小鼠缺氧及藥物對耗氧量的影響.ppt

1,Hypoxia,機能實驗學(xué),小鼠缺氧及藥物對耗氧量的影響,機能實驗中心,2,實驗 目的,小鼠缺氧及藥物對耗氧量的影響,3,實驗原理,概念：缺氧（Hypoxia）是指組織供氧減少和/或用氧障礙，引起細胞代謝、功能和形態(tài)結(jié)構(gòu)異常變化的病理過程。,4,實驗原理,乏氧性缺氧：多由于吸入氣體的氧分壓過低、外呼吸功能障礙或靜脈血分流入動脈血引起。,血液性缺氧：主要由于血紅蛋白的數(shù)量減少或性質(zhì)改變。,貧血 一氧化碳中毒 高鐵血紅蛋白血癥,5,實驗材料,試劑,器材,6,實驗對象,小鼠，7只，雌雄不限,注意：小鼠分組，標記,7,實驗方法,血液性缺氧,CO中毒,取小鼠1只放入廣口瓶中，觀察其一般表現(xiàn)、呼吸及皮膚黏膜顏色；,廣口瓶通過橡皮管與CO發(fā)生裝置相連，使?jié)饬蛩嶂鸬渭尤爰姿嶂校凭珶艏訜岙a(chǎn)生CO；,記錄小鼠存活時間，觀察其皮膚黏膜顏色變化。,8,實驗方法,亞硝酸鈉中毒性缺氧,血液性缺氧,取小鼠2只（體重相近），標記，觀察其一般表現(xiàn)、呼吸及皮膚黏膜顏色；,甲鼠：ip 亞硝酸鈉0.3ml/只+NS 0.3ml/只 乙鼠： ip 亞硝酸鈉0.3ml/只+美藍 0.3ml/只,記錄2只小鼠存活時間，觀察其皮膚黏膜顏色變化。,9,實驗方法,藥物對耗氧量的影響,取小鼠4只（體重相近），稱重、標記；,對4只小鼠分別給藥室溫下放置15分鐘放入乏氧瓶中通過移液管觀察小鼠10分鐘的耗氧量。 甲鼠：ip NS 0.3ml/10g 乙鼠：ip 0.025%氯丙嗪(CPZ) 0.3ml/10g 丙鼠： ip 0.1%普萘洛爾(prop) 0.3ml/10g 丁鼠： sc 0.05%異丙腎上腺素(Isop) 0.4ml/10g,注意給藥間隔時間的掌控,10,實驗結(jié)果,CO中毒 NaNO2+NS NaNO2+美藍,皮膚黏膜顏色 存活時間,表1. 不同類型缺氧小鼠的表現(xiàn)和存活時間,11,實驗結(jié)果,甲 乙 丙 丁,鼠號 體重(g) 藥物 劑量(ml/10g) 耗氧量,表2. 不同藥物對小鼠耗氧量的影響,ip NS ip 0.025% CPZ ip 0.1% prop sc 0.05% Isop,0.3 0.3 0.3 0.4,12,注意事項,動物要做好標記以免混淆；所選小鼠體重應(yīng) 盡量一致，避免由于體重差異造成結(jié)果不準確；,CO發(fā)生裝置濃硫酸應(yīng)逐滴加入甲酸中， 不可過熱以致液體沸騰；,注意觀察小鼠的表現(xiàn)，不要忘記錄小鼠的 存活時間；,復(fù)制低張性缺氧動物模型時，整套裝置必 須保證密閉性。,CO抑制紅細胞內(nèi)糖酵解，2,3- DPG生成減少，氧離曲線左移。,CO同部分血紅素結(jié)合將增加其余血紅素對氧的親和力，使解離曲線左移。,Hb性質(zhì)改變,皮膚、粘膜呈HbCO的櫻桃紅色。,一氧化碳中毒,討 論,美藍是還原劑，將還原成，保護Hb的正常結(jié)構(gòu)，恢復(fù)其攜氧能力。,Hb分子中的4個Fe2+部分氧化成Fe3+后，使剩余Fe2+與氧的親和力，氧解離曲線左移，組織缺氧。,Hb性質(zhì)改變,皮膚、粘膜呈 Fe3+Hb的青石板色。,亞硝酸鈉中毒,討 論,15,討 論,CPZ:(-)中樞多巴胺受體，使機體活動量，基礎(chǔ)代謝率，故耗氧量。 prop:(-)心臟-R，產(chǎn)生負性變時、變力、變傳導(dǎo)作用，使心率，心肌