12《藥物分析》第六章(2課時).doc

武漢軟件工程職業(yè)學(xué)院教案（附頁）章 節(jié)名 稱第六章 胺類藥物的分析裝 訂 線授 課安 排授 課時 數(shù)2授 課時 間第八周授 課方 法講授授 課 教 具多媒體教 學(xué)目 的1、 明確胺類藥物的性質(zhì)、結(jié)構(gòu)特征、鑒別試驗、雜質(zhì)檢查；2、 學(xué)會亞硝酸鈉滴定法、非水滴定法及HPLC的原理及方法。教 學(xué)重 點芳胺類藥物、苯乙胺類藥物及丙胺類藥物的分析；教 學(xué)難 點亞硝酸鈉滴定法、非水滴定法及HPLC的原理及方法；項目8 芳胺類藥物、苯乙胺類藥物及丙胺類藥物的分析胺類藥物的種類較多，根據(jù)其化學(xué)性質(zhì)結(jié)構(gòu)特點可分為芳胺類、芳烴胺類、脂肪胺類和磺酰胺類等幾大類。一、 典型藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)(一)對氨基苯甲酸酯類藥物本類藥物分子中都具有對氨基苯甲酸酯的母體，結(jié)構(gòu)通式如下：（1）典型藥物：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因和鹽酸丁卡因等局部麻醉藥。結(jié)構(gòu)為:苯佐卡因(Benzocaine) （鹽酸普魯卡因）(Procaine Hydrochloride)鹽酸丁卡因(Tetracaine Hydrochloride)鹽酸普魯卡因胺（抗心律失常藥）因其化學(xué)性質(zhì)與本類藥物很相似，也在此一并列入討論。其結(jié)構(gòu)如下：（2）主要化學(xué)性質(zhì)1.芳伯氨基特性 顯重氮化偶合反應(yīng)；與芳醛縮合反應(yīng)；易氧化變色等。2.水解特性 含酯鍵（或酰胺鍵）易水解。其水解的快慢受光線、熱或堿性條件的影響。水解產(chǎn)物主要為對氨基苯甲酸（PABA）。3.弱堿性 除苯佐卡因外，因其脂烴胺側(cè)鏈為叔胺氮原子，故具有弱堿性。因此能與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)；但在水溶液中不能用標(biāo)準(zhǔn)酸直接滴定，在非水溶劑中能滴定。4.其它特性 本類藥物的游離堿多為堿性油狀液體或低熔點固體，難溶于水，可溶于有機溶劑。其鹽酸鹽均系白色結(jié)晶性粉末，具有一定的熔點，易溶于水和乙醇，難溶于有機溶劑。(二)酰胺類藥物本類藥物均系苯胺的?；苌铮涔残允蔷哂蟹减０被?，基本結(jié)構(gòu)為：（1）典型藥物：對乙酰氨基酚（撲熱息痛）等解熱鎮(zhèn)痛藥、鹽酸利多卡因和鹽酸布比卡因等局部麻醉藥及醋氨苯砜抗麻風(fēng)藥。結(jié)構(gòu)為： 對乙酰氨基酚(Paracetamol) 醋氨苯砜(Acedapsone)鹽酸利多卡因(Lidocaine Hydrochloride)鹽酸布比卡因(Bupivacaine Hydrochloride) （2）主要化學(xué)性質(zhì)1.水解后顯芳伯氨基特性芳酰氨基在酸性溶液中易水解為芳伯氨基，并顯芳伯氨基特性反應(yīng)。水解反應(yīng)的速度受空間位阻影響：對乙酰氨基酚利多卡因、布比卡因。2.水解產(chǎn)物易酯化對乙酰氨基酚和醋氨苯砜醋酸醋酸乙酯的香味。3.酚羥基特性對乙酰氨基酚(FeCl3)。4.弱堿性 利多卡因和布比卡因的脂烴胺側(cè)鏈有叔胺氮原子，顯堿性，可以成鹽，與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)。其中與三硝基苯酚試液反應(yīng)生成的沉淀具有一定的熔點。5.與重金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng) 鹽酸利多卡因和鹽酸布比卡因酰氨基上的氮可在水溶液中與銅離子或鈷離子絡(luò)合，生成有色的配位化合物沉淀。此沉淀可溶于氯仿等有機溶劑后呈色，此外，本類藥物的紫外吸收和紅外吸收光譜特征均可供分析用。(三)苯乙胺類藥物本類藥物為擬腎上腺素類藥物，共性為具有苯乙胺的基本結(jié)構(gòu)。其中腎上腺素、鹽酸異丙腎上腺素和鹽酸多巴胺分子結(jié)構(gòu)中苯環(huán)的3,4位上都有2個鄰位酚羥基，與兒茶酚類似，都屬于兒茶酚胺類藥物。藥典中收載本類原料藥物近20種，本節(jié)在表63中僅列舉了13種，在鑒別、檢查和含量測定等方面具有代表性的藥物供分析用。（1）本類藥物的基本結(jié)構(gòu)為：（2）主要化學(xué)性質(zhì)1.弱堿性 本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有烴氨基側(cè)鏈，其氮為仲胺氮，故顯弱堿性。其游離堿難溶于水，易溶于有機溶劑，其鹽可溶于水。2.酚羥基特性 本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有鄰苯二酚（或苯酚）結(jié)構(gòu)，可與重金屬離子絡(luò)合呈色，露置空氣中或遇光、熱易氧化，色漸變深，在堿性溶液中更易變色。3.光學(xué)活性 多數(shù)藥物分子結(jié)構(gòu)中具有手性碳原子，具有旋光性，可供分析用。此外，藥物分子結(jié)構(gòu)中苯環(huán)上的其它取代基，如鹽酸克侖特羅的芳伯氨基，也各具特性均可供分析用。還可利用其紫外吸收與紅外吸收光譜進行定性或定量分析。二、典型藥物的質(zhì)量分析對氨基苯甲酸酯類藥物、酰胺類藥物的質(zhì)量分析（1）鑒別實驗1.重氮化偶合反應(yīng)分子結(jié)構(gòu)中具有芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物，均可發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成的重氮鹽可與堿性萘酚偶合生成有色的偶氮染料。苯佐卡因、鹽酸普魯卡因和鹽酸普魯卡因胺(鹽酸溶液中) + 亞硝酸鈉進行重氮化反應(yīng)；對乙酰氨基酚和醋氨苯砜(鹽酸或硫酸)加熱水解 + 亞硝酸鈉進行重氮化反應(yīng)。如鹽酸普魯卡因的鑒別反應(yīng)如下：2.水解產(chǎn)物反應(yīng)本類藥物分子中有些具有酯的結(jié)構(gòu)，在堿性條件下水解，利用其水解產(chǎn)物與試劑的反應(yīng)進行鑒別。鹽酸普魯卡因的鑒別方法取本品約0.1g，加水2ml溶解后，加10氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀，加熱變?yōu)橛蜖钗铮ㄆ蒸斂ㄒ颍焕^續(xù)加熱，產(chǎn)生的蒸汽（二乙氨基乙醇）能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色；熱至油狀物消失后（生成可溶于水的對氨基苯甲酸鈉），放冷，加酸酸化，即析出白色沉淀。此沉淀能溶于過量的鹽酸。3.與三氯化鐵反應(yīng)-對乙酰氨基酚（+FeCl3試液藍(lán)紫色）。4.紅外吸收光譜紅外吸收光譜具有特征性強，專屬性好的特點。因此，國內(nèi)外藥典均把紅外吸收光譜作為一種鑒別方法，而且采用該法鑒別的藥品不斷增加。如中國藥典（1995年版）用紅外吸收光譜法鑒別的藥品，由1990年版的207種增加到316種。（2）雜質(zhì)檢查鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查：普魯卡因分子結(jié)構(gòu)中有酯鍵，易發(fā)生水解反應(yīng)。其注射液制備過程中受滅菌溫度、時間、溶液pH值、貯藏時間以及光線和金屬離子等因素的影響，可發(fā)生水解反應(yīng)生成對氨基苯甲酸和2-二乙氨基醇。其中對氨基苯甲酸隨貯藏時間的延長或高溫加熱，可進一步脫羧轉(zhuǎn)化為苯胺，而苯胺又可被氧化為有色物，使注射液變黃，療效下降，毒性增加。故中國藥典90年版規(guī)定，本品注射液應(yīng)檢查水解產(chǎn)物對氨基苯甲酸，其限度不得超過1.2。檢查方法 精密量取本品，加乙醇稀釋使成為每1ml中含鹽酸普魯卡因2.5mg的溶液，作為供試品溶液。取對氨基苯甲酸對照品,加乙醇制成每1ml中含30g的溶液,作為對照品溶液。取上述兩種溶液各10L，分別點于含有羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠H薄層板上，用苯冰醋酸丙酮甲醇（14:1:1:4）為展開劑，展開后，取出晾干，用對二甲氨基苯甲醛溶液（2對二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加入冰醋酸5ml制成）噴霧顯色。供試品溶液如顯與對照品溶液相應(yīng)的雜質(zhì)斑點，其顏色與對照品溶液主斑點比較，不得更深。（3）含量測定1.亞硝酸鈉滴定法本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基，在酸性溶液中可與亞硝酸鈉反應(yīng)，可用亞硝酸鈉滴定法測定含量。由于本法適用范圍廣，常被國內(nèi)外藥典所采用。芳伯氨基藥物在酸性溶液中與亞硝酸鈉定量反應(yīng)，生成重氮鹽，用永停法或外指示劑法指示反應(yīng)終點。2.高效液相色譜法用高效液相色譜法，以苯甲酸為內(nèi)標(biāo)，可以同時測定鹽酸普魯卡因注射液中的普魯卡因及其降解產(chǎn)物對氨基苯甲酸(PABA)，不需分離提取，方法準(zhǔn)確簡便。苯乙胺類藥物的質(zhì)量分析（1）鑒別實驗1.與三氯化鐵反應(yīng)-酚羥基腎上腺素和鹽酸去氧腎上腺素等藥物的分子結(jié)構(gòu)中具有酚羥基，與Fe3+離子絡(luò)合顯色，加入堿性溶液，隨即被高鐵離子氧化而顯紫色或紫紅色。2.與甲醛硫酸反應(yīng)腎上腺素和鹽酸去氧腎上腺素等藥物可與甲醛在硫酸中反應(yīng)，形成具有醌式結(jié)構(gòu)的有色化合物。3.氧化反應(yīng)-酚羥基本類藥物分子結(jié)構(gòu)中多數(shù)具有酚羥基，易被碘、過氧化氫、鐵氰化鉀等氧化劑氧化而呈現(xiàn)不同的顏色。如腎上腺素在中性或酸性條件下，被碘或過氧化氫氧化后，生成腎上腺素紅，放置可變?yōu)樽厣嗑垠w；鹽酸異丙腎上腺素在偏酸性條件下被碘迅速氧化，生成異丙腎上腺素紅，加硫代硫酸鈉使碘的棕色消退，溶液顯淡紅色。重酒石酸去甲腎上腺素在上述條件下比較穩(wěn)定，幾乎不被碘氧化。為了與腎上腺素和鹽酸異丙腎上腺素相區(qū)別，中國藥典規(guī)定本品加酒石酸氫鉀飽和溶液（pH=3.56）溶解，加碘試液放置5分鐘后，加硫代硫酸鈉試液，溶液為無色或僅顯微紅色或淡紫色。在此條件下腎上腺素和鹽酸異丙腎上腺素可被氧化產(chǎn)生明顯的紅棕色或紫色。在pH 6.5的緩沖液中，這三種藥物均可被碘氧化產(chǎn)生紅色。故在pH為6.5條件下加碘試液，無法區(qū)別這三種藥物。（2）雜質(zhì)檢查1.酸度檢查2.堿性溶液的澄清度與顏色（3）含量測定本類藥物的原料多采用非水溶液滴定法和溴量法測定含量，其制劑的測定方法較多，有提取容量法、陰離子表面活性劑滴定法、比色法、紫外分光光度法和高效液相色譜法等。1.非水溶液滴定法在列舉的13種典型藥物中，有10種藥物的原料藥均采用非水溶液滴定法測定含量。常用的測定條件為：冰醋酸為溶劑，加入醋酸汞試液以消除氫鹵酸的干擾，并用結(jié)晶紫指示液指示終點。僅鹽酸甲氧明測定中以萘酚苯甲醇指示終點；鹽酸苯乙雙胍和鹽酸克侖特羅的測定采用電位滴定法。如堿性較弱，終點不明顯可加入醋酐，提高其堿性，使終點突躍明顯。重酒石酸去甲腎上腺素的測定 取本品0.2g，精密稱定，加冰醋酸10ml，振搖溶解后(必要時微溫)，加結(jié)晶紫指示劑1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液顯藍(lán)綠色，并將滴定結(jié)果用空白試驗校正。由于重酒石酸在冰醋酸溶液中酸性較弱，不干擾高氯酸的滴定和結(jié)晶紫指示劑