3。若將標本檢測的隨機誤差考慮在內(nèi)，則要判斷估計的總誤差是否小于允許誤差，此時較簡便的方法是將CLLA88允許誤差的1/2作為2臺生化分析儀結(jié)果的允許限值，從而判斷用新鮮血清作為標準品實現(xiàn)2臺生化分析儀結(jié)果的一致性是否可行。2 結(jié)果2.1 經(jīng)過2種方法內(nèi)離群點的檢驗及方法間配對結(jié)果離群點的檢驗，均未發(fā)現(xiàn)離群點。2.2 通過SPSS 15.0軟件進行直線回歸，得到線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)見表1，可見7個比對項目均有良好的相關(guān)性(R2均大于0.95)，這說明了回歸統(tǒng)計的斜率b 和截距a可靠，可以用它們?nèi)ス烙嬓迈r血清定標帶來的系統(tǒng)誤差。2.3 各項目醫(yī)學決定水平系統(tǒng)誤差及1/2Ea(CLIA’88)見表2。3 討論3.1 EP9A2文件為臨床實驗室提供了一個評價實驗室方法試劑儀器性能的指南，用于評價測定同一被測物的2種方法(試劑或儀器)間的偏倚，它要求(1)操作者有足夠的時間熟悉儀器操作及維護步驟；(2)操作者有足夠時間熟悉評價方案；(3)在評價過程中，2種方法必須保證適當?shù)馁|(zhì)量控制；(4)2種方法必須有足夠的數(shù)據(jù)以保證結(jié)果具有代表性。我們嚴格按照儀器操作規(guī)程、試劑參數(shù)操作，進行儀器保養(yǎng)，用羅氏試劑及程序羅氏校準品cfas羅氏質(zhì)控 一系列羅氏系統(tǒng)保證結(jié)果可以溯源，參加全國衛(wèi)生部室間質(zhì)評，所測7項均優(yōu)良，保證測量結(jié)果準確及與其他實驗室間結(jié)果的可比性，堅持每天做室內(nèi)質(zhì)控，保證儀器狀態(tài)穩(wěn)定，結(jié)果準確。3.2 羅氏系統(tǒng)結(jié)果具有溯源性，用新鮮血清作為標準品去校準奧林巴斯AU640，通過常規(guī)測定方法測人的新鮮血清標本的結(jié)果，比較兩系統(tǒng)間差異無統(tǒng)計學意義，表明奧林巴斯AU640全自動生化分析儀系統(tǒng)檢測結(jié)果具有溯源性，從而實現(xiàn)2臺生化分析儀結(jié)果的一致性。3.3 許多實驗室擁有多臺全自動生化分析儀，品牌不同，所用試劑不同，試劑方法學不一定相同，但是同一實驗室所測結(jié)果差異必須在臨床可接受范圍之內(nèi),因此實驗室要經(jīng)常進行同一項目不同檢測系統(tǒng)間的偏倚評估4，按照EP9A2文件提供的方法，通過對比研究，我們認為用新鮮血清作為標準品可以實現(xiàn)2臺不同品牌生化分析儀所用試劑不同，試劑方法學不一定相同所測結(jié)果的一致性。表1 線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)（略）表2 各項目醫(yī)學決定水平及系統(tǒng)誤差（略）【參考文獻】 1 王樹輝，楊永紅，安任剛，等.病人新鮮血清作為校準液用于7170A全自動生化分析儀的溯源性分析.貴州醫(yī)藥,2006，30：256266.2 National Committee for Clinical Laboratory Standards. Method comparison and bias estimation using patient sampies.Approved Guideline EP 9A2.Pennsylvania,NCCLS.2002.3 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編.全國臨床檢驗操作規(guī)程.第3版.南