蘇教版選修1 第一章 第二節(jié) 分離特定的微生物并測定其數(shù)量 學案.docVIP

1.實驗室中分離微生物的方法有平板分離法和選擇培養(yǎng)分離，平板分離法常用的有涂布平板法和混合平板法。2針對某種微生物的特性，設(shè)計一個特定的環(huán)境，使之特別適合這種微生物的生長，而抑制其他微生物的生長。這種通過選擇培養(yǎng)進行微生物純培養(yǎng)分離的技術(shù)稱為選擇培養(yǎng)分離。3測定微生物數(shù)量的常用方法有涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)法。涂布平板法計數(shù)的結(jié)果與待測樣品中真正的含菌數(shù)量相比往往偏低。4涂布平板法培養(yǎng)和計數(shù)微生物的流程為：準備實驗器材采集土壤，制備懸液選擇適于分離特定微生物的培養(yǎng)基接種培養(yǎng)與觀察計數(shù)菌落。5涂布平板法計數(shù)微生物的公式：每克土壤樣品的細菌數(shù)某一稀釋度幾次重復(fù)培養(yǎng)后的菌落平均數(shù)稀釋倍數(shù)(涂布所用稀釋液為1 ml)第二節(jié)分離特定的微生物并測定其數(shù)量微生物的分離1分離原理在實驗室中利用選擇培養(yǎng)基可以篩選和分離出某種微生物，然后在高度稀釋的條件下，在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)該微生物形成的單個菌落，即為純培養(yǎng)物。2分離方法(1)平板分離法：包括涂布平板法和混合平板法。能將單個微生物分離和固定在固體培養(yǎng)基表面或里面，每個孤立的活微生物體經(jīng)過生長、繁殖均可形成單個菌落。(2)選擇培養(yǎng)分離：科學家針對某種微生物的特性，設(shè)計一個特定的環(huán)境，使之特別適合這種微生物的生長，而抑制其他微生物的生長。這種通過選擇培養(yǎng)進行微生物純培養(yǎng)分離的技術(shù)，稱為選擇培養(yǎng)分離。(3)根據(jù)菌落特征初步分離：菌落的含義：是指單個微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到一定程度，形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞生長群體。菌落特征：不同微生物在特定培養(yǎng)基上生長形成的菌落一般都具有穩(wěn)定的特征，如菌落的大小、形狀、邊緣特征、隆起程度、顏色等，這些可以成為對微生物進行分類、鑒定的重要依據(jù)。在選擇培養(yǎng)分離微生物的過程中，“選擇培養(yǎng)”的培養(yǎng)基按物理性質(zhì)劃分屬于什么培養(yǎng)基？為什么？提示：固體培養(yǎng)基。便于選擇、分離所需要的微生物。1涂布平板法與混合平板法的比較項目操作特點結(jié)果涂布平板法取一定稀釋度的樣品涂布平板用無菌玻璃刮鏟將樣品涂抹均勻先制作瓊脂平板后加入菌液細菌菌落通常僅在平板表面生長混合平板法取一定稀釋度的樣品與熔化的瓊脂混合將與樣品混合后的瓊脂倒入無菌培養(yǎng)皿菌液與瓊脂混合，共同倒平板細菌菌落出現(xiàn)在平板表面及內(nèi)部2.選擇培養(yǎng)基的選擇作用(1)原理：根據(jù)不同微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性不同而制備培養(yǎng)基。(2)方法：在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)。例如，加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌；加入高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。 例如，缺乏氮源時可以分離固氮微生物；石油作為唯一碳源時，可以分離出能消除石油污染的微生物；用含無機碳源的培養(yǎng)基分離自養(yǎng)型微生物。改變微生物的培養(yǎng)條件。例如，將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)可以得到耐高溫的微生物；用普通培養(yǎng)基在無氧條件下分離厭氧型和兼性厭氧型微生物。土壤微生物的分離、培養(yǎng)與數(shù)量測定1涂布平板法培養(yǎng)和計數(shù)土壤微生物(1)過程：(2)計數(shù)：每克土壤樣品的細菌數(shù)某一稀釋度幾次重復(fù)培養(yǎng)后的菌落平均數(shù)稀釋倍數(shù)(涂布所用稀釋液為1 ml)2顯微鏡直接計數(shù)法(1)原理：利用血球計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。(2)血球計數(shù)板：血球計數(shù)板是一塊特制的載玻片。其上有特定面積為1 mm2、高為0.1 mm的計數(shù)室，一個計數(shù)室又被分成25個(或16個)中方格，每個中方格再被劃分成16個(或25個)小方格，每個計數(shù)室都由400個小方格組成。(3)操作過程：將清潔干燥的血球計數(shù)板蓋上蓋玻片，用無菌的毛細滴管吸取搖勻的土壤微生物懸液，在蓋玻片的邊緣滴一小滴，讓菌液沿著縫隙靠毛細滲透作用自動進入計數(shù)室。加樣后靜止5 min，然后在顯微鏡下計數(shù)45個中格中的細菌數(shù)，并求出每個小格所含細菌的平均數(shù)，再按計算公式求出每毫升樣品中所含的菌體總數(shù)。(4)計算公式：1 ml懸液所含菌體總數(shù)每小格平均菌體數(shù)400104稀釋倍數(shù)。3分離土壤中能分解纖維素的微生物(1)實驗?zāi)康模悍蛛x以纖維素為唯一碳源的微生物。(2)培養(yǎng)基配方特點：纖維素是唯一的碳源。(3)基本步驟：制備培養(yǎng)基制備土壤懸液接種培養(yǎng)觀察。1閱讀教材p19表11，并思考回答下列問題：(1)在培養(yǎng)基的配方中，為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是什么物質(zhì)？瓊脂的作用是什么？提示：碳源主要是葡萄糖，氮源是尿素。瓊脂的作用是作為凝固劑。(2)該培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用？如果具有，是如何進行選擇的？提示：該培養(yǎng)基對微生物有選擇作用。該培養(yǎng)基的氮源比較特殊，是尿素，只允許能以尿素作為氮源的微生物生長。(3)該培養(yǎng)基屬于何種類型？提示：該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，又屬于選擇培養(yǎng)基。2通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，獲得的結(jié)果與實際活菌數(shù)相比，是偏高、偏低還是正好吻合？為什么？提示：偏低。一個菌落可能由兩個或兩個以上的細菌所形成。1直接計數(shù)法與間接計數(shù)法的比較微生物生長量的測定有計數(shù)法、重量法、生理指標法等，但是一般使用計數(shù)法，計數(shù)法可分為直接計數(shù)法和間接計數(shù)法。二者比較如下：項目直接計數(shù)法間接計數(shù)法主要用具顯微鏡、細菌計數(shù)板培養(yǎng)基計數(shù)依據(jù)菌株本身培養(yǎng)基上菌落數(shù)優(yōu)點計數(shù)方便、操作簡單計數(shù)的是活菌缺點死菌、活菌都計算在內(nèi)操作較復(fù)雜，且有一定誤差計算公式每毫升原液含菌株數(shù)400104每小格平均菌株數(shù)稀釋倍數(shù)每毫升原液含菌株數(shù)培養(yǎng)基上平均菌落數(shù)稀釋倍數(shù)(涂布所用稀釋液為1 ml)特別提醒(1)每次用移液管移取懸液前都要用洗耳球吹口對準移液管末端將懸液吸入或排出移液管數(shù)次，以使懸液均勻。(2)在涂抹平板操作中，每個步驟都要注意無菌操作，以防培養(yǎng)基被污染，影響實驗效果。(3)每一稀釋倍數(shù)菌液都至少要涂布3個平板，作為實驗重復(fù)組，增強實驗結(jié)果的說服力與準確性。選擇菌落數(shù)為30300一組進行計數(shù)，并求平均值，若其中有菌落數(shù)與其他實驗差距懸殊者，應(yīng)舍棄該實驗數(shù)據(jù)，不進行統(tǒng)計、計算。2土壤中能分解纖維素的微生物分離步驟(1)制備選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中提供碳源的物質(zhì)只有纖維素。(2)制備土壤稀釋液：依次制備稀釋度為101、102、103、104、105的土壤稀釋液。(3)接種培養(yǎng)：分別吸取各稀釋度的土壤稀釋液1 ml轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基中，每個稀釋度重復(fù)3次，置培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(4)觀察菌落的生成情況。 選擇培養(yǎng)基的特點和應(yīng)用例1下表是培養(yǎng)分解尿素的細菌的培養(yǎng)基配方，請回答下面的問題：編號成分含量kh2po41.4 gna2hpo42.1 gmgso47h2o0.2 g葡萄糖10.0 g尿素1.0 g瓊脂15.0 g將上述物質(zhì)溶解后，用自來水定容到1 000 ml(1)在該培養(yǎng)基的配方中，為微生物提供碳源的是_，提供氮源的是_。(2)絕大多數(shù)微生物都能利用_，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解_。(3)分析該培養(yǎng)基的配方，該培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用？如果具有，又是如何進行選擇的？思路點撥精講精析碳源是提供碳元素的物質(zhì)，氮源是提供氮元素的物質(zhì)，所以該培養(yǎng)基中碳源是葡萄糖，氮源是尿素。該培養(yǎng)基的配方中含有凝固劑瓊脂，所以，配制的一定為固體培養(yǎng)基。絕大多數(shù)生物都能利用葡萄糖，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以這種培養(yǎng)基對微生物有選擇作用。選擇的原理是只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長。答案(1)葡萄糖尿素(2)葡萄糖尿素(3)該培養(yǎng)基對微生物具有選擇作用。以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可以分離得到產(chǎn)生脲酶的微生物(即分解尿素的微生物)。微生物選擇培養(yǎng)的原理(1)選擇培養(yǎng)微生物的方法通常有兩種：可利用該分離對象對某一營養(yǎng)物質(zhì)有“嗜好”的原理，專門在培養(yǎng)基中加入該營養(yǎng)物質(zhì)，從而使它成為一種加富培養(yǎng)基?？衫迷摲蛛x對象對某種抑菌物質(zhì)的抗性，在混合培養(yǎng)物中加入該抑菌物質(zhì)，經(jīng)培養(yǎng)后，其他微生物生長受抑制，而分離對象卻可乘機大大增殖，在數(shù)量上占優(yōu)勢。(2)原則上只有目的微生物才能在選擇培養(yǎng)基上生長。但實際上，微生物培養(yǎng)是一個非常復(fù)雜的問題，有些微生物可以利用其他微生物的代謝產(chǎn)物生長繁殖，因此能夠在選擇培養(yǎng)基上生長的微生物不一定都是所需要的微生物，還需要進一步的驗證。分離土壤中分解尿素的細菌，對培養(yǎng)基的要求是()加尿素不加尿素加瓊脂不加瓊脂加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸鹽不加硝酸鹽abc d解析：選c要分離土壤中分解尿素的細菌，培養(yǎng)基中尿素應(yīng)是唯一的氮源，不能加硝酸鹽；在固體培養(yǎng)基上形成菌落，要加瓊脂作凝固劑；分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物，要加有機碳源(如葡萄糖)。以科研課題為載體，考查微生物分離與計數(shù)例2自然界中的微生物往往是混雜生長的。人們在研究微生物時一般要將它們分離提純，然后進行數(shù)量的測定。下面是對大腸桿菌進行數(shù)量測定的實驗，請回答有關(guān)問題：實驗步驟：(1)制備稀釋倍數(shù)為102、103、104、105、106的系列稀釋液。(2)選用_法接種樣品。(3)適宜溫度下培養(yǎng)。結(jié)果分析：(1)測定的大腸桿菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果，正確可信的是()a一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是23b兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是22和26，取平均值24c三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、5和52，取平均值26d四個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、30、24和25，取平均值25(2)一同學在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4，那么每毫升樣品中的菌株數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2 ml)_。(3)用這種方法測定密度，實際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量_，因為_。(4)某同學在測定大腸桿菌的密度時發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落，能否肯定該大腸桿菌的品系被污染了？為什么？精講精析實驗步驟：(2)若要對大腸桿菌進行計數(shù)，常用涂抹平板法接種樣品。結(jié)果分析：(1)在選取樣品時，應(yīng)選取多個菌落數(shù)相差不大的平板計數(shù)，取其平均值。(2)每毫升樣品中菌株數(shù)稀釋倍數(shù)即23.40.21061.17108。(3)由于菌落可能由1個或多個細菌連在一起生長而成的，所以實際活菌數(shù)量比測得數(shù)量多。(4)污染的原因可能是菌種不純，也可能是培養(yǎng)基滅菌不徹底或接種過程操作不當。答案實驗步驟：(2)涂布平板結(jié)果分析：(1)d(2)1.17108(3)多當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落(4)不能。因為不能排除雜菌來自培養(yǎng)基或培養(yǎng)過程。本題出錯原因是不理解菌落數(shù)目的統(tǒng)計規(guī)則。實驗時，每一個濃度至少涂布三個平板，以增強實驗的說服力和準確性。當樣品的稀釋倍數(shù)足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌。計數(shù)時選擇菌落數(shù)在30300的平板計數(shù)，若某兩個或多個稀釋濃度下獲得的菌落數(shù)符合條件時，再看兩者菌落數(shù)的比值：若小于2，則取兩者的平均值；若大于2，則取小者。 課堂回扣練習1在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基稱作()a鑒別培養(yǎng)基b加富培養(yǎng)基c選擇培養(yǎng)基 d基礎(chǔ)培養(yǎng)基解析：選c鑒別培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種特殊化學物質(zhì)，使微生物的代謝產(chǎn)物與特殊化學物質(zhì)發(fā)生特定化學反應(yīng)，產(chǎn)生明顯特征變化以達到鑒別特定微生物的培養(yǎng)基；加富培養(yǎng)基一般用來培養(yǎng)營養(yǎng)要求比較苛刻的異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基；基礎(chǔ)培養(yǎng)基是含有一般微生物生長繁殖所需的基本營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基，例如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基；選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入特殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學物質(zhì)，抑制不需要微生物的生長，有利于所需微生物生長的培養(yǎng)基。2下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的有關(guān)敘述，錯誤的是()a微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進行消毒b測定土壤樣品中的細菌數(shù)目，常用菌落計數(shù)法c分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度d分離能分解尿素的細菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源解析：選a消毒不能殺死培養(yǎng)基上的所有微生物，所以在培養(yǎng)微生物前，應(yīng)用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基進行徹底滅菌。3某同學在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上測得平板上的菌落數(shù)的平均值為215，那么每毫升樣品中菌落數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.1 ml)()a2.15108 b2.15109c215 d21.5解析：選b稀釋倍數(shù)為106,0.1 ml稀釋液的菌落數(shù)的平均值為215，則每毫升樣品中菌落數(shù)就為2150.11062.15109。4用涂布平板法來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)時，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)就能推測出樣品中的活菌數(shù)，原因是()a平板上的一個菌落就是一個細菌b菌落中的細菌數(shù)是固定的c此時的一個菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個活菌d此方法統(tǒng)計的菌落數(shù)一定與活菌的實際數(shù)相同解析：選c當稀釋倍數(shù)適宜時，培養(yǎng)基上的一個菌落可能來源于樣品稀釋液中的一個活菌，但也可能由2個或2個以上活菌生長而成，因此菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)低。5(新課標全國卷)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_；然后，將1 ml水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1 ml稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過_滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是_。(3)示意圖a和b中，_表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_的利用率。解析：(1)為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間。(2)0.1 ml稀釋液中平均有38個活菌，可推測每升水樣中的活菌數(shù)38101001 0003.8107(個)。(3)接種環(huán)、接種針或其他金屬用具直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌。在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。(3)比較兩圖可以看出，a是用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果，b是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)由于振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因此振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。答案：(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3)b(4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì) 課下綜合檢測一、選擇題1下列關(guān)于微生物分離的敘述，錯誤的是()a平板分離法能將單個微生物經(jīng)過培養(yǎng)形成便于移植的菌落b只有細菌才可以形成菌落，所以只有分離細菌時才可能獲得菌落c平板分離法有涂布平板法和混合平板法等d涂布平板法得到的菌落僅在平板的表面生長解析：選b大多數(shù)細菌、許多真菌和單細胞藻類均能在固體培養(yǎng)基上形成菌落。2有關(guān)涂布平板法的敘述錯誤的是()a首先將菌液進行一系列的梯度稀釋b然后將不同稀釋度的菌液分別涂抹到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面c適宜條件下培養(yǎng)d結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落解析：選d涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在適宜條件下培養(yǎng)的過程。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。3從土壤中分離能分解尿素的微生物與分離能分解纖維素的微生物時，所利用的培養(yǎng)基中最明顯的特點是()a前者尿素是唯一的氮源，后者纖維素是唯一的碳源b二者都具有瓊脂成分c二者的ph相同d以上均不正確解析：選a由于分離微生物所利用的是選擇培養(yǎng)基，所以培養(yǎng)基中有與其他培養(yǎng)基不同的某種成分，該種成分是由培養(yǎng)的目的微生物而定的。分離能分解尿素的微生物，所利用的培養(yǎng)基中尿素是唯一的氮源，凡是能分解尿素的微生物就能生存，否則就不能生存。由相同的原理可知，分離能分解纖維素的微生物時，纖維素是唯一的碳源。4下列關(guān)于分離與培養(yǎng)土壤微生物的操作，敘述錯誤的是()a制備土壤懸液時，應(yīng)依此配制成濃度分別為102、103、104、105、106、107、108 g/ml的土壤懸液b制平板時，應(yīng)將熔化的培養(yǎng)基冷卻到4550 后再倒入培養(yǎng)皿中，并迅速蓋好培養(yǎng)皿蓋c接種時應(yīng)從最低的土壤懸液開始，并且每個濃度設(shè)置3個重復(fù)組d計數(shù)菌落時，應(yīng)選取菌落數(shù)為100300的一組為代表進行統(tǒng)計解析：選d分離與培養(yǎng)土壤微生物的操作過程中，對土壤懸液應(yīng)進行10倍濃度梯度差的稀釋，并稀釋至108g/ml。制平板時應(yīng)防止雜菌的污染，接種時應(yīng)從最低的土壤懸液開始，并且每個濃度設(shè)置3個重復(fù)組。計數(shù)時應(yīng)選取菌落數(shù)為30300的一組為代表進行統(tǒng)計。5選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物，通過不含有機物的培養(yǎng)基、缺氮培養(yǎng)基、含尿素(不含其他氮源)的培養(yǎng)基，可從土壤中分離出的微生物依次是()a硝化細菌、放線菌、根瘤菌b根瘤菌、青霉菌、固氮菌c異養(yǎng)型細菌、放線菌、硝化細菌d自養(yǎng)型細菌、固氮菌、分解尿素的細菌解析：選d選擇培養(yǎng)基是根據(jù)不同微生物的代謝特點，通過改變培養(yǎng)基的成分，以達到選擇某種微生物的目的。不含有機物的培養(yǎng)基可以選擇自養(yǎng)型微生物，缺少氮元素的培養(yǎng)基可以培養(yǎng)固氮微生物，含尿素(不含其他氮源)的培養(yǎng)基可以選擇能分解尿素的微生物。6下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是()akh2po4、na2hpo4、mgso47h2o、葡萄糖、尿素、瓊脂、蒸餾水bkh2po4、na2hpo4、mgso47h2o、葡萄糖、瓊脂、蒸餾水ckh2po4、na2hpo4、mgso47h2o、尿素、瓊脂、蒸餾水dkh2po4、na2hpo4、mgso47h2o、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、蒸餾水解析：選a在a項的培養(yǎng)基中既有尿素作為唯一氮源，又有其他各種成分，可以選擇出分解尿素的細菌；而c項中缺少碳源，b項中無尿素作氮源，d項中有牛肉膏可提供氮源的成分。7用涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果，正確的是()a涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是230b涂布了兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是215和260，取平均值238c涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、212和256，取平均值163d涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是210、240和256，取平均值235解析：選d在設(shè)計實驗時，一定要涂布至少3個平板，作為重復(fù)組，才能增強實驗的說服力與準確性，所以a、b兩項不正確。c項雖涂布了3個平板，但是其中1個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差太遠，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，因此，不能簡單地用3個平板的計數(shù)值來求平均值。8下列說法中不正確的是()a科學家從7080 熱泉中分離得到耐高溫的taq dna聚合酶b統(tǒng)計某一稀釋度的5個平板的菌落數(shù)依次為m1、m2、m3、m4、m5，以m3作為該樣品菌落數(shù)的估計值c設(shè)置對照實驗的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度d同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，種類最多解析：選btaq dna聚合酶是從一種水生耐熱菌中分離提取的，這種耐熱菌能在7080 的高溫條件下生長。統(tǒng)計平板的菌落數(shù)時，應(yīng)選擇菌落數(shù)在30300的平板，每個稀釋度至少取3個平板，為了提高準確度，應(yīng)求其平均值。設(shè)置對照實驗的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度。土壤有“微生物的天然培養(yǎng)基”之稱，同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，種類最多。二、非選擇題9尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類、數(shù)量繁多，某生物小組試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如下表所示，實驗步驟如下圖所示。請分析回答：kh2po4na2hpo4mgso47h2o葡萄糖尿素瓊脂1.4 g2.1 g0.2 g10 g1 g15 g(1)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選_，這種培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的_和_，實驗中需要振蕩培養(yǎng)，目的是_。(3)轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基上時，常采用_法接種，獲得單個菌落后繼續(xù)篩選。(4)下列材料或用具中，需要滅菌的是_；需要消毒的是_(填序號)。培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管實驗操作者的雙手(5)在做分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗時，a同學從對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只篩選出大約50個菌落。a同學的實驗結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有_(填序號)。土樣不同培養(yǎng)基被污染操作失誤沒有設(shè)置對照解析：(1)培養(yǎng)基中加入尿素為唯一氮源能夠篩選出能分解尿素的細菌，此培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)尿素為“目的菌”提供氮源，葡萄糖為“目的菌”提供碳源。振蕩培養(yǎng)基可溶入氧氣，為培養(yǎng)的目的菌提供必需的氧氣。(5)a同學比其他同學得到的實驗結(jié)果數(shù)據(jù)大，可能是由于選取的土樣不同，培養(yǎng)基滅菌不徹底或操作過程中受到雜菌污染，也可能是操作失誤引起的，如稀釋不夠準確等。培養(yǎng)基上篩選出的細菌數(shù)量與是否設(shè)置對照無關(guān)。答案：(1)目的菌選擇(2)尿素葡萄糖為目的菌提供氧氣(3)涂布平