血細(xì)胞分析儀應(yīng)用心得ppt課件.ppt

電阻抗型血細(xì)胞分析儀的應(yīng)用心得 及腦脊液胸腹水常規(guī)檢查,主要內(nèi)容操作部分,1.檢驗(yàn)前 （1）是否有凝塊，眼觀，竹簽輕挑，注意蓋子內(nèi)部。 （2）血量2ml，少于1ml手工上機(jī)，完成后改起始號(hào)。 （3）進(jìn)架，架號(hào)與編號(hào)尾數(shù)對(duì)應(yīng)，小號(hào)在前，大號(hào)在后。 （4）上機(jī)，檢查起始號(hào)是否一致。若修改，必須打兩次。,2.檢驗(yàn)中 （1）儀器運(yùn)行是否良好，試劑合格，室內(nèi)質(zhì)控合格。 （2）是否跳號(hào)。報(bào)警信息（試劑不足，部分吸樣，貧血。）,3.檢驗(yàn)后 （1）分析各檢測(cè)參數(shù)，分析 直方圖、散點(diǎn)圖、提示 信息，必要時(shí)涂片復(fù)檢。 （2）結(jié)合臨床，審核報(bào)告。 （3）危急值的報(bào)告與登記。,超敏C反應(yīng)蛋白,主要內(nèi)容理論部分,一、電阻抗型血細(xì)胞分析儀 （1）電阻抗原理 （2）紅細(xì)胞與血小板的檢測(cè)原理 （3）白細(xì)胞的檢測(cè)原理 （4）血紅蛋白的檢測(cè)原理 （5）基于檢測(cè)原理的常見誤差分析,二、腦脊液胸腹水常規(guī)檢查 （1）改良牛鮑計(jì)數(shù)板 （2）總數(shù)的計(jì)算 （3）性狀描述、定性 （4）分類的要點(diǎn),（1）電阻抗原理,血細(xì)胞檢測(cè)原理,血細(xì)胞通過小孔,血細(xì)胞大脈沖大,用等滲電解質(zhì)溶液稀釋全血 通過小孔感應(yīng)區(qū)時(shí)，電阻增加 引起了電壓變化而出現(xiàn)一個(gè)脈沖信號(hào) 細(xì)胞體積越大，引起的電壓變化越大，產(chǎn)生的脈沖振幅越高 根據(jù)脈沖信號(hào)的大小測(cè)定不同大小的細(xì)胞，從而對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分群,要點(diǎn) 血細(xì)胞是非傳導(dǎo)性 細(xì)胞通過小孔時(shí)會(huì)引起電阻的變化 脈沖振幅的高低反映了細(xì)胞體積的大小 脈沖數(shù)量反映了細(xì)胞數(shù)量,（1）電阻抗原理,RBC：7.2m PLT：1.53m WBC：620m,（2）紅細(xì)胞及其參數(shù)的檢測(cè)原理,含有白細(xì)胞因素，但可忽略。,RBC：WBC=750:1,MCV：紅細(xì)胞平均體積（脈沖平均高度） HCT=RBCMCV MCH=HGBRBC MCHC=HGBHCT,誤差分析 （1）RBC假性增高 （2）RBC假性減低,（2）血小板檢測(cè)原理,（1）血小板與紅細(xì)胞在同一通道檢測(cè) （2）血小板通常在230fl （3）大于右側(cè)閾值者考慮為紅細(xì)胞,誤差分析 （1）PLT：紅細(xì)胞碎片、小紅細(xì)胞等 （2）PLT：血小板聚集、巨血小板等,（3）白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分群的檢測(cè)原理,WBC計(jì)數(shù)：電阻抗原理 （1）排除RBC影響：溶血?jiǎng)?（2）排除PLT影響：體積差異,分群原理：脈沖高低，細(xì)胞大小 Q：中間細(xì)胞群中包括單核細(xì)胞，單核細(xì)胞的體積不一定小于粒細(xì)胞，那為何中間細(xì)胞群位于粒細(xì)胞群之前？,（4）血紅蛋白檢測(cè)原理：分光光度比色法,檢測(cè)物質(zhì)為血紅蛋白衍生物 （1）氰化血紅蛋白 含有氰化物 （2）月桂酰硫酸鈉（SLS）血紅蛋白 不含氰化物 校正儀器時(shí)以氰化高鐵法為準(zhǔn) 最大吸收波長為540nm 國際血液標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（ICSH）推薦方法,誤差分析：影響檢測(cè)光路的因素,（5.1）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的誤差分析,（1）RBC假性增高：WBC極度增高、嚴(yán)重貧血、巨大血小板？ （2）RBC假性減低：紅細(xì)胞凝集（冷凝集、抗凝劑相關(guān)性、自身免疫性）,冷凝集解離前測(cè)定結(jié)果,冷凝集解離后測(cè)定結(jié)果,冷凝集素綜合征 在31以下 自身紅細(xì)胞抗原發(fā)生可逆 性凝集 常見病 白血病、惡性淋巴瘤或全身性紅斑狼瘡 肺炎支原體屬感染 傳染性單核細(xì)胞增多癥 處理方法 37水浴,（5.2）血小板計(jì)數(shù)的誤差分析,（1）PLT假性增高：紅、白細(xì)胞碎片，小紅細(xì)胞；冷蛋白血癥 處理辦法：鏡檢確認(rèn)，手工計(jì)數(shù)；光學(xué)法儀器復(fù)查。 （2）PLT假性減低：血小板凝集（采血，抗凝劑），血小板衛(wèi)星現(xiàn)象，巨大血小板 處理辦法：鏡檢確認(rèn)，手工計(jì)數(shù)；光學(xué)法儀器復(fù)查。,EDTA依賴性血小板聚集,患者，男性，26歲，呼吸內(nèi)科，發(fā)熱待查,PLT 9109/L WBC 10.2109/L RBC 4.501012/L HGB 120.5g/L HCT 0.45 MCV 80fl,PLT 185109/L WBC 9.4109/L RBC4.481012/L HGB 120g/L HCT 0.45 MCV 80fl,Q:血常規(guī)初診PLT計(jì)數(shù)偏低應(yīng)如何處理？（國際復(fù)檢規(guī)則小于100）,查看血樣是否有凝塊,有重抽復(fù)查,無,復(fù)查,正常核實(shí)，審核,不變,查看PLT直方 圖及提示信息,直方圖良好，無提示信息，可考慮結(jié)合臨床審核，最好先閱片,直方圖尾部抬起，巨血小板、血小板凝塊 ,鏡檢發(fā)現(xiàn) 血小板聚集,抽血不順引起的聚集 重抽，正常審核,EDTA依賴性的聚集更換抗凝劑正常,聯(lián)系臨床，了解患者應(yīng)無牙齦出血、皮下瘀斑、紫癜等出血傾向，囑 醫(yī)生告知患者今后血常規(guī)應(yīng)采用特殊抗凝劑采血。（通常為枸櫞酸鈉）,（5.3）白細(xì)胞計(jì)數(shù)的誤差分析,（1）WBC假性減低：白細(xì)胞凝集（少見）,（2）WBC假性增高：血小板凝塊、巨大血小板，冷蛋白，紅細(xì)胞溶血不良， 有核紅細(xì)胞,紅細(xì)胞溶血不良 （1）脂類代謝異常：紅細(xì)胞膜表面與脂類結(jié)合形成脂質(zhì)顆粒保護(hù)膜 （2）紅細(xì)胞膜表面結(jié)構(gòu)異常：異常血紅蛋白血癥,常見于 （1）肝功能低下（肝硬化、肝癌晚期、膽道阻塞） （2）高脂血癥、高膽固醇制劑輸液治療中 （3）異常血紅蛋白癥（Hgb-S癥、Hgb-C癥）,處理辦法：人工顯微鏡形態(tài)學(xué)鏡檢,有核紅細(xì)胞的干擾,白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果必須按如下公式予以校正,上式中，X為未校正前白細(xì)胞數(shù)，Y為在白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)時(shí)， 計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞的同時(shí)計(jì)數(shù)到的有核紅細(xì)胞數(shù)。,全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 第3版,白細(xì)胞校正數(shù)/L=X,（5.4）血紅蛋白檢測(cè)的誤差分析,脂血癥 異常血漿蛋白 嚴(yán)重白細(xì)胞增多 膽紅素增高 體內(nèi)溶血 紅細(xì)胞不溶解,患者，男，30歲，燒傷整形外科,該圖來源于北京協(xié)和醫(yī)院張時(shí)民教授博客,患者，男性，30歲，血液內(nèi)科一病區(qū)，臨床診斷為慢性髓細(xì)胞性白血病。急查血常規(guī)：,問：為什么HGB與HCT的下降程度不一致？HCT結(jié)果為0.31，對(duì)應(yīng)的HGB應(yīng)在100g/L左右，而該結(jié)果HGB僅為49g/L。,病例思考題：,WBC 423.5109/L RBC 1.91012/L HGB 49.00g/L,PLT 225109/L MCV 159fl HCT 0.31,自學(xué)內(nèi)容,紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的臨床意義 血小板計(jì)數(shù)的臨床意義 白細(xì)胞計(jì)數(shù)及其分類的臨床意義 血紅蛋白檢測(cè)的臨床意義 其他參數(shù)的臨床應(yīng)用及其意義,二、腦脊液胸腹水常規(guī)檢查,（1）性狀描述、定性 （2）改良牛鮑計(jì)數(shù)板 （3）總數(shù)的計(jì)算 （4）分類的要點(diǎn),（1）性狀描述、定性試驗(yàn),性狀 透明度 顏色：無色、紅色、黃色、乳白色、淡綠色、褐黑色等,定性試驗(yàn) 腦脊液：潘迪試驗(yàn)，球蛋白與苯酚結(jié)合，形成不溶性蛋白鹽沉淀 胸腹水：Rivalta試驗(yàn)，0.1%乙酸溶液，使酸性黏蛋白形成白色霧 狀沉淀,混濁、血性標(biāo)本應(yīng)離心取上清做定性試驗(yàn),3mm三等分,每個(gè)大格面積為1mm2 計(jì)數(shù)池高度為0.1mm 容積=1mm20.1mm=0.1mm3 =0.1l,（2）改良牛鮑計(jì)數(shù)板,（3）總數(shù)的計(jì)算,細(xì)胞總數(shù)=n/410106稀釋倍數(shù),工欲善其事，必先利其器,清潔：計(jì)數(shù)板、蓋玻片 干燥 干凈：試管、槍頭,充池前：充分混勻，腦脊液1:1，胸腹水1:3,（4）細(xì)胞分類要點(diǎn),臨床上通常細(xì)胞總數(shù)50106/L時(shí)，進(jìn)行細(xì)胞分類,腦脊液 有核細(xì)胞總數(shù) 單個(gè)核細(xì)胞百分比 多葉核細(xì)胞百分比,胸腹水 有核細(xì)胞總數(shù) TH-間皮及組織細(xì)胞 多葉核細(xì)胞百分比 單個(gè)核