「細(xì)胞凋亡作用機(jī)理【學(xué)習(xí)資料】」.ppt

細(xì)胞衰老與細(xì)胞凋亡 1 學(xué)習(xí)資料 衰老和死亡是生命的基本現(xiàn)象 生命要不斷的更新 種族要不斷的繁衍 而這種過程就是在生與死的矛盾中進(jìn)行的 至少從細(xì)胞水平來看 死亡是不可避免的 衰老過程發(fā)生在生物界的整體水平 種群水平 個體水平 細(xì)胞水平以及分子水平等不同的層次 2 學(xué)習(xí)資料 衰老是細(xì)胞的一種重要的生命活動 Hayflick界限 第1節(jié)細(xì)胞衰老 CELLAGING CELLSENESCENCE 細(xì)胞衰老的研究 3 學(xué)習(xí)資料 成人早衰癥 Werner氏綜合癥 嬰幼兒早衰癥 Hayflick Guilford綜合癥 4 學(xué)習(xí)資料 決定細(xì)胞衰老的因素在細(xì)胞內(nèi)部 而不在外部環(huán)境 決定細(xì)胞衰老的表達(dá)是細(xì)胞核而不是細(xì)胞質(zhì) 長壽基因和衰老基因 細(xì)胞在體內(nèi)條件下的衰老 5 學(xué)習(xí)資料 衰老細(xì)胞結(jié)構(gòu)的變化 細(xì)胞核 核膜的內(nèi)折 染色質(zhì)固縮化 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 有序排列被破壞 彌散于核周胞質(zhì)中糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)解體 減少 線粒體 數(shù)目減少 體積增大 有時可看到嵴 致密體 積累增多 是由溶酶體或線粒體轉(zhuǎn)化 膜系統(tǒng)的變化 凝膠相或固相 通透性和流動性降低細(xì)胞間間隙連接減少組成間隙連接的膜內(nèi)顆粒聚集體變小 6 學(xué)習(xí)資料 皮膚干燥 發(fā)皺 頭發(fā)變白 老人斑 吸收能力下降 細(xì)胞水分減少 體積減小 細(xì)胞內(nèi)的酶活性降低 細(xì)胞內(nèi)色素 脂褐素 的累積 細(xì)胞膜通透性功能改變 無力 細(xì)胞內(nèi)呼吸速度減慢 衰老癥狀與原因分析 7 學(xué)習(xí)資料 就生物個體而言 在其整個的生長發(fā)育過程中也不斷地發(fā)生細(xì)胞選擇性地死亡 這對保證機(jī)體的生存 保持機(jī)體對內(nèi)外環(huán)境變化的適應(yīng)能力 維持其正常的發(fā)育均具有重要意義 此種細(xì)胞死亡稱為編程性細(xì)胞死亡 programmedcelldeath PCD 也稱細(xì)胞凋亡 apoptosis 編程性細(xì)胞死亡 8 學(xué)習(xí)資料 細(xì)胞凋亡 apoptosis 由基因控制的自主性有序死亡 亦稱程序性死亡 programmedcelldeath PCD Apo ptosis來源于希臘語 fromfall 細(xì)胞的死亡猶如秋天樹葉的凋落1965年Kerr J F R 對大鼠肝臟門靜脈結(jié)扎后肝細(xì)胞溶酶體的觀察 JPathol Bacteriol 90 419 1965 1972年澳大利亞Kerr和Curry提出 9 學(xué)習(xí)資料 10 學(xué)習(xí)資料 線蟲 C elegant 中的細(xì)胞程序性死亡 線蟲 成體959個細(xì)胞 但在發(fā)育過程中有131個細(xì)胞會注定發(fā)生PCDPCD發(fā)生時間 1h左右參與線蟲PCD的基因 目前已知的有14個 凋亡的回顧 11 學(xué)習(xí)資料 programmedcelldeath PCD 經(jīng)典凋亡模型 12 學(xué)習(xí)資料 PCD已經(jīng)提出20多年了 但是發(fā)現(xiàn)其生物學(xué)上的重大意義還是近年的事 PCD和遺傳 進(jìn)化 發(fā)育 病理及至腫瘤的發(fā)生 發(fā)展及其放療 化療等均有密切的關(guān)系 年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎分別授予了英國科學(xué)家悉尼 布雷內(nèi) 美國科學(xué)家羅伯特 霍維茨和英國科學(xué)家約翰 蘇爾斯頓 以表彰他們發(fā)現(xiàn)了在器官發(fā)育和 程序性細(xì)胞死亡 過程中的基因規(guī)則 13 學(xué)習(xí)資料 SydneyBrenner1 3oftheprizeUnitedKingdomTheMolecularSciencesInstituteBerkeley CA USAb 1927 inUnionofSouthAfrica H RobertHorvit1 3oftheprizeUSAMassachusettsInstituteofTechnology MIT Cambridge MA USAb 1947 JohnE SulstonUnitedKingdomTheWellcomeTrustSangerInstituteCambridge UnitedKingdomb 1942 THE2002NOBELPRIZEWINNER 14 學(xué)習(xí)資料 THENOBELDIPlOMA 15 學(xué)習(xí)資料 2002年諾貝爾醫(yī)學(xué)與生理學(xué)頒獎儀式 瑞典斯德哥爾摩音樂廳 16 學(xué)習(xí)資料 SydneyBrennerreceivinghisNobelPrizefromHisMajestytheKingattheStockholmConcertHall Photo HansMehlin Nobele Museum 17 學(xué)習(xí)資料 1 細(xì)胞凋亡和一般性衰老死亡區(qū)分開來 證明了細(xì)胞凋亡的必然性 2 基因分析與細(xì)胞的分裂 分化以及器官的發(fā)育聯(lián)系起來 3 細(xì)胞凋亡機(jī)理為艾滋病 腫瘤和癌癥等疾病的治療提供了尋找新方法的可能 18 學(xué)習(xí)資料 程序性細(xì)胞死亡 是細(xì)胞的一種生理性 主動性的 自覺自殺行為 這些細(xì)胞死得有規(guī)律 似乎是按編好了的 程序 進(jìn)行的 其死亡過程猶如秋天片片樹葉的凋落 所以這種細(xì)胞死亡又稱為 細(xì)胞凋亡 19 學(xué)習(xí)資料 包括人類在內(nèi)的生物是由細(xì)胞組成的 細(xì)胞的誕生固然非常重要 但細(xì)胞的死亡也重要 20 學(xué)習(xí)資料 早在 世紀(jì) 年代初期 科學(xué)家就開始探索 程序性細(xì)胞死亡 的奧秘 但要揭開這一奧秘 需要選擇一個合適的研究對象 像細(xì)菌這樣的單細(xì)胞生物太簡單 而像哺乳動物這樣由大量細(xì)胞組成的生物又太復(fù)雜 科學(xué)家最終選擇了線蟲 線蟲長僅 毫米 細(xì)胞數(shù)量不多 功能也不復(fù)雜 而且它身體透明 便于用顯微鏡觀測 21 學(xué)習(xí)資料 這 位獲獎?wù)叩某晒麨槠渌茖W(xué)家研究 程序性細(xì)胞死亡 提供了重要基礎(chǔ) 后來科學(xué)家又在這一領(lǐng)域取得了一系列新成績 科學(xué)家們發(fā)現(xiàn) 控制 程序性細(xì)胞死亡 的基因有兩類 一類是抑制細(xì)胞死亡的 另一類是啟動或促進(jìn)細(xì)胞死亡的 兩類基因相互作用控制細(xì)胞正常死亡 22 學(xué)習(xí)資料 如果能發(fā)現(xiàn)所有的調(diào)控基因 分析其功能 研究出能發(fā)揮或抑制這些基因功能的藥物 那么就可加速癌細(xì)胞自殺 達(dá)到治療癌癥的目的 而同時提高免疫細(xì)胞的生命力 則達(dá)到抵御艾滋病的目的 23 學(xué)習(xí)資料 細(xì)胞凋亡與壞死的區(qū)別 1 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞凋亡多發(fā)生于生理情況下 故可稱為生理性死亡 部分病理刺激也可誘導(dǎo)凋亡 其特征為 1 細(xì)胞骨架的擾亂 粘附力降低 伴隨細(xì)胞皺縮而產(chǎn)生的胞質(zhì)和核的濃縮 2 膜發(fā)泡 3 核中沿核周緣染色質(zhì)凝集 繼而染色質(zhì)降解 凝膠電泳檢測呈現(xiàn)180 200bp及其倍數(shù)的特征梯度 ladder 24 學(xué)習(xí)資料 膜通透性增高 細(xì)胞水腫 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膨脹 線粒體膨脹破裂 酶被釋放 染色質(zhì)凝集 核固縮 細(xì)胞溶解 胞質(zhì)內(nèi)容物釋放 導(dǎo)致炎癥反應(yīng) 2 細(xì)胞壞死 細(xì)胞壞死 necrosis 是區(qū)別于細(xì)胞凋亡的另一種細(xì)胞死亡方式 由多種致病因子如局部缺血 物理 化學(xué)和生物因子的作用而產(chǎn)生的急性損傷所致 故稱為病理性死亡 25 學(xué)習(xí)資料 細(xì)胞凋亡與壞死的比較 壞死凋亡 強(qiáng)刺激 弱刺激 溶酶釋出 炎癥反應(yīng) ATP ATP 26 學(xué)習(xí)資料 Apoptoticbodies 凋亡小體 哺乳類的細(xì)胞凋亡過程 Apoptosis 27 學(xué)習(xí)資料 28 學(xué)習(xí)資料 檢測細(xì)胞凋亡的方法 組織切片中的凋亡細(xì)胞分散 數(shù)量少 迅速為巨噬細(xì)胞所吞食 Giemsa染色 孚爾根染色或Hoechest33342等熒光染色 在光鏡下鏡檢 可觀察到染色質(zhì)凝集 邊緣化 凋亡小體出現(xiàn) 巨噬細(xì)胞的吞食等現(xiàn)象 1 形態(tài)學(xué) 組織切片中壞死灶周圍有炎癥反應(yīng) 淋巴細(xì)胞集中 死亡 凋亡 29 學(xué)習(xí)資料 在小鼠肌肉中生長的P815腫瘤細(xì)胞中因缺血誘導(dǎo)的壞死 示濃縮的染色質(zhì)塊的病態(tài)的邊緣 膨脹的線粒體和分解的膜 30 學(xué)習(xí)資料 孚爾根染色 DNA熒光染色可顯示染色質(zhì)凝集 斷片等現(xiàn)象 臺盼藍(lán)染色 凋亡細(xì)胞仍是拒染而壞死細(xì)胞是著色的 表明凋亡細(xì)胞還保持著一定生物活性 壞死細(xì)胞胞質(zhì)不濃縮而是明顯腫脹 無凋亡小體 電鏡下凋亡細(xì)胞的核縮小 染色質(zhì)邊緣化 凝集 電子密度高 晚期則形成核碎片和胞質(zhì)內(nèi)的細(xì)胞器混合在一起被細(xì)胞膜包圍的凋亡小體 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到后期膨脹成泡狀 胞質(zhì)密度增高 胞膜絨毛減少 凋亡小體最后脫離胞體 被巨噬細(xì)胞所吞噬 31 學(xué)習(xí)資料 正常細(xì)胞核 凋亡細(xì)胞核 細(xì)胞發(fā)生凋亡時 染色質(zhì)會固縮 所以Hoechst染色時 細(xì)胞核會呈致密濃染 或呈碎塊狀致密濃染 32 學(xué)習(xí)資料 返回 前進(jìn) 33 學(xué)習(xí)資料 ApoptosisofANA 1cellinducedbyCurcumin 34 學(xué)習(xí)資料 Humanlymphomacellstreatedwiththechemotherapyagentcamptothecin Thecellsthatareundergoingapoptosisappearyellowandshowthecharacteristicmembraneblebbing bubbleformation seenincellsdyingviaapoptosis 35 學(xué)習(xí)資料 線蟲 C clegans 凋亡細(xì)胞是自身cdc3和ced4基因表達(dá)依賴性的 凋亡細(xì)胞被鄰近細(xì)胞吞食 36 學(xué)習(xí)資料 2 DNA電泳 提取細(xì)胞基因組DNA 通過瓊脂糖凝膠電泳 凋亡細(xì)胞DNA顯示出180 200bp及其不同倍數(shù)的梯帶 被視為最典型的凋亡指標(biāo) 因被激活的核酸內(nèi)切酶選擇性地在核小體的連接段 linker 處切斷所致 壞死細(xì)胞DNA則被核酸內(nèi)切酶無規(guī)則地切斷 在培養(yǎng)液中細(xì)胞溶解后放出DNA片段 故在電泳膠上呈彌散的涂抹狀 37 學(xué)習(xí)資料 DNA電泳 necrosis apoptosis 38 學(xué)習(xí)資料 3 流式細(xì)胞光度術(shù) 由于核酸內(nèi)切酶對DNA的降解成小片段 通過固定改變膜通透性 經(jīng)PI或Hoechest33342染色 G1期出現(xiàn)低于2CDNA含量的峰 成為細(xì)胞凋亡的重要標(biāo)志之一 39 學(xué)習(xí)資料 全反式維甲酸處理人HL 60細(xì)胞后 流式細(xì)胞光度儀對細(xì)胞DNA含量分析藥物處理后第5 6天明顯出現(xiàn)Gl期小峰 40 學(xué)習(xí)資料 4 凋亡細(xì)胞的原位標(biāo)記 由于凋亡細(xì)胞DNA為核酸內(nèi)切酶降解產(chǎn)生3 OH的缺口和末端 故可用原位缺口平移法 insitunicktranslation 或原位末端標(biāo)記法 TUNEL 顯示凋亡細(xì)胞 根據(jù)需要可采用生物素 地高辛 熒光素和同位素等標(biāo)記物 如標(biāo)記的熒光素可以在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行定量分析凋亡與非凋亡細(xì)胞 原位標(biāo)記法的最大優(yōu)點在于 能在組織切片上識別難于判斷的凋亡細(xì)胞 不足之處為缺乏專一性 但可結(jié)合形態(tài)學(xué)予以正確判斷 41 學(xué)習(xí)資料 HL 60cells 急粒 p53缺陷 被喜樹堿誘導(dǎo)3小時 DNA段端被熒光標(biāo)記的脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記 42 學(xué)習(xí)資料 5 細(xì)胞膜磷脂酰絲氨酸 PS 熒光顯示 PS在非凋亡細(xì)胞中分布于細(xì)胞內(nèi)膜 細(xì)胞凋亡后 細(xì)胞內(nèi)膜轉(zhuǎn)至膜外 PS被巨噬細(xì)胞識別后被吞噬 而PS出現(xiàn)在細(xì)胞膜外 可作為凋亡細(xì)胞的標(biāo)志 鈣結(jié)合蛋白 annexinV 依靠Ca2 與PS結(jié)合 使用熒光標(biāo)記的鈣結(jié)合蛋白 annexinV fluos 及PI兩種熒光可在流式細(xì)胞儀上定量地區(qū)別凋亡 壞死和正常的細(xì)胞 亦可用熒光顯微鏡鑒定個別的凋亡細(xì)胞 43 學(xué)習(xí)資料 Jurkat人類白血病T細(xì)胞經(jīng)喜樹堿處理 ps外翻 早期凋亡特異性的特征被annexin 5檢測到 晚期凋亡和壞死細(xì)胞被pi染色 44 學(xué)習(xí)資料 45 學(xué)習(xí)資料 46 學(xué)習(xí)資料 confocalmicroscopy共聚焦顯微鏡用于檢測凋亡 47 學(xué)習(xí)資料 48 學(xué)習(xí)資料 細(xì)胞凋亡的生物學(xué)意義 細(xì)胞凋亡是機(jī)體自我保護(hù)機(jī)制 是長期遺傳 進(jìn)化的結(jié)果 以保證生物的世代延續(xù) 確保正常發(fā)育生長 清除多余的細(xì)胞 維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定 清除受損 突變 衰老的細(xì)胞 積極防御功能 對病毒感染細(xì)胞阻止復(fù)制 49 學(xué)習(xí)資料 細(xì)胞凋亡的過程 1 凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 啟動信號Ca2 cAMP 神經(jīng)酰胺2 凋亡基因激活 表達(dá)酶類和其他物質(zhì)3 細(xì)胞凋亡的執(zhí)行 核酸內(nèi)切酶 DNase 和Caspases4 凋亡細(xì)胞的清除 被臨近的M 或其他細(xì)胞吞噬分解 50 學(xué)習(xí)資料 凋亡時細(xì)胞的主要變化 形態(tài)學(xué)改變 胞膜空泡化 固縮 出芽 染色質(zhì)邊集 脫接觸 凋亡小體 51 學(xué)習(xí)資料 52 學(xué)習(xí)資料 53 學(xué)習(xí)資料 細(xì)胞凋亡的生化改變 1 DNA的片段化 梯狀條帶形成 核小體連接區(qū)被切開 染色質(zhì) 300kb 50kb 180 200bp或其整倍數(shù)片段 5min 90min 54 學(xué)習(xí)資料 2 內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶激活及其作用 由一系列胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)環(huán)節(jié)激活 執(zhí)行染色質(zhì)DNA切割 55 學(xué)習(xí)資料 Caspase8的激活 需要FADD Fasassociatedproteinwithdeathdomain Caspase9激活 需要通過CARD caspase recruitmentdomain Apaf 1 細(xì)胞色素c ATP等多個因子的參與 細(xì)胞色素C Apaf 1和pro caspase9組成了 Apoptosome 凋亡體 56 學(xué)習(xí)資料 3 凋亡蛋白酶 caspases 的激活及其作用 是一組對底物天冬氨酸部位有特異水解作用 其活性中心富含半胱氨酸的蛋白酶 cysteine containingaspartate spicificprotease 至少有13個成員Cysteine半胱氨酸Aspartate天冬氨酸spicificprotease 57 學(xué)習(xí)資料 caspases功能 滅活細(xì)胞凋亡的抑制物 如Bcl 2 水解蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu) 細(xì)胞解體 凋亡小體 在凋亡級聯(lián)反應(yīng)中水解相關(guān)活性蛋白 使其獲得或喪失功能 58 學(xué)習(xí)資料 細(xì)胞凋亡的調(diào)控 細(xì)胞凋亡是細(xì)胞自殺現(xiàn)象 是受到一定程序的控制的 如細(xì)胞接受凋亡信號 通過一系列的信號傳遞 凋亡有關(guān)的正負(fù)調(diào)節(jié)基因的表達(dá) Ca2 的變化 酶的激活等 最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡 目前發(fā)現(xiàn)與細(xì)胞凋亡有關(guān)的基因有三類 即促進(jìn)細(xì)胞凋亡的基因 抑制細(xì)胞凋亡的基因和在細(xì)胞凋亡過程中表達(dá)的基因 若按基因效應(yīng)劃分 則可分為原癌基因 抑癌基因 病毒基因 生長及其抑制因子基因 細(xì)胞受體基因和蛋白激酶基因等 59 學(xué)習(xí)資料 誘導(dǎo)性因素 激素 生長因子 理化因素 免疫 微生物 細(xì)胞凋亡相關(guān)因素 抑制性因素 細(xì)胞因子 IL 2 神經(jīng)生長因子激素 ACTH 睪酮 雌激素其它 Zn2 苯巴比妥 半胱氨酸蛋白酶抑制劑 EB病毒 中性氨基酸 60 學(xué)習(xí)資料 細(xì)胞凋亡信號的轉(zhuǎn)導(dǎo) 誘導(dǎo)信號 cell R 神經(jīng)酰胺 多途徑 R SAPK JNK P53基因 NF kB JNK AP 1途徑 激活baxor下調(diào)bcl 2 ROS mtDNA 61 學(xué)習(xí)資料 凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)特點 多樣性 不同種類的細(xì)胞系統(tǒng)不同 偶聯(lián)性 與增殖分化的信號系統(tǒng)交叉偶聯(lián) 同一性 多因素 共用同一系統(tǒng)觸發(fā) 多途性 同一誘導(dǎo)因素啟動多條信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑 62 學(xué)習(xí)資料 凋亡相關(guān)基因 抑制凋亡基因 bcl 2促進(jìn)凋亡基因 fas P53雙向調(diào)控基因 c myc bclx 63 學(xué)習(xí)資料 1 ced基因 在線蟲中已發(fā)現(xiàn)14個與細(xì)胞凋亡相關(guān)的基因 其研究得比較深入的有ced 3和ced 4以及促進(jìn)細(xì)胞凋亡的有關(guān)基因 ced 4的詳細(xì)功能尚不十分清楚 但Ced 3蛋白有530個氨基酸 其中含有約100個氨基酸長度的絲氨酸富含區(qū) 提示磷酸化在細(xì)胞凋亡中有十分重要的作用 64 學(xué)習(xí)資料 在哺乳動物中克隆出一個與ced 3相似的基因為白細(xì)胞介素1 轉(zhuǎn)化酶 inter leukin 1 convertingenzyme ICE 是一種底物特異性半胱氨酸蛋白酶 可裂解IL 1 前體為17 5kDa的成熟形式的IL 1 65 學(xué)習(xí)資料 由果蠅 D melanogaster 中克隆出rpr reaper 基因 編碼65個氨基酸的短鏈多肽 其迅速表達(dá)可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡 但并非參加一切細(xì)胞的凋亡 其在進(jìn)化中的保守性有待深入研究 2 rpr基因 66 學(xué)習(xí)資料 它定位于人的第18號染色體 在淋巴瘤中極易發(fā)生染色體易位 14 18 使bcl 2與14號染色體上IgH基因并列而導(dǎo)致過表達(dá) 它編碼26kDa的Bcl 2a及22kDa的Bcl 2 蛋白 bcl 2是一個不斷在擴(kuò)增的多基因家族的原型 prototypes 其在哺乳類中的家族成員有Bcl Mcl 1 Bax Bak Bad A1和Bik 1 3 Bcl 2 67 學(xué)習(xí)資料 Bcl 2 229aa構(gòu)成 鼠236 分在線粒體內(nèi)膜 細(xì)胞內(nèi)膜表面 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 核膜等處 Bcl 2 Bcelllymphoma leukemia 2 Bcl 2和C elegans中的ced 9有很高的同源性 具有促進(jìn)細(xì)胞存活的功能 68 學(xué)習(xí)資料 大量實驗證明它是多細(xì)胞動物中普遍存在的 長壽 基因 如神經(jīng)元壽命長 bcl 2的表達(dá)則高于其他類型細(xì)胞 Bcl 2的功能是延長細(xì)胞的壽命 而不是刺激細(xì)胞的增殖 69 學(xué)習(xí)資料 Bcl 2抗凋亡機(jī)制 直接的抗氧化 抑制線粒體釋放促凋亡的蛋白質(zhì) 抑制促凋亡的Bax Bak細(xì)胞毒作用 抑制Caspases激活 維持細(xì)胞鈣穩(wěn)態(tài) 70 學(xué)習(xí)資料 線蟲C elegans和哺乳類細(xì)胞的死亡途徑比較 71 學(xué)習(xí)資料 它是一個多功能的原癌基因 c myc可促進(jìn)細(xì)胞分裂 參與細(xì)胞的轉(zhuǎn)化 c myc存在于核仁 并可結(jié)合在特異的DNA序列上發(fā)揮轉(zhuǎn)化因子的作用 它既可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡 又可抑制細(xì)胞凋亡 4 c myc基因 72 學(xué)習(xí)資料 c myc轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子依賴GFBcl xBcl xl抑凋亡Bcl xs促凋亡 73 學(xué)習(xí)資料 p53是腫瘤抑制基因 野生型p53可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡 缺乏p53功能的癌細(xì)胞若轉(zhuǎn)染p53基因并使其過表達(dá)p53時 導(dǎo)致生長抑制 p53誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻斷的能力 長期以來認(rèn)為其機(jī)理是抑制了腫瘤細(xì)胞生長 現(xiàn)在認(rèn)為p53促進(jìn)細(xì)胞凋亡可能是腫瘤生長抑制的主要原因 5 p53基因 74 學(xué)習(xí)資料 P53 野生型誘導(dǎo)凋亡 在G1期發(fā)揮卡點功能 有缺陷DNA CIP表達(dá) 啟動修復(fù) 失敗 啟動凋亡CIP cyclindependentkinase interactingprotien 1P53 molecularpoliceman 75 學(xué)習(xí)資料 G1 S G2 M CyclinA CDK CyckinA CDK1 CyclinB CyclinD p53 Bax Bcl 2 molecularpoliceman BlockingIGF R 76 學(xué)習(xí)資料 Fas和Apo 1是分別從人的T琳巴細(xì)胞瘤KT3細(xì)胞株及人B細(xì)胞淋巴瘤SKW6 4株分離的兩個cDNA克隆 序列分析證明兩者完全一致 為同一分子 1993年在美國Boston召開的第五屆人類白細(xì)胞抗原分型國際會議上 正式命名Apo 1 Fas為CD95 6 Fas Apo 1 77 學(xué)習(xí)資料 FasL Fasligand 為人和鼠的Fas的配體 激活的T淋巴細(xì)胞高表達(dá)FasL Fas和FasL結(jié)合則誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡 但如何激活細(xì)胞凋亡的機(jī)理尚不清楚 78 學(xué)習(xí)資料 ICE基因是由哺乳類中克隆出的cdc 3的同源基因 ICE的前體為p45 有p20及p102個亞基 p45可能自身參與這一催化過程 p20 p10 2形成有活性的ICEI Rat 1細(xì)胞中ICE過量表達(dá)可導(dǎo)致細(xì)胞凋亡 如將ICE的催化位點Cys285突變 則細(xì)胞不能凋亡 7 ICE基因 79 學(xué)習(xí)資料