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乳酸的測(cè)定 EDTA滴定乳酸鈣法1 實(shí)驗(yàn)原理1.1 乙二胺四乙酸(簡(jiǎn)稱(chēng)EDTA,常用H4Y表示)難溶于水,通常使用其二鈉鹽配制標(biāo)準(zhǔn)溶液。標(biāo)定EDTA溶液常用的基準(zhǔn)物有Zn、ZnO、CaCO3、Bi、Cu、MgSO47H2O、Hg、Ni、Pb等。通常選用其中與被測(cè)組分相同的物質(zhì)作基準(zhǔn)物,這樣滴定條件較一致。EDTA溶液若用于測(cè)定石灰石或白云石中CaO、MgO的含量,則宜用CaCO3為基準(zhǔn)物。首先可加HCl溶液與之作用,其反應(yīng)如下:CaCO3+2HClCaCl2+H2O+CO2 然后把溶液轉(zhuǎn)移到容量瓶中并稀釋?zhuān)瞥赦}標(biāo)準(zhǔn)溶液。吸取一定量鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液,調(diào)節(jié)酸度至pH12,用鈣指示劑作指示劑以EDTA滴定至溶液從酒紅色變?yōu)榧兯{(lán)色,即為終點(diǎn),其變色原理如下:鈣指示劑(常以H2Ind表示)在溶液中按下式電離:H3Ind2H+HInd2-在pH12溶液中,HInd2-與Ca2+離子形成比較穩(wěn)定的絡(luò)離子,反應(yīng)如下:HInd2-+Ca2+CaInd-+H+ 純藍(lán)色 酒紅色 所以在鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液中加入鈣指示劑,溶液呈酒紅色,當(dāng)用EDTA溶液滴定時(shí),由于EDTA與Ca2+離子形成比CaInd-絡(luò)離子更穩(wěn)定的絡(luò)離子CaY2-,因此在滴定終點(diǎn)附近,CaInd-絡(luò)離子不斷轉(zhuǎn)化為較穩(wěn)定的CaY2-絡(luò)離子,而鈣指示劑則被游離了出來(lái),其反應(yīng)可表示如下:CaInd-+H2Y2-CaY2-+ HInd2-+H2O 酒紅色 無(wú)色 純藍(lán)色 由于CaY2-離子無(wú)色,所以到達(dá)終點(diǎn)時(shí)溶液由酒紅色變成純藍(lán)色。 用此法測(cè)定鈣,若Mg2+離子共存(在調(diào)節(jié)溶液酸度為pH12時(shí),Mg2+離子將形成Mg(OH)2沉淀),此共存的少量Mg2+離子不僅不干擾鈣的測(cè)定,而且會(huì)使終點(diǎn)比Ca2+離子單獨(dú)存在時(shí)更敏銳。當(dāng)Ca2+、Mg2+離子共存時(shí),終點(diǎn)由酒紅色變到純藍(lán)色,當(dāng)Ca2+離子單獨(dú)存在時(shí)則由酒紅色變紫藍(lán)色,所以測(cè)定單獨(dú)存在的Ca2+離子時(shí),常常加入少量Mg2+離子溶液。 滴定至終點(diǎn)后藍(lán)色很快又返回至紫紅色又稱(chēng)終點(diǎn)回頭。此現(xiàn)象是由鈣鎂鹽類(lèi)的懸浮性顆粒所致,影響測(cè)定。存在這樣情況,可加鹽酸酸化,便可除去堿度,后用NaOH溶液中和。2 器皿和試劑酸式滴定管;乙二胺四乙酸二鈉(C10H14N2Na2O8.2H2O),CaCO3,鎂溶液(溶解1g MgSO47H2O于水中,稀釋至200mL),NaOH溶液(20%溶液),鹽酸溶液(1+1)鈣指示劑(固體指示劑)3 實(shí)驗(yàn)步驟3.1 0.05molL-1EDTA溶液的配制: 準(zhǔn)確稱(chēng)取乙二胺四乙酸二鈉18.612g,溶解于500-600mL水中,稀釋至1L,如混濁,應(yīng)過(guò)濾,轉(zhuǎn)移至1000mL細(xì)口瓶中,搖勻。3.2 以CaCO3為基準(zhǔn)物標(biāo)定EDTA溶液3.2.1 0.05molL-1鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制: 置CaCO3基準(zhǔn)物于稱(chēng)量瓶中,在110C干燥2小時(shí),冷卻后,準(zhǔn)確稱(chēng)取1.25-1.30g碳酸鈣于150mL燒杯中,蓋上表面皿,加水潤(rùn)濕,再?gòu)谋爝呏鸬渭尤霐?shù)毫升HCl溶液(1+1)淋洗入杯中,直至CaCO3 完全反應(yīng),待冷卻后轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,洗凈表面皿物質(zhì)至容量瓶,稀釋至刻度,搖勻。計(jì)算準(zhǔn)確濃度C0。3.2.2 用鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定EDTA溶液: 用移液管移取25.00mL標(biāo)準(zhǔn)鈣溶液于250mL錐形瓶中,加入約25 mL水,2mL鎂溶液,5mL20%NaOH溶液,2mLHCl溶液(1+4)及約10mg(米粒大?。┾}指示劑,搖勻后,用EDTA溶液滴定至溶液從紅色變?yōu)榧兯{(lán)色,即為終點(diǎn)。測(cè)定三次,取平均值。3.3 用EDTA溶液滴定乳酸鈣: 取發(fā)酵液2ml,滴到盛有50mL蒸餾水的250mL錐形瓶中,加2mL鎂溶液,5mL20%NaOH溶液,2mLHCl溶液(1+4)及約10mg(米粒大?。┾}指示劑,搖勻后,用EDTA溶液滴定至溶液從紅色變?yōu)榧兯{(lán)色,即為終點(diǎn)。測(cè)定平行樣,取平均值。4 計(jì)算 C1=C0*25/V1C1 EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(mol/L)C0 CaCO3基準(zhǔn)溶液濃度(mol/L)V1 25mLCaCO3 基準(zhǔn)液消耗EDTA溶液體積(mL) W1=C1*(V2/1000)*218.2/(2/1000)=C1*V2*308.3/2W1 乳酸鈣(CH3CHOHCOO2Ca5H2O)含量(g/L) C1 EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(mol/L)V2 發(fā)酵液消耗EDTA溶液體積(mL)308.3乳酸鈣((CH3CHOHCOO)2Ca5H2O)摩爾質(zhì)量(g/mol) W2=2*C1*(V2/1000)*90/(2/1000)=2*C1*V2*90/2=90*C1*V2W2 乳酸含量(g
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