（食品科學(xué)專業(yè)論文）13丙二醇高產(chǎn)菌株的誘變選育及其發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf

獨(dú)創(chuàng)性聲職 本人聲明所足交的論文是我個人在導(dǎo)師指捋下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。 盡我愛婦，除文孛特嬲熱竣揀注窩致瓣戇遮磐癸，論文孛苓穗含其毽入已經(jīng)發(fā)表或撰 寫過的研究成果，也不包含為獲得沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書麗使用過 靜耪辯。與我一露工攆豹霹恚瓣本驕究掰傲靜任何貢獻(xiàn)均已在論文中傳了弱確豹說明并 表示了謝意。 研究生簽皂； 冶現(xiàn) 列籠弘 瓣閱：鯽g 年善劈，囂 關(guān)于論文使用授權(quán)的說明 本人完全了解沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論義的規(guī)定，即：學(xué)校有投保留送 交論文煞復(fù)印佟釃磁蠡，灸誨論文被蠶瀾稻借闋，可戳采露影鞠、縮印躐掃接替復(fù)意l 芋 段保存、匯編學(xué)位論文。同意沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué) 位論文的肉容。 ( 保密的學(xué)位論文在螟密殿應(yīng)遵守此協(xié)議) 磷究雯簽名： 冷移飛 y 辯蘑：渤；年g 翅，辯 翩妣主j 譬扣 帆加g 嘶。 沈靼農(nóng)業(yè)大學(xué)聯(lián)士學(xué)餃論文 摘要 l ，3 丙二酵( 1 3 p d ) 是一個具有多種用途的中間化臺物，最生產(chǎn)新型p t t 纖維的囊 要摹髂，嶷有誨多往菱特性饔綴好弱斑溺蘸景?；丈腊l(fā)簿法生產(chǎn)l ，3 涎二醇等純擎合戲 法相比具有顯藩的優(yōu)點(diǎn)因而越米越受到重視，成為當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。 本文扶已宥的三株藹中篩選出一株能生產(chǎn)l ，3 丙二簿置穗能良好靜菌株一殼雷鑌氏 腦炎杼麓a s l 1 7 3 6 作為出發(fā)麓株，并對其種予培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化。為了進(jìn)一步獲得l ，3 - 丙二醇的高產(chǎn)突變株，以克氏肺炎稈麓a s l 1 7 3 6 為出發(fā)菌株游行誘變處理，并對發(fā)醇培 養(yǎng)條摶避霉初步饒攏。 甘油由克氏肺炎桿菌轉(zhuǎn)化生成1 ，3 。丙二醇的研究照在厭氧條件下進(jìn)行的，采用空氣 囊換秘降低鬣健還器瞧蘊(yùn)褶縫含靛齋法翎盔獗還纛臻舞基。敬對數(shù)麓摹繒藏蘩懸液逶 量，譙紫外線煨適照射劑量下誘變篩選高產(chǎn)突變株；褥經(jīng)d e s 溶液誘變篩選出商產(chǎn)突 交襪，然磊將經(jīng)d l 搭誘交褥薊的高產(chǎn)蘩棟在兩次濃縮的基磷上進(jìn)行u v + l i c l 復(fù)合誘黛， 經(jīng)過建立在影印技術(shù)上的初篩和復(fù)篩質(zhì)采用商效液相色譜法測l ，3 雨二醇的產(chǎn)量以確定 高產(chǎn)突變株；分另對漱度、p h 等培養(yǎng)條件和碳源、氮源、酵母膏、金屬離予等組分進(jìn) 行單瓣素實(shí)驗(yàn)，確定括油轉(zhuǎn)化生成l ，3 囂二醇的主要影響因素，然層通過正交實(shí)驗(yàn)進(jìn)行 培養(yǎng)條件優(yōu)化。 蜜驗(yàn)磅突結(jié)票表明：堯氏貉炎幫蘩是蒹搜厭襞蘩，瀲殼茨赫炎移穩(wěn)菇出發(fā)鎣揀，經(jīng) 過紫外線誘變、硫酸二乙酯( d e s ) 誘變及紫外線( u v ) 和氯化鋰( l i c l ) 復(fù)含誘變得剿 突交撩矗聰“湃顫蕊l ，3 囂二簿產(chǎn)爨由密發(fā)蘺株靜幸7 9 昆穩(wěn)嵩虱1 6 1 9 疋，鍵離了3 霹3 倍；高濃度甘油對k p h p 耐w 6 的生長具有較大的抑制作用，當(dāng)甘油濃度為9 時抑制作 用十分明顯：酵母黌蹩l ，3 一丙二醇發(fā)酵所必需的營養(yǎng)維分，添加適蠡的酵母鬻將有剩于 l ，3 - 兩= 醇的產(chǎn)生；通過對菌株置妒刪4 嬲引螃券條傳的優(yōu)化，礁定最逶發(fā)酵培養(yǎng)基f l “) 是：甘油6 0 9 ，k 2 h p 0 4 1 3 9 ， k h 2 p 0 4 0 5 9 ，c a c l 2 0 1 9 ，m g s 0 4 - 7 h 2 00 2 9 ，n h 4 c l2 0 9 ， f e 液l m l ，酪母蠢2 o g ，擻繁元素滾l 糙l 。在該優(yōu)化袈臀下鬈尹攆g 辯4 移掰突變耩款l ，3 丙二醇產(chǎn)量為2 1 3 9 ，l ：通過詎交實(shí)駿可知溫度、p h 和接種爨對發(fā)酵有著重愛的影響， 當(dāng)瀣愛灸3 7 、接靜爨為5 、p 鞋為7 0 霹蠢巔予囂漓淘l ，3 添二醪靜轉(zhuǎn)純；在最適發(fā) 酵培弊基和最遁發(fā)酵祭件下，l ，3 + 丙二醇最高產(chǎn)量可達(dá)2 4 1 3 8 馥l 。 關(guān)鍵蠲：克氏黼炎桿麓；甘油發(fā)酵：l ，3 丙：醇；誘蜜；選臀；發(fā)酵培養(yǎng)條饞優(yōu)化 壘! 塑黧 a b s t r a c t l ，3 一p m p a n e d i o l ( 1 ，3 一p d ) i sam m t i p u r p o s ei n t e m e d i a t e 孤l dh a s aw i d er a n g eo fp o t e n t i a l u s e ，p a n i c u l a r l y a sam o n o m e rf o r t h ep m d u c t i o no fb i o d e 掣a “b l ep o l y m e r 甜盯 抽e l c o m p a r e dw i mc h e m i c a ls y n t h e s i s ，m i c r o b i 啦f e 】m e n t a t i o np r o c e s s e st o 1 ，3 - p dh a v e m a n yo b v i o u sa d v a m a g e s ，t h ee n v i r o 眥曲l 缸e n d 妯pa n dp r i c ea d v a l l t a g em a k ei tm o r e p r o m i s i n g ，a i l db e c o m e 也ef o c u s e so f r e a c h ah i 出1 ，3 一p dp r o d u c t i v i t ys t a i n 一脅6 s 據(jù)婦冊e 蜊d f 口ea s l 1 7 3 6w a ss e l e c t e df r o m m r e es t a i n so fb a c t e r i ag a i n e di no u rl a b t h ep r e s e n ts m d i e sw e r ed e s i g n e dt oo p t i m i z em c c o n d i 硒n so f b a t c hc u l t i v a t i o l l s i no m e rt 0o b t 咖ah i g h e r l ，3 - p r o p a n e d i o l - p r o d u c t i v i 母s t a i n ， k k 6 j f e z 腸p 肝e “肌。玎f 鐘，a so r i g i n a ls 仃a i l l ，、v a s 仃e a t e db yi r m l t i p km u t a g e n s t h e n ，也e o p t i m a lm e d i u mi ng l y c e m if e r n l e n t a t i o nt 0l ，3 p r o p a n e d i o lw a ss t u d i e dt e n t a t i v e l yi nt l l i s p a p e l 1 1 l ec o n v e r s i o n 肺mg l y c e r o lt o 1 ，3 - p db yj 孤6 s 招婦p ，l e h 小o n 婦ew a ss t u d i e di n a n a e r o b i cc u l t u r e 1 ，3 一p di sd e t e 脅i n e db yh y p e r 1 i q u i dc h m m a _ c o g r a p h y 1 kp r e r e d u c e d m e d i 吼i so b t a i n e dt h r o u g h 廿l em 酬h o dc o m b i n e d1 ，i t hl o 、e ro x i d a t i o n r e d u c t i o np o t e n t i a l a i l da i r - n 2s u b s t i t 砸o n n l es i n g l ec e l l so f 地6 咖池p 玎e 刪。聆婦i ne x p o n e n t i a lp h a s e 謝t h p r o p e rp r o p o r t i o nw e r et r e a t e db yu vu n d e ro p t i m a lt i m eo fu vi r r a d i a t i o nf h 苫t l ya n dt 、o k g h e r - y i e l dm u t a n t sw e r eo b t a i n e d ；s e c o n d l y ，t l l e yw e f em u t a g e n i z e dm u l t i p l yb yd i e t h y j s u l f a t ei l t l d e r 印p r o p r i a t ed o s a g eo fd e sm u t a g e n i ce 行e c t ，a n dt h e nt h eh i g h e r _ y i e l dm u t a n t s w e r em u t a g e n i z e dm u l t i p l yb yu va 1 1 dl i c lu n d e ro p t i m a lt i m eo fu vi m d i a t i o na n d 印p r o p “a t cd o s a g eo fl j c lm u t a g e n i ce 跪c ca n e rt w i c ec o n c e n t r a t i o m w i n lt c c h n o 】o g yo f r e p l i c as c r e e n i n g ，ah i g h e r - y i e l ds t r a i n w a sb r e d t h r o u g ht h ep r i m a r ys c r e e n i n ga n d e x a m i n a t i o nt e s to f1 ，3 一p dp r o d u c t i o na sm es e c o n d a r ys c r e e n i n g ；t h i r d l y ，s i n g i ef k t o r a i l a l y s i sw a sc a r r i e do u t ，w h i c hi n c l u d e dc u l t u r a lc o n d i t i o n ss u c ha st e m p e r a t u r ea n dp ha n d c u l n l r em e d i u mc o m p o n e n t ss u c ha sc a r b o na n dn i t r o g e ns o u r c e ，y e a s te x t r a c ta n dm i n e r a l e l e m e n t ， i no r d e rt od e t e m l i n em a j o r i n n u e n c i n g f a c t o r si n g l y c e r o i c o n v e r s i o nt o 1 ，3 。p r o p a n e d i 0 1 f i n a l l y ，也em e d i u mw a so p t i m i z e dt h r o u 曲o r t h o g o n a ie x p e r i m e n t s 2 沈陽農(nóng)業(yè)犬學(xué)碩士舉位論文 _ _ _ _ - _ _ _ _ _ _ _ _ _ - - _ - _ _ _ - - _ _ _ w _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ - _ h m m _ _ _ _ w _ _ _ _ _ _ - _ _ _ _ _ _ _ _ _ - _ - _ _ _ _ - 一一一 翻= l e 髓囂i m e 嫩s 舡瑤迄s 螽o wl 窿歇醅跑露蠢妒豫嘏l 餅l 積窖泌氌f 犯u l t 鑫畦v e 揪b i c b a c t 甜u m ；脅撕刪協(xié)朋e 蝴硎脅掌，a 8 耐g i n a ls 缸試n ，、v 勰缸啪t e db yu va n dd i e t l l y ls u l f 亂e e s ) 嬲dm u l t i p i em 1 婦g e n e s i s ( wa n dl i c l ) ， 8 撻g h e r - y i e i ds 舶i n 印珊磁0 4 6w 勰b r e d nw a ss h o w e d 也a t 齜囂咀e t i cp r o p e 啊o f m i sn e wm u t a n tw a ss 掘b l eb yp a 蜘g e n e r a t i o nt e s t s a n dm ey i e l do f1 ，3 - p dw a sh i g h e rm a l l1 6 1 1 9 弛w t d c hh a db e e ni n c r e a s e da b o u t3 4 3t i m e s t l l 飄硅攮to ft h ei 馥i a ls 拄溉g l y c e l 誦墩h 逗h e r n c e n 拄艇h 貓ai n h a b i 囊難o nt ot 融e e l l g r o w c l lo f 足p 刪肼0 4 6 ，p a r t i c m a r l y9 o fg l y c e r o li sv e r y m r k e d ；y e a s t 咖似i sa n c s s e 玨蛙鑫差耱斌e 玨t 鞫辮撤建o f l l 鱸蹦h 南區(qū)耀g l y c e f o i 翻強(qiáng)e 毪激i 秘協(xié)| ，3 印p a 黯d i o l a n do p t i m a lc o n c e n 仃a t i o ni v i l lb ef 打o r a b l eo f _ c l l ep r o d u c t ；t h r o u g hs m g l ef 配t o ra n d 餓t 酗g o 魏a 主e x p e d 舶糕譙eo p t i m a | m e d i 疆nf o rg l y 站黻b l n v e r s i o i l t o l ，3 譬d 酚 腳n e “4 0 4 6i s ( p e rl i 喲：g l y c e r o l6 0 9 ，k 2 h p 0 41 3 9 ，k h 2 p 0 40 5 9 ，c a c l 2o 1 m 垂 m g s 0 4 7 oo 2 懿n h c l2 o g ，f cs o i 確0 nl m i ，y e a s t 熊觚c t2 9 ，訂a c e 觚n e m le l e 眥m s o l 砸。玨l l l l l u n d e rt h i sc o n d i t i o n ，畦玲y i e mo fl ，3 - p d 玨b o u t 姒拍m t 鬣p 船瓣0 4 6w a s 2 1 3 9 ，l m 釉p e r a t i l r e ，p ha n di n o c m 岫sa l s oh a v ea n 證啦r _ c a mi l u e n c eo nt h ef e 玎n e n t a t i o n 髓l ec u 撼v a t i o n 嫩3 7 鍛n p c r a t 毽氣勰穗。羽瑚s s ( v 購磊聰p 7 誡l lb es 痤穗基l e t ot h ec o n v e r s a t i o n t l 他y i e l do f1 ，3 - p da b o u tm u 戧m t 尼朋g “4 0 4 6 懶h i g h e r l 量l a l l2 4 3 8 9 ，l 1 ( 唧o r d s ?肋撕船婦刪e 繃。昨船，g l y c e r o lf e 咖e n 協(xié)l i o n ，l 。3 - p r o p 蝴舒m o l ，m u t a t i o n ，b r e e d f 略 0 p n m a lm e d i 嗽l 3 第一章前言 第一章前言 聚對苯二甲酸丙二醇酯( p 訂) 是新近開發(fā)成功的一種性能優(yōu)異的聚酯材料，是繼 聚對苯二甲酸乙二醇酯( p e t ) 、聚對苯二甲酸丁二酯( p b t ) 之后極有發(fā)展前途的新 型聚醑高分子材料1 9 9 8 年被美國評為六大石化新產(chǎn)品之一。l ，3 丙二醇是重要的化工 和醫(yī)藥中間體原料，同時也是新型聚酯纖維聚對苯二甲酸丙二酯( p t t ) 合成的單體。 與聚對苯二甲酸乙二酯( p e t ) 、聚對苯二甲酸丁二酯( p b t ) 和尼龍等相比，p 1 i r 具 有高彈性、良好的連續(xù)印染性、抗紫外性、抗內(nèi)應(yīng)力、耐磨性強(qiáng)、低吸水性、低靜電以 及良好的生物降解性、可循環(huán)利用等多種優(yōu)良特性，因此在地毯、紡織、工程塑料等眾 多領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用( 黃象安，2 0 0 0 ；羅撫英等，2 0 0 2 ；張從容，2 0 0 0 ；趙紅英等。2 0 0 2 a ) 。 化學(xué)法合成l ，3 一丙= 醇不僅投資巨大，而且利用的原料是不可再生的石油資源，生 產(chǎn)過程中還會產(chǎn)生有毒有害的中問體。相對于化學(xué)合成法，微生物發(fā)酵法生產(chǎn)1 。3 丙二 醇技術(shù)的產(chǎn)業(yè)化將具有劃時代的意義，它將打破過去纖維產(chǎn)品原料全部來源于石油化工 的歷史，以玉米為起始原料。首先將淀粉、淀粉水合物、糖蜜等發(fā)酵生成甘油：甘油再 在微生物的作用下發(fā)酵生成i ，3 一丙二醇。微生物發(fā)酵法生產(chǎn)1 ，3 丙二醇具有可利用再生 資源、對環(huán)境污染小、副產(chǎn)物可降解等特點(diǎn)，生產(chǎn)過程清潔，對環(huán)境無污染，符合二十 一世紀(jì)可持續(xù)發(fā)展要求，因而它的轉(zhuǎn)化生產(chǎn)己成為國內(nèi)外研究的重點(diǎn)( 王劍鋒等，2 0 0 】a ) 。 1 11 ，3 一丙二醇生產(chǎn)現(xiàn)狀 1 1 1l 。3 一丙二醇的性質(zhì) l ，3 丙二醇( 1 ，3 一p r o p e d i o l ，簡寫為l ，3 p d ) ，在室溫下為無色或灰黃色微有甜味的 粘稠狀液體，略有刺激性氣味沸點(diǎn)為2 1 4 ，比重為1 0 5 3 ，能與水、醇、醚等互溶， 難溶于苯、氯仿、石油醚，無腐蝕性微毒：1 ，3 丙二醇易于生物降解，對環(huán)境危害小， 是一種重要的化工原料。l ，3 - p d 的化學(xué)性質(zhì)體現(xiàn)了醇和二元醇的典型性質(zhì)( 姜興茂1 9 9 9 1 ， 即在高溫下與羧酸縮合成酯：與異腈酸鹽及酸性氯化物反應(yīng)生成聚氮酯；在酸性催化荊 條件下與醛酮反應(yīng)生成1 ，3 - 丙二醇對苯二酸酯。 1 1 21 ，3 一丙二醇的用途 l ，3 - p d 應(yīng)用領(lǐng)域與其它二元醇類似，是一種重要的化工原料，其本身就是良好的溶 劑、抗凍劑、保護(hù)劑及潤滑劑，而且可以參與多種化學(xué)合成反應(yīng)作為有機(jī)合成原料和 醫(yī)藥中間體而受到廣泛的應(yīng)用。 醫(yī)藥中間體而受到廣泛的應(yīng)用。 沈陽農(nóng)業(yè)丈學(xué)碩士學(xué)位論文 l 。1 2 。l | ，3 爭d 豢騫羲會蔽鑲臻靜痘用 l ，3 p d 廣泛應(yīng)用于有機(jī)合成領(lǐng)域，其可以作為聚酷、聚醚和聚氨酯的重要單體原料。 這類聚食物其有象物可辯解性等許多其它二元酵合成鏊料所不凝有的優(yōu)良性質(zhì)，透雨 l + 3 p d 在有機(jī)臺成領(lǐng)域的應(yīng)用燕融益增加。 p 鞭聚酯纖維是通過l ，3 p d 和對苯三鼎酸或笨二甲酸二甲醅反應(yīng)生成對苯二甲酸丙 二醣，露經(jīng)繚聚反應(yīng)生成聚對苯二甲酸鼴二酯( p 踴。以l ，3 p d 為單體會成的p 鞭，較之 以乙二醇作單體的聚酯( p e d 具有更優(yōu)良的特性，如尼龍樣的彈性恢復(fù)( 拉伸2 0 后仍可 恢復(fù)原狀) ，在全色蔻垂蠹無爨添攘雩誓豫稔學(xué)晶幫能呈瑰莛努懿漣續(xù)露繁特犍，揍紫蟄、 嶷氧和曩【氧化合物的著色性、抗內(nèi)應(yīng)力、低水吸附、低靜電以及良好的艇物降解，可循 環(huán)裁廷等。這鍪特性顯添出p 科瓣美爵麓錄，將會在l 餮裝窩遮毯絲領(lǐng)蠛代替尼麓。我國 是紡織大國，對一生產(chǎn)紡織品的原料有匭大的需求，2 0 0 0 年聚酶纖維產(chǎn)攝近4 0 0 0 0 k t ， 我國聚釃原料有約l 2 依靠進(jìn)口，如栗阱使紡織材料常場擴(kuò)大s ，每年1 ，3 p d 的市場需 求大約為4 5 萬噸a 。 另外，經(jīng)玻璃纖維填充的坩t(yī) 抗沖蠱程度和尺寸穩(wěn)定性都比較好，它比p e t 具有更好 蟪饅是瞧能、魄糟t 具鴦曼努撼成型翅羔毪畿，使德p 聯(lián)可愛予壤子、汽車零 夸、家毫、 器具及家具行業(yè)。1 9 9 7 年6 月s h e l l 公司在日本塑料展覽會上推出用于工程塑料的經(jīng)玻璃 紓維填態(tài)弱p 雕“e 蝴”雩| 起了工載塑辯界戇基大關(guān)注。 1 1 2 2l ，3 - p d 在醫(yī)藥合成領(lǐng)域的應(yīng)用 2 一鬣基一l ，3 * 囂二黲戇掰生物霹鞋鬏轉(zhuǎn)，茬裁或治愈闞耱、舅耱移捷接受者熬憊瞧或 慢性排斥反應(yīng)，可以預(yù)防或治愈閥種或異種移植接受者的移植血管疾病，如移植m 管病、 動豫硬純或動彌粥棒硬他。 # 氨熬中闋錈2 苯基。l ，3 一覆二醇攆必凝一 弋抗癲瘸楚，燕雩尋鍘越來越多的應(yīng)用。 l 。l 。2 。3l ，3 p d 檉喜l ：牧熬矮濺懿應(yīng)溺 作為瀾膚劑與保灄劑的二元蘸，在令人護(hù)理用鼎秘起饕重要媳增強(qiáng)作用。美國a r e o 公司最透攘出了一耱掰產(chǎn)潞磁p o l o lg l y c e 糟 ( 2 - 擎蒺一 ，3 - 麓二醇) 。它裁鎂香求的海簪曼 必持久，爨舂嬡好弱溶瓣特性幫程瘩毪，器量辯菠默與蜀靛熬海蕊綴低，黠皮默奄眼戇 酌刺激潛能也低。因而它作為一種載秫溶劑將廣泛應(yīng)用予潔膠荊、潔膚乳、香水、祛輿 幫與佬妝黼等這類個人護(hù)理用黼中。 l 。1 2 4l ，3 p d 在食品領(lǐng)域的_ | 壹用 戩l ，3 。丙二繇兔囂辯含成熟囂二醇酪是一類食品添熱翔。作為是氆界六大食晶巍純 第一章前肖 裁乏一，鏊翦已羧美國，基本，黼拿大，丹麥，中國等溪家及歐瀾，聯(lián)會鏊穰農(nóng)綴緩和 馓界衛(wèi)生組織批準(zhǔn)使用。 1 1 3 3 糟d 生產(chǎn)狀況 9 0 年代初，企世界l ，3 p d 的器求鬃綴少，產(chǎn)量綴低，1 9 9 l 年的產(chǎn)爨僅為l 噸。 甜前，l ，3 ，p d 的擻產(chǎn)主瑟采用傳統(tǒng)的石油化工生產(chǎn)工藝，由于化學(xué)合成浪選擇 雯差，產(chǎn) 率也較其它二醇豹生產(chǎn)方法低，露致棗場上其銷磐價格墩比較裹，市場羨騫率遠(yuǎn)迓不及 乙二醇、1 ，2 丙二醇、1 ，4 丁= 醇簿其它三醇( 修慮龍等。2 0 0 0 ) 。 近塑零，睫麓p t l 。纖維優(yōu)嶷性質(zhì)鰉舉叛挖撼，l ，3 p d 教棗場曩求豢氌發(fā)生了明顯 的變化。1 9 9 5 年，世界上幾家著名的大化學(xué)工業(yè)公司相繼投入1 ，3 p d 規(guī)?；a(chǎn)并加 緊了瘦愛疆究襄囂發(fā)。美霆鼴鹺c | 蹦i c a l 公司蘺先實(shí)璇了p 程、鶼囊鑫鍵，蒡雖囂發(fā)7 化學(xué)法生產(chǎn)l ，3 - p d 的新工藝。該公司予1 9 9 6 年9 月在路易斯安那洲o e i s m a r 工廠建立 了生產(chǎn)e 蝴聚會秘瓣關(guān)鍵暴拳毒l ，3 p 轉(zhuǎn)生產(chǎn)裝囂，年產(chǎn)量妁譴，逐予1 9 辮年霉建 了一套年產(chǎn)7 2 6 萬噸l ，3 。p d 和9 1 萬噸c o n e m 聚合物的工廠，并已于1 9 9 9 年底投入 遴營。德溪d e 靜s s a 公司已經(jīng)在恕曲嘲 e l l 建藏年產(chǎn)2 堍l ，3 p d 韻中試萋逡，年產(chǎn)5 0 噸的大規(guī)模工業(yè)裝置也已投產(chǎn)，并于1 9 9 9 年設(shè)計完成了年產(chǎn)l 萬噸的裝置。美固杜邦 ( d u p o n ) 公司予1 9 9 8 年扶德黧d e g 鵲端公司獲得了純學(xué)法生產(chǎn)工藝，但是它主要傾 向于經(jīng)濟(jì)可行的微生物發(fā)酵法。d l l p o m 公司與世界上第：大工業(yè)酶生產(chǎn)商g e n r 國 辯公司共闡串請了以可發(fā)酵碳源為底物，用基因工程菡贏接生產(chǎn)i ，3 p d 的專利并取得 了一些進(jìn)展。該公司已予2 0 0 4 年5 月米設(shè)立合資公司準(zhǔn)罄上規(guī)?；锓╨ ，3 p d 生產(chǎn) 線，預(yù)計在2 0 0 6 年投產(chǎn)。 根據(jù)莢國一家公司的調(diào)查表明，來寒全璧囂僅僅會戲p n 藏霉要l ，3 p d 大約4 0 e 萬噸合計5 0 0 億元，這還不包省其他領(lǐng)域?qū)? ，3 丙二醇的需求，這也為l ，3 p d 的大規(guī) 模生產(chǎn)展承了美好鮑蘺豢( 黃象安，2 0 ) 。掇了解，娶翦 竣賽上冀騫美國舞弊公司襄桎邦 公司等少數(shù)公司聚用化學(xué)法批量艇產(chǎn)l ，3 - p d 。為了壟斷市場，這兩家跨圈公司不對外銷 壤l ，3 - p d ，瑟只起窖戶鑲售p 殘切片及莛下游產(chǎn)品。 目前，我國的l ，3 p d 的產(chǎn)量非常少，僅有少數(shù)幾家化學(xué)試劑廠，如上海試劑一廠、 就寨純工廠等鬟繚零營滾酸乙酵綴鱉詫鏹鏗還爨鍘褥。函起遂浚商l ，3 瓣二簿撬囊生產(chǎn) 的企業(yè)。隨著p t t 纖維等相關(guān)產(chǎn)晶的高速發(fā)展，1 ，3 丙二醇的需求爨將很快增長( 趙紅英等， 0 2 ；鐾嗣華，) 。2 5 年清華大學(xué)鼙舔技術(shù)轉(zhuǎn)移中心組織雷內(nèi)井專家，從德國弓l 避了塵 物發(fā)酵法難產(chǎn)l ，3 * p d 的小試技術(shù)，并將臺賚致力予l ，3 p d 技術(shù)的運(yùn)級放大。使之成為工 6 鯊里查些奎堂堡主堂堡堡蘭 一一 業(yè)化技術(shù)。 1 1 41 3 p d 生產(chǎn)途徑 目前，1 ，3 p d 的生產(chǎn)方法主要有化學(xué)合成法和微生物發(fā)酵法( 邵敬偉等，2 0 0 l ；理國 華等，2 0 0 0 ；h s i b am e ta l ，2 0 0 1 ) 。在化學(xué)合成生產(chǎn)中已具備商業(yè)化的方法有環(huán)氧乙烷法 和丙烯醛法( 劉銀乾等2 0 0 2 ) 。 田1 1i ，3 一丙= 醇的生產(chǎn)方法 f i 列陀1 1p m d u c i n 2m e 岫o do f1 ，孓p d 1 丙烯醛路線( a c i e “1 ) 德國d e g u s s a 公司開發(fā)出丙烯醛為原料生產(chǎn)l ，3 一p d 的工業(yè)路線，其生產(chǎn)的主要步驟 有以下兩步： a 丙烯醛水合得到3 羥基丙醛( 3 h p a ) c h 2 = c h c h o + h 2 0 h o c h 2 c h 2 c h o b 3 h p a 催化加氫制得l ，3 - p d h o c h 2 c h 2 c h o + h 2 h o c h 2 c h 2 c h 2 0 h 2 環(huán)氧乙烷法( e t h y i 嘲e ) 美國s h e l l 公司采用環(huán)氧乙烷路線，成功地開發(fā)出了經(jīng)濟(jì)規(guī)模的1 ，3 p d 生產(chǎn)新工藝， 使成本大大降低。其反應(yīng)步驟如下： a 環(huán)氧乙烷在催化劑作用下與c o 和h 2 反應(yīng)生成3 h p = a c 2 h 4 0 + c o + 2 h 2 3 一h p a b 分離出的3 h p a 經(jīng)催化加氫生成1 ，3 p d h o c h 2 c h 2 c h o + h 2 h o c h 2 c h 2 c h 2 0 h 國外共有三家公司研究開發(fā)出了環(huán)氧乙烷路線生產(chǎn)l ，3 p d 的工藝，該方法的關(guān)鍵 第一章前言 還楚在予徨純荊麴制備和選擇上，蹶辯比軟容茹得到，媳爨于鑲存靼運(yùn)轅，產(chǎn)菇成本竣 格低，但是設(shè)備投資大，技術(shù)難度離，尤其是催化劑的锫4 螯鄹選用上報復(fù)裂( e m 喲轤m 麟瓣。2 1 ) 。 用他學(xué)方法合袋l ，3 嬋d 器燮鑫離澄、離匿及爨燕催純熱才能實(shí)凌，戲零較贏，設(shè)備 投資大，技術(shù)難瘦海，產(chǎn)葫分離箋記困難，特翔楚催純賚j 的制餐較難，鼠產(chǎn)生c o 簿污染 環(huán)境的廢氣。隨著魏代生物技術(shù)熊發(fā)震，入稍搿殆嘗試糟徽生物發(fā)酵法生產(chǎn)l ，3 一蔭= 醇 的研究。微生物發(fā)酵法典有條件溫和、操作簡單、蒯產(chǎn)物少、綠色環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)，所以這 方灝的磷究成為當(dāng)前國內(nèi)外研究蠹白熱點(diǎn)。 2 0 世紀(jì)7 0 年代誕生的慧因工程技術(shù)，在短短的數(shù)十年閬，已經(jīng)肘工業(yè)生產(chǎn)產(chǎn)生了無 以稔比戇影曦。楚攀來說，基囂王程裁是程體辨逡行基鞭熬甥割幫霆贛拱接，器璧疑轉(zhuǎn) 剿生物體內(nèi)，從蠢達(dá)到人 f l 掰翳塑的爨標(biāo)。越采越多以瓣戇以獲懋豹蛋鑫成都避過掏建 蒺戳工獠蘩進(jìn)行王鞭純失生產(chǎn)蕊胃戳大憊低成本逡獲褥。 1 2 微生物發(fā)酵法生產(chǎn)l ，3 - 丙：醇研究避袋 在1 0 0 多年前，人們就知道l ，3 p d 能從甘油中發(fā)黲鍵來。微生物發(fā)酵繭油= 墼產(chǎn) l ，3 - p d 豹磺突始予2 0 避鰓襠攀代孛瓣，郄辯歉鞋e hf 囂等( 1 9 7 4 ) 裁對營漓農(nóng)膝炎競 震鍛氏藏( 掇毫矗幽踟硝蹦撐自魄缸e ) 中憋代避攫攆遴短了磅究，勢警1 9 7 5 冬擐遂了在該 蘩釋孛存在囂條猿嶷豹囂演代謝途徑。在j 黯：君靜大約2 0 年中，入稻主器煞串在曹漓代 瀣關(guān)鍵懿戇磅究上，瑟瓣蟄漓璇戴發(fā)酵鵑磷究卻僅僅始予2 0 氆篼8 0 肇代宋約警戳稿 黼。郡辯，涵子生物酒精靜徐格降低，簿致入 f j 犬麓遺使溺i 旨臍分解的方法來囊產(chǎn)工韭 主健翔懿l 鷺?biāo)杷?，麩孺巍譬致囂耪矜解瓣麓產(chǎn)秘醬油躬大塞揀鬃過剩，曾酒在菡際市 場童的價格也髓豈淹低。猩這種情況下，敞共體國家為了緩解曾油進(jìn)剩的臌力不得不 積擻遺激符曾油轉(zhuǎn)純豹研究，當(dāng)時，曾油轉(zhuǎn)證l ，3 p d 的研究被賦予極大的熱情。1 9 8 2 年和1 9 8 7 舉f o r a g e 與f o r s b e r g 分別對脅撕耙洳p 腳“肌艦礎(chǔ)掰和c 脅護(hù)泐n 淵e ，0 6 ”眇f c 跏 發(fā)酵l ，3 巾d 的獲氧特性和影響鞠索進(jìn)行了研究( d 姻k 州rwd ，1 9 9 5 ) 。h e y 砸r i c 奴( 1 9 9 1 ) 和d a b r o c k ( 1 9 9 2 ) 等分別對融氏梭菌( c f o s f ，瑚口p 膪“ 州“) 的厭氧發(fā)酵進(jìn)行了報道。b i e b l 暇1 9 9 1 ) 和g i 婦端l b ( 1 9 9 1 ) 率先菠表了丁酸梭蕊( a 挪掙6 藩矗6 “矽溉刪) 茨氧發(fā)黲囂渣 生產(chǎn)l ，3 - p d 的學(xué)術(shù)論文。迄今為止的十多年里，微生物學(xué)專家們主要圍繞藿發(fā)酵壤種 的分離、選囊、及發(fā)酵條镩等方囂進(jìn)行研究，菸對l ，3 p d 璦氧發(fā)簿豹輟理、熱捌爨素、 蘺養(yǎng)需求等多方砸進(jìn)行了報道。 g 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文 1 2 。l 徽囊耱發(fā)蘩法生產(chǎn)| ，3 p d 蘸釋 微生物發(fā)酵法生產(chǎn)l ，3 p d 是由細(xì)菌來完成的?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)幾種能以坩油為底物發(fā)酵 壅產(chǎn)l ，3 巾d 靜細(xì)菌，緞還沒有發(fā)現(xiàn)霹戳翻用其它有機(jī)秘為贏秘生產(chǎn)l ，3 p d 的鑫然螢 ( d e c k w e r h ，1 9 9 5 ) 。到目前為止。能夠進(jìn)行轉(zhuǎn)化的細(xì)菌未要有：腸道細(xì)菌中的肺炎克雷 倍氏菌( 磊強(qiáng)撕耙洳p 攤b 群m 鯽 裙，簡稱肺炎桿菌) ，產(chǎn)氣竟需伯氏麓( 娩6 s 婦婦粥r d 彩門嘲， 弗氏檸檬菌( c 脅6 韶 鏟。艇螂哦f ) ，絮凝腸細(xì)桿藏( 肌p 煳拍鯽昭g 如8 瑚堪) ；磐l 桿菌 耩的短乳桿菌( 工球c 幻6 口c 撕6 理v 國和布氏乳桿菌( 口喲6 礎(chǔ)棚6 “齲m e ，i ) ；梭菌屬的丁酸梭 狀芽孢杼菌( 簡稱丁酸援麓) 和巴氏援菌。其中，腦炎杼麓，丁酸梭螢、弗氏檸檬毽具有 較高的l ，3 一p d 轉(zhuǎn)化率及生產(chǎn)強(qiáng)艘，是研究比較多的三種菌。肺炎桿菌尚弗氏檸檬菌屬 予兼性嫠，兩丁羧梭菌則要求嚴(yán)格懿厭襞條件( g 啦m l be 鑫l ，1 9 9 l ；c o 玨n e 越，2 0 0 l ；s o l 。m 。啦 e ta i ，1 9 9 5 ) 。肺炎桿菌和丫酸梭菌比弗氏檸檬菌具有較高的耐受力，發(fā)酵速度較快。雖然 耱炎努嫠與弗艮攛檬鎣是l ，3 零d 轉(zhuǎn)證較鳋的蘩黻，毽囊予它爨終曳瑟遂蘩霉糍戇致瘸 憔，所以在實(shí)際威用上受到一定限制。在國外的l ，3 p d 微生物發(fā)酵生產(chǎn)研究中丁酸梭 蘩霞其譽(yù)較蹇秘戇癱茲濃度耐受牲、安余毪窩l ，3 p d 轉(zhuǎn)恁率，已成藥稀究較多的饒勢 菌種，受到越來越多的薰視。 l 。2 2 曹涵轉(zhuǎn)抱燮產(chǎn)l ，鏘羚戎瀵浚經(jīng) 1 3 固d 是以甘油為底物發(fā)酵生產(chǎn)的典型產(chǎn)物，至目前為止還沒有發(fā)現(xiàn)以剃用其它 鴦搬物必窳妨生產(chǎn)l ，3 。p d 爨奄蠡然麓。羹瀨炸鴦難一豹驥潦窩畿涿銹痿，豫了一幫分形 成生物鱟鰹，其余沒黃綴化和還艨題令平褥路徑健潺，發(fā)生歧促愛瘦。彗、潰歧純邋程慰 鍪1 2 。 薹l 甘油六= 羥辯釃 | io型u 一方瑟，曹漶凝胃激濃曾滾裁憊酶( d h 固) 氧純生成二羥褥黼( d h a ) ，藉幽二羥 舞鬻激瓣( d h 擻) 磷羧純生成磷酸二羥西酮玨a p ) ，獲褥戮達(dá)了中心代謝途徑生成丙酮 9 第一葷前富 黢，囂黎羧遴一步錢澎生成備靜凝產(chǎn)物。該途徑為襞德途徑，俸疆宥還駐當(dāng)量杖a d 壬l 和a t p 的生成。另一方顧，甘油也可以譙以維生索b 1 2 為輔酶的堞油脫水酶( 曲鶘) 作用 下生成3 * 羥萋丙疆( 3 h p a ) ：3 鞠紈在n 細(xì)h 參島下被l ，3 雨二簿氧化迸原酶還琢生成 l ，3 * p d 。該途徑為還原途徑。所囂的n a d h 由氧化途徑提供。 在茨戴條 牟下，氧純途徑中生成丙翻酸鵑愛應(yīng)在不閼的菌種中是數(shù)的，假是不同 的微生物蘺釋獲戴代謝的粼產(chǎn)鈞愚不盡褶掏豹，郢褥鬻酸脊多個代謝途徑。在腑道繃菌 中，丙酮酸被丙酮酸甲酸裂解酶催化分解為乙酰輔酶a 和甲酸，甲酸往往義會分解為二 戴他碳釉氫氣。乙酰輔酶a 在經(jīng)過己酰磷羧純形成已酸的邀程中生成過餐鵜a ：r p 。在不 控制p h 的條件下，丙酮酸也可能經(jīng)洳乙酸瑰酸產(chǎn)繳3 羥基丁酵并最終轉(zhuǎn)化為2 ，3 一t 二 薅。憩辨，腸遨鏹藏發(fā)黲靜剽產(chǎn)糖巾還蠢襞酸釋裝霸酸。鼗巴鬣梭蘺孛丁黲或雋戴純途 經(jīng)的主要產(chǎn)物，閹時也考少爨救五酵產(chǎn)生( 捺志龍，2 l ；赫赫8 v 1 9 9 2 ；b 毫f 韃嗽o 1 9 9 7 ；罄l e 秘 h 。 9 9 9 ) 。程丁羧梭菡孛，維穩(wěn)在鐵蛋爨氧純還原酶酌佟用下生成己酰c o a ，并釋放出 = 裁仡碳翻氯氣，忍酰c o a 迸一疹代謗i 最終主簧生成乙酸和了酸，有時強(qiáng)可戳俘淹有 甲酸和讖了醇的生成。 1 2 31 3 零d 發(fā)酵生產(chǎn)影響黼素 l ，3 p d 攝終濃度的大小主要取決于薄株對底物、主要產(chǎn)物；f 副產(chǎn)物的耐受裰成，還 姆懿的靛謝活性霄莢。 1 不犀發(fā)簿形式慰生產(chǎn)魅力鮑影曦 l ，3 孵發(fā)酵羼予波態(tài)淡氡嫠酵。在發(fā)辯王藝秀露，翔欺發(fā)酵秘連續(xù)發(fā)黲研究辯糖對 技多。闥歇發(fā)酵霹以褥劐較塞黲產(chǎn)物濃發(fā)，瞧生產(chǎn)強(qiáng)度較祗；遺續(xù)發(fā)酵毒科予產(chǎn)奉鶼提 離，褪產(chǎn)物濃褒較低?？妓獍苐 ，3 零d 自勢特有靜往震，及常溉分離贊用筒、商濃度有利 予鬃期撬漱等將點(diǎn)，選擇濺熱發(fā)酵較為會遙。置采羽流旁n 袋酵可戳降低殘物獅稍佟兩， 提商細(xì)胞對甘油的利用。另外，細(xì)胞固定化可以縮斑菌體生長時間，提商細(xì)胞冀復(fù)使用 率，減少菌體培養(yǎng)費(fèi)用，獲得較高產(chǎn)率，弗有稍予發(fā)酵過程穩(wěn)定遴行，舅馥已鴦入在 l ，3 。p d 發(fā)酵方面研究開發(fā)固定化細(xì)胞的漣續(xù)生產(chǎn)反廢器。 網(wǎng)一靜壤轉(zhuǎn)采取不月斡壤蓁方式攝弱效果不耀。分撼發(fā)酵最終濃度較離。瑟連續(xù)發(fā) 酵在生產(chǎn)強(qiáng)度上較蠢伐勢。在弱櫸條l 譬下，分批發(fā)酵每建笨囂演褥到o 。5 5 舷6 s m o l ，3 * p d ，箕鐾：產(chǎn)強(qiáng)壤為| 2 。5 9 鬼m ，最終濃寢達(dá)捌5 0 確g 凡。雨連續(xù)發(fā)酵可戩掇高整產(chǎn) 強(qiáng)艨到s 6 9 現(xiàn)，k ，經(jīng)發(fā)辯滾率產(chǎn)秘濃疫裘| 】舉及熬式發(fā)酵釣一半。值得一繩駒是，m e f 凇l 1 0 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文 等( 1 9 9 7 ) 采用足明e 刪。一f c 配進(jìn)行甘油連續(xù)發(fā)酵高產(chǎn)l ，3 - p d 的研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)稀釋率 在l o 予缸2 5 時，最終1 ，3 p d 含量為3 5 2 4 8 5 9 ，l 。由于在分批發(fā)酵中高濃度甘油對產(chǎn) 物l ，3 p d 具有強(qiáng)烈的抑制作用。為了減少高濃度甘油的抑制作用，補(bǔ)料分批培養(yǎng)是很 好的甘油底物提供方式。z c n g 等( 1 9 9 7 ) 的研究發(fā)現(xiàn)，足朋e 堋唧。一婦采用該形式培養(yǎng)發(fā)酵生 產(chǎn)l ，3 p d 時，甘油的含量為2 0 7 0 9 ，l ，轉(zhuǎn)化率均可達(dá)1 0 0 ，1 ，3 - p d 的產(chǎn)量為1 2 - 3 2 9 ，l 。 當(dāng)甘油起始濃度為5 ，可以獲得最大產(chǎn)率。一般在1 2 1 6 h 后再補(bǔ)加甘油2 0 9 l ，隨著 稀釋度的增加，酶的活性也隨之提高，從而轉(zhuǎn)化速率沒有改變。 2 底物和產(chǎn)物的抑制作用及其與代謝的關(guān)系 底物和產(chǎn)物對細(xì)胞生長的抑制作用是普遍存在的，對于任何甘油發(fā)酵生產(chǎn)l ，3 p d 的 菌株來說，都會受到底物和產(chǎn)物的抑制作用。 高濃度甘油對發(fā)酵l ，3 p d 生產(chǎn)具有強(qiáng)烈的抑制作用。趙紅英等人( 2 0 0 2 ) 研究了底 物甘油濃度對尉e 6 s 把砌冊e 刪d h 妞e 發(fā)酵生產(chǎn)l ，3 - p d 的影響，針對底物抑制現(xiàn)象，提出 了菌種馴化和流加甘油發(fā)酵兩種解決途徑。在較高甘油初始濃度( 7 8 9r n m o l ，l ) 的情況下， 使用馴化培養(yǎng)獲得的耐底物抑制菌株，采用流加甘油發(fā)酵工藝，可使l ，3 p d 摩爾濃度 和摩爾轉(zhuǎn)化率分別達(dá)到3 9 7 7m m o l ，l 和o 6 2 5 r n o o l 。 在以甘油為唯一碳源并缺少其它外源還原當(dāng)量的情況下，1 ，3 p d 形成的生理作用就 是把在生物合成和副產(chǎn)物形成過程中釋放的還原當(dāng)量再氧化。乙酸、乙醇、丁酸等副產(chǎn) 物對細(xì)胞的生長和生存是必要的。z e n gh ( 1 9 9 4 ) 等認(rèn)為抑制丁酸梭菌細(xì)胞生長的關(guān)鍵 濃度為：乙酸( 未游離) o 4 9 幾、丁酸o 3g ，l 、甘油9 7g 幾、l ，3 - p d 6 4g l ，并且建立 了數(shù)學(xué)模式來描述幾個主要副產(chǎn)物、產(chǎn)物、和底物對丁酸梭菌的抑制作用。他認(rèn)為在不 添加其它抑制因子的條件下，連續(xù)培養(yǎng)只可以獲得很少量的丁酸；代謝產(chǎn)生的丁酸具有 比外加入的丁酸高2 3 倍的抑制力，丁酸的抑制作用表現(xiàn)為總量。乙酸的作用方式同丁 酸相似，但是乙酸比丁酸的毒性小，乙酸對細(xì)胞生長的抑制作用主要來自于未解離形式 的乙酸。乙酸和丁酸只有在培養(yǎng)液中含有較低濃度的1 ，3 p d 時，對細(xì)胞的抑制作用明 顯；而在含有較高濃度的l ，3 - p d 時，l ，3 一p d 的抑制作用則更為突出。 另外。g n n z e l ( 1 9 9 1 ) 等認(rèn)為空氣流速和攪拌速度對發(fā)酵產(chǎn)物的形成無明顯影響。 1 2 41 ，3 p d 發(fā)酵底物選用 發(fā)酵生產(chǎn)1 ，3 一p d 的細(xì)菌中，還沒有發(fā)現(xiàn)能利用除甘油外的其它有機(jī)物為底物生產(chǎn) l ，3 一p d 的自然菌。在以甘油為唯一底物發(fā)酵生產(chǎn)l ，3 p d 的過程中，經(jīng)過微生物代謝后 除產(chǎn)生目的產(chǎn)物1 ，3 一p d 以外，還可能產(chǎn)生乙酸、乙醇、丁酸、2 ，3 丁二醇、乳酸、琥珀 第一章前言 簸、+ 丙酸等剮產(chǎn)品( b o 秧re t 螽l ，1 9 9 3 ；n 糙l k 礴a l ，1 9 9 7 ) ，這樣一部分螢瀨在畿豫途徑 中作為還原當(dāng)量個體面被消耗形成了副產(chǎn)物。因?yàn)槠咸烟强梢圆糠秩〈视妥鳛檫€原當(dāng) 曩翡供體( 張健，勰馘) ，通過滾嬲蘩麓糠律必甘濁裳簿轆熟底嬤，黢可提塞蘩訪漿濃發(fā)， 還可以避免葡萄糖對過程的抑制作用，從耐盥著提旆最終發(fā)酵波中的l ，3 一p d 濃度、甘 洼敕轉(zhuǎn)純搴以及l(fā) ，3 零d 豹擻產(chǎn)強(qiáng)澄。 在實(shí)際應(yīng)用中，雖然甘油的轉(zhuǎn)化率可以得到提癱，但是由予同l l 重消耗了麓莓糖，恧 懇掇供攘弼戇還豢巍蠢爨鼴饕莓糖豹震囊憝彗演愛爨夔2 倍，囂鼗，要練套考惑轉(zhuǎn)純率 秘鑲萄糖及幢濁戇徐捺，以便決定蹶采溺豹工藝路線( 骼恚戇，2 o ) 。 選釋冀它胃發(fā)群物蔟俸為輔助底耪釣效果不是鍛理想，如：乙二醇，它不儀不能提 供遙霖警蠢，雨量遙要獲曾油酶氧托串獲彀還琢當(dāng)纛，最終產(chǎn)生己醇，褥苜油轉(zhuǎn)訖為乙 敬，這種轉(zhuǎn)化剮是禿用功。只有在經(jīng)濟(jì)條件相同的情況下，甘油的轉(zhuǎn)化率越高，h 生產(chǎn)工 芑酌可行幢瞧隨之提高。 我國清華大學(xué)應(yīng)用化學(xué)研究所劃德華教授也對肺炎克囂儋氏桿菌以裁楚糖作為轆 黢殿物發(fā)酵生產(chǎn)l ，3 - 囂= 黲避囂了聯(lián)究。磷究表驥，以麓甏糖擎獨(dú)據(jù)為窳物發(fā)酵囂謄不生 成l ，3 露二醇；默齷蔻壤秘囂油必瀑臺底勃游，耱饞濃度顯著撬離。因j 斃糍營酒必瘋物 熬教酵串，逶遭摻熬蔫端糖作兔輔麓贏轆胃黻鬟離l 3 褥二醇轉(zhuǎn)訖率，閽時縮鬣發(fā)酵對 闋，逶避選擇合適鑫留蘩懿糖嬲入速率，葜轉(zhuǎn)純率菠離可遮6 4 9 。囊d 德牮蔣入( 2 0 0 s ) 又發(fā)明了一種外源添加反丁烯二被促進(jìn)微生物合成1 ，3 丙二醇的方法，適用于1 ，3 - 閃二 醇的厭氧及有氧發(fā)熬過稷，其優(yōu)點(diǎn)在于：可加速壤饞對討浦豹利用，顯蔫提高l ，3 藤二 醇濃度和生產(chǎn)強(qiáng)度，降低生產(chǎn)成本。 吏氏腦炎樣藏怒蓑譙藏，在露裁或魘戴條絳下都霹戮警長，窀存在舞令淫繁予癭p 和d k ，分嬲在竅畿、厭戴環(huán)境下越作震，使纓腿，生長鋱澎漣入苓| 遐代謝途徑。邑寮臻 究表甓：在蠢氧條釋下克耱炎釋藹生長醞箍，函魏交獻(xiàn)擻道靜用于l ，3 掰二酵發(fā)酵酌 寵茨赫炎杼麓靜予臻養(yǎng)建稷大都在寤氧祭 串下送行，毽氯靜存在鬟幸還繇釜曩煞傳遞不 利，故稀克氏肺炎稈菌發(fā)酵難產(chǎn)l ，3 丙二醇過程大都在厭瓶條件下進(jìn)行?？紤]氮?dú)庵苽?的尚成本，近年來霄氧代謝條件下生產(chǎn)l ，3 。丙二醇的研究逐漸增多。王鍘鋒等和h 娃a n 窖 等的研究表明。商氧條件下。l ，3 丙= 醇合成途徑并米完企臌截( 千劍峰等。2 0 0 l b ；h u a n g e ta l ，2 2 ) 。通過比較克氏膝炎輯藏璦氧濺趣發(fā)酵_ 穗鴦氧滾熱發(fā)酵結(jié)聚，滲牮大學(xué)提嶷了 前期厭瓴屢期有飄發(fā)酵王芑，通過5 l 及5 0 l 發(fā)簿罐上魄實(shí)驗(yàn)表明，該工藝霹甓顯掇裹 1 2 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文 l ，3 丙二醇濃度及生產(chǎn)強(qiáng)度。在5 l 發(fā)酵罐上l ，3 丙二醇可達(dá)6 9 6 9 ，l ，應(yīng)用工業(yè)原料的 5 0 l 發(fā)酵罐上l ，3 丙二醇濃度可達(dá)5 8 8 9 ，l 。 1 2 5 我國微生物發(fā)酵法生產(chǎn)l ，3 - p d 研究現(xiàn)狀 我國微生物法生產(chǎn)l ，3 p d 的研究雖然起步較晚，但已經(jīng)取得一定的進(jìn)展。清華大學(xué)、 大連理工大學(xué)、沈陽農(nóng)業(yè)大