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實驗中所用的玻璃儀器等清潔與否直接影響實驗的結果,往往由于儀器的不清潔或被污染而造成較大的實驗誤差,有時甚至會導致實驗的失敗。 做生物化學實驗對玻璃儀器清潔程度的要求,比一般化學實驗的要求更高,這是因為:生物化學實驗中蛋白質、酶、核酸等往往都是以“毫克”和“微克”計的,稍有雜質,影響就很大;生物化學實驗對許多常見的污染雜質十分敏感,如金屬離子(鈣、鎂離子等)、去污劑和有機物殘基等,因此玻璃儀器(包括離心管等塑料器皿)是否徹底清洗凈是非常重要的。1. 初用玻璃儀器的清洗新購買的玻璃儀器表面常附著有游離的堿性物質,可先用0.5的去污劑洗刷,再用自來水洗凈,然后浸泡在12 鹽酸溶液中過夜( 不可少于4小時),再用自來水沖洗,最后用無離子水沖洗兩次,在100120烘箱內(nèi)烘干備用。2.使用過的玻璃儀器的清洗做完實驗,應立即把用過的玻璃儀器洗刷干凈。這是由于那時污物比較容易清洗,同時由于了解污物的性質,有利于選用適當?shù)南礈旆椒?。使用過的玻璃儀器的清洗,可先用自來水洗刷至無污物,再用合適的毛刷沾去污劑(粉) 洗刷,或浸泡在 0.5的清洗劑中超聲清洗(比色皿決不可超聲),然后用自來水徹底洗凈去污劑,再用無離子水洗兩次。玻璃儀器洗凈的標志是水傾出后,器壁上沒有水滴,否則重洗。若重洗后仍掛有水珠,則需用洗液浸泡數(shù)小時后(或用去污粉擦洗 ),重新清洗。3.石英和玻璃比色皿的清洗絕不可用強堿清洗,因為強堿會侵蝕拋光的比色皿。只能用洗液或12的去污劑浸泡,然后用自來水沖洗,這時使用一支綢布包裹的小棒或棉花球棒刷洗,效果會更好,清洗干凈的比色皿內(nèi)外壁不掛水珠。4. 塑料器皿的清洗聚乙烯、聚丙烯等制成的塑料器皿,在生物化學實驗中已用的越來越多。第一次使用塑料器皿時,可先用8mol/L 尿素(用濃鹽酸調 pH = 1)清洗,接著依次用無離子水、1mol/LKOH 和無離子水清洗,然后用13 mol/LEDTA 除去金屬離子的污染,最后用無離子水徹底清洗,以后每次使用時,可只用0.5的去污劑清洗,然后用自來水和無離子水洗凈即可。5.玻璃和塑料器皿的干燥生化實驗中用到的玻璃和塑料器皿經(jīng)常需要干燥,通常都是用烘箱或烘干機在110120 進行干燥,而不要用丙酮蕩洗后再吹干的方法來干燥,因為那樣會有殘留的有機物覆蓋在器皿的內(nèi)表面,從而干擾生物化學反應。定量的玻璃儀器不能加熱,一般采取控干或依次用少量酒精、乙醚刷洗后用溫熱的氣流吹干。硝酸纖維素的塑料離心管加熱時會發(fā)生爆炸,所以決不能放在烘箱中干燥,只能用冷風吹干。燒接的比色皿可以用超聲波清洗,但功率不要太大,時間也不要太長。粘接的比色皿不能用超聲波清洗,否則會洗壞。一、市場面上一般使用的石英比色皿均為石英粉燒接的,專用超聲波清洗, 洗比色皿清洗時毛面朝下。 二、 石英比色皿清潔方法: 1用乙醚和無水乙醇的混合液(各50%)清洗。 2. 若太臟可用專用洗液清洗。但時間要短(10分鐘),再用清水清洗干凈。 三、 不要用洗潔精之類的清潔劑。以免影響測量。 注: 高級分光光度計都采用專利技術加工的石英比色皿,采用石英本體材料經(jīng)過高溫熔融膠合,減少污染,使用壽命更長.(價格是普通石英比色皿二倍) 一、比色皿注意事項 比色皿一般為長方體,其底及兩側為磨毛玻璃,另兩面為光學玻璃制成的透光面采用熔融一體、玻璃粉高溫燒結和膠粘合而成。所以使用時應注意以下幾點:: 1、拿取比色皿時, 只能用手指接觸兩側的毛玻璃, 避免接觸光學面。同時注意輕拿輕放,防止外力對比色皿的影響,產(chǎn)生應力后破損。 2、凡含有腐蝕玻璃的物質的溶液,不得長期盛放在比色皿中。 3、不能將比色皿放在火焰或電爐上進行加熱或干燥箱內(nèi)烘烤;。 4、當發(fā)現(xiàn)比色皿里面被污染后,應用無水乙醇清洗,及時擦拭干凈。 5、不得將比色皿的透光面與硬物或臟物接觸。盛裝溶液時,高度為比色皿的2/3處即可,光學面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附,然后再用鏡頭紙或絲綢擦拭。 二、比色皿成組性測試 在測量時如對比色皿有懷疑,可自行檢測,方法如下: 1、用戶可將波長選擇置實際使用的波長上,將一套比色皿都注入蒸餾水 ,將其中一只的透射比調至100%處 ,測量其他各只的透射比, 凡透射比之差不大于0.5%,即可配套使用。 2、比色前將各個比色皿中裝入蒸餾水,在比色波長下進行比較,誤差在0.001吸光度以內(nèi)的比色皿選出4-8個進行比色測定,可避免因比色皿差異造成測量誤差。 3、我公司的比色皿,在出廠前檢測,原則上是0% 誤差。 三、比色皿的洗滌方法 隨著光譜分析儀器的迅速發(fā)展,微量、半微量、熒光等一些比色皿不斷出現(xiàn),對使用維護、清洗比色皿有更高的要求。一般在國外都是一次性使用,在國內(nèi)為了節(jié)約成本,開源節(jié)流而重復使用。如何對比色皿進行清洗,只能按照各種試劑,采用能溶解中和的方法來進行清洗,原則上一是不能損壞比色皿的結構和透光性能;二是能夠采用中和溶解的方法來達到比色皿干凈如初的效果。而分光光度計中比色皿潔凈與否是影響測定準確度的因素之一。因此,必須重視選擇正確的洗凈方法。下面介紹幾種清洗方式: 1、比如測定溶液是酸,如果不干凈,就用弱堿溶液洗,要是測定溶液是堿,如果不干凈,就用弱酸溶液洗,要是測定溶液是有機物質,如果不干凈,就用有機溶劑,比如酒精等溶液洗。 2、選擇比色皿洗滌液的原則是去污效果好,不損壞比色皿,同時又不影響測定。 3、分析常用的鉻酸洗液不宜用于洗滌比色皿,這是因為帶水的比色皿在該洗液中有時會局部發(fā)熱,致使比色皿膠接面裂開而損壞。同時經(jīng)洗液洗滌后的比色皿還很可能殘存微量鉻,其在紫外區(qū)有吸收,因此會影響鉻及其他有關元素的測定。一般主張使用硝酸和過氧化氫(5:1)的混合溶液泡洗,然后用水沖洗干凈。 4、對一般方法難以洗凈的比色皿,還可以采取以下兩種方法。 A、先將比色皿侵入含有少量陰離子表面活性劑的碳酸鈉(20 克/升)溶液泡洗,經(jīng)水沖洗后,再于過氧化氫和硝酸(5:1)混合溶液中侵泡半小時。 B、在通風櫥中用鹽酸、水和甲醇(1:3:4)混合溶液泡洗,一般不超過10分鐘。

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