一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB15979-2002.pdf

一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(GB 159792002)(2-1)20020901實(shí)施范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了一次性使用衛(wèi)生用品的產(chǎn)品和生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)、消毒效果生物監(jiān)測評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和相應(yīng)檢驗(yàn)方法，以及原材料與產(chǎn)品生產(chǎn)、消毒、貯存、運(yùn)輸過程衛(wèi)生要求和產(chǎn)品標(biāo)識(shí)要求。在本標(biāo)準(zhǔn)中，一次性使用衛(wèi)生用品是指：本標(biāo)準(zhǔn)適用于國內(nèi)從事一次性使用衛(wèi)生用品的生產(chǎn)與銷售的部門、單位或個(gè)人，也適用于經(jīng)銷進(jìn)口一次性使用衛(wèi)生用品的部門、單位或個(gè)人。引用標(biāo)準(zhǔn)下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文，通過在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)準(zhǔn)出版時(shí)，所示版本均為有效。所有標(biāo)準(zhǔn)都會(huì)被修訂，使用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)最新版本的可能性。GB 15981-1995 消毒與滅菌效果的評價(jià)方法與標(biāo)準(zhǔn)定義本標(biāo)準(zhǔn)采用下列定義：一次性使用衛(wèi)生用品使用一次后即丟棄的、與人體直接或間接接觸的、并為達(dá)到人體生理衛(wèi)生或衛(wèi)生保?。咕蛞志┠康亩褂玫母鞣N日常生活用品，產(chǎn)品性狀可以是固體也可以是液體。例如，一次性使用手套或指套（不包括醫(yī)用手套或指套）、紙巾、濕巾、衛(wèi)生濕巾、電話膜、帽子、口罩、內(nèi)褲、婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品（包括衛(wèi)生護(hù)墊）、尿布等排泄物衛(wèi)生用品（不包括皺紋衛(wèi)生紙等廁所用紙）、避孕套等，在本標(biāo)準(zhǔn)中統(tǒng)稱為“衛(wèi)生用品”。產(chǎn)品衛(wèi)生指標(biāo)1 外觀必須整潔，符合該衛(wèi)生用品固有性狀，不得有異常氣味與異物。2 不得對皮膚與粘膜產(chǎn)生不良刺激與過敏反應(yīng)及其他損害作用。3 產(chǎn)品須符合表1中微生物學(xué)指標(biāo)。表1產(chǎn)品種類微生物指標(biāo)初始污染菌1)cfu/g細(xì)菌菌落總數(shù)cfu/g或cfu/mL大腸菌群致病性化膿菌2)真菌菌落總數(shù)cfu/g或cfu/mL手套或指套、紙巾、濕巾、帽子內(nèi)褲、電話膜.200不得檢出不得檢出100抗菌（或抑菌）液體產(chǎn)品200不得檢出不得檢出100衛(wèi)生濕巾.20不得檢出不得檢出不得檢出口罩.普通級(jí).200不得檢出不得檢出100消毒級(jí)10 00020不得檢出不得檢出不得檢出婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品.普通級(jí).200不得檢出不得檢出100消毒級(jí)10 00020不得檢出不得檢出不得檢出尿布等排泄物衛(wèi)生用品.普通級(jí).200不得檢出不得檢出100消毒級(jí)10 00020不得檢出不得檢出不得檢出避孕套.20不得檢出不得檢出不得檢出1) 如初始污染菌超過表內(nèi)數(shù)值，應(yīng)相應(yīng)提高殺滅指數(shù)，使達(dá)到本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的細(xì)菌與真菌限值。2) 致病性化膿菌指綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌與溶血性鏈球菌。4 衛(wèi)生濕巾除必須達(dá)到表1中的微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)外，對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的殺滅率須90，如需標(biāo)明對真菌的作用，還須對白色念珠菌的殺滅率90，其殺菌作用在室溫下至少須保持1年。5 抗菌（或抑菌）產(chǎn)品除必須達(dá)到表1中的同類同級(jí)產(chǎn)品微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)外，對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌率須50（溶出性）或26（非溶出性），如需標(biāo)明對真菌的作用，還須白色念珠菌的抑菌率50（溶出性）或26（非溶出性），其抑菌作用在室溫下至少須保持1年。6任何經(jīng)環(huán)氧乙烷消毒的衛(wèi)生用品出廠時(shí)，環(huán)氧乙烷殘留量必須250g/g。生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生指標(biāo)1 裝配與包裝車間空氣中細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)2 500 cfu/m3。2 工作臺(tái)表面細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)20 cfu/cm2。3 工人手表面細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)300 cfu/只手，并不得檢出致病菌。消毒效果生物監(jiān)測評價(jià)1 環(huán)氧乙烷消毒：對枯草桿菌黑色變種芽胞(ATCC 9372)的殺滅指數(shù)應(yīng)103。2 電離輻射消毒：對短小桿菌芽胞E6d(ATCC 27142)的殺滅指數(shù)應(yīng)103。3 壓力蒸氣消毒：對嗜熱脂肪桿菌芽胞(ATCC 7953)的殺滅指數(shù)應(yīng)103。測試方法1 產(chǎn)品測試方法1.1 產(chǎn)品外觀：目測，應(yīng)符合本標(biāo)準(zhǔn)3.1的規(guī)定。1.2 產(chǎn)品毒理學(xué)測試方法：見附錄A。1.3 產(chǎn)品微生物檢測方法：見附錄B。1.4 產(chǎn)品殺菌性能、抑菌性能與穩(wěn)定性測試方法：見附錄C。1.5 產(chǎn)品環(huán)氧乙烷殘留量測試方法：見附錄D。2 生產(chǎn)環(huán)境采樣與測試方法：見附錄E。3 消毒效果生物監(jiān)測評價(jià)方法：見附錄F。原材料衛(wèi)生要求1 原材料應(yīng)無毒、無害、無污染；原材料包裝應(yīng)清潔，清楚標(biāo)明內(nèi)含物的名稱、生產(chǎn)單位、生產(chǎn)日期或生產(chǎn)批號(hào)；影響衛(wèi)生質(zhì)量的原材料應(yīng)不裸露；有特殊要求的原材料應(yīng)標(biāo)明保存條件和保質(zhì)期。2 對影響產(chǎn)品衛(wèi)生質(zhì)量的原材料應(yīng)有相應(yīng)檢驗(yàn)報(bào)告或證明材料，必要時(shí)需進(jìn)行微生物監(jiān)控和采取相應(yīng)措施。3 禁止使用廢棄的衛(wèi)生用品作原材料或半成品。生產(chǎn)環(huán)境與過程衛(wèi)生要求1 生產(chǎn)區(qū)周圍環(huán)境應(yīng)整潔，無垃圾，無蚊、蠅等害蟲孳生地。2 生產(chǎn)區(qū)應(yīng)有足夠空間滿足生產(chǎn)需要，布局必須符合生產(chǎn)工藝要求，分隔合理，人、物分流，產(chǎn)品流程中無逆向與交叉。原料進(jìn)入與成品出去應(yīng)有防污染措施和嚴(yán)格的操作規(guī)程，減少生產(chǎn)環(huán)境微生物污染。3 生產(chǎn)區(qū)內(nèi)應(yīng)配置有效的防塵、防蟲、防鼠設(shè)施，地面、墻面、工作臺(tái)面應(yīng)平整、光滑、不起塵、便于除塵與清洗消毒，有充足的照明與空氣消毒或凈化措施，以保證生產(chǎn)環(huán)境滿足本標(biāo)準(zhǔn)第5章的規(guī)定。4 配置必需的生產(chǎn)和質(zhì)檢設(shè)備，有完整的生產(chǎn)和質(zhì)檢記錄，切實(shí)保證產(chǎn)品衛(wèi)生質(zhì)量。5 生產(chǎn)過程中使用易燃、易爆物品或產(chǎn)生有害物質(zhì)的，必須具備相應(yīng)安全防護(hù)措施，符合國家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或規(guī)定。6 原材料和成品應(yīng)分開堆放，待檢、合格、不合格原材料和成品應(yīng)嚴(yán)格分開堆放并設(shè)明顯標(biāo)志。倉庫內(nèi)應(yīng)干燥、清潔、通風(fēng)，設(shè)防蟲、防鼠設(shè)施與墊倉板，符合產(chǎn)品保存條件。7進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)要換工作衣和工作鞋，戴工作帽，直接接觸裸裝產(chǎn)品的人員需戴口罩，清洗和消毒雙手或戴手套；生產(chǎn)區(qū)前應(yīng)相應(yīng)設(shè)有更衣室、洗手池、消毒池與緩沖區(qū)，8 從事衛(wèi)生用品生產(chǎn)的人員應(yīng)保持個(gè)人衛(wèi)生，不得留指甲，工作時(shí)不得戴手飾，長發(fā)應(yīng)卷在工作帽內(nèi)。痢疾、傷寒、病毒性肝炎、活動(dòng)性肺結(jié)核、尖銳濕疣、淋病及化膿性或滲出性皮膚病患者或病原攜帶者不得參與直接與產(chǎn)品接觸的生產(chǎn)活動(dòng)。9 從事衛(wèi)生用品生產(chǎn)的人員應(yīng)在上崗前及定期(每年一次)進(jìn)行健康檢查與衛(wèi)生知識(shí)(包括生產(chǎn)衛(wèi)生、個(gè)人衛(wèi)生、有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)與規(guī)范)培訓(xùn)，合格者方可上崗。消毒過程要求1 消毒級(jí)產(chǎn)品最終消毒必須采用環(huán)氧乙烷、電離輻射或壓力蒸氣等有效消毒方法，所用消毒設(shè)備必須符合有關(guān)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。2 根據(jù)產(chǎn)品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)、初始污染菌與消毒效果生物監(jiān)測評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)制定消毒程序、技術(shù)參數(shù)、工作制度，經(jīng)驗(yàn)證后嚴(yán)格按照既定的消毒工藝操作。該消毒程序、技術(shù)參數(shù)或影響消毒效果的原材料或生產(chǎn)工藝發(fā)生變化后應(yīng)重新驗(yàn)證確定消毒工藝。3 每次消毒過程必須進(jìn)行相應(yīng)的工藝（物理）和化學(xué)指示劑監(jiān)測，每月用相應(yīng)的生物指示劑監(jiān)測，只有當(dāng)工藝監(jiān)測、化學(xué)監(jiān)測、生物監(jiān)測達(dá)到規(guī)定要求時(shí)，被消毒物品才能出廠。4 產(chǎn)品經(jīng)消毒處理后，外觀與性能應(yīng)與消毒處理前無明顯可見的差異。包裝、運(yùn)輸與貯存要求1 執(zhí)行衛(wèi)生用品運(yùn)輸或貯存的單位或個(gè)人，應(yīng)嚴(yán)格按照生產(chǎn)者提供的運(yùn)輸與貯存要求進(jìn)行運(yùn)輸或貯存。2 直接與產(chǎn)品接觸的包裝材料必須無毒、無害、清潔，產(chǎn)品的所有包裝材料必須具有足夠的密封性和牢固性以達(dá)到保證產(chǎn)品在正常的運(yùn)輸與貯存條件下不受污染的目的。產(chǎn)品標(biāo)識(shí)要求1 產(chǎn)品標(biāo)識(shí)應(yīng)符合中華人民共和國產(chǎn)品質(zhì)量法的規(guī)定，并在產(chǎn)品包裝上標(biāo)明執(zhí)行的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)號(hào)以及生產(chǎn)日期和保質(zhì)期（有效期）或生產(chǎn)批號(hào)和限定使用日期。2 消毒級(jí)產(chǎn)品還應(yīng)在銷售包裝上注明“消毒級(jí)”字樣以及消毒日期和有效期或消毒批號(hào)和限定使用日期，在運(yùn)輸包裝上標(biāo)明“消毒級(jí)”字樣以及消毒單位與地址、消毒方法、消毒日期和有效期或消毒批號(hào)和限定使用日期。附 錄 A（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）產(chǎn)品毒理學(xué)測試方法A1 各類產(chǎn)品毒理學(xué)測試指標(biāo)當(dāng)原材料、生產(chǎn)工藝等發(fā)生變化可能影響產(chǎn)品毒性時(shí)，應(yīng)按表A1根據(jù)不同產(chǎn)品種類提供有效的（經(jīng)政府認(rèn)定的第三方）成品毒理學(xué)測試報(bào)告。表A1產(chǎn)品種類皮膚刺激試驗(yàn)陰道粘膜刺激試驗(yàn)皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)手套或指套、內(nèi)褲抗菌（或抑菌）液體產(chǎn)品根據(jù)用途選擇1）濕巾、衛(wèi)生濕巾根據(jù)用途選擇1）根據(jù)材料選擇口罩婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品尿布等排泄物衛(wèi)生用品避孕套1）用于陰道粘膜的產(chǎn)品須做陰道粘膜刺激試驗(yàn)，但無須做皮膚刺激試驗(yàn)。A2 試驗(yàn)方法皮膚刺激試驗(yàn)、陰道粘膜刺激試驗(yàn)和皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)方法按衛(wèi)生部消毒技術(shù)規(guī)范（第三版）第一分冊實(shí)驗(yàn)技術(shù)規(guī)范（1999）中的“消毒劑毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)”中相應(yīng)的試驗(yàn)方法進(jìn)行。固體產(chǎn)品的樣品制備方法按照A3進(jìn)行。注1 用于皮膚刺激試驗(yàn)中的空白對照應(yīng)為：生理鹽水和斑貼紙。2 在皮膚變態(tài)反應(yīng)中，致敏處理和激發(fā)處理所用的劑量保持一致。A3 樣品制備A3.1 皮膚刺激試驗(yàn)和皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)以橫斷方式剪一塊斑貼大小的產(chǎn)品。對于干的產(chǎn)品，如尿布、婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品，用生理鹽水潤濕后貼到皮膚上，再用斑貼紙覆蓋。濕的產(chǎn)品，如濕巾，則可以按要求裁剪合適的面積，直接貼到皮膚上，再用斑貼紙覆蓋。A3.2 陰道粘膜刺激試驗(yàn)A3.2.1 干的產(chǎn)品（如婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品）以橫斷方式剪取足夠量的產(chǎn)品，按1g/10mL的比例加入滅菌生理鹽水，密封于萃取容器中攪拌后置于371下放置24h。冷卻到室溫，攪拌后析取樣液備檢。A3.2.2 濕的產(chǎn)品（如衛(wèi)生濕巾）在進(jìn)行陰道粘膜刺激試驗(yàn)的當(dāng)天，擠出濕巾里的添加液作為試樣。A4 判定標(biāo)準(zhǔn)以衛(wèi)生部消毒技術(shù)規(guī)范（第三版）第一分冊實(shí)驗(yàn)技術(shù)規(guī)范（1999）中“毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果的最終判定”的相應(yīng)部分作為試驗(yàn)結(jié)果判定原則。附錄B（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）產(chǎn)品微生物檢測方法B1 產(chǎn)品采集與樣品處理于同一批號(hào)的三個(gè)運(yùn)輸包裝中至少抽取12個(gè)最小銷售包裝樣品，14樣品用于檢測，14樣品用于留樣，另12樣品（可就地封存）必要時(shí)用于復(fù)檢。抽樣的最小銷售包裝不應(yīng)有破裂，檢驗(yàn)前不得啟開。在100級(jí)凈化條件下用無菌方法打開用于檢測的至少3個(gè)包裝，從每個(gè)包裝中取樣，準(zhǔn)確稱取10 g1g樣品，剪碎后加入到200 mL滅菌生理鹽水中，充分混勻，得到一個(gè)生理鹽水樣液。液體產(chǎn)品用原液直接做樣液。如被檢樣品含有大量吸水樹脂材料而導(dǎo)致不能吸出足夠樣液時(shí)，稀釋液量可按每次50mL遞增，直到能吸出足夠測試用樣液。在計(jì)算細(xì)菌菌落總數(shù)與真菌菌落總數(shù)時(shí)應(yīng)調(diào)整稀釋度。B2 細(xì)菌菌落總數(shù)與初始污染菌檢測方法本方法適用于產(chǎn)品初始污染菌與細(xì)菌菌落總數(shù)（以下統(tǒng)稱為細(xì)菌菌落總數(shù)）檢測。B2.1 操作步驟待上述生理鹽水樣液自然沉降后取上清液作菌落計(jì)數(shù)。共接種5個(gè)平皿，每個(gè)平皿中加入1 mL樣液，然后用冷卻至45左右的熔化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基15 20mL倒入每個(gè)平皿內(nèi)混合均勻。待瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿置352 培養(yǎng)48h后，計(jì)算平板上的菌落數(shù)。B2.2 結(jié)果報(bào)告菌落呈片狀生長的平板不宜采用；計(jì)數(shù)符合要求的平板上的菌落，按式(B1)計(jì)算結(jié)果：式中：X1細(xì)菌菌落總數(shù)，cfu/g或cfu/mL；A5塊營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上的細(xì)菌菌落總數(shù)；K稀釋度。當(dāng)菌落數(shù)在100以內(nèi)，按實(shí)有數(shù)報(bào)告，大于100時(shí)采用二位有效數(shù)字。如果樣品菌落總數(shù)超過本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，按B2.3進(jìn)行復(fù)檢和結(jié)果報(bào)告。B2.3 復(fù)檢方法將留存的復(fù)檢樣品依前法復(fù)測2次，2次結(jié)果平均值都達(dá)到本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，則判定被檢樣品合格；其中有任何1次結(jié)果平均值超過本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，則判定被檢樣品不合格。B3 大腸菌群檢測方法B3.1 操作步驟取樣液5mL接種50mL乳糖膽鹽發(fā)酵管，置352 培養(yǎng)24 h，如不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，則報(bào)告為大腸菌群陰性。如產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則劃線接種伊紅美藍(lán)瓊脂平板，置352培養(yǎng)1824 h，觀察平板上菌落形態(tài)。典型的大腸菌落為黑紫色或紅紫色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤，常具有金屬光澤，也有的呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤，或粉紅色，中心較深的菌落。取疑似大腸菌落12個(gè)作革蘭氏染色鏡檢，同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管，置352培養(yǎng)24 h，觀察產(chǎn)氣情況。B3.2 結(jié)果報(bào)告凡乳糖膽鹽發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，乳糖發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，在伊紅美藍(lán)平板上有典型大腸菌落，革蘭氏染色為陰性無芽胞桿菌，可報(bào)告被檢樣品檢出大腸桿菌。B4 綠膿桿菌檢測方法B4.1 操作步驟取樣液5 mL，加入到50 mL SCDLP培養(yǎng)液中，充分混勻，置352培養(yǎng)1824 h。如有綠膿桿菌生長，培養(yǎng)液表面呈現(xiàn)一層薄菌膜，培養(yǎng)液常呈黃綠色或藍(lán)綠色。從培養(yǎng)液的薄菌膜處挑取培養(yǎng)物，劃線接種十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板，置352培養(yǎng)1824 h，觀察菌落特征。綠膿桿菌在此培養(yǎng)基上生長良好，菌落扁平，邊緣不整，菌落周圍培養(yǎng)基略帶粉紅色，其他菌不長。取可疑菌落涂片作革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陰性菌者應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)：氧化酶試驗(yàn)：取一小塊潔凈的白色濾紙片放在滅菌平皿內(nèi)，用無菌玻棒挑取可疑菌落涂在濾紙片上，然后在其上滴加一滴新配制的1二甲基對苯二胺試液，30 s內(nèi)出現(xiàn)粉紅色或紫紅色，為氧化酶試驗(yàn)陽性，不變色者為陰性。綠膿菌素試驗(yàn)：取23個(gè)可疑菌落，分別接種在綠膿菌素測定用培養(yǎng)基斜面，352培養(yǎng)24 h，加入三氯甲烷35 mL，充分振蕩使培養(yǎng)物中可能存在的綠膿菌素溶解，待三氯甲烷呈藍(lán)色時(shí)，用吸管移到另一試管中并加入1 mol/L的鹽酸1 mL，振蕩后靜置片刻。如上層出現(xiàn)粉紅色或紫紅色即為陽性，表示有綠膿菌素存在。硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)：挑取被檢菌純培養(yǎng)物接種在硝酸鹽胨水培養(yǎng)基中，置352培養(yǎng)24 h，培養(yǎng)基小倒管中有氣者即為陽性。明膠液化試驗(yàn)：取可疑菌落純培養(yǎng)物，穿刺接種在明膠培養(yǎng)基內(nèi)，置352培養(yǎng)24h，取出放于410，如仍呈液態(tài)為陽性，凝固者為陰性。42生長試驗(yàn)：挑取可疑培養(yǎng)物，接種在普通瓊脂斜面培養(yǎng)基上，置42培養(yǎng)2448 h，有綠膿桿菌生長為陽性。B4.2 結(jié)果報(bào)告被檢樣品經(jīng)增菌分離培養(yǎng)后，證實(shí)為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶及綠膿桿菌試驗(yàn)均為陽性者，即可報(bào)告被檢樣品中檢出綠膿桿菌。如綠膿菌素試驗(yàn)陰性而液化明膠、硝酸鹽還原產(chǎn)氣和42生長試驗(yàn)三者皆為陽性時(shí)，仍可報(bào)告被檢樣品中檢出綠膿桿菌。B5 金黃色葡萄球菌檢測方法B5.1 操作步驟取樣液5 mL，加入到50 mL SCDLP培養(yǎng)液中，充分混勻，置352培養(yǎng)24 h。自上述增菌液中取12接種環(huán)，劃線接種在血瓊脂培養(yǎng)基上，置352培養(yǎng)2448 h。在血瓊脂平板上該菌菌落呈金黃色，大而突起，圓形，不透明，表面光滑，周圍有溶血圈。挑取典型菌落，涂片作革蘭氏染色鏡檢，金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性球菌，排列成葡萄狀，無芽胞與莢膜。鏡檢符合上述情況，應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)：甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)：取上述菌落接種甘露醇培養(yǎng)液，置352培養(yǎng)24 h，發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸者為陽性。血漿凝固酶試驗(yàn)：玻片法：取清潔干燥載玻片，一端滴加一滴生理鹽水，另一端滴加一滴兔血漿，挑取菌落分別與生理鹽水和血漿混合，5 min如血漿內(nèi)出現(xiàn)團(tuán)塊或顆粒狀凝塊，而鹽水滴仍呈均勻混濁無凝固則為陽性，如兩者均無凝固則為陰性。凡鹽水滴與血漿滴均有凝固現(xiàn)象，再進(jìn)行試管凝固酶試驗(yàn)；試管法：吸取14新鮮血漿0.5 mL，放滅菌小試管中，加入等量待檢菌24 h肉湯培養(yǎng)物0.5 mL?；靹?，放352溫箱或水浴中，每半小時(shí)觀察一次，24 h之內(nèi)呈現(xiàn)凝塊即為陽性。同時(shí)以已知血漿凝固酶陽性和陰性菌株肉湯培養(yǎng)物各0.5 mL作陽性與陰性對照。B5.2 結(jié)果報(bào)告凡在瓊脂平板上有可疑菌落生長，鏡檢為革蘭氏陽性葡萄球菌，并能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，血漿凝固酶試驗(yàn)陽性者，可報(bào)告被檢樣品檢出金黃色葡萄球菌。B6 溶血性鏈球菌檢測方法B6.1 操作步驟取樣液5 mL加入到50 mL葡萄糖肉湯，352培養(yǎng)24 h。將培養(yǎng)物劃線接種血瓊脂平板，352培養(yǎng)24 h觀察菌落特征。溶血性鏈球菌在血平板上為灰白色，半透明或不透明，針尖狀突起，表面光滑，邊緣整齊，周圍有無色透明溶血圈。挑取典型菌落作涂片革蘭氏染色鏡檢，應(yīng)為革蘭氏陽性，呈鏈狀排列的球菌。鏡檢符合上述情況，應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)：鏈激酶試驗(yàn)：吸取草酸鉀血漿0.2 mL(0.01 g草酸鉀加5 mL兔血漿混勻，經(jīng)離心沉淀，吸取上清液)，加入0.8 mL滅菌生理鹽水，混勻后再加入待檢菌24 h肉湯培養(yǎng)物0.5 mL和0.25氯化鈣0.25 mL，混勻，放352水浴中，2 min觀察一次(一般10 min內(nèi)可凝固)，待血漿凝固后繼續(xù)觀察并記錄溶化時(shí)間。如2 h內(nèi)不溶化，繼續(xù)放置24 h觀察，如凝塊全部溶化為陽性，24 h仍不溶化為陰性。桿菌肽敏感試驗(yàn)：將被檢菌菌液涂于血平板上，用滅菌鑷子取每片含0.04單位桿菌肽的紙片放在平板表面上，同時(shí)以已知陽性菌株作對照，在352下放置1824 h，有抑菌帶者為陽性。B6.2 結(jié)果報(bào)告鏡檢革蘭氏陽性鏈狀排列球菌，血平板上呈現(xiàn)溶血圈，鏈激酶和桿菌肽試驗(yàn)陽性，可報(bào)告被檢樣品檢出溶血性鏈球菌。B7 真菌菌落總數(shù)檢測方法B7.1 操作步驟待上述生理鹽水樣液自然沉降后取上清液作真菌計(jì)數(shù)，共接種5個(gè)平皿，每一個(gè)平皿中加入1mL樣液，然后用冷卻至45左右的熔化的沙氏瓊脂培養(yǎng)基1525 mL倒入每個(gè)平皿內(nèi)混合均勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿置252培養(yǎng)7天，分別于3、5、7天觀察，計(jì)算平板上菌落數(shù)，如果發(fā)現(xiàn)菌落蔓延，以前一次的菌落計(jì)數(shù)為準(zhǔn)。B7.2 結(jié)果報(bào)告菌落呈片狀生產(chǎn)的平板不宜采用；計(jì)數(shù)符合要求的平板上的菌落，按式（B2）計(jì)算結(jié)果：式中：X2真菌菌落總數(shù)，cfu/g或cfu/mL；B5塊沙氏瓊脂培養(yǎng)基平板上的真菌菌落總數(shù)；K稀釋度。當(dāng)菌落數(shù)在100以內(nèi)，按實(shí)有數(shù)報(bào)告，大于100時(shí)采用二位有效數(shù)字。如果樣品菌落總數(shù)超過本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，按B7.3進(jìn)行復(fù)檢和結(jié)果報(bào)告。B7.3 復(fù)檢方法將留存的復(fù)檢樣品依前法復(fù)測2次，2次結(jié)果都達(dá)到本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，則判定被檢樣品合格，其中有任何1次結(jié)果超過本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，則判定被檢樣品不合格。B8 真菌定性檢測方法B8.1 操作步驟取樣液5mL加入到50mL沙氏培養(yǎng)基中，252培養(yǎng)7天，逐日觀察有無真菌生長。B8.2 結(jié)果報(bào)告培養(yǎng)管混濁應(yīng)轉(zhuǎn)種沙氏瓊脂培養(yǎng)基，證實(shí)有真菌生長，可報(bào)告被檢樣品檢出真菌。附 錄 C（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）產(chǎn)品殺菌性能、抑菌性能與穩(wěn)定性測試方法C1 樣品采集為使樣品具有良好的代表性，應(yīng)于同一批號(hào)三個(gè)運(yùn)輸包裝中至少隨機(jī)抽取20件最小銷售包裝樣品，其中5件留樣，5件做抑菌或殺菌性能測試，10件做穩(wěn)定性測試。C2 試驗(yàn)菌與菌液制備C2.1 試驗(yàn)菌C2.1.1 細(xì)菌：金黃色葡萄球菌 (ATCC 6538)，大腸桿菌 (8099或ATCC 25922)。C2.1.2 酵母菌：白色念珠菌（ATCC 10231）。菌液制備：取菌株第314代的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面新鮮培養(yǎng)物(1824h)，用5mL0.03mol/L磷酸鹽緩沖液（以下簡稱PBS）洗下菌苔，使菌懸浮均勻后用上述PBS稀釋至所需濃度。C3 殺菌性能試驗(yàn)方法該試驗(yàn)取樣部位，根據(jù)被試產(chǎn)品生產(chǎn)者的說明而確定。C3.1 中和劑鑒定試驗(yàn)進(jìn)行殺菌性能測試必須通過以下中和劑鑒定試驗(yàn)。C3.1.1試驗(yàn)分組1)染菌樣片5mLPBS2)染菌樣片5mL中和劑3)染菌對照片5mL中和劑4)樣片5mL中和劑染菌對照片5)染菌對照片5mLPBS6)同批次PBS7)同批次中和劑8)同批次培養(yǎng)基。C3.1.2 評價(jià)規(guī)定1)第1組無試驗(yàn)菌，或僅有極少數(shù)試驗(yàn)菌菌落生長。2)第2組有較第1組為多，但較第3、4、5組為少的試驗(yàn)菌生長，并符合要求。3)第3、4、5組有相似量試驗(yàn)菌生長，并在11049104cfu/片之間，其組間菌落數(shù)誤差率不超過15。4)第68組無菌生長。5)連續(xù)3次試驗(yàn)取得合格評價(jià)。C3.2 殺菌試驗(yàn)C3.2.1 操作步驟將試驗(yàn)菌24h斜面培養(yǎng)物用PBS洗下，制成菌懸液（要求的濃度為：用100L滴于對照樣片上，回收菌數(shù)為11049104cfu/片）。取被試樣片（2.0cm3.0cm）和對照樣片（與試樣同質(zhì)材料，同等大小，但不含抗菌材料，且經(jīng)滅菌處理）各4片，分成4組置于4個(gè)滅菌平皿內(nèi)。取上述菌懸液，分別在每個(gè)被試樣片和對照樣片上滴加100L，均勻涂布，開始計(jì)時(shí)，作用2、5、10、20min，用無菌鑷分別將樣片投入含5mL相應(yīng)中和劑的試管內(nèi)，充分混勻，作適當(dāng)稀釋，然后取其中23個(gè)稀釋度，分別吸取0.5mL置于兩個(gè)平皿，用涼至4045的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（細(xì)菌）或沙氏瓊脂培養(yǎng)基（酵母菌）15mL作傾注，轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，使其充分均勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平板，352培養(yǎng)48h（細(xì)菌）或72h（酵母菌），作活菌菌落計(jì)數(shù)。試驗(yàn)重復(fù)3次，按式（C1）計(jì)算殺菌率：X3(A-B)/A100%（C1）式中：X3殺菌率，；A對照樣品平均菌落數(shù)；B被試樣品平均菌落數(shù)。C3.2.2 評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)殺菌率90，產(chǎn)品有殺菌作用。C4 溶出性抗（抑）菌產(chǎn)品抑菌性能試驗(yàn)方法C4.1 操作步驟將試驗(yàn)菌24h斜面培養(yǎng)物用PBS洗下，制成菌懸液（要求的濃度為：用100L滴于對照樣片上或5mL樣液內(nèi)，回收菌數(shù)為11049104cfu/片或mL）。取被試樣片（2.0cm3.0cm）或樣液（5mL）和對照樣片或樣液（與試樣同質(zhì)材料，同等大小，但不含抗菌材料，且經(jīng)滅菌處理）各4片（置于滅菌平皿內(nèi)）或4管。取上述菌懸液，分別在每個(gè)被試樣片或樣液和對照樣片或樣液上或內(nèi)滴加100L，均勻涂布混合，開始計(jì)時(shí)，作用2、5、10、20min，用無菌鑷分別將樣片或樣液（0.5mL）投入含5mLPBS的試管內(nèi)，充分混勻，作適當(dāng)稀釋，然后取其中23個(gè)稀釋度，分別吸取0.5mL，置于兩個(gè)平皿，用涼至4045的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（細(xì)菌）或沙氏瓊脂培養(yǎng)基（酵母菌）15mL作傾注，轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，使其充分均勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平板，352培養(yǎng)48h（細(xì)菌）或72h（酵母菌），作活