新高考生物一輪復(fù)習(xí) 加試特訓(xùn)（九）浙科版.doc

加試特訓(xùn)(九)1請(qǐng)回答下列有關(guān)微生物的相關(guān)問題。資料一微生物在現(xiàn)代生物技術(shù)中應(yīng)用非常廣泛，如釀酒制醋等。獲取純種釀酒酵母菌的基本程序是：配制培養(yǎng)基接種培養(yǎng)觀察記錄純化培養(yǎng)。(1)酵母菌的培養(yǎng)最好使用下列哪種培養(yǎng)基()a牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基b麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基c無土栽培培養(yǎng)基dms培養(yǎng)基(2)采用劃線分離法接種時(shí)，開始接種時(shí)要灼燒接種環(huán)，目的是_。要把接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基同時(shí)放入恒溫箱培養(yǎng)，設(shè)置“未接種的培養(yǎng)基”的目的是_。(3)如果將分離出來的純種釀酒酵母接種到葡萄汁中發(fā)酵，如何獲得酒精含量更高的果酒？_。(4)把從酵母細(xì)胞中提取的淀粉酶固定在尼龍布上制成固定化酶，與傳統(tǒng)酶應(yīng)用技術(shù)相比，此技術(shù)最顯著的優(yōu)點(diǎn)是_。(5)某實(shí)驗(yàn)小組欲按上述方法從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌，應(yīng)將菌液涂布接種于以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，30 條件下培養(yǎng)。為避免污染，需將培養(yǎng)皿呈_狀態(tài)放置；篩選時(shí)應(yīng)將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍，如果菌落周圍的現(xiàn)象是出現(xiàn)透明圈，則說明此種菌能夠_。從平板中挑取實(shí)驗(yàn)效果明顯的目的菌株，采用_法接種于新的培養(yǎng)基平板，可對(duì)菌株進(jìn)行進(jìn)一步的純化。資料二基因工程中常選用一些微生物作為工程菌，下圖為大腸桿菌及質(zhì)粒載體的結(jié)構(gòu)模式圖。(6)a代表的物質(zhì)和質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)相同，都是_，二者還具有其他共同點(diǎn)，如_，_(寫出兩條即可)。(7)若質(zhì)粒dna分子的切割末端為，則與之連接的目的基因的切割末端應(yīng)為_；可使用_把質(zhì)粒和目的基因連接在一起。(8)氨芐青霉素抗性基因在質(zhì)粒dna上被稱為_，其作用是_。(9)下列常在基因工程中用做載體的是()a蘇云金芽孢桿菌抗蟲基因b土壤農(nóng)桿菌環(huán)狀rna分子c大腸桿菌的質(zhì)粒d動(dòng)物細(xì)胞的染色體答案(1)b(2)滅菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否被污染(3)往葡萄汁中加入適量的蔗糖(4)可重復(fù)使用(產(chǎn)品易純化)(5)淀粉倒置分泌淀粉酶使淀粉發(fā)生水解劃線分離(6)dna能夠自主復(fù)制具有遺傳效應(yīng)(7)dna連接酶(8)標(biāo)記基因篩選到含有重組dna分子的受體細(xì)胞(9)c解析(1)“細(xì)菌喜葷，霉菌喜素”，a培養(yǎng)基適用于細(xì)菌培養(yǎng)，b培養(yǎng)基適用于真菌培養(yǎng)；c培養(yǎng)基適用于植物體培養(yǎng)，d培養(yǎng)基適用于植物組織培養(yǎng)。(2)開始接種時(shí)要對(duì)接種環(huán)灼燒滅菌，接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基同時(shí)放入恒溫箱培養(yǎng)，目的是檢驗(yàn)培養(yǎng)基在接種中是否被污染。(3)葡萄汁中添加蔗糖發(fā)酵能促進(jìn)酵母菌快速生長，加快發(fā)酵產(chǎn)生酒精更多。(4)使用固定化酶的優(yōu)點(diǎn)是酶制劑更加穩(wěn)定、可以重復(fù)使用、產(chǎn)品易純化等。(5)以淀粉為唯一碳源的固體培養(yǎng)基通常只生長能利用淀粉的微生物。培養(yǎng)皿在培養(yǎng)過程中會(huì)有冷凝水從蓋上滴落到培養(yǎng)基上，培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)可以防止菌體隨水滴擴(kuò)散，使分離菌種失敗。培養(yǎng)基中含淀粉遇碘液會(huì)顯藍(lán)色，若菌體能分解利用淀粉，其菌落周圍會(huì)出現(xiàn)透明圈。通過劃線分離法可以進(jìn)一步分離純化菌種。(6)a為擬核，與質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)相同，都為dna，均為大腸桿菌的遺傳物質(zhì)，可以自主復(fù)制，并具有遺傳效應(yīng)。(7)相同的限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒，產(chǎn)生粘性末端的堿基序列互補(bǔ)，可以通過dna連接酶連接。(8)質(zhì)粒上的抗性基因作為標(biāo)記基因，可以用于篩選含有重組dna分子的受體細(xì)胞。(9)作為基因工程中的載體，應(yīng)能夠自主復(fù)制，并具有標(biāo)記基因和多個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶切點(diǎn)。2在工業(yè)生產(chǎn)中，淀粉酶主要是通過固定化酶技術(shù)將其用于淀粉的分解，淀粉酶廣泛分布于動(dòng)物、植物和微生物中。請(qǐng)回答下列相關(guān)問題：(1)在上個(gè)世紀(jì)50年代，酶已經(jīng)大規(guī)模地應(yīng)用于各個(gè)生產(chǎn)領(lǐng)域，到了70年代又發(fā)明了固定化酶技術(shù)。固定化酶技術(shù)將酶固定在不溶于水的載體上，使酶既能與_接觸，又能與_分離，同時(shí)固定在載體上的酶還能_。常用的固定方法有_。(2)“淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè)”實(shí)驗(yàn)中：淀粉酶固定在_上，使用了下圖中方法_(填出號(hào)碼及名稱)。實(shí)驗(yàn)中，用滴管滴加淀粉溶液時(shí)，使淀粉溶液以_流速過柱，目的是_。灌注了固定化酶的注射器在使用完后要_，放置在_中保存。(3)正常大鼠體內(nèi)因含有淀粉酶基因可以正常利用淀粉。但研究發(fā)現(xiàn)某一突變型大鼠因體內(nèi)缺少淀粉酶基因無法利用淀粉?，F(xiàn)科研人員通過基因改造使其可以正常利用淀粉。具體流程如下：卵母細(xì)胞除從活體輸卵管中采集外，還可從已處死的雌鼠_中獲取。圖中的淀粉酶基因作為_，質(zhì)粒作為_，二者需用_切割后連接成重組載體，該過程與質(zhì)粒上含有_有關(guān)。子代大鼠如果_和_，即可分別在分子水平和個(gè)體水平上說明淀粉酶基因已成功表達(dá)。在上述轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過程中，所用到的主要胚胎工程技術(shù)是_、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植。答案(1)反應(yīng)物產(chǎn)物反復(fù)利用吸附法、共價(jià)偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法(2)石英砂乙0.3 ml/min使淀粉充分與酶接觸用10倍柱體積的蒸餾水洗滌4 冰箱(3)卵巢目的基因載體同一種限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點(diǎn)檢測(cè)到相應(yīng)蛋白質(zhì)(淀粉酶)可利用淀粉體外受精解析(1)固定化酶技術(shù)將水溶性的酶通過物理或化學(xué)的方法固定在不溶于水的載體上，使酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離，酶可以重復(fù)利用。常用的固定方法有吸附法、共價(jià)偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法。(2)教材實(shí)驗(yàn)中淀粉酶固定在圖乙所示的石英砂上。為了使淀粉充分與酶接觸，淀粉溶液以較慢的速度0.3 ml/min流速過柱。使用完畢的注射器要用10倍柱體積的蒸餾水洗滌后放置在4 冰箱中保存。(3)獲取卵母細(xì)胞的途徑有2條：從活體輸卵管中采集或從已處死的雌鼠卵巢中獲取。目的基因?yàn)榈矸勖富?，質(zhì)粒為載體，兩者必須用相同的限制性核酸內(nèi)切酶切割，有相同的粘性末端才能連接，能被限制性核酸內(nèi)切酶切割，是因?yàn)榫哂邢拗菩院怂醿?nèi)切酶的切割位點(diǎn)。如果檢測(cè)到相應(yīng)蛋白質(zhì)(淀粉酶)，即可在分子水平上說明目的基因已經(jīng)表達(dá)，如果檢測(cè)到大鼠可以利用淀粉，即可在個(gè)體水平上說明目的基因已經(jīng)表達(dá)。在上述轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過程中，所用到的主要胚胎工程技術(shù)是體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植。3在我們的周圍存在著各種各樣的微生物，比如大腸桿菌、酵母菌、乳酸菌、霉菌等。微生物與人類的生活、健康有著密切的聯(lián)系。請(qǐng)回答下列相關(guān)問題：(1)檢查飲用水中大腸桿菌數(shù)量時(shí)必須進(jìn)行無菌操作。實(shí)驗(yàn)前所需的各種器材如三角燒瓶、培養(yǎng)皿等需要經(jīng)過_法滅菌。在微生物培養(yǎng)或分離過程中，下列操作不恰當(dāng)?shù)氖莀。a在超凈臺(tái)中進(jìn)行接種時(shí)應(yīng)該關(guān)閉紫外燈b擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)必須保證氧氣的供應(yīng)c控制液體培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度d空白的培養(yǎng)基平板需進(jìn)行無菌實(shí)驗(yàn)(2)微生物與人類的生活關(guān)系越來越密切，在制作果酒、果醋、泡菜的過程中，用到的主要微生物分別是_。在果醋、泡菜和果酒的制作過程中，均利用相應(yīng)微生物的代謝特點(diǎn)進(jìn)行條件控制，其中需要提供氧氣的是_的制作。泡菜腌制原理是_和_等主要微生物利用菜中的_和其他營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行發(fā)酵，產(chǎn)生有機(jī)酸和醇類物質(zhì)。(3)因?yàn)榕囵B(yǎng)基里面含有微生物或動(dòng)植物細(xì)胞生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì)和成分，所以常用培養(yǎng)基來保存或增殖微生物或動(dòng)植物細(xì)胞。配制培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基時(shí)，根據(jù)“細(xì)菌喜葷，霉菌喜素”的規(guī)律，通常在培養(yǎng)基中加入_作為營養(yǎng)物質(zhì)，還需要考慮溫度、滲透壓和_等條件。大腸桿菌培養(yǎng)和分離的實(shí)驗(yàn)中，在lb液體培養(yǎng)基中進(jìn)行_，培養(yǎng)液經(jīng)_后，在lb固體培養(yǎng)基上進(jìn)行_，并將培養(yǎng)皿_放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，可以獲得如圖效果。通常對(duì)獲得的純菌種可以依據(jù)_的形狀、大小等特征進(jìn)行初步的鑒定。根據(jù)微生物的特點(diǎn)，可以利用相應(yīng)的培養(yǎng)基進(jìn)行分離或培養(yǎng)，例如用_的培養(yǎng)基分離能產(chǎn)生脲酶的微生物，用_的培養(yǎng)基培養(yǎng)蘋果青霉，可提高果膠酶的產(chǎn)量。利用固體培養(yǎng)基可以進(jìn)行微生物培養(yǎng)和植物細(xì)胞培養(yǎng)，兩者的培養(yǎng)基明顯不同的是()a瓊脂的添加 b有機(jī)物的添加c激素的添加 d滅菌的處理答案(1)高壓蒸汽滅菌b(2)酵母菌、醋化醋桿菌、乳酸菌果醋假絲酵母乳酸菌糖(3)蛋白胨和酵母提取物ph擴(kuò)大培養(yǎng)稀釋涂布分離倒置菌落僅以尿素為氮源富含果膠c解析(1)無菌操作包括多種滅菌方法，對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿如培養(yǎng)皿等采用高壓蒸汽滅菌法滅菌。擴(kuò)大培養(yǎng)一般用液體培養(yǎng)基，是否要通入空氣要根據(jù)微生物的需求而定，不能一概而論。(2)在制作果酒、果醋、泡菜的過程中，分別用到的主要微生物是酵母菌、醋化醋桿菌和乳酸菌。果醋發(fā)酵屬于需氧發(fā)酵，需要向發(fā)酵裝置中通入空氣。泡菜腌制原理是假絲酵母和乳酸菌等主要微生物利用菜中的糖和其他營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行發(fā)酵，產(chǎn)生有機(jī)酸和醇類物質(zhì)。(3)細(xì)菌需要的營養(yǎng)物質(zhì)主要為蛋白胨、酵母提取物等。培養(yǎng)基配制除考慮營養(yǎng)物質(zhì)、溫度、滲透壓等之外還要特別注意ph適宜。通常液體培養(yǎng)基用于菌種擴(kuò)大培養(yǎng)或生產(chǎn)，固體培養(yǎng)基用于研究鑒定和菌種分離，菌種分離常用劃線分離和涂布分離，其中涂布分離前常常需要稀釋樣品。接種后的培養(yǎng)皿應(yīng)倒置培養(yǎng)，避免培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落到培養(yǎng)基上，造成菌體隨水滴擴(kuò)散，不能獲得單菌落。固體培養(yǎng)基上生長的微生物能形成菌落，菌落的形狀、大小、顏色、軟硬等特征可用于菌種的鑒定。分離能產(chǎn)生脲酶的微生物應(yīng)用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基。培養(yǎng)蘋果青霉獲得大量果膠酶時(shí)應(yīng)用含果膠豐富的培養(yǎng)基。植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中必須加入植物激素作為生長調(diào)節(jié)物質(zhì)才能完成，有機(jī)物的需求較少但不能缺少，而一般微生物培養(yǎng)時(shí)不需要激素添加，有機(jī)物較多。4人參果果實(shí)有淡雅的清香，果肉清爽多汁，風(fēng)味獨(dú)特。具有高蛋白、低糖、低脂，還富含維生素c，以及多種人體所必需的微量元素，尤其是硒、鈣的含量大大地高于其他的果實(shí)和蔬菜。某興趣小組將人參果制成果酒，并嘗試將其口感欠佳的葉子制作泡菜。請(qǐng)回答下列相關(guān)問題：(1)下圖為人參果果酒生產(chǎn)工藝流程簡圖，據(jù)圖回答問題：選料“？”粉碎滅菌接種發(fā)酵“？”果酒流程中“？”處的內(nèi)容依次應(yīng)為_、_。制作果酒時(shí)，溫度應(yīng)該控制在_，果酒釀造過程中如果果汁滅菌不合格，含有醋化醋桿菌，在酒精發(fā)酵旺盛時(shí)，醋化醋桿菌能否將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸？說明理由。_。果酒制作離不開酵母菌，與醋化醋桿菌相比，酵母菌在結(jié)構(gòu)上的主要特點(diǎn)是_。人參果果酒制作過程中，接種完成后要先向發(fā)酵罐中通入一段時(shí)間的無菌空氣，目的是_。(2)下圖是人參果葉子的腌制及亞硝酸鹽含量測(cè)定的實(shí)驗(yàn)流程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜或其他原料，原因是_。泡菜腌制過程中起主要作用的菌種是_。在制作泡菜的過程中，因?yàn)椴僮鞑划?dāng)，造成泡菜腐爛。下列原因中正確的是()a罐口密閉缺氧，抑制了乳酸菌和需氧腐生細(xì)菌的生長繁殖b罐口密閉不嚴(yán)，氧氣使乳酸菌的生長繁殖受到抑制，需氧腐生細(xì)菌的生長繁殖加快c罐口密閉不嚴(yán)，氧氣使酵母菌和需氧腐生細(xì)菌的生長繁殖減慢d罐口密閉缺氧，促進(jìn)了乳酸菌和需氧腐生細(xì)菌的生長繁殖測(cè)定亞硝酸鹽含量的方法是_。亞硝酸鹽可與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)，反應(yīng)產(chǎn)物再與n1萘基乙二胺偶聯(lián)，形成_色產(chǎn)物。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，應(yīng)以亞硝酸鈉質(zhì)量為橫坐標(biāo)，以_為縱坐標(biāo)。三壇泡菜分別在腌制過程中的第3、5、7、9、11、13天分別對(duì)食鹽濃度為4%、6%、8%的泡菜做了亞硝酸鹽含量的檢測(cè)，得到以下數(shù)據(jù)：食鹽濃度發(fā)酵天數(shù)1號(hào)壇4%2號(hào)壇6%3號(hào)壇8%第3天1.61.20.5第5天3.25.52第7天3.84.01.8第9天3.51.81.6第11天3.41.21.5第13天3.21.21.2請(qǐng)根據(jù)表中數(shù)據(jù)，對(duì)泡菜的制作提出兩條建議_、_。(3)科學(xué)家將分離得到的人參果韌皮部細(xì)胞進(jìn)行克隆，最終由單個(gè)細(xì)胞發(fā)育成了完整的新人參果植株。具體操作步驟如下所示：科學(xué)家所用的這種植物克隆技術(shù)叫做_。該項(xiàng)技術(shù)表明，當(dāng)植物細(xì)胞處于_狀態(tài)時(shí)，在一定的營養(yǎng)物質(zhì)、_和其他外界條件的作用下，可能表現(xiàn)出_，發(fā)育成完整植株。答案(1)沖洗過濾2530 不能因醋化醋桿菌是好氧型細(xì)菌，而果酒發(fā)酵是無氧環(huán)境(或因醋化醋桿菌需要在有氧且溫度是3035 條件下，才能將糖轉(zhuǎn)化為醋酸，而此時(shí)發(fā)酵罐中的條件是無氧且溫度是2530 )有成形的細(xì)胞核在有氧條件下，使酵母菌迅速繁殖，增加數(shù)量(2)亞硝酸鹽的含量低假絲酵母和乳酸菌b光電比色法紫紅光密度值泡菜腌制時(shí)間最好長于13天適當(dāng)?shù)卦黾邮雏}的濃度(3)(植物)組織培養(yǎng)離體(植物)激素細(xì)胞的全能性解析(1)果酒生產(chǎn)的工藝流程為：選料沖洗粉碎滅菌接種發(fā)酵過濾果酒。醋化醋桿菌的最適生長溫度為3035 。如果果汁滅菌不合格，含有醋化醋桿菌，由于果酒發(fā)酵旺盛時(shí)是無氧環(huán)境，且溫度為2530 ，不適合醋化醋桿菌生存，故醋化醋桿菌不能將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸。醋化醋桿菌是原核生物，無細(xì)胞核，酵母菌是真核生物，有細(xì)胞核及多種細(xì)胞器。果酒制作過程中，接種完成后要先向發(fā)酵罐中通入一段時(shí)間的無菌空氣，在有氧條件下，使酵母菌迅速繁殖，增加數(shù)量，有利于后期發(fā)酵。(2)制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜是因?yàn)槠渲衼喯跛猁}的含量低，蔬菜中的氮元素會(huì)被微生物分解產(chǎn)生亞硝酸鹽。泡菜腌制過程中起主要作用的菌種是假絲酵母和乳酸菌，先期發(fā)酵以假絲酵母為主，以后發(fā)酵以乳酸菌為主。在制作泡菜的過程中，罐口密閉不嚴(yán)，氧氣使乳酸菌的生長繁殖受到抑制，需氧腐生細(xì)菌的生長繁殖加快，造成泡菜腐爛。測(cè)定亞硝酸鹽含量的方法是光電比色法，亞硝酸鹽可與顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生紫紅色物質(zhì)。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，應(yīng)以標(biāo)準(zhǔn)溶液中亞硝酸鈉質(zhì)量為橫坐標(biāo)，以光密度值為縱坐標(biāo)。分析表中數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，泡菜中亞硝酸鹽的含量隨時(shí)間延長，先增加，13天后開始下降；泡菜中亞硝酸鹽的含量還與使用鹽水濃度有關(guān)，鹽水濃度適當(dāng)增大亞硝酸鹽的含量相對(duì)減少。(3)由圖可知，為植物組織培養(yǎng)過程，a為離體培養(yǎng)，b為脫分化形成愈傷組織，c為再分化形成胚狀體，d表示胚狀體經(jīng)過有絲分裂發(fā)育成幼苗，e為幼苗成長為植株。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性。5如圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案。請(qǐng)據(jù)圖回答問題。(1)該方案的目的是_。該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？_。原因是_。(2)圖中為_過程，常用_作為誘導(dǎo)劑。該細(xì)胞繼承了_，因此，不僅能_，還能產(chǎn)生_。圖中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的目的是_。圖中的培養(yǎng)能獲得_細(xì)胞，便于大規(guī)模培養(yǎng)。(3)在制備破傷風(fēng)桿菌抗體的過程中，進(jìn)行了兩次篩選，其目的是不相同的，是通過篩選獲得_，是通過篩選獲得_。(4)破傷風(fēng)桿菌的抗體最終可從_和_中提取。(5)破傷風(fēng)桿菌是原核生物，可歸為微生物。一般而言，為了獲得純凈的微生物培養(yǎng)物，最為關(guān)鍵的是無菌操作。下列有關(guān)無菌操作的敘述中，錯(cuò)誤的是()a對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行滅菌b將培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌c為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行d實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍物品相接觸答案(1)制備單克隆抗體不能沒有將抗原注入小鼠體內(nèi)，無法獲得產(chǎn)生單一抗體的b淋巴細(xì)胞(2)細(xì)胞融合和篩選滅活的病毒雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)大量繁殖特異性抗體在體外條件下使雜交瘤細(xì)胞大量增殖足夠量產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤(3)雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞(4)細(xì)胞培養(yǎng)液小鼠腹水(5)a解析(1)由圖示的程序圖可知，該方案的目的是制備單克隆抗體。b淋巴細(xì)胞有以下特點(diǎn)：在體外不能無限增殖；只有受到抗原刺激后才能產(chǎn)生相應(yīng)抗體；與骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞后既可無限增殖，又能產(chǎn)生大量所需抗體。所以單克隆抗體制備過程首先需要注射與生產(chǎn)單克隆抗體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)的抗原，否則小鼠體內(nèi)不會(huì)發(fā)生特異性免疫反應(yīng)，產(chǎn)生合成所需抗體的b淋巴細(xì)胞。(2)獲得b淋巴細(xì)胞后，因?yàn)閎淋巴細(xì)胞不能大量增殖，雖能產(chǎn)生抗體，但數(shù)量有限，因此需要與骨髓瘤細(xì)胞融合，融合必須在誘導(dǎo)劑的誘導(dǎo)下才能發(fā)生，常用的是滅活的病毒。兩細(xì)胞融合有三種類型：b淋巴細(xì)胞b淋巴細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞，b淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞，我們需要的是雜種細(xì)胞，它結(jié)合了雙親的遺傳物質(zhì)，具備大量增殖和產(chǎn)生抗體的能力，所以需培養(yǎng)篩選。單克隆抗體生產(chǎn)中，經(jīng)篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞需要體外培養(yǎng)獲得大量的克隆細(xì)胞。圖中的培養(yǎng)能獲得足量的雜交瘤細(xì)胞。(3)第一次篩選是選擇需要的雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選是在雜交瘤細(xì)胞中選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。(4)獲得的雜交瘤細(xì)胞需轉(zhuǎn)移到體外培養(yǎng)液中或小鼠腹腔中生產(chǎn)大量的單克隆抗體。(5)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒而不是滅菌。6回答下列有關(guān)微生物和動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：(1)下表是用于從土壤中分離純化土壤細(xì)菌的培養(yǎng)基配方。請(qǐng)回答：試劑牛肉膏蛋白胨nacl瓊脂水用量5 g10 g5 g20 g1 000 ml培養(yǎng)基的類型有很多，但培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、_和無機(jī)鹽。上述培養(yǎng)基配方中能充當(dāng)碳源的成分是_。培養(yǎng)基配制完成以后，一般還要調(diào)節(jié)ph，并對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行_處理。該培養(yǎng)基從物理性質(zhì)上分類屬于_。分離純化微生物最常使用的接種方法是_和_。假設(shè)培養(yǎng)結(jié)束后，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上菌落連成一片，可能的原因是什么？_、_(列舉兩項(xiàng))。(2)動(dòng)物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對(duì)于研究器官的生理、病理過程及其機(jī)制意義重大。如圖是一個(gè)新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖，請(qǐng)回答下列問題：肝臟切成小薄片，這有利于肝臟細(xì)胞_。氣室中充入5%co2，氣體的主要作用是_。培養(yǎng)液中添加抗生素是為了抑制細(xì)菌生長，但要注意選擇抗生素的_，以保證抗生素對(duì)肝臟無害。圖中培養(yǎng)過程所用的培養(yǎng)基與植物組織培養(yǎng)基成分的主要不同是_。(3)植物組織培養(yǎng)過程中對(duì)植物樣本進(jìn)行消毒，可將植物樣本先放入70%酒精中浸泡10 min，再放入5%_溶液中浸泡5 min，并重復(fù)一次，最后用無菌水沖洗。培養(yǎng)基除了含有必需的營養(yǎng)物質(zhì)和凝固物質(zhì)外，還必須加入_。消毒后的植物樣本要先后培養(yǎng)在_培養(yǎng)基和_培養(yǎng)基中，在合適條件下可培養(yǎng)得到幼苗。幼苗在定植前需經(jīng)過一段時(shí)間的鍛煉，即逐漸降低幼苗生活環(huán)境中的_，以使幼苗能適應(yīng)自然環(huán)境。答案(1)氮源牛肉膏和蛋白胨滅菌固體培養(yǎng)基劃線分離法涂布分離法稀釋倍數(shù)不夠，菌液的濃度太高劃線時(shí)或劃完第一次沒有滅菌即接著劃第二次培養(yǎng)過程中滅菌不嚴(yán)格，受到了其他微生物的污染(任選兩項(xiàng))(2)吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物維持培養(yǎng)液適宜的ph種類和劑量動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中必須含有血清等(3)次氯酸鈉植物激素發(fā)芽(生芽)生根(順序不能錯(cuò))濕度解析(1)培養(yǎng)基中都應(yīng)含有水、無機(jī)鹽、碳源、氮源。配制培養(yǎng)基時(shí)加入了瓊脂，因此該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基配制完成后要調(diào)ph和滅菌。牛肉膏、蛋白胨中含碳元素，可作為有機(jī)碳源。分離純化微生物一般用劃線分離法和涂布分離法。劃線分離法中每次劃線前都要將接種環(huán)灼燒滅菌，以殺死上次劃線時(shí)接種環(huán)上殘留的菌種；采用涂布分離法時(shí)稀釋度要足夠高，否則會(huì)使微生物不能分散成單個(gè)細(xì)胞。(2)把肝臟切成小薄片，有利于肝臟細(xì)胞的呼吸代謝，即吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物。氣室中充入5%co2的作用是形成碳酸來維持培養(yǎng)液適宜的ph。同時(shí)也要注意選擇抗生素的種類和數(shù)量來抑制細(xì)菌生長。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中為保證順利增殖，培養(yǎng)基中一般要加入血清等。(3)植物組織培養(yǎng)中對(duì)外植體的消毒過程為放入70%酒精中浸泡10 min，再放入5%次氯酸鈉溶液中浸泡5 min，并重復(fù)一次，最后用無菌水沖洗。植物組織培養(yǎng)基中除含有必需的營養(yǎng)物質(zhì)和凝固物質(zhì)外，還必須加入植物激素作為生長調(diào)節(jié)物質(zhì)。植物組織培養(yǎng)快速繁殖的一般程序是先誘導(dǎo)生芽得叢狀苗，后誘導(dǎo)生根得試管苗，故培養(yǎng)時(shí)先用生芽培養(yǎng)基后用生根培養(yǎng)基。試管苗的生活環(huán)境與自然環(huán)境相差很大，光照弱濕度大且恒溫，因此在試管苗移栽前要煉苗，主要是逐漸減少濕度、增強(qiáng)光照和變溫等，其中減少濕度最關(guān)鍵。7干擾素是治療癌癥的重要藥物，它必須從血液中提取，每升人血只能提取0.5 g，所以價(jià)格昂貴?，F(xiàn)在某一基因公司用下圖所示的方式生產(chǎn)干擾素。請(qǐng)回答下列有關(guān)基因工程和酵母菌的相關(guān)問題：(1)干擾素基因在基因工程中稱為_。用_技術(shù)可使獲得的基因迅速擴(kuò)增。此基因與細(xì)菌的質(zhì)粒結(jié)合，形成重組dna分子要用_處理基因和質(zhì)粒特定核苷酸之間的_，使兩者露出相同的粘性末端，再用_將二者連接成重組dna分子，然后將其導(dǎo)入酵母菌體內(nèi)。酵母菌在基因工程中稱為_。(2)科學(xué)家在培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植物時(shí)，常用_中的質(zhì)粒做載體。(3)分離純化所需受體酵母菌時(shí)可采用下圖所示兩種方法，圖b的分離方法是_。利用獲得的突變酵母菌和葡萄汁進(jìn)行酒精發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，發(fā)酵過程中下列方法不能防止雜菌入侵的是()a彎曲玻璃管中加水封口b發(fā)酵液中添加某種抑制物如抗菌素c發(fā)酵過程必須保證所有用具都是清潔的d人工接種發(fā)酵的葡萄需經(jīng)高錳酸鉀浸泡消毒答案(1)目的基因pcr同種限制性核酸內(nèi)切酶磷酸二酯鍵dna連接酶受體細(xì)胞(2)農(nóng)桿菌(3)涂布分離法b解析(1)干擾素基因作為目的基因，可用pcr技術(shù)擴(kuò)增。形成重組dna分子時(shí)要用到的工具有限制性核酸內(nèi)切酶、dna連接酶、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體。(2)培育轉(zhuǎn)基因植物時(shí)常用農(nóng)桿菌做載體。(3)分離純化微生物有涂布分離和劃線分離法兩種，b屬于涂布分離法。在酒精發(fā)酵過程中需防止雜菌入侵，方法有許多，如彎曲導(dǎo)氣玻璃管中加水封口，發(fā)酵過程必須保證所有用具都是清潔的，人工接種發(fā)酵的葡萄需經(jīng)高錳酸鉀浸泡消毒等，但發(fā)酵液中添加抗菌素只能抑制部分細(xì)菌生長，不能抑制其他微生物如霉菌的生長。8果膠酶基因廣泛存在于各種微生物中，如細(xì)菌、真菌和放線菌中。某一科研機(jī)構(gòu)通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)將黑曲霉菌中的果膠酶基因轉(zhuǎn)入到奶牛體內(nèi)，培育出可產(chǎn)生果膠酶的轉(zhuǎn)基因奶牛。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：(1)圖中b、c指的生物工程技術(shù)名稱_、_；外源基因是指_。d與親本a、b牛的最根本區(qū)別是_。(2)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面_時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的_。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是_。(3)現(xiàn)用某種大分子染料，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí)，觀察到死細(xì)胞被染色，而活細(xì)胞不染色，原因是_。檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目，最好選用_期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察。(4)為了檢測(cè)轉(zhuǎn)基因奶牛產(chǎn)生的果膠酶活