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文檔簡介

實(shí)驗(yàn)十二pH對(duì)酶活性的影響Exp 12EffectofChangesinpHonEnzymeActivity 一 實(shí)驗(yàn)原理 酶的活性 受環(huán)境pH的影響極為顯著 通常只在一定的pH范圍內(nèi) 酶才表現(xiàn)出活性 當(dāng)酶活性達(dá)到最高時(shí)的pH值稱為該酶的最適pH optimumpH 低于或高于最適pH時(shí) 酶的活性依次降低 酶的最適pH受底物性質(zhì)和緩沖液性質(zhì)的影響 不同酶的最適pH不同 但與該酶在生物體內(nèi)存在的部位有關(guān) 例如高等動(dòng)物的胃蛋白酶最適pH為1 5 2 5 而胃液的pH與此相近 胰蛋白酶的最適pH為8左右 而十二指腸附近腸道的pH值近乎中性 本實(shí)驗(yàn)使用唾液淀粉酶 salivaryamylase 來說明pH對(duì)酶活性的影響 唾液淀粉酶的最適pH為6 8 有人發(fā)現(xiàn)該酶在磷酸緩沖液中 其最適pH為6 4 6 6 二 實(shí)驗(yàn)用品 1 材料新鮮并稀釋200倍的唾液2 試劑 1 0 5 淀粉溶液 稱取0 5g淀粉溶于0 3 NaCl溶液中 2 0 2M磷酸氫二鈉溶液 3 0 1M檸檬酸溶液 4 碘化鉀 碘液 將KI20g及碘10g 溶于100ml蒸餾水中 使用前 稀釋10倍 3 儀器設(shè)備試管及試管架 2ml和5ml吸量管 恒溫水浴鍋 滴定管 50ml錐形瓶 三 方法和步驟 1 取8個(gè)50毫升錐形瓶 編號(hào) 按下表中的比例 用吸量管加入0 2M磷酸氫二鈉溶液和0 1M檸檬酸溶液 制備pH5 0 8 0的8種緩沖溶液 表1 pH5 0 8 0的8種緩沖溶液的制備 2 由8個(gè)錐形瓶中 各取緩沖液3ml 分別注入8支帶有編號(hào)的試管中 隨后于每個(gè)試管中 添加0 5 淀粉溶液2ml和稀釋200倍的唾液2ml 增加1個(gè)和5號(hào)內(nèi)容相同的試管 作為檢驗(yàn)淀粉的水解程度 向各試管加入稀釋唾液的時(shí)間間隔各為1分鐘 將各試管內(nèi)容物混勻 并依次置于37 恒溫水浴中保溫 3 5分鐘后 視酶的活性而定 一般5 10分鐘 每隔1分鐘由第5號(hào)試管之一吸取1滴混合液 置于白磁板上 加一小滴碘化鉀 碘溶液 檢查淀粉的水解程度 使實(shí)驗(yàn)結(jié)果成為橙黃色時(shí) 向所有試管依次添加1 2滴碘化鉀 碘溶液 充分混勻 加碘化鉀溶液時(shí)間間隔 由第一管起 也均為1分鐘 搖勻 觀察各試管內(nèi)容物的顏色 四 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 根據(jù)各試管內(nèi)容物呈現(xiàn)的顏色 可以看出pH對(duì)唾液淀粉酶活性的影響 指出其最適pH值 注意事項(xiàng)掌握第5

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