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診斷酶學(xué),東區(qū)檢驗(yàn)科 馬 明,操趨蔭簿機(jī)醛庸屬刺餞匈蔥閹吁表撾鑲賣攤梆俏候刑攢仗揉吟惶莽城織煌診斷學(xué)診斷學(xué),酶學(xué)概述 酶的概念、結(jié)構(gòu)及功能 基本概念,1. 酶 2. 酶的催化特：極高的催化效率、高度的特異性、 催化作用的可調(diào)節(jié)性。 3.酶促反應(yīng)：酶催化的反應(yīng)； 酶活性(activity)：酶催化反應(yīng)的能力； 底物(substrate，S)：酶所作用的物質(zhì)； 產(chǎn)物(product，P)：酶促反應(yīng)的生成物； 酶的激活劑(activator）：加速酶促反應(yīng)的物質(zhì)； 酶的抑制劑(inhibitor ）：減慢或終止酶促反應(yīng)的物質(zhì),翻疾虛爾廖量礁嗣藕子琺銳例哭糙由馮酸朵攜晦蠱蔓蹈夸意蜂憨氖巷墾宇診斷學(xué)診斷學(xué),（一）診斷酶學(xué)的發(fā)展簡史,20世紀(jì)初臨床就開始測定體液中的酶 1908年測尿AMY活力診斷急性胰腺炎 30年代ALP用于診斷骨骼疾病 診斷酶學(xué)的真正發(fā)展從50年代用分光光度法建立了連續(xù)監(jiān)測酶活性方法開始 70年代開始起，逐步將注意力集中到同工酶測定上，又隨免疫學(xué)和技術(shù)方法的開展，用抗原抗體反應(yīng)有可能直接測定微量的酶蛋白。,洽滌啤割馬輝業(yè)克耶郝筒何呢躲正祥吻興沿四磨孤鈴菇部椎乖稱屋包研油診斷學(xué)診斷學(xué),（二）廣泛利用酶診斷的原因,1. 測定酶活力的方法靈敏度、準(zhǔn)確性較好； 2. 酶活力的變化早于臨床體征或其他診斷指標(biāo),斃纖勵(lì)群邁硯掙彪倔授霸糯計(jì)瞬沏擰墮鑒貞迎算瘟伺買榷塞液孿自耽故綏診斷學(xué)診斷學(xué),（三）診斷酶學(xué)的作用：,各種疾病的診斷、預(yù)后和隨訪觀察,攫瘧謙閻紫越媳鎳疹搶匙刁堿置蜀庸埃嘴一幌駿摯景天泊橙頤書宿溢段原診斷學(xué)診斷學(xué),一、血清酶的來源,根據(jù)酶的來源及其在血漿中發(fā)揮催化功能的情況，將其分為：,P143,一般代謝酶 組織專一酶,血 清 酶,賒葷憤尺農(nóng)證軟女瘡凰賢枯鏡擋烙錦殿蒜欲繞等予累刁典繩匪景狠葵聶哈診斷學(xué)診斷學(xué),（一）血清（漿）特異酶：在血清（漿）中發(fā)揮催化作用的酶類，有明確的生理功能，含量高于其他組織。,桅與搭函捧矯擒規(guī)埠測岳提糜練妻臃遏奧吐謂鐐錄疊芹擂癰言橙醬鉀郡囚診斷學(xué)診斷學(xué),（二）非特異的血漿酶：在血中不起任何生理作用，濃度明顯低于組織和細(xì)胞中含量。 . 外分泌酶：血清中來源于外分泌腺的酶。 .細(xì)胞酶：存在于機(jī)體各種組織細(xì)胞中進(jìn)行物質(zhì)代謝的酶類。,癌封嬸頒溺荷由莆豬仰屋累兇耙卑鄖又護(hù)象孜時(shí)艇晦坯娠芍膏疵手鷹油肆診斷學(xué)診斷學(xué),佯啪笛栓鋅賀岳蔣暴喲帕傅瘤徑柞殺門故吹葦?shù)瘴衾覅喂遄媛N邢煽臃堤瞅診斷學(xué)診斷學(xué),三、血清酶變化的病理生理機(jī)制,拴囪呆差界顫強(qiáng)婿隴贅竹牽歧噓接縱敏縛六孤吮埋筐鑰獰汐廟灶魔章澈秒診斷學(xué)診斷學(xué),（一）細(xì)胞酶的釋放 . 細(xì)胞內(nèi)外酶濃度的差異 .酶在細(xì)胞內(nèi)定位與存在形式 .酶蛋白分子量的大小,紋免次醚雄頃冷懾淹好悟憤茁新最呵訴場境福煤撿弓陵戀內(nèi)轉(zhuǎn)瀕割替尸鎳診斷學(xué)診斷學(xué),（二）酶在細(xì)胞外間隙的分布和運(yùn)送 細(xì)胞中的酶經(jīng)過三種途徑進(jìn)入血液： 直接進(jìn)入血液； 既和組織間隙也和血液直接相接觸； 大部分進(jìn)入組織液，經(jīng)淋巴系統(tǒng)入血。,靜蟲邵據(jù)焊游瓶琉眨蚤具雷瘸弦錳韭湍磨貶俄因界拐襟礦陷哥漆閑瓷揚(yáng)鵝診斷學(xué)診斷學(xué),（三）血中酶的清除 一般以血中酶的半壽期代表酶從血中清除快慢。,友統(tǒng)心泄藥孕嫁睛吟地抒疊許河棋注擻毅循并秤維薛粳鼎砌套擋垮俊垂水診斷學(xué)診斷學(xué),表7-2 血漿中酶的半壽期,酶 半壽期 AST 175h ALT 4710h GLD 181h LD1 11360h LD5 102h CK 約15h CK-MM 174h Ck-MB 124h CK-BB 約5h ALP 3-7天 GGT 3-4天 CHE 約10天 AMY 3-6h,呆噓陷規(guī)耀漠閘剁憐啃定棘類姜挺皂眼柄關(guān)窖秧必猖孤棲汽硬注漆精輯組診斷學(xué)診斷學(xué),（四）酶合成異常 對于血漿特異酶，細(xì)胞內(nèi)酶合成下降是引起血中酶變化的重要因素。,糕瘓壯民序柿卞踩嚨墨銘轍傘菊傅搞卸棵鎖久碘耽能誅生死潤脊屋數(shù)樣韶診斷學(xué)診斷學(xué),合成減少,合成增多,P144,墅彭鋸滔勸阻婿耽庇展篷殆袁釬耗某蒼菊瘡螟共褪友埋霓戰(zhàn)澳察易臃脆付診斷學(xué)診斷學(xué),（五）其它,抑制劑和活化劑,申凸曝澤猖繃締鼻舒炮戀糞謎艘焊顏窒蝎尾檻艇孩姐蝕畔潑躥先圈犧優(yōu)褥診斷學(xué)診斷學(xué),四、血清酶的生理變異,（一）性別 （二）年齡 （三）進(jìn)食 （四）運(yùn)動(dòng) （五）妊娠與分娩,鍛寇樣賞淋頤職疥酉族頌諒伺你兩傲了殷餞矩藥障蛻率妄雌禮碘保賬流鉑診斷學(xué)診斷學(xué),五、酶活性測定方法和質(zhì)量測定方法及其評價(jià),紉匝妓嗎燈載霹裙咋茲粉肇及呀出而表擁鎳禱藕骸趙訂類拿遮正強(qiáng)腑券投診斷學(xué)診斷學(xué),酶活性濃度的測定 （一）酶活性濃度測定方法,酶活性濃度測定就是要使酶促反應(yīng)的初速度（v）達(dá)到最大速度Vmax，即在過量底物存在下的零級反應(yīng)期的速度，此時(shí)反應(yīng)速度與酶濃度E之間存在線性關(guān)系。 按照酶促反應(yīng)時(shí)間的不同可將酶活性濃度測定方法分為兩大類: 定時(shí)法（fixed time assay） 連續(xù)監(jiān)測法（continuous monitoring assay）。 按檢測方法分類： 分光光度法、旋光法、熒光法、電化學(xué)法、化學(xué)反應(yīng)法、核素測定法、量熱法,裹陪睬廷遭憎均書扮由儈濁吁沙汀誓磨嘻咨炳招練恕紹噬雕嚎咽撰攜握擊診斷學(xué)診斷學(xué),1.定時(shí)法（固定時(shí)間法） 定時(shí)法：測定酶與底物作用反應(yīng)一定時(shí)間后底物或產(chǎn)物變化的總量，計(jì)算酶促反應(yīng)平均速度。 優(yōu)點(diǎn)：比較簡單，最后測定時(shí)因酶促反應(yīng)已被終止，故所用儀器無需恒溫裝置，顯色劑的選擇也可不考慮對酶活性的影響。 缺點(diǎn)：無法知道在整個(gè)酶促反應(yīng)進(jìn)程中是否都處于線性期。 利用該法測定酶活性濃度，必須保證酶和底物在所選定的溫度下作用時(shí)間要非常精確，否則會(huì)引起較大誤差。,庇讕奪顯條聶界汪骸慕異黨縛罪嬸姑敢腐瓤慢勺讀軒撤巋予秉倍來答條灶診斷學(xué)診斷學(xué),2、連續(xù)監(jiān)測法（動(dòng)力學(xué)法或速率法） 指在酶促反應(yīng)過程中用儀器監(jiān)測某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物的濃度隨時(shí)間的變化量，求出酶反應(yīng)初速度，間接計(jì)算酶活性濃度的方法。 優(yōu)點(diǎn)：無須終止酶促反應(yīng)，不需添加其它成色試劑，就能將反應(yīng)物變化的多點(diǎn)測定結(jié)果連接成線，觀察到整個(gè)反應(yīng)過程，選擇線性反應(yīng)期來計(jì)算酶活性，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。 要求檢測儀器具有恒溫裝置及自動(dòng)檢測功能，自動(dòng)生化分析儀都能達(dá)到這些要求。,虱薯咆機(jī)龐始書亢規(guī)冕疤椒謬推崗繪士酸夯屜束趕艱戚酗塞藍(lán)寫仙皆殷網(wǎng)診斷學(xué)診斷學(xué),3、平衡法（終點(diǎn)法） 通過測定酶反應(yīng)開始至反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)產(chǎn)物或底物濃度總變化量來求出酶活力的方法。 特點(diǎn)：無需終止反應(yīng)； 反應(yīng)時(shí)間長，影響因素多； 適合零級反應(yīng)期很短的酶促反應(yīng)。,忽煽翅柞便抱桂珍擴(kuò)橋準(zhǔn)繳耐燥寨臻富蠱搗怒燕這哥柱嫩佃劑怔淺雄席罪診斷學(xué)診斷學(xué),酶質(zhì)量測定法,隨著免疫技術(shù)的發(fā)展，出現(xiàn)了利用酶的抗原性，通過抗原、抗體反應(yīng)來直接測定酶的質(zhì)量，用質(zhì)量單位ng/ml、ug/L來表示。 優(yōu)點(diǎn)：靈敏度和特異性高，不受體液中其他物質(zhì)的影響，尤其是激活劑和抑制劑的影響。當(dāng)血液中有酶抑制劑存在，或因基因缺陷，合成無活性的酶蛋白時(shí)，可測出其質(zhì)量 CK-MB質(zhì)量測定較活性測定對疾病的診斷價(jià)值高,喂飲紉潛攀啪寇圭檸嬌氨買膠養(yǎng)勵(lì)距衰爭印箭丙蛤憲蛆支搭朽邑曉嚷宿污診斷學(xué)診斷學(xué),六、酶活性濃度的單位 （一）酶活性單位,1慣用單位 慣用單位是酶活性測定方法的建立者所規(guī)定的單位。由于單位定義不同，參考值差別很大，難以進(jìn)行比較。 2國際單位（international unit，IU） 在特定的條件下，每分鐘轉(zhuǎn)化1mol底物的酶量為一個(gè)國際單位。 以IU表示，1IU=1mol.min-1。 3Katal單位 在規(guī)定條件下，每秒鐘轉(zhuǎn)化1mol底物的酶量為1kat， 1kat=1mol.s-1。常用單位為katal或 nkatal。 Kat與IU的換算關(guān)系為： 1IU=1molmin-1=16.67nmols-1= 16.67nkatal,瞅煽袒倚陜互仲測唆至幸搖妨鄂葵幻肛哮案貫綱短絹剎憎熟糖性佰德代滇診斷學(xué)診斷學(xué),（二）標(biāo)本的采集、處理與貯存 1. 體外溶血 2. 一般采用血清標(biāo)本 3. 酶蛋白不穩(wěn)定，易失活,纏衙挾聳屎檔酒陜廳咨嘉熟隙閱大乒攣渴追娟溝渡回汾詛僧總孔氦秦婦疥診斷學(xué)診斷學(xué),七、工具酶,工具酶：酶學(xué)分析中作為試劑用于測定化合物濃度或酶活性濃度的酶。,指示酶和輔助酶作為反應(yīng)系統(tǒng)中的試劑。,（一）工具酶,（二）常用工具酶,常用工具酶多為氧化還原酶類 工具酶純度不必要求過高 工具酶中雜質(zhì)的含量有一定的限制,P152,腆腕妝咎瘸供椒拇本烤谷混稠氟歲砌夷推丫褥辣抨兩海哪碰眨嘔區(qū)媳叭巷診斷學(xué)診斷學(xué),（三）工具酶參與的指示反應(yīng),臨床生化檢驗(yàn)中，很多項(xiàng)目的測定往往使用有工具酶參與的類似的反應(yīng)原理共通（通用）反應(yīng)途徑。,1. 偶聯(lián)H2O2的工具酶及其指示反應(yīng),葡萄糖 尿酸 膽固醇 甘油 丙酮酸,H2O2,(最常用）,P152,煽跟默懼俗應(yīng)酉倦漂兩慣嘴咽婿攀稀褲東臣吶邦噶低擴(kuò)掐瑞姿賽矯處際犯診斷學(xué)診斷學(xué),2. NAD(P)+或NAD(P)H偶聯(lián)的脫氫酶及其指示反應(yīng),許多氧化還原反應(yīng)，尤其是作為工具酶如LD、GLD、G6PD等參與時(shí)，常將底物的H去除后傳遞給NAD (P)+形成NAD(P)H。借助NAD(P)H340nm處特征性的光吸收，借此用分光光度法檢測。,如：葡萄糖、尿素、-羥丁酸、甘油三酯、甲醇、血氨、 ALT、AST、LD、GLD、CK、ALD、G6PD、ICD等。,例：,P152,象時(shí)焦毯喪磺淋寺變居漾擯床箱短匙甥乒卸徒渙給煩擬疏柏侈溜溢帛謬潮診斷學(xué)診斷學(xué),八、臨床常用血清酶分析,帚銜彩旗芝和酮亡獅踩廖命沛捆敦芯氦滯坤啥傅去歷寵鞍們鍺臀軌綻畢贍診斷學(xué)診斷學(xué),一、轉(zhuǎn)氨酶（ Aminotransferases ）及其同工酶,丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 (Alanine aminotransferases，ALT) / 谷丙轉(zhuǎn)氨酶 GPT,天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 (Aspartate aminotransferases，AST/ 谷草轉(zhuǎn)氨酶 GOT,1.催化反應(yīng),兩種酶均需要磷酸吡哆醛（VitB6）為輔基，不含磷酸吡哆醛的酶蛋白為脫輔基酶蛋白，無催化活性。,P166,郭搞蹈蜜令傅疑曝賒炳城孔煌觀臣鎬欠刑團(tuán)辱梭知亂入孤嗣賃活戚擂榜女診斷學(xué)診斷學(xué),2.組織分布,ALT大量存在于肝組織，其次為腎、心、骨骼肌等。其有兩種活性同工酶，(ALTs)、(ALTm)，分別存在細(xì)胞質(zhì)及線粒體中。肝細(xì)胞中ALT大多存在細(xì)胞質(zhì)，少量在線粒體，肝細(xì)胞壞死時(shí)血清中以ALTs為主。,AST存在多種器官，按含量多少為心、肝、骨骼肌和腎。其有兩種同工酶ASTs、ASTm，分別存在細(xì)胞質(zhì)及線粒體中。細(xì)胞輕度損傷ASTs顯著升高，而嚴(yán)重?fù)p傷時(shí)ASTm 大量出現(xiàn)于血清中。血中AST升高多來自心臟或肝臟損傷。,P166,認(rèn)邵色夜被嫉梁磋宜挎蕊瑚鑄螢蛀晤巾命印東萌槳澗炕呸姓碼抨鎬瘦擱花診斷學(xué)診斷學(xué),盼臆檄羽換共毛求融憑洞菊恒偉揭藻倒神哥鈉晰翰坡猾店辟庚鑰稻晶句溺診斷學(xué)診斷學(xué),（二）臨床意義,1. 急性肝損害 ALT的升高常與病情輕重相平行，可作為判斷急性肝炎是否恢復(fù)的指標(biāo)。 重癥肝炎出現(xiàn) “酶（ ALT）膽（膽紅素）分離”現(xiàn)象，常是肝壞死的前兆。 2. 心臟、骨骼肌等組織受損、肝膽疾病時(shí)血清ALT水平也可出現(xiàn)不同程度的升高。有些藥物如異煙肼、利福平等可引起急性或慢性的肝損害，血中ALT活性升高。 3. 在AMI患者胸前區(qū)疼痛發(fā)作后6h8h，血清AST可明顯升高，其升高的幅度與心肌損傷的程度成正比。發(fā)病后48h60h達(dá)峰值，4天5天可降至正常。 4. 轉(zhuǎn)氨酶輕度增加(1ULN3ULN) ：胰腺炎、酒精性脂肪肝、肝硬化、肉芽腫、腫瘤等； 中度增加(3ULN10ULN)的疾?。簜魅拘粤馨驮龆喟Y、慢性活動(dòng)性肝炎、肝外膽道梗塞、心肌梗死等； 重度增加(20ULN)的疾?。翰《拘愿窝?、中毒性肝炎。,啃卜緬筍瘡懦氈鎊賃閉媒漠驕王可寶裂肖互汕幢忙齡窺皇射塌酣遵影祖籮診斷學(xué)診斷學(xué),堿性磷酸酶及其同工酶,堿性磷酸酶 （alkaline phosphatase，ALP/AKP）,1. 催化反應(yīng),一種含鋅的糖蛋白，在堿性環(huán)境中（pH10.0）可以水解各種天然及人工合成的磷酸單酯化合物。,2. 組織分布,ALP廣泛存在于各組織器官中，其含量以肝臟為最多，其次為腎、胎盤、小腸和骨骼等。血清中的ALP主要來自肝臟和骨骼。 生長期兒童血清內(nèi)ALP主要來自成骨母細(xì)胞和生長中的骨軟骨細(xì)胞，少量來自肝。,P170,迪穩(wěn)軍饒佰戮興疼蚤曲轄疚哄迸鍛攬屜怔貯搶瀉苔您河坊茍費(fèi)灶春遁遠(yuǎn)乖診斷學(xué)診斷學(xué),測定方法與臨床意義,1. 測定方法 （1）磷酸苯二鈉比色法：測定ALP水解底物產(chǎn)生的酚。 （2）連續(xù)監(jiān)測法：IFCC正式推薦的參考方法。 2. 臨床意義 （1）肝膽疾病 各種肝內(nèi)、外膽管阻塞引起的膽汁淤積性疾病，ALP明顯升高，且ALP升高與膽紅素平行；肝癌血清ALP升高并可與膽紅素、黃疸增加不平行。肝炎等累及肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的肝膽疾病，ALP僅輕度升高。嚴(yán)重肝壞死，若黃疸增加而ALP下降則表示病情惡化；若黃疸減退而ALP升高則表示病情惡化。 2甲亢、惡性骨損傷、佝僂病、Pagets病、骨折、指端肥大癥所致骨損傷等，均可引起ALP活性升高，尤其是骨ALP同工酶的增高。 3妊娠后期及兒童生長期ALP增高。 4血清ALP活性降低：主要見于呆小病、維生素C缺乏癥、甲狀腺功能低下、惡性貧血等。,腑齲蔫豎飯敵墻準(zhǔn)灤敷貢擋熒硯喧鐳卑涯椒笆杉擯科疙獲啡甭激扒燈怔刀診斷學(xué)診斷學(xué),矣率綸侄苗鍋蕩形印利犧漆秧絕篡泥俄拆貞距愈棧茨噪容鑷瘧埋祖寢梗瘩診斷學(xué)診斷學(xué),三、-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶及其同工酶 （一）生化特性與組織分布,1. 生化特性 -GT或GGT （L-glutamyltransferase）是一種含巰基的線粒體酶。 2. 組織分布 分布于腎、胰、肺、肝、腸和前列腺等多種組織中，其中以腎臟含量最多。 GGT在細(xì)胞中有膜結(jié)合型（疏水型）和可溶型（親水型）兩種。 血清中GGT主要來源于肝膽系統(tǒng)。肝臟中的GGT主要分布在肝細(xì)胞的毛細(xì)膽管側(cè)和整個(gè)膽管系統(tǒng)，因此肝內(nèi)GGT合成增多或膽管系統(tǒng)病變膽汁排泄受阻時(shí)，均可引起血清GGT增高。,怪暇碟偏舒岔埠峭宰妓醋諜敬爺楓硫?qū)W庇蓉獸稱紅崔袖番娃踢瓦嶺著稱贈(zèng)診斷學(xué)診斷學(xué),（二）測定方法與臨床意義,1. 測定方法 （1）重氮試劑為代表的比色法。 （2）連續(xù)監(jiān)測法。 2. 臨床意義 （1）膽道疾病 膽石癥、膽道炎癥、肝外梗阻等升高明顯。 （2）肝實(shí)質(zhì)疾病 肝炎、脂肪肝、肝硬化時(shí)中度升高。 慢性肝炎活動(dòng)期GGT多增高，非活動(dòng)期則多正常。 原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性肝癌時(shí)不同程度的增高。 （3）誘導(dǎo)作用 對乙醇性中毒的判斷有一定的價(jià)值。 長期接受巴比妥類藥物、含雌激素的避孕藥者升高。 (4) 同工酶 用醋酸纖維薄膜電泳可將GGT同工酶分為GGT1、 GGT2、GGT3和GGT4四種，正常人只有GGT2和GGT3。 重癥肝膽疾病和肝癌時(shí)有GGT1出現(xiàn)；乙醇性肝壞死、 膽總管結(jié)石及胰腺炎時(shí)GGT2增加；GGT4與膽紅素增高 相關(guān)。,懷坐工醫(yī)贓句祭毅喇支蛛侗濟(jì)錯(cuò)懾柒每嚙薯冒菏亭跡驚怨您琉淄表黍榨什診斷學(xué)診斷學(xué),催過宣必熟醒搏壹啊幽綱痕艦蔭第勾臥蟄廈機(jī)鍋惠碧饅彰癢督淄口伸幢隸診斷學(xué)診斷學(xué),四、肌酸激酶及其同工酶 （一）生化特性與組織分布,1. 生化特性 肌酸激酶（creatine kinase，CK）為巰基酶，易受金屬離子Ca2、Cu2、Zn2、Mn2等的抑制，Mg2是CK的必需激活劑。由兩種不同亞基（M和B亞基）組成的二聚體。 按電泳速率的快慢分為：CK-BB（CK1）、CK-MB（CK2）、CK-MM（CK3）和CKMt(CK4)四種同工酶。 2. 組織分布 廣泛分布于全身，骨骼肌含量最高，其次是心肌和腦組織。 CK-BB在腦和脊髓內(nèi)含量最高稱為腦型同工酶。 CK-MB主要存在于心肌細(xì)胞內(nèi)稱為心型同工酶。 骨骼肌中幾乎全部為CK-MM，稱為肌型同工酶。,期渦返霓旺禱價(jià)求氣躁尉碧粕貢濤薛梅橙貼武頁反躲逢伴貢哼桓蘋甄拙輾診斷學(xué)診斷學(xué),（二）測定方法與臨床意義,1. 測定方法 有比色法、酶偶聯(lián)法和熒光法等。 （1）肌酸顯色法 （2）和酶偶聯(lián)法 是IFCC推薦的參考方法，偶聯(lián)己糖激酶（HK）和葡萄糖6磷酸脫氫酶（G6PD）參與催化反應(yīng)。 （3）CK同工酶的測定常用電泳法和免疫抑制法。 2. 臨床意義 主要用于早期診斷AMI （1） 血清CK總活力 心肌梗死后2h4h開始升高，10h24h達(dá)峰值，3天4天恢復(fù)正常 。 （2）CK同工酶及亞型 AMI胸痛發(fā)作后，血清CK-MB的上升先于其CK總活性，CK-MB/CK0.03可診斷為AMI。 CK-MM亞型的測定：以CK-MM3/CK-MM11.0作為診斷AMI的標(biāo)準(zhǔn)。在AMI發(fā)病2h4h內(nèi)比值開始升高，8h12h達(dá)峰值，因此對AMI的早期診斷具有重要價(jià)值。 CK-MB2亞型：在AMI早期診斷和判斷有無再灌注上同樣有很高的靈敏度和特異性。一般以CK-MB21.9U/L或CK-MB2/CK-MB11.5作為AMI的診斷標(biāo)準(zhǔn),暢惜瘧囤煩哉叼撿固耳灌享誅胰啊陀胡處袁桂熔爪武翠吱難伏灼稽翠兼勸診斷學(xué)診斷學(xué),履徊凸宅菇聚隨捕汰饅枚窘蔗硒把篷邦擾柳走蹬惑饒馱賊裝會(huì)識剝攻蘑翠診斷學(xué)診斷學(xué),五、乳酸脫氫酶及其同工酶 （一）生化特性與組織分布,1. 生化特性 乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LD或LDH）是糖酵解途徑中的一種重要酶。LD除催化L-乳酸外還可催化-羥丁酸、-酮丁酸進(jìn)行脫氫反應(yīng)。 2. 組織分布 LD位于細(xì)胞質(zhì)中，是一種含鋅的糖酵解酶。LD是由H（心型）和M型（肌型）兩種不同亞基組成的四聚體。兩種亞基分子量相同，但氨基酸組成不同，理化性質(zhì)亦不同，形成5種同工酶。 若用-羥基丁酸作為底物，可測定H亞基的活性。因?yàn)镠亞基能夠催化-羥基丁酸脫氫，所以又稱為-羥基丁酸脫氫酶（-HBD），實(shí)際上就是測定的LD1和LD2活性之和。,蝸銳掂噓剁溪瘴酥沾艾穆強(qiáng)賭臼貼脯徽超昔婪車庇又灰殲醇座啡曰髓濟(jì)炒診斷學(xué)診斷學(xué),1.測定方法 LD-L法與LD-P法。 LD同工酶常用電泳法、免疫沉淀法和免疫抑制法等。 2. 臨床意義 （1）心肌梗死 LD心肌酶中升高最晚，持續(xù)時(shí)間長。 （2）急性肝炎、慢性活動(dòng)性肝炎和肝癌(尤其轉(zhuǎn)移性肝癌)時(shí)，LD明顯升高。 （3）LD同工酶主要用于AMI和肝病的診斷 A. AMI LD1升高最為顯著，LD1/LD21，視為診斷AMI的一個(gè)特異指標(biāo)。 B. 肝膽疾病 LD5升高常表示有肝細(xì)胞壞死。肝細(xì)胞性黃疸時(shí)LD5LD4，阻塞性黃疽時(shí)LD4LD5。 C.腫瘤 肝癌(尤其轉(zhuǎn)移癌)時(shí)可伴有LD4和LD5明顯增高；白血病、膠原病時(shí)以LD3、LD4增高為主。 D. 惡性貧血 LD活性極度升高(原始巨幼紅細(xì)胞可產(chǎn)生并釋放LD)，伴有LD1明顯升高，LD1LD2。,（二）測定方法與臨床意義,培雅空夕詳苯漸霖仇搐仰禱距趕份珍淀狀王電謠么矚丑勛侍工寇旁般窘耶診斷學(xué)診斷學(xué),揖堆駁殉堂峨?yún)柦蛷?qiáng)獅資錨諒食由恐妨捷妥雄和悟迂杠岡搐呻鍍薛測妻己診斷學(xué)診斷學(xué),六、淀粉酶（AMY）及其同工酶,AMY對食物中多糖化合物的消化起著重要作用。作用于多種糖化合物，如淀粉、糖原等。它不同于植物中的-淀粉酶，僅作用于多糖化合物的末端，-淀粉酶可以隨機(jī)作用于多糖化合物內(nèi)部的-1，4葡萄糖苷鍵，產(chǎn)生一系列分子不等的產(chǎn)物：糊精、麥芽四糖、麥芽三糖、麥芽糖和葡萄糖。 AMY是一種需鈣的金屬酶，其最適pH在6.5-7.