

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課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)學(xué)業(yè)水平層次(a)1在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長(zhǎng),同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基稱做()a鑒別培養(yǎng)基b加富培養(yǎng)基c選擇培養(yǎng)基 d基礎(chǔ)培養(yǎng)基【解析】鑒別培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種特殊化學(xué)物質(zhì),使微生物的代謝產(chǎn)物與特殊化學(xué)物質(zhì)發(fā)生特定化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生明顯特征變化以達(dá)到鑒別特定微生物的培養(yǎng)基;加富培養(yǎng)基一般用來(lái)培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求比較苛刻的異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基;基礎(chǔ)培養(yǎng)基是含有一般微生物生長(zhǎng)繁殖所需的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基,例如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基;選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì),抵制不需要微生物的生長(zhǎng),有利于所需微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基?!敬鸢浮縞2土壤中的細(xì)菌能分解尿素,是因?yàn)樗鼈兡芎铣梢环N()a尿素酶 b脲酶c蛋白酶 d肽酶【解析】能夠分解利用尿素的細(xì)菌,其細(xì)胞內(nèi)含有脲酶,可以把尿素分解成氨,然后進(jìn)一步利用?!敬鸢浮縝3測(cè)定土壤中細(xì)菌數(shù)量一般選用104、105和106倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng),而測(cè)定真菌的數(shù)量一般選用102、103和104倍稀釋,其原因是()a細(xì)菌個(gè)體小,真菌個(gè)體大b細(xì)菌易稀釋,真菌不易稀釋c細(xì)菌在土壤中數(shù)量比真菌多d隨機(jī)的,沒有原因【解析】土壤中的微生物大約70%90%是細(xì)菌,真菌的數(shù)量要比細(xì)菌少。樣品的稀釋度越高,在平板上生成的菌落數(shù)目就越少。在實(shí)際操作中,通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng),以保證獲得菌落數(shù)在30300,適于平板計(jì)數(shù),所以細(xì)菌的稀釋倍數(shù)要高于真菌的稀釋倍數(shù)。【答案】c4在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,培養(yǎng)細(xì)菌后,指示劑將()a變藍(lán)色 b變紅色c變黑色 d變棕色【解析】細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成了氨,氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng),ph升高,加入酚紅指示劑將變紅?!敬鸢浮縝5產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是()a一個(gè)細(xì)菌、液體培養(yǎng)基b許多細(xì)菌、液體培養(yǎng)基c一個(gè)細(xì)菌、固體培養(yǎng)基d許多細(xì)菌、固體培養(yǎng)基【解析】在固體培養(yǎng)基上由一個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的子細(xì)菌群體叫菌落。【答案】c能力提升層次(b)6用稀釋涂布平板法來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)時(shí),通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能推測(cè)出樣品中的活菌數(shù),原因是()a平板上的一個(gè)菌落就是一個(gè)細(xì)菌b菌落中的細(xì)菌數(shù)是固定的c此時(shí)的一個(gè)菌落一般來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌d此方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)一定與活菌的實(shí)際數(shù)相同【解析】當(dāng)稀釋倍數(shù)適宜時(shí),培養(yǎng)基上的一個(gè)菌落可能來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌,但也可能由2個(gè)或2個(gè)以上活菌生長(zhǎng)而成,因此菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)低?!敬鸢浮縞7下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的有關(guān)敘述,錯(cuò)誤的是()a微生物培養(yǎng)前,需對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行消毒b測(cè)定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目,常用菌落計(jì)數(shù)法c分離土壤中不同的微生物,要采用不同的稀釋度d分離能分解尿素的細(xì)菌,要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源【解析】微生物培養(yǎng)前,需對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,而不是消毒;測(cè)定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目,常用菌落計(jì)數(shù)法而一般不用活菌計(jì)數(shù)法;分離土壤中不同的微生物,要采用不同的稀釋度以便能從中選擇出菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù);分離能分解尿素的細(xì)菌,要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源?!敬鸢浮縜8某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上測(cè)得平板上的菌落數(shù)的平均值為215,那么每毫升樣品中菌落數(shù)是(涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.1 ml)()a2.15108 b2.15109c215 d21.5【解析】稀釋倍數(shù)為106,0.1 ml稀釋液的菌落數(shù)的平均值為215,則每毫升樣品中菌落數(shù)就為215/0.11062.15109?!敬鸢浮縝9下列關(guān)于土壤取樣的敘述,錯(cuò)誤的是()a土壤取樣,應(yīng)選取肥沃、濕潤(rùn)的土壤b先鏟去表層土,再取樣c取樣用的小鐵鏟和信封在使用前不用滅菌d應(yīng)在火焰旁稱取土壤【解析】土壤取樣過程中,為防止雜菌污染,取樣用的小鐵鏟和信封在使用前必須滅菌。【答案】c10(2015海淀模擬)下列有關(guān)微生物篩選的敘述中,不正確的是()a用全營(yíng)養(yǎng)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基篩選大腸桿菌b用高nacl培養(yǎng)基篩選抗鹽突變菌株c用含酚紅的尿素培養(yǎng)基篩選鑒別出分解尿素的菌株d利用高溫條件篩選耐熱的taq細(xì)菌【解析】全營(yíng)養(yǎng)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基常用于大腸桿菌的培養(yǎng),但是該培養(yǎng)基對(duì)微生物無(wú)選擇作用,a項(xiàng)錯(cuò)誤??果}突變菌株具有耐高鹽的能力,因此可以利用高nacl培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng),b項(xiàng)正確。分解尿素的菌株會(huì)分解尿素產(chǎn)生氨,使培養(yǎng)基ph升高,因此可以利用含酚紅的尿素培養(yǎng)基篩選鑒別出分解尿素的菌株,c項(xiàng)正確。利用高溫條件可以篩選耐熱的taq細(xì)菌,d項(xiàng)正確。【答案】a拓展探究層次(c)11(2015益陽(yáng)高二檢測(cè))甲、乙、丙是三種微生物,下表、是用來(lái)培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在中正常生長(zhǎng)繁殖;甲能在中正常生長(zhǎng)繁殖,而乙和丙都不能;乙能在中正常生長(zhǎng)繁殖,甲、丙都不能。下列說法正確的是()成分含量粉狀硫10 gk2hpo44 gfeso40.5 g蔗糖10 g(nh4)2so40.4 gh2o100 mlmgso49.25 gcacl20.5 ga. 甲、乙、丙都是異養(yǎng)微生物b甲、乙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物c甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物d甲是異養(yǎng)微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)微生物【解析】培養(yǎng)基為無(wú)氮培養(yǎng)基,只有能夠利用大氣中的氮?dú)獾奈⑸锊拍茉谠撆囵B(yǎng)基上生長(zhǎng),可以培養(yǎng)固氮微生物;培養(yǎng)基缺少蔗糖,培養(yǎng)基的成分中無(wú)有機(jī)物,可以培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物。而培養(yǎng)基含有蔗糖,可以培養(yǎng)異養(yǎng)型微生物?!敬鸢浮縞123個(gè)培養(yǎng)皿中分別加入10 ml不同的培養(yǎng)基,然后接種相同的大腸桿菌樣液。培養(yǎng)36小時(shí)后,計(jì)數(shù)菌落數(shù),結(jié)果如下表。下列選項(xiàng)不正確的是()培養(yǎng)皿培養(yǎng)基成分菌落數(shù)瓊脂、葡萄糖35瓊脂、葡萄糖、生長(zhǎng)因子250瓊脂、生長(zhǎng)因子0a. 該實(shí)驗(yàn)采用的是固體平板培養(yǎng)基b該實(shí)驗(yàn)采用稀釋涂布平板法接種c和對(duì)照,說明大腸桿菌的生長(zhǎng)不需要生長(zhǎng)因子d和對(duì)照,說明大腸桿菌的生長(zhǎng)需要糖類【解析】培養(yǎng)基中添加了瓊脂且能觀察到菌落,因此本實(shí)驗(yàn)采用的是固體平板培養(yǎng)基,a項(xiàng)正確。對(duì)大腸桿菌進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)用的是稀釋涂布平板法,b項(xiàng)正確。和相比,菌落數(shù)比較少,說明生長(zhǎng)因子能促進(jìn)大腸桿菌的生長(zhǎng),c項(xiàng)不正確;和對(duì)照,缺少葡萄糖大腸桿菌不能生長(zhǎng),說明大腸桿菌的生長(zhǎng)需要糖類,d項(xiàng)正確?!敬鸢浮縞13在探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量變化的實(shí)驗(yàn)中,需利用計(jì)數(shù)板對(duì)微生物細(xì)胞進(jìn)行直接計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)板是一個(gè)特制的可在顯微鏡下觀察的玻片,樣品就滴在計(jì)數(shù)室內(nèi)。計(jì)數(shù)室由2516400個(gè)小室組成,容納液體總體積為0.1 mm3。某同學(xué)操作時(shí)將1 ml酵母菌樣品加99 ml無(wú)菌水稀釋,用無(wú)菌吸管吸取少許使其自行滲入計(jì)數(shù)室,蓋上蓋玻片并用濾紙吸去多余菌液,進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)。(1)在實(shí)驗(yàn)中,某同學(xué)的部分實(shí)驗(yàn)操作過程是這樣的:從靜置試管中吸取酵母菌培養(yǎng)液加入計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù),并記錄數(shù)據(jù);把酵母菌培養(yǎng)液放置在冰箱中,第七天再取樣計(jì)數(shù),記錄數(shù)據(jù),統(tǒng)計(jì)分析繪成曲線。請(qǐng)糾正該同學(xué)實(shí)驗(yàn)操作中的3處錯(cuò)誤:_;_;_。(2)在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)該對(duì)計(jì)數(shù)板、吸管等器具進(jìn)行_處理。(3)如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多,難以數(shù)清,應(yīng)采取的措施是_。(4)如果觀察到如圖所示a、b、c、d、e 5個(gè)大格共80個(gè)小室內(nèi)共有酵母菌48個(gè),則上述1 ml酵母菌樣品中約有酵母菌_個(gè);要獲得較為準(zhǔn)確的數(shù)值,減少誤差,你認(rèn)為該怎么做?_?!窘馕觥?1)在從試管中吸取酵母菌之前,應(yīng)將試管輕輕振蕩幾次,目的是使酵母菌在培養(yǎng)液中均勻分布。酵母菌的培養(yǎng)液應(yīng)置于適宜條件下,并且每隔24小時(shí)就要統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目。(2)為了避免雜菌污染,實(shí)驗(yàn)中所用吸管、計(jì)數(shù)板等器具需進(jìn)行滅菌處理。(4)解答時(shí)要注意以下兩點(diǎn):統(tǒng)一單位;注意體積的變化。400個(gè)小室共容納液體總體積為0.1 mm3,則80個(gè)小室容納體積為:2102mm3,含酵母菌48個(gè),又因酵母菌培養(yǎng)液總體積為100 ml,統(tǒng)一單位后即可求出酵母菌個(gè)數(shù)。【答案】(1)應(yīng)將試管輕輕振蕩幾次再吸取酵母菌培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)應(yīng)將酵母菌培養(yǎng)液放置在適宜溫度下培養(yǎng)應(yīng)連續(xù)七天觀察、取樣計(jì)數(shù)并記錄數(shù)據(jù)(2)滅菌(3)適當(dāng)稀釋(4)2.4108多次計(jì)數(shù),求平均值14下面是探究如何從土壤中分離出自生固氮菌與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn),完成下列問題。實(shí)驗(yàn)原理:農(nóng)田的表層土壤中,自生固氮菌的數(shù)量比較多。將用表層土壤制成的稀泥漿,接種到無(wú)氮培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。在這種情況下,只有自生固氮菌才能生長(zhǎng)繁殖。用這種方法,可以將自生固氮菌與其他細(xì)菌分離。材料用具:農(nóng)田的表層土壤、無(wú)氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、盛有9 ml無(wú)菌水的試管、無(wú)菌吸管、無(wú)菌涂布器、無(wú)菌培養(yǎng)皿、盛有90 ml無(wú)菌水的錐形瓶、恒溫箱。(1)方法步驟培養(yǎng)基的制備:分別配制無(wú)氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,其倒平板應(yīng)在_操作。制備土壤稀釋液:取土樣10 g加入盛有90 ml無(wú)菌水的錐形瓶中,充分搖勻。用無(wú)菌吸管吸取上清液1 ml,轉(zhuǎn)至盛有9 ml的無(wú)菌水的試管中,依次稀釋到107稀釋度。涂布平板操作:按照由107103的稀釋度的順序分別吸取0.1 ml進(jìn)行涂布平板操作,每個(gè)稀釋度下,無(wú)氮培養(yǎng)基應(yīng)至少涂布_個(gè)平板,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布_個(gè)。培養(yǎng):放入恒溫箱內(nèi),在2830 下培養(yǎng)34 d。計(jì)數(shù):當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí),選取菌落數(shù)在_的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。如果在稀釋倍數(shù)為105的平板上測(cè)定的平均值為50,則每克樣品中的菌體數(shù)是_。(2)預(yù)期結(jié)果:相同稀釋度下,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)_(選填“多于”或“小于”)無(wú)氮培養(yǎng)基上的數(shù)目。原因是_?!窘馕觥?1)在酒精燈火焰旁倒平板,可以減少雜菌的污染。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般設(shè)置3個(gè)或3個(gè)以上平板,選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),并取平均值,則每克樣品中的菌落數(shù)為(500.1)1055107。(2)用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照組,說明無(wú)氮培養(yǎng)基的選擇作用,該培養(yǎng)基適合其他細(xì)菌生存,所以它比無(wú)氮培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目多?!敬鸢浮?1)酒精燈火焰附近31303005107(2)多于無(wú)氮培養(yǎng)基上只有土壤中的自生固氮菌能生存繁殖,而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上幾乎允許土壤中所有微生物生存15氯苯化合物是重要的有機(jī)化工原料,但不易降解,會(huì)污染環(huán)境。某研究小組依照下列實(shí)驗(yàn)方案(下圖)篩選出能高效降解氯苯的微生物sp1菌,培養(yǎng)基配方如下表:表:培養(yǎng)基的組成(1)配制號(hào)固體培養(yǎng)基時(shí),除添加號(hào)液體培養(yǎng)基成分外,還應(yīng)添加1%的_。(2)培養(yǎng)基配制時(shí),滅菌與調(diào)ph的先后順序是_。(3)從用途上來(lái)說,號(hào)培養(yǎng)基和號(hào)培養(yǎng)基分別屬于_培養(yǎng)基和_培養(yǎng)基。在號(hào)培養(yǎng)基中,為sp1菌提供氮素的成分是_。(4)在營(yíng)養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時(shí),sp1的菌體會(huì)變成一個(gè)圓形的休眠體,這種休眠體被稱為_。(5)將sp1菌接種在含不同濃度氯苯的號(hào)培養(yǎng)液中培養(yǎng),得到生長(zhǎng)曲線(如下圖)。從圖可知sp1菌在_培養(yǎng)條件下最早停止生長(zhǎng),其原因是_?!窘馕觥?1)固體培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上加入凝固劑制成的,常用的凝固劑是瓊脂。(2)配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先調(diào)ph后滅菌。(3)從培養(yǎng)基的成分看,號(hào)培養(yǎng)基中含有牛肉膏和蛋白胨,因此
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