自身抗體檢測的臨床應用與質(zhì)量控制.doc

自身抗體檢測的臨床應用與質(zhì)量控制 尚小云 遼寧省撫順市中心醫(yī)院檢驗科，遼寧撫順113006 摘要自身抗體的檢驗項目種類較多，檢驗方法也比較豐富，目前已有效應用到多種自身免疫性疾病中以協(xié)助臨床診斷與治療，受到臨床醫(yī)師的廣泛認可。檢測過程中保障嚴密的操作流程以及相關設備準備，可充分保證良好的檢驗質(zhì)量，能夠為臨床診治提供更有效依據(jù)。 關鍵詞自身抗體檢測；臨床應用；質(zhì)量控制 R575A1672-5654（xx）11（b）-0164-02 作者簡介尚小云(1982-),女,遼寧省撫順市,本科,畢業(yè)于大連醫(yī)科大學,主管檢驗師,研究方向：醫(yī)學臨床檢驗。 目前，我國對自身抗體檢測的重視程度已廣泛提升，通過相關指標檢測可直接協(xié)助合理的診治開展。但由于臨床檢驗的特殊性，以及設備、試劑、檢驗人員的不確定性，仍會存在檢測不當?shù)南嚓P表現(xiàn)1。筆者通過分析該種檢驗的臨床應用范圍，合理提出質(zhì)量控制建議，旨在為日后檢測提供有效的參考建議。 1自身抗體檢測應用分析 1.1檢測常見項目 存在自身免疫性疾病的病患中多數(shù)均能夠自血清中獲取具有良好價值的自身抗體，即便部分項目與疾病進展的關系并不明確，但均存在一定程度的關聯(lián)。部分指標已成為臨床診斷中的有效依據(jù)2，可充分評估疾病的發(fā)生與緩解，其臨床中常見檢測項目如下。 抗核抗體（ANA）：多項研究已證實該指標對自身免疫性疾病存在良好的診斷價值，也是美國風濕病學會所認可的系統(tǒng)性紅斑狼瘡的主要診斷指標之一。扛單鏈DNA（ss-DNA）：以脫氧核糖與核糖為靶抗原，可作為系統(tǒng)性紅斑狼瘡的參考指標，對類風濕性關節(jié)炎也存在一定價值?？闺p鏈DNA抗體（ds-DNA）：以雙螺旋DNA為靶抗原，是系統(tǒng)性紅斑狼瘡病患的特異性標志物，并且能夠通過滴度檢測分析疾病程度。抗可提取性核抗原抗體（ENA）：該類別由眾多核苷酸與其蛋白質(zhì)顆粒共同組成，包括多種抗原組成，能夠準確評估彌漫性結(jié)締組織疾病的發(fā)生。類風濕因子（RF）：其靶抗原為變形IgG，對類風濕性關節(jié)炎具有明確診斷作用3，但針對指標表現(xiàn)為陰性這并不可直接排除疾病存在。除此之外，混合型結(jié)締組織疾病，全身性紅斑狼瘡等患者也會存在RF陽性表現(xiàn)?？故戎行粤＜毎麧{抗體（ANCA）：其靶抗原為人嗜中性粒細胞胞漿成分，能夠準確評估系統(tǒng)性血管炎疾病，多與血管炎性病變存在關聯(lián)?？菇堑鞍卓贵w（AKA）：主要為類風濕性關節(jié)炎患者的特異性指標，但對于其他免疫性疾病不具備顯著的檢出作用?？垢慰乖陨砜贵w：此項目包含的抗體類型較多，經(jīng)臨床檢測可充分辨別自身免疫性肝炎與病毒性肝炎，為治療提供可靠保障?？弓h(huán)瓜氨酸肽抗體（CCP）：此項目對與所有類型風濕性關節(jié)炎均具備特異性，在疾病的早期發(fā)現(xiàn)中具有良好作用?？挂葝u細胞抗體（ICA）：該指標主要針對胰島素依賴型糖尿病具有診斷價值，但病患經(jīng)長期治療后其檢驗水平也存在降低趨勢。 1.2檢測方法分析 酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）：該檢驗方式主要為非放射性免疫檢測，其臨床操作具有較好的簡易程度，不存在放射性傷害，并且試劑相對穩(wěn)定，在臨床中的應用范圍較廣泛。由于試劑制品的日趨成熟，其開展方法已經(jīng)在國內(nèi)外獲得良好的推廣。間接免疫熒光法（IIF）：當前臨床主要以Hep-2細胞作為該種檢測的抗原，經(jīng)反應發(fā)生后形成復合物，再聯(lián)合應用抗人IgG最終獲得檢驗結(jié)果，最終采用熒光顯微鏡辨別免疫圖形與著染狀況。放射免疫法（RIA）：以放射性標記物作為檢驗基礎，但臨床開展過程中存在放射源污染等不良事件。免疫印跡法（WB）：檢驗過程中主要以抗原吸附的硝酸纖維膜作為載體，通過凝膠電泳分離分子，再通過檢驗標準評估各區(qū)帶情況，經(jīng)轉(zhuǎn)印到固相載體后完成載體膜。血清標本受檢過程中分別結(jié)合抗原區(qū)帶，經(jīng)IgG抗體標記后形成復合物，通過顯色表現(xiàn)總結(jié)抗ENA抗體。免疫斑點法（IDA）：該種方法由WB改進而來，同樣也主要應用于抗ENA抗體檢驗中。 2臨床檢驗質(zhì)量控制分析 自身抗體檢測能夠保證多項疾病的良好診斷，但其檢驗結(jié)果準確程度與質(zhì)量控制存在密切相關性，其質(zhì)控為臨床檢測的主要指標。當前檢驗中大部分均為半定量或定性試驗，在獲取結(jié)果的同時需存在陽性與陰性對照，進而確保準確程度，也為實驗室質(zhì)控評估提供比較作用。 2.1設備規(guī)范化 檢測科室需具備良好的環(huán)境因素，保證檢驗質(zhì)控的基礎作用，需配備合理的空間、完善的室溫與照明調(diào)節(jié)設備，以保證相關檢測的順利開展；確保良好的熒光顯微鏡質(zhì)量，并同時保證適合的光源強度對提高分辨度具有重要作用4；檢驗醫(yī)師需定期校準相關器械的精密程度，避免檢測過程中存在誤差；開展檢測時所應用的相關試劑盒需由資質(zhì)豐富的生產(chǎn)商提供，收到試劑盒后依據(jù)指示說明給予保存；保證酶標儀的良好校準措施，給予良好的維護處理；開展免疫熒光法檢驗前需著重評估相關標記物的稀釋方法，保證檢驗操作無誤；針對不同檢驗項目均需建立完善的流程操作標準；保證病患標本與質(zhì)控版本的檢測環(huán)境相同，切勿由于保存不當引發(fā)檢驗結(jié)果準確率下降；獲取結(jié)果后應先對以往病例記錄進行對照分析，核實無誤后再給予結(jié)果。 2.2實驗基質(zhì)合理化 開展簡潔免疫熒光法時需采用實驗基質(zhì)作為處理依據(jù)，針對不同自身抗體項目檢測需保證針對性的實驗基質(zhì)，避免發(fā)生選擇不當而降低實驗效果。同時，還需關注熒光標記二抗的實際質(zhì)量，保證良好的摩爾比值。 2.3結(jié)果判定準確化 檢測過程中熒光染色不可辨認情況時，將其結(jié)果與陰性對照進行合理比較，如水平表現(xiàn)相同則為陰性。存在可辨認熒光染色情況時，則與陽性對照開展比較，如水平相同或略高均可判定為陽性。在實際報告中需存在各圖形與滴度5，辨別與疾病存在關聯(lián)可進一步開展特異性免疫實驗6。同時，在判定結(jié)果是需結(jié)合病患個性化特征給予分析，檢驗結(jié)果不明確時相應給予注解，協(xié)助臨床醫(yī)師認知。 自身抗體檢驗在臨床中具有良好的診斷作用，但在實際實驗過程中需要保證合理的質(zhì)量控制措施，提升檢測的合理性以及結(jié)果的準確性。 參考文獻 1胡朝軍,李永哲.重視自身抗體檢測質(zhì)量管理和臨床應用J.中華檢驗醫(yī)學雜志,xx,36(8):673-676. 2朱珍,張宏宇,何梅芳,等.肝病患者血清自身抗體檢測及臨床意義J.重慶醫(yī)學,xx,43(10):1246-1248. 3董旭才,張婧,沈建軍,等.類風濕性關節(jié)炎患者自身抗體的檢測及應用J.國際檢驗醫(yī)學雜志,xx,35(4):406-407. 4王廣杰,劉輝.自身抗體檢測新技術及其臨床應用J.醫(yī)學與哲學:臨床決策論壇版,xx,16(