血清分析論文.doc

生物化學實驗指導試用版 18血清成分分析（家雞、烏雞血清）作者：王志豪 李東 導師：吳明江（溫州大學生命與環(huán)境科學學院 浙江溫州 325027）摘 要 ：本次血清成分分析總共分三個試驗進行操作。血清膽固醇的定量測定（鄰苯二甲醛法），血清清蛋白與-球蛋白的分離與鑒定，血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的鑒定及活力測定。通過試驗了解并掌握鄰苯二甲醛法測定血清總膽固醇，鹽析法分離提純蛋白質(zhì)，并對蛋白質(zhì)進行透析與濃縮，采用凝膠層析法分離重鉻酸鉀和藍葡聚糖混合液，利用醋酸纖維素薄膜電泳法分離與鑒定血清清蛋白與-球蛋白，凝膠過濾層析及透析法脫鹽與蛋白質(zhì)濃縮的原理和方法。并以肝臟為原料，進行了谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力的鑒定。利用對雞的血清分析來了解血清成分的區(qū)別，我們主要采用烏雞與家雞對照來進行試驗。關鍵詞： 血清、肝臟、成分分析、蛋白質(zhì)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶Serum component analysis ( chicken, chicken serum )Author: Wang Zhihao Lidong Tutor: Wu Mingjiang(College of Life and Environment Sciences, Wenzhou University, Wenzhou, Zhejiang 325027 )Abstract: The analysis of serum components in a total of three test operation. Quantitative determination of serum cholesterol ( adjacent benzene two formaldehyde), serum albumin and gamma globulin separation and identification, serum alanine aminotransferase activity identification and activity determination of. Through the experiment to understand and master the adjacent benzene two formaldehyde determination of total cholesterol in serum by salting out method, separation and purification of proteins, and proteins for dialysis and concentration by gel chromatography, potassium dichromate and blue dextran solution, using cellulose acetate membrane electrophoresis separation and identification of serum albumin and gamma globulin, gel filtration chromatography and dialysis desalination with the principle and method of protein concentration. And to the liver as raw material, the alanine aminotransferase activity determination of. Utilization of chicken serum analysis to understand the difference between serum components, we mainly use the chicken and chicken controls to test.Key words: Serum；liver；component analysis、protein、alanine aminotransferase前言：血清總膽固醇測定是血脂分析的常規(guī)項目, 測定方法很多, 目前國內(nèi)大多數(shù)實驗室的常用方法有酶法、硫酸一磷酸一高鐵顯色法、硫酸一醋醉直接顯色法、硫酸一醋酐煮沸顯色法及鄰苯二甲醛一硫酸顯色法。本次實驗用鄰苯二甲醛酸法進行測定。1 而通過血清清蛋白與-球蛋白的分離可以了解蛋白質(zhì)等生物大分子的一些特性。 血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶以下簡稱谷丙酶，谷丙酶活力測定對于病毒性肝炎的診斷價值已被一致肯定以,。它肝病早期診斷, 療效觀察, 以及流行病學調(diào)查等方面均有一定意義。2通過本次實驗將讓我們了解到基本的血清成分測定方法。一、血清膽固醇的定量測定（鄰苯二甲醛法）1.1目的了解并掌握鄰苯二甲醛法測定血清總膽固醇的原理和方法。1.2原理膽固醇及其酯在硫酸存在下與鄰苯二甲醛作用。產(chǎn)生紫紅色物質(zhì)，此物質(zhì)對550nm波長的光有最大吸收，可用比色法定量測定。100mL樣品中膽固醇含量在400mg之內(nèi)與吸光度呈良好線性關系。本法優(yōu)點是操作簡便（無須將樣品中的膽固醇抽提出來或去除樣品中的蛋白質(zhì)），靈敏，穩(wěn)定。1.3器材1、血清2、試管 1.5cm15cm（7）3、吸管 0.1mL（3）、0.5mL（4）、5mL（1）、10mL（1）4、容量瓶 50mL（1）、100mL（1）5、燒杯 100mL（2）6、電子分析天平7、分光光度計1.4試劑與材料1、鄰苯二甲醛試劑：稱取鄰苯二甲醛（A.R.）50mg，以無水乙醇（A.R.）溶解并稀釋到50mL，冷藏，有效期1個半月。2、90%醋酸：取冰醋酸90mL加入10mL蒸餾水中混勻即成。3、混合酸：取試劑2加等體積濃硫酸混勻即成。4、標準膽固醇貯液（1mg/mL）：準確稱取膽固醇（A.R.）100mg以醋酸定容至100mL。5、標準膽固醇應用液（0.1mg/mL）：將上述標準膽固醇貯液準確稀釋10倍。1.5操作1、標準曲線的繪制取清潔干燥試管5支，編號，按表2加入試劑。表2 鄰苯二甲醛法測定血清總膽固醇標準曲線的繪制編號試劑編號編號編號編號編號01234標準膽固醇應用液/mL00.10.20.30.4醋酸/mL0.40.30.20.10鄰苯二甲醛試劑/mL0.20.20.20.20.2蒸餾水/mL0.010.010.010.010.01混合酸/mL4.04.04.04.04.0100mL血清中總膽固醇含量/mg0100200300400A550nm加畢，混勻，靜置10min，以550nm波長比色測定，以吸光度值為縱坐標，膽固醇含量為橫坐標，做標準曲線。2、樣品的測定取3支清潔干燥試管，編號后，按表3加入試劑。表3 鄰苯二甲醛法測定血清總膽固醇樣品的測定試管試劑對照樣品1樣品2醋酸/mL0.40.40.4血清/mL0.010.010.01鄰苯二甲醛試劑/mL00.20.2無水乙醇/mL0.200混合酸/mL*4.04.04.0*硫酸含量的高低對顯色有影響，故混合酸的配制和測定過程中的加量都應準確。顯色時要避免高溫，采用混合酸液反應時溫度不會升得太高，一般在432時，顏色能穩(wěn)定2h。加畢，混勻，靜置10min，于550nm波長比色，以對照管校零點，對照標準曲線即知100mL樣品中總膽固醇含量（mg）。1.6實驗結果1.61 實驗標準曲線的制作鄰苯二甲醛法測定血清總膽固醇標準曲線的繪制100mL血清中總膽固醇含量/mg0100200300400OD值00.1650.3030.4770.642鄰苯二甲醛法測定血清總膽固醇樣品的測定試管對照烏雞家雞OD值00.0780.081由標準曲線可知 100mL烏雞血清中總膽固醇含量為 55mg。100mL家雞血清中總膽固醇含量為 61mg。二、血清清蛋白與-球蛋白的分離與鑒定2.1實驗目的1. 掌握鹽析法分離提純蛋白質(zhì)的原理和方法；2. 掌握透析法脫鹽與蛋白質(zhì)濃縮的方法；3. 掌握凝膠過濾層析的技術方法；4. 掌握利用醋酸纖維素薄膜電泳法分離與鑒定血清清蛋白的原理和方法。2.2血清清蛋白與-球蛋白的鹽析、透析與濃縮2.2.1 實驗試劑和儀器1. 試劑（1）血清 （2）PBS（3）（NH4）2SO4溶液 （4）雙縮脲試劑（5）酪蛋白 （6）蔗糖（7）BaCl2溶液2. 用品與儀器（1）離心機 （2）燒杯（3）移液管 （4）透析袋2.2.2 血清清蛋白與-球蛋白的鹽析2.2.2.1 蛋白質(zhì)鹽析的實驗原理1. 蛋白質(zhì)分子是生物大分子，其大小恰好在膠體的范圍，且分子中親水基團多位于分子的表面，疏水基團多在分子結構內(nèi)部。因此，蛋白質(zhì)分子在水中能以膠體顆粒存在，形成膠體溶液。2.蛋白質(zhì)在水中形成親水膠體，親水膠體顆粒有兩個穩(wěn)定因素：（1）膠粒上的電荷；（2）水化膜。3. 蛋白質(zhì)在水溶液中呈現(xiàn)兩性電離。在環(huán)境的pHpI時，蛋白質(zhì)可帶正電荷或負電荷。在某一pH條件，蛋白質(zhì)帶同種電荷，同電相斥，故可吸引水分子（水分子為極性分子），水分子排列圍繞在蛋白質(zhì)分子周圍，形成水化膜，使蛋白質(zhì)分子相互分割開來。破壞這兩個因素或其中某一個因素（破壞了蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定性），易于蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀。4. 高濃度鹽溶液，在水溶液中電離，其正、負離子吸引水分子，從而奪取水化膜，還可以中和部分電荷。這樣，就不同程度地去掉了上述的兩個穩(wěn)定因素，使蛋白質(zhì)凝聚、沉淀，這就是蛋白質(zhì)的鹽析。5. 由于各種蛋白質(zhì)的顆粒大小、帶電荷多少及親水程度的不同，對于同一種中性鹽，蛋白質(zhì)鹽析所需最低濃度也不同。例如：球蛋白不溶于半飽和的（NH4）2SO4溶液，-球蛋白不溶于1/3飽和度的(NH4)2SO4溶液，而清蛋白僅不溶于飽和的（NH4）2SO4溶液。因而?？梢岳貌煌瑵舛鹊模∟H4）2SO4溶液使血清或其他混合蛋白質(zhì)中的這些不同的蛋白質(zhì)分開。2.2.2.2 血清清蛋白與-球蛋白的鹽析實驗步驟血清清蛋白與-球蛋白的鹽析實驗步驟取離心管一支，加入2mL血清加入2mLPBS（稀釋血清），搖勻逐滴加入pH=7.2的（NH4）2SO4溶液2mL，邊加邊搖靜止30min，離心20min（v=3000rpm）上清液（主要含有清蛋白）沉 淀（主要含有-球蛋白）加入3.132g(NH4)2SO4，使上清液飽和加1mLPBS溶解靜止30min逐滴加入飽和（NH4）2SO4溶液0.5mL（相當于33%飽和（NH4）2SO4溶液）離心、沉淀加1mLPBS溶解沉淀放置30min放入透析袋離心20min（v=3000rpm）*放棄離心后的上清液（主要是、球蛋白），沉淀即為初步純化的-球蛋白2.2.3血清清蛋白的透析與濃縮2.2.3.1 蛋白質(zhì)透析與濃縮的實驗原理1. 透析（1） 透析是利用蛋白質(zhì)等生物大分子不能通過半透膜的性質(zhì)的一類純化方法，可利用該方法分離大分子與小分子的混合物。（2） 由于NH4+和SO42-可以通過半透膜，而血清清蛋白不能，因此，可以利用透析的方法使清蛋白溶液脫鹽。透析達到平衡狀態(tài)透析達到平衡狀態(tài)緩沖液透析袋飽和溶液液2. 濃縮利用半透膜還可以進行大分子溶液的濃縮。將盛有待濃縮的大分子溶液的透析袋放入高濃度的吸水性強的蔗糖固體顆粒中，袋內(nèi)溶液中的水被袋外的多聚物所吸收而有效地濃縮。2.2.3.2 蛋白質(zhì)透析與濃縮的實驗步驟1. 取玻璃紙（15cm15cm）兩張，折成袋狀。將前面第一次鹽析得到的含有清蛋白的上清液和-球蛋白分別倒入兩個透析袋中，用線繩系緊上口。2. 用玻璃棒懸掛在盛有半杯蒸餾水的100mL燒杯中，使透析袋下半部浸入水中，將燒杯放在微量振蕩器上振蕩1h（中間換水12次）。實際操作：流水透析1h。3. 將透析袋取下，小心將線繩解開，用滴管取袋內(nèi)液體放入干凈試管中。4. 用雙縮脲法分別檢查袋內(nèi)外液體蛋白質(zhì)。再用BaCl2溶液檢查燒杯中液體的NH4+和SO42-。5. 將兩透析袋取出，埋入蔗糖中濃縮。2.3凝膠層析2.3.1 凝膠層析的實驗原理1. 凝膠層析也稱凝膠過濾，是一類利用有一定孔徑范圍的多孔凝膠的層析技術。2. 當樣品流經(jīng)這類凝膠的固定相時，不同分子大小的各組分因進入網(wǎng)孔受阻滯的程度不同而以不同的速度通過層析柱，從而達到分離的目的。大分子物質(zhì)凝膠顆粒小分子物質(zhì)下降方向3. 當樣品通過層析柱時，分子量較大的物質(zhì)因為不能或較難通過網(wǎng)孔而進入凝膠顆粒，而是沿著凝膠顆粒間的間隙流動，所以流程較短，向前移動的速度較快，即受阻滯的程度較小，最先流出層析柱；反之，分子量較小的物質(zhì)，因為顆粒直徑小，可通過網(wǎng)孔而進入凝膠顆粒，所以流程較長，向前移動的速度較慢，即受阻滯的程度較大，流出較晚。本實驗用的是重鉻酸鉀和藍葡聚糖混合溶液通過Sephandex G-200凝膠柱。2.3.2 實驗試劑和用品1. 試劑（1）Sephandex 4B 凝膠 （2）生理鹽水（3）5%重鉻酸鉀 （4）5%藍葡聚糖2. 主要實驗用品（1）鐵架臺 （2）凝膠柱（101.0cm）（3）玻璃棒 （4）燒杯（5）試管 （6）膠頭吸管2.3.3 凝膠層析的實驗步驟凝膠層析的實驗步驟過程名稱實驗步驟凝膠預處理8g葡萄糖膠G-25放入100mL燒杯中100mL蒸餾水小火煮沸1h靜止、冷卻、傾棄蒸餾水加入PBS10mL輕輕攪拌至凝膠懸起傾入10cm1.0cm層析柱裝柱 將全部凝膠都傾入柱內(nèi)，且液面接近凝膠面時，用螺旋夾將橡膠管夾緊，然后小心放松螺旋夾，使液體緩慢流出，到液體剛好流入凝膠面時，將螺旋夾再夾緊，裝柱工作完成。加樣 用膠頭吸管將柱中上方清液吸出，加入重鉻酸鉀和藍葡聚糖混合溶液，用膠塞封住上口。洗脫 用生理鹽水洗脫液進行洗脫。打開螺旋夾，使液體的流速達到67dpm（實際1015 dpm）。收集混合液在凝膠柱中分離，藍色的藍葡聚糖在下方，黃色的重鉻酸鉀在上方。用試管收集流出藍、黃色液體，比色并畫出洗脫曲線。2.3.4 實驗結果從3號試管開始出現(xiàn)淡紫色顏色，并且4號試管紫色最深，從5號試管開始顏色變淡，到6號試管顏色消失從7號試管開始出現(xiàn)黃色，到9號試管時顏色最深，以后又逐漸變淡，到13號試管顏色消失。大致趨勢如下圖所示。2.4血清清蛋白與-球蛋白的鑒定（醋酸纖維素薄膜電泳法）2.4.1 醋酸纖維素薄膜電泳的原理1. 醋酸纖維素薄膜電泳法是以醋酸纖維素薄膜作為支持物的電泳方法。2. 醋酸纖維素薄膜是用二乙酸纖維素制成的，它具有均一的泡沫樣的結構，厚度僅為120m，有強滲透性，對分子移動無阻力，作為取代電泳的支持物進行蛋白電泳有簡便、快速、樣品用量少、應用廣泛、沒有吸附等特點。2.4.2 醋酸纖維素薄膜電泳的實驗步驟醋酸纖維素薄膜電泳實驗步驟浸泡 將醋酸纖維素薄膜在緩沖溶液中浸泡20min，取出識別光面和粗糙面。點樣 用鑷子將薄膜置于濾紙上，吸收多余的液體，用鉛筆在薄膜粗糙面一端2cm處畫一細線，利用蓋玻片一側蘸取樣品，于細線處點樣。電泳 將薄膜粗糙面朝下，平懸于電泳槽支架的濾紙橋上，點樣一端靠近負極；使U=160V，電泳45min。染色 將薄膜取出后，置于氨基黑10B染色劑重，染色10min。漂洗及透明 將薄膜取出，移至漂洗液中漂洗若干次，至背景無色后置于玻板上，用濾紙去除多余液體后滴加透明液透明，烘干。2.4.3 醋酸纖維素薄膜電泳的實驗結果三、 谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的鑒定及活力單位的測定3.1實驗目的1、用紙層折法觀察肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）的轉(zhuǎn)氨基作用；2、用分光光度法測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活力。3.2實驗材料與試劑3.2.1實驗材料動物肝臟3.2.2實驗試劑1、0.9% NaCl溶液 2、海砂3、1% 谷氨酸溶液（1%KOH溶液中和）4、1% 丙酮酸鈉溶液（用1%KOH溶液中和）5、0.1% KHCO3溶液6、0.025% 溴乙酸溶液（用1%KOH中和）7、2% 乙酸溶液8、苯酚的飽和水溶液將2份酚和2份水（按重量計算）混合后，放入分液漏斗中，振蕩。靜止24h后分層，將下部酚層放入瓶中備用。新配制的酚展層劑可以反復使用1周。9、0.1% 水合茚三酮的正丁醇溶液 10、0.1% 標準谷氨酸溶液11、0.1% 標準丙氨酸溶液 12、1% KOH溶液3.3谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的鑒定（紙層析法）3.3.1實驗原理觀察肝糜中谷丙轉(zhuǎn)氨酶所催化的氨基移換反應。通過紙層析法檢查底物谷氨酸的減少和產(chǎn)物丙氨酸的生成。為防止丙酮酸被肝糜中的其它酶所氧化或還原，在反應系統(tǒng)中加入了抑制劑溴乙酸。3.3.2實驗操作3.3.2.1谷丙轉(zhuǎn)氨酶提取液制備谷丙轉(zhuǎn)氨酶提取液制備方法2g肝臟 + 0.9% NaCl 6mL + 海砂200mg在低溫下，研磨成漿用脫脂棉（或雙層紗布）過濾，得提取液（濾液不清）3.3.2.2轉(zhuǎn)氨作用試 劑對照管測試管 1測試管 20.1moL/L谷氨酸0.500.500.500.1moL/L丙酮酸鈉0.500.500.500.1% KHCO30.500.500.500.025% 溴乙酸0.250.250.25煮沸的酶液0.50酶液0.500.50加脫脂棉塞，45水浴，1.5h，時時振蕩內(nèi)容物2% 乙酸6滴6滴6滴沸水浴2min，使蛋白質(zhì)完全沉下，過濾，作層析3.3.3紙層析1、方法紙層析方法取圓形層析濾紙1張，在圓心處用圓規(guī)繪出直徑為3cm的同心圓通過中心將濾紙繪成五等分扇形，用毛細管點樣24次（直徑不超過2mm）在濾紙的圓心上剪一小孔，直徑約12mm取一小濾紙條，將下端剪成刷狀，再卷成燈芯插入圓形小孔，不能使燈芯突出紙面將圓形濾紙平放在盛有層析液（水飽和酚）培養(yǎng)皿上，使燈芯向下與溶劑接觸用大小相同的培養(yǎng)皿蓋在濾紙上溶劑通過燈芯上升到濾紙上向四周展層，直到溶劑前沿移至距濾紙邊緣約1cm處時停止（展層時間為1h）80100烘箱干燥，噴灑水合茚三酮的正丁醇溶液，80100顯色2、實驗結果標準Glu標準Ala測試管1測試管2對照管3.4血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力單位測定3.4.1實驗原理本實驗用丙氨酸和-酮戊二酸為底物，經(jīng)轉(zhuǎn)氨作用生成谷氨酸和丙酮酸。丙酮酸與2，4-二硝基苯肼作用生成2，4-二硝基苯腙，此物質(zhì)堿性條件下呈棕紅色，其顏色的深淺與丙酮酸的含量成正比，可用比色法進行定量測定。通過與標準溶液的比較，即可計算出酶的活力單位數(shù)。 谷氨酸 丙酮酸 -酮戊二酸 丙氨酸3.4.2實驗操作3.4.2.1標準曲線的繪制1、試劑（1）1/15 mol/L pH=7.4的磷酸緩沖液取1/15 mol/L磷酸氫二鈉（稱取Na2HPO4 9.47g或Na2HPO412H2O23.87g，溶于蒸餾水中定容至1000mL）825mL；1/15 mol/L磷酸二氫鉀（稱取KH2PO4 9.078g溶于蒸餾水中定容1000mL）175mL混合。（2）GPT基質(zhì)液（谷丙轉(zhuǎn)氨酶底物）取分析純-酮戊二酸29.2mg，DL-丙氨酸1.78g置于小燒杯內(nèi)，加入1mol/LNaOH溶液約10mL，使其完全溶解，并用1mol/LNaOH溶液或1mol/L鹽酸調(diào)整pH至7.4，加磷酸緩沖液定容至100mL?？杉勇确聰?shù)滴防腐。此溶液每毫升含-酮戊二酸2.0微摩爾，丙氨酸200微摩爾。在冰箱內(nèi)可保存一周。（3）1mmol/L 2，4-二硝基苯肼在200mL錐形瓶內(nèi)放入分析純2，4-二硝基苯肼19.8mg，加100mL 1mol/L鹽酸。把錐形瓶放在暗處并不時搖動，待2，4-二硝基苯肼全部溶解后，濾入棕色瓶中，置冰箱內(nèi)保存。（4）2.0mol/mL丙酮酸鈉標準液精確稱取丙酮酸鈉22mg，加磷酸緩沖液溶解后定容至100mL。臨用前配制。（5）0.4mol/LNaOH溶液2、方法試 劑試管號012345丙酮酸鈉標準液（mL）0.050.100.150.200.25GPT基質(zhì)液（mL）0.500.450.400.350.300.25pH7.4磷酸緩沖液（mL）0.100.100.100.100.100.10充分搖勻后，置于37水浴，保溫10min2，4-二硝基苯肼（mL）0.500.500.500.500.500.50充分搖勻后，置于37水浴，保溫20min0.4mol/LNaOH（mL）5.005.005.005.005.005.00充分搖勻，室溫靜置10min后，以0號管為空白，520nm波長下比色A520nm值各管所含丙酮酸量（mol）0.100.200.300.400.50各管相當于酶的單位數(shù)100200300400500以酶的活力單位數(shù)為橫坐標，以光吸收值為縱坐標，繪制A520nm與對應的酶活力單位數(shù)的標準曲線。注：（1）丙酮酸鈉標準液mL數(shù)摩爾濃度（2mol/mL）（2） GPT活力單位為：每mL血清在37與pH=7.4的基質(zhì)液作用60min，生成1mol丙酮酸為一個單位（U）。本實驗（臨床檢驗）取血清量為0.1mL，報告數(shù)據(jù)以100mL血清計算，因此將實際測得結果1000即可。3.4.2.2酶活力的測定試 劑測定管測定管對照管120GPT基質(zhì)液（mL）0.500.500.5037水浴，預溫10min血清（mL）0.100.10充分搖勻后，置于37水浴，保溫30min2，4-二硝基苯肼（mL）0.500.505.00血清（mL）0.100.4mol/L NaOH（mL）5.005.005.00搖勻后，室溫靜置10分鐘，520nm波長下比色A520nm值查標準曲線的對應值，得100mL血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活力單位數(shù)3.4.3實驗結果標準曲線的制作酶的活力單位標準曲線制作OD值00.1030.1970.2770.3540.483相當于酶的活力單位數(shù)0100200300400500樣品的活力單位測定試管對照烏雞家雞吸光度00.0540.050由標準曲線可知0.1mL烏雞血清中GPT活力單位為53。0.1mL家雞血清中GPT活力單位為49。即 100mL烏雞GPT活力單位為53000,100mL家雞GPT活力單位為49000。3.4.4注意事項1、所需試劑如基質(zhì)液、丙酮酸標準液、2，4-二硝基苯肼等均需冷藏；2、為防止溶血及其他因素對酶活性影響，實驗所用器皿應干凈、干燥；3、丙酮酸鈉極易變質(zhì)，配試劑時應選擇外觀潔白干燥者，否則應重結晶；4、轉(zhuǎn)氨酶只能作用于-L-Ala，對D-Ala無催化作用。實驗室多用DL-Ala，是因為便宜，如果采用-L-Aa，則用量需減半；5、如活性高于500U/100mL，應將血清稀釋一定倍數(shù)重新測定，結果應稀釋倍數(shù)；6、為保證操作結果可靠，測定酶活性時應恒定pH、保溫時間；7、選用固定分光光度計及比色杯減少誤差。四、實驗結果分析實驗中得到，血清主要由水和各種化學成分組成,這些化學成分就包括白蛋白、1 、2 、- 球蛋白,總膽固醇,谷丙轉(zhuǎn)氨酶。4.1血清膽固醇的定量測定1 由實驗結果可知家雞的血清膽固醇含量比烏雞的要高。2 誤差分析：（1）血清總膽固醇的測定受水分的影響較大，因此是使用比色皿試管時，可能會由于內(nèi)部含有少量的水而照成濃度誤差較大。比色