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河南省靈寶市2012-2013學年高二上學期生物2.2.2動物細胞融合與單克隆抗體導(dǎo)學案 新人教版單克隆抗體的制備過程?!厩榫硨?dǎo)入】基因工程操作的四部曲是什么?將目的基因?qū)胫参锛毎?、動物細胞、微生物細胞的常用方法分別是什么?基因工程自20世紀70年代興起后,飛速發(fā)展,目前已在農(nóng)牧業(yè)、工業(yè)、環(huán)境、能源和醫(yī)藥衛(wèi)生等方面展示出美好的應(yīng)用前景。 【學習過程】自主預(yù)習案:一、動物細胞融合(又叫:細胞雜交)1)概念:指 或 動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。2)結(jié)果:融合形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞,稱為 細胞。3)動物細胞融合原理:細胞膜的 。4)誘導(dǎo)動物細胞融合的方法:物理方法 、化學方法 、生物方法 。5)過程: 6)意義:細胞融合突破了有性雜交方法的局限,使 成為可能。這一技術(shù)成為研究 、 、腫瘤和生物 培育的重要手段。二、單克隆抗體1)概念:由單一b淋巴細胞進行無性生殖形成的細胞所產(chǎn)生的化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體。2)抗體:淋巴細胞(漿細胞)產(chǎn)生的,化學本質(zhì)為 ,具有特異性。從血清中分離出的抗體 、純度低、特異性差。3)哺乳動物感染病原體(如病毒、細菌等)后,體內(nèi)會形成相應(yīng)的b淋巴細胞。b淋巴細胞能分泌 ,凝集或殺死這些病原體。但是每一個b淋巴細胞只分泌 。因此,要想獲得大量的 ,必須克隆 ,形成 。4)單克隆抗體的制備(1)過程:第一步:將 注射到小鼠體內(nèi)進行免疫;第二步:從該小鼠脾臟中獲得能夠產(chǎn)生抗體的細胞,與小鼠的細胞在,或聚乙二醇的誘導(dǎo)下融合;第三步:在特定的培養(yǎng)基中,篩選出細胞;第四步:培養(yǎng)雜交瘤細胞,從中挑選出的細胞群,繼續(xù)培養(yǎng);第五步:將該雜交瘤細胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠 內(nèi)增殖,然后再分離純化單克隆抗體;(2)雜交瘤細胞的特點:既能大量 ,又能產(chǎn)生 。5)提取單克隆抗體:從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取。 特別提醒:在選擇培養(yǎng)基上,未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡,只有 才能生長。b淋巴細胞的特點: ,缺點:骨髓瘤細胞的特點:。雜交瘤細胞具備具備雙親的遺傳物質(zhì),不僅能產(chǎn)生 ,還能 ,能大量產(chǎn)生單克隆抗體。6)單克隆抗體的應(yīng)用(1)單克隆抗體的優(yōu)點: 強、 高,并可能。(2)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細胞制備的單克隆抗體定位診斷(3)用于治療疾病和運載藥物:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成生物導(dǎo)彈優(yōu)點:療效高,毒副作用小。例題分析:例1、動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是( )a、動物細胞融合 b、胚胎移植 c、動物細胞培養(yǎng) d、核移植例2、下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的敘述中正確的是( )a、動物細胞培育的目的是獲得大量的細胞分泌蛋白b、動物細胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶使細胞分散c、細胞的癌變發(fā)生于原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中d、培養(yǎng)至50代后的傳代細胞稱為細胞株例3、表現(xiàn)型不同的母牛生育出基因型完全相同的小牛,產(chǎn)生這一結(jié)果最可能的原因是( )a、試管動物培養(yǎng) b、胚胎移植子 c、胚胎分割移植 d、受精卵移植例4、世界上第一只克隆綿羊“多利”的培育程序如圖所示,請據(jù)圖回答:(1)寫出圖中a、b所指的細胞工程名稱: a ;b (2)實施細胞工程a時,所需的受體細胞大多采用動物卵母細胞的原因是 (3)“多利”面部的毛色是 。請根據(jù)遺傳學原理說明判斷依據(jù): (4)繼植物組織培養(yǎng)之后,克隆綿羊的培育成功,證明動物細胞核也具有 。例5、右圖為細胞融合的簡略過程,請據(jù)圖回答:(1)若a、b是植物細胞,在細胞融合之前已用 _ _ 處理,除去了 _ ;由a、b到細胞c的過程中,常用的物理方法是 _ 。融合完成的標志是_ 。(2)若a、b是植物細胞,則形成的d細胞還要應(yīng)用 _ _ 技術(shù)把d培養(yǎng)成植株。(3)若a、b是動物細胞,一般取自 _ ,然后用 使其分散開來;由a、b到c的過程中,常用的不同于植物細胞融合的手段是 _ ,所形成的d稱為 _ ,a、b融合為c的過程說明了細胞膜具有 。(4)若該過程是制備單克隆抗體,a為小鼠效應(yīng)b細胞,那么,在獲得此細胞之前,小鼠已經(jīng)被注射了 。注射后小鼠身體發(fā)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng),生成了 _ _,圖中b為 _ 。(5)若該過程仍是制備單克隆抗體,在a、b到c的過程中,所形成的c有 種,用來培養(yǎng)的d細胞應(yīng)該是 _ 。從中選擇出它的方法是 _ 培養(yǎng),獲得d后,常用的培養(yǎng)方法是培養(yǎng)液中培養(yǎng)和 _ 。合作探究案:1 誘導(dǎo)動物細胞融合的手段不同于植物體雜交的是什么?2選擇抗原刺激獲得的鼠的b淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,進而制備得到的單克隆抗體能否直接用于人體疾病的治療?為什么?3雜交瘤細胞與b淋巴細胞、骨髓瘤細胞融合相比,有什么特點? 4植物體細胞雜交和單克隆抗體制備在細胞融合前應(yīng)分別進行什么處理? 5把b淋巴細胞與骨髓瘤細胞放在培養(yǎng)液中,經(jīng)融合處理后有幾種融合方式,培養(yǎng)液中通常會有幾種細胞類型存在?分別是什么細胞?6在動物細胞融合中為什么常用多個細胞進行細胞間融合?【課堂檢測】1、在進行動物細胞培養(yǎng)時,通常選用的培養(yǎng)材料是( )a、衰老退化的動物組織細胞 b、成熟動物個體的體細胞c、動物的受精卵細胞 d、動物胚胎或幼齡動物個體的細胞2、一只羊的卵細胞核被另一只羊的體細胞核置換后,這個卵細胞經(jīng)過多次分裂,再植入第三只羊的子宮內(nèi)發(fā)育,結(jié)果產(chǎn)下一只羊羔。這種克隆技術(shù)具有多種用途,但是不能( )a、有選擇地繁殖某一性別的家畜 b、繁殖家畜中的優(yōu)秀個體c、用于保存物種 d、改變物種的基因型3、下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述中,錯誤的是( )a、用于培養(yǎng)的細胞大多取自胚胎或幼齡動物的器官或組織b、將所取的組織先用胰蛋白酶等進行處理使其分散成單個細胞c、在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離,制成懸浮液d、動物細胞培養(yǎng)只能傳50代左右,所培養(yǎng)的細胞會衰老死亡4、從母羊甲的體細胞中取出細胞核,注入到母羊乙去掉核的卵細胞中,融合后的細胞經(jīng)卵裂形成早期胚胎,再植入到另一只母羊丙的子宮內(nèi),出生小羊的大多數(shù)性狀( )a、難以預(yù)測 b、像甲 c、像乙 d、像丙5、動物細胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較,在動物細胞融合中有特殊性的是( )a、融合的原理 b、融合的優(yōu)點 c、融合的誘導(dǎo)手段 d、融合的過程6、科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合,得到雜交瘤細胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體,與骨髓瘤細胞融合的是( )a、經(jīng)過免疫的b淋巴細胞 b、不經(jīng)過免疫的t淋巴細胞c、經(jīng)過免疫的t淋巴細胞 d、不經(jīng)過免疫的b淋巴細胞7、單克隆抗體制備過程中,骨髓瘤細胞和b淋巴細胞融合后要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活、增殖的細胞是( )b淋巴細胞 小鼠骨髓瘤細胞 b淋巴細胞自身融合細胞 小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞 雜交瘤細胞a、 b、 c、 d、8、下圖是單克隆抗體制備過程示意圖,其中1過程注射的物質(zhì)和a細胞的名稱為( )a、抗體、t淋巴細胞 b、抗原、t淋巴細胞c、抗體、b淋巴細胞 d、抗原、效應(yīng)b淋巴細胞9、單克隆抗體和血清抗體相比,其優(yōu)越性在于( )a、單克隆抗體能夠制成“生物導(dǎo)彈” b、單克隆抗體能夠在體外制備c、單克隆抗體比血清抗體的特異性強、免疫活性高d、單克隆抗體制備過程簡單10、“生物導(dǎo)彈”是指( )a、單克隆抗體 b、帶有特定藥物的單克隆抗體c、雜交細胞 d、b淋巴細胞二、填空11、下圖是動物細胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請據(jù)此回答:(1)容器a中放置的是動物器官或組織。它一般取自 _。(2)容器a中的動物器官或組織首先要進行的處理是 ,然后用 酶處理,這是為了使細胞分散開來,這樣做的目的是 _ 。(3)培養(yǎng)首先在b瓶中進行,瓶中的培養(yǎng)基成分有 _ _等。在此瓶中培養(yǎng)一段時間后,有許多細胞衰老死亡,這是培養(yǎng)到第 代,到這時的培養(yǎng)稱為 _ 。(4)為了把b瓶中的細胞分裝到c瓶中,用 處理,然后配置成 ,再分裝。(5)在c瓶中正常培養(yǎng)了一段時間后,發(fā)現(xiàn)細胞全部死亡,原因是 _。12、科學工作者用綠色和紅色熒光材料,分別標記人和鼠的細胞膜上的蛋白質(zhì)。當兩個標記細胞融合成一個細胞后,起初一半膜發(fā)出綠色熒光,另一半膜發(fā)出紅色熒光,一段時間后,兩種顏色的熒光點均勻分布,如圖所示。請分析回答:(1)該實驗結(jié)果說明了細胞膜 ,這是因為 。(2)若在兩個細胞融合成一個細胞后,將融合細胞置于0條件下再保持40min,則融合細胞仍然是一半膜發(fā)綠色熒光,另一半膜發(fā)紅色熒光,這說明 _ _ 。13、圖是某種淋巴細胞,膜外顆粒狀物質(zhì)為抗體。據(jù)圖回答:(1)這是 細胞,它是由 _ 分化而來的。(2)抗體從開始合成到分泌出細胞,經(jīng)過的細胞結(jié)構(gòu)順序是(填標號) _ ??贵w的分泌說明細胞的各種生物膜在結(jié)構(gòu)上具有 _ ,并以 的形式轉(zhuǎn)變。(3)在分泌抗體時要消耗由 提供的能量。(4)抗體的化學本質(zhì)是 ,它能與 發(fā)生特異性結(jié)合,發(fā)揮免疫效應(yīng),該過程屬于 免疫。(5)若該抗體是單克隆抗體,則該細胞名稱為 _ 。在制備單克隆抗體的過程中,要應(yīng)用的動物細胞工程的技術(shù)手段是 。14、英國科學家米爾斯坦和科勒在前人工作的基礎(chǔ)上,利用小鼠的骨髓瘤細胞與某種b淋巴細胞,產(chǎn)生雜交瘤細胞,通過雜交瘤細胞增殖產(chǎn)生了單克隆抗體?,F(xiàn)在我們能不能利用此題原理生產(chǎn)人的胰島素呢?黑人婦女海拉的宮頸癌細胞分離建立了“海拉細胞系”至今已有半個世紀,仍然在世界上許多實驗室廣泛地傳代使用。能否利用“海拉細胞系”提供的細胞和胰島b細胞產(chǎn)生“雜交瘤細胞”,經(jīng)“雜交

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