高考生物 專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用總復(fù)習(xí)課件 新人教版.ppt

考綱要求展示 知識(shí)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 一 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1 培養(yǎng)基 1 概念 人們按照微生物對(duì) 的不同需求 配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì) 2 成分 一般都含有碳源 水和 還需要滿足不同微生物生長(zhǎng)對(duì) 特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及 的要求 2 無菌技術(shù) 1 含義 指在培養(yǎng)微生物的操作中 所有 的方法 2 關(guān)鍵 防止外來 的入侵 3 方法 消毒 化學(xué)藥劑消毒法 滅菌 滅菌 干熱滅菌 滅菌 3 實(shí)驗(yàn)操作 1 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基過程 計(jì)算 溶化 倒平板 2 純化大腸桿菌的原理 在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成 形成單個(gè)菌落 此菌落是由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的子細(xì)胞群體 3 微生物的常用接種方法 和稀釋涂布平板法 接種過程仍然是 操作 二 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)1 分離原理 土壤中細(xì)菌之所以能分解尿素 是由于它們體內(nèi)能合成 這種物質(zhì)在把尿素分解成無機(jī)物的過程中起到 作用 2 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用 3 實(shí)驗(yàn)流程 土壤取樣 制備 微生物的培養(yǎng)與觀察 細(xì)菌的計(jì)數(shù) 三 分解纖維素的微生物的分離1 纖維素酶的組成 一種 它至少包括三種組分 即c1酶 酶和 酶 2 篩選方法 剛果紅染色法 即通過是否產(chǎn)生 來篩選纖維素分解菌 3 實(shí)驗(yàn)操作步驟 土壤取樣 將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 自我校對(duì) 一 1 1 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 2 氮源無機(jī)鹽ph氧氣2 1 防止雜菌污染 2 雜菌 3 煮沸消毒法紫外線消毒法灼燒高壓蒸汽3 1 稱量滅菌 2 單個(gè)細(xì)胞 3 平板劃線法無菌二 1 脲酶催化2 稀釋涂布平板法3 培養(yǎng)基三 1 復(fù)合酶cx葡萄糖苷2 透明圈3 選擇培養(yǎng)梯度稀釋挑選產(chǎn)生透明圈的菌落 微生物的培養(yǎng) 一 培養(yǎng)基的類型及其應(yīng)用 二 培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成 1 微生物最常利用的碳源是糖類 特別是葡萄糖 常利用的氮源是氨鹽 硝酸鹽 2 在微生物所需要的化合物中需要量最大的是碳源 3 微生物之所以需要補(bǔ)充生長(zhǎng)因子 是由于缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限 三 無菌技術(shù)1 消毒與滅菌的區(qū)別 2 實(shí)驗(yàn)室常用滅菌方法的比較 1 芽孢是細(xì)菌發(fā)育后期形成的休眠體 耐高溫 故消毒僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物而不包括其芽孢和孢子 2 滅菌和消毒的實(shí)質(zhì)大都是使微生物的蛋白質(zhì)或核酸發(fā)生變性 3 微生物分離中的無菌技術(shù) 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染 無菌技術(shù)可從如下四個(gè)方面展開 1 對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間 操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒 2 將用于微生物培養(yǎng)的器皿 接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌 3 為避免周圍環(huán)境中微生物的污染 實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行 4 實(shí)驗(yàn)操作時(shí) 應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸 例1 下列說法正確的是 a 培養(yǎng)基是為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)的b 培養(yǎng)基只有兩類 液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基c 除水以外的無機(jī)物只能提供無機(jī)鹽d 無機(jī)氮源不可能提供能量 解析 根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì) 可分為液體培養(yǎng)基 半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基 在液體培養(yǎng)基中加入不同量的凝固劑可形成半固體或固體培養(yǎng)基 除水以外的無機(jī)物如nh4hco3 既可以是碳源 也可以是氮源 不僅僅能提供無機(jī)鹽 無機(jī)氮源有時(shí)也能提供能量 如nh3可以為硝化細(xì)菌提供能量 答案 a 1 培養(yǎng)基的配制原則目的要明確 根據(jù)微生物的種類 培養(yǎng)目的選擇不同的原料配制培養(yǎng)基 營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào) 配制培養(yǎng)基時(shí)要注意各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例 ph要適宜 2 培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成各種培養(yǎng)基的具體配方不同 但一般都含有水 碳源 氮源和無機(jī)鹽 不同培養(yǎng)基還要滿足不同微生物對(duì)ph 特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求 1 2011 合肥質(zhì)檢 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的下列操作中 不正確的是 a 操作流程是計(jì)算 稱量 溶化 滅菌和倒平板b 將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同倒入燒杯中再加水 去紙c 滅菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2 瓊脂 并使其溶解d 將培養(yǎng)基冷卻到約50度時(shí) 在酒精燈火焰附近倒平板 解析 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的操作步驟是計(jì)算 稱量 溶化 滅菌 倒平板 將稱好的牛肉膏與稱量紙一同放在燒杯中 加入少量水 加熱 牛肉膏溶化并與稱量紙分離后 用玻璃棒撈出稱量紙 滅菌前將蛋白胨和氯化鈉加入燒杯 等培養(yǎng)基冷卻到50度左右時(shí) 在酒精燈火焰附近倒平板 答案 c 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 一 實(shí)驗(yàn)原理1 篩選菌株 常用選擇培養(yǎng)基 2 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù) 3 設(shè)置對(duì)照 二 實(shí)驗(yàn)流程1 土壤取樣 一般在距地表約3 8cm的土壤層取樣 富含有機(jī)物 潮濕 ph 7 2 制備培養(yǎng)基 準(zhǔn)備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照 用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用 3 微生物的培養(yǎng)與觀察 將土樣以1 101 102 依次等比稀釋至107稀釋度 按照濃度從低到高的順序涂布平板 注明培養(yǎng)基種類 培養(yǎng)日期以及平板培養(yǎng)樣品的稀釋度 將涂布好的培養(yǎng)皿放在30 溫度下培養(yǎng) 隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng) 會(huì)有不同的菌落產(chǎn)生 比較牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基中菌落的數(shù)量 形態(tài)等 并做好記錄 4 細(xì)菌的計(jì)數(shù) 當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí) 進(jìn)行計(jì)數(shù) 防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目 求出平均值 根據(jù)平板所對(duì)應(yīng)的稀釋度計(jì)算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目 例2 某同學(xué)在101 102 103倍稀釋液的平均菌落數(shù)為2760 295和46 則菌落總數(shù) 個(gè) ml 為 a 2 76 104b 2 95 104c 4 6 104d 3 775 104 解析 菌落計(jì)數(shù)法 注意是計(jì)算不同稀釋度的平均菌落數(shù) 首先選擇平均菌落數(shù)在30 300之間的 當(dāng)只有一個(gè)稀釋倍數(shù)的平均菌落數(shù)符合此范圍時(shí) 則以該平均菌落乘以稀釋倍數(shù)即為該樣品的細(xì)菌總數(shù) 若有兩個(gè)稀釋倍的平均菌落數(shù)均在30 300之間 則按兩者菌落總數(shù)之比值來決定 若比值小于2應(yīng)采取兩者的平均數(shù) 若大于2 則取其中較小的菌落總數(shù) 本題295 46在30 300之間 46 103與295 102比值為1 6 應(yīng)取二者平均數(shù) 46 103 295 102 2 3 775 104 若所有稀釋倍數(shù)的菌落數(shù)均不在30 300之間 則應(yīng)以最接近300或30的平均菌落乘以稀釋倍數(shù) 答案 d 微生物計(jì)數(shù)規(guī)則1 選擇菌落數(shù)在30 300的平板計(jì)數(shù) 2 若某兩個(gè)或多個(gè)稀釋濃度下獲得的菌落數(shù)均符合條件時(shí) 再看兩者菌落數(shù)的比值 若小于2 則取兩者的平均值 若大于2 則取最小值 3 計(jì)算方法 每克樣品中的菌落數(shù) c v m c 某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù) v 涂布平板所用稀釋液的體積 ml m 稀釋倍數(shù) 2 用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù) 在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中 得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果 正確的是 a 涂布了一個(gè)平板 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230b 涂布了兩個(gè)平板 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是215和260 取平均值238c 涂布了三個(gè)平板 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21 212和256 取平均值163d 涂布了三個(gè)平板 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210 240和250 取平均值233 解析 在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí) 一定要涂布至少3個(gè)平板 才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性 c項(xiàng)雖涂布了3個(gè)平板 但是 其中1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另兩個(gè)相差太遠(yuǎn) 說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤 因此 不能簡(jiǎn)單地將3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來求平均值 答案 d 分解纖維素的微生物的分離 一 實(shí)驗(yàn)原理 二 實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣 選擇培養(yǎng) 此步是否需要 應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定 梯度稀釋 將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落 例3 纖維素分解菌的篩選原理是 a 剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物b 剛果紅可以與水解的纖維二糖和葡萄糖形成紅色復(fù)合物c 剛果紅可以與纖維素酶形成紅色復(fù)合物d 剛果紅可以與纖維素分解菌結(jié)合形成紅色復(fù)合物 解析 剛果紅是一種染料 它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物 但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng) 剛果紅也不與纖維素酶或者與纖維素分解菌結(jié)合形成紅色復(fù)合物 答案 a 選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的濃度 確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物 涉及到微生物技術(shù)主要有 培養(yǎng)基的配制 無菌操作技術(shù) 稀釋涂布平板法 選擇培養(yǎng)基的作用 土壤取樣等 3 分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)過程中操作有誤的是 a