exp13細(xì)菌紫外線和營養(yǎng)缺陷性突變株的篩選.ppt

實(shí)驗(yàn)一 顯微鏡油鏡的使用和細(xì)菌形態(tài)的觀察,目的要求 顯微鏡油鏡使用的原理 實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)程序 思考題,目 的 要 求,學(xué)習(xí)并掌握顯微鏡油鏡的使用技術(shù)及維護(hù)的基本知識 使用油鏡觀察細(xì)菌的幾種基本形態(tài) 用懸滴法在高倍鏡或油鏡下觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng),顯微鏡油鏡使用的原理,普通光學(xué)顯微鏡 歐林巴斯（OLYMPUS）生物顯微鏡 歐林巴斯（OLYMPUS）相差顯微鏡,普通光學(xué)顯微鏡,顯微鏡的構(gòu)造 1.光學(xué)部分:接目鏡 、 接物鏡 、 照明裝置(聚光鏡、 虹彩光圈、 反光鏡等). 它使檢視物放大,造成物象. 2.機(jī)械部分:鏡座、鏡臂、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺、載物臺轉(zhuǎn)移器、粗調(diào)節(jié)器、細(xì)調(diào)節(jié)器等部件.它起著支持 調(diào)節(jié) 固定等作用.,普通光學(xué)顯微鏡,顯微鏡的放大倍數(shù)和分辨率 1.放大倍數(shù)=接物鏡放大倍數(shù)接目鏡放大倍數(shù) 2. 顯微鏡的分辨率 是表示顯微鏡辨析物體（兩端）兩點(diǎn)之間距離的能力，可用公式表示為： D=/2nsin(/2 ) 式中D：物鏡分辨出物體兩點(diǎn)間的最短距離。 ：可見光的波長（平均0.55m) n: 物鏡和被檢標(biāo)本間介質(zhì)的折射率。 ：鏡口角（即入射角）。,普通光學(xué)顯微鏡,油鏡使用的原理 油鏡，即油浸接物鏡。當(dāng)光線由反光鏡通過玻片與鏡頭之間的空氣時(shí)，由于空氣與玻片的密度不同，使光線受到曲折，發(fā)生散射，降低了視野的照明度。若中間的介質(zhì)是一層油（其折射率與玻片的相近），則幾乎不發(fā)生折射，增加了視野的進(jìn)光量，從而使物象更加清晰。,實(shí) 驗(yàn) 材 料,顯微鏡（顯微鏡燈）、香柏油、二甲苯、擦鏡紙、吸水紙等。 細(xì)菌三種形態(tài)的染色標(biāo)本。 培養(yǎng)1218h的枯草桿菌（B.subtilis) 蓋玻片、凹玻片、接種環(huán)、酒精燈。,實(shí)驗(yàn)程序（顯微鏡的使用）,主要是油鏡的使用 1.用前檢查：零件是否齊全，鏡頭是否清潔。 2.調(diào)節(jié)光亮度 3.低倍鏡觀察：粗調(diào)、細(xì)調(diào) 4.依次再進(jìn)行中倍、高倍觀察 5.油鏡觀察：高倍鏡下找到清晰的物象后，提升聚光鏡，在標(biāo)本中央滴一滴香柏油，使油鏡鏡頭浸入香柏油中，細(xì)調(diào)至看清物象為止。 6.換片：另換新片，必須從第三條開始操作。 7.用后復(fù)原：觀察完畢，上懸鏡筒，先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油，然后再用擦鏡紙沾取少量二甲苯擦去殘留的油，最后用擦鏡紙擦去殘留的二甲苯，后將鏡體全部復(fù)原。,實(shí)驗(yàn)程序（顯微鏡的使用）,顯微鏡保養(yǎng)和使用中的注意事項(xiàng)： 1.不準(zhǔn)擅自拆卸顯微鏡的任何部件,以免損壞。 2.鏡面只能用擦鏡紙擦，不能用手指或粗布，以保證光潔度 3.觀察標(biāo)本時(shí)，必須依次用低、中、高倍鏡，最后用油鏡。當(dāng)目視接目鏡時(shí)，特別在使用油鏡時(shí)，切不可使用粗調(diào)節(jié)器，以免壓碎玻片或損傷鏡面。 4.觀察時(shí)，兩眼睜開，養(yǎng)成兩眼能夠輪換觀察的習(xí)慣，以免眼睛疲勞，并且能夠在左眼觀察時(shí)，右眼注視繪圖。 5.拿顯微鏡時(shí)，一定要右手拿鏡臂，左手托鏡座，不可單手拿，更不可傾斜拿。 6.顯微鏡應(yīng)存放在陰涼干燥處，以免鏡片滋生霉菌而腐蝕鏡片。,實(shí)驗(yàn)程序III,細(xì)菌三種基本形態(tài)的觀察： 菌落形態(tài)觀察和個(gè)體形態(tài)觀察，這里主要指個(gè)體形態(tài)的觀察。 1. 結(jié)合油鏡的使用，觀察三張細(xì)菌染色片（球狀菌、桿狀菌、和螺旋狀菌），邊觀察邊繪圖。 2. 看示范鏡：觀察雙球菌、四聯(lián)球菌，并繪圖。,實(shí)驗(yàn)程序,細(xì)菌運(yùn)動(dòng)性的觀察（示范）： 一般采用水浸片法、懸滴法、半固體培養(yǎng)法，常用水浸法和懸滴法來觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性。 1. 水浸片法 2. 懸滴法,歐林巴斯（OLYMPUS）生物顯微鏡,OLYMPUS生物顯微鏡是由日本進(jìn)口的一種雙筒光學(xué)顯微鏡，它使用方便，分辨率高，并且有立體感。是目前研究微生物的良好工具。 顯微鏡的結(jié)構(gòu),錄像演示,歐林巴斯（OLYMPUS）生物顯微鏡 （顯微鏡的使用方法 ）,1. 接通電源。 2. 打開主開關(guān)。 3. 移動(dòng)電壓調(diào)整旋，使亮度適中。 4. 把標(biāo)本固定在再物臺上。 5. 放松粗調(diào)鎖擋。 6. 用低倍物鏡，旋轉(zhuǎn)粗調(diào)和微控制鈕來進(jìn)行對焦。 7. 調(diào)節(jié)雙目鏡筒間距和視度差。 8. 再適當(dāng)調(diào)節(jié)照明度。 9. 使焦點(diǎn)正確地對準(zhǔn)標(biāo)本。,10. 鎖緊粗調(diào)鎖擋。 11. 調(diào)節(jié)孔徑光欄。 12. 依次用低、中、高倍鏡觀察。 13. 油鏡觀察：與普通光學(xué)顯微鏡方法一致。 14. 觀察完畢，復(fù)原：先將電壓調(diào)節(jié)旋鈕復(fù)原，關(guān)閉主開關(guān)，切斷電源，放開粗調(diào)鎖擋。油鏡的處理與普通光學(xué)顯微鏡方法一致。 15. 放入保存箱中。,歐林巴斯（OLYMPUS）相差顯微鏡,相差顯微鏡的工作原理 相差顯微鏡具有一個(gè)特殊的由環(huán)狀光圈與聚光鏡組合的轉(zhuǎn)盤聚光鏡，通過這個(gè)特殊的裝置，就可把光波的相位差異變?yōu)檎穹町悾瑥亩谷藗內(nèi)庋奂茨苡^察到活細(xì)胞的細(xì)微結(jié)構(gòu)，并有立體感。常用來觀察活細(xì)胞結(jié)構(gòu)，鞭毛的運(yùn)動(dòng)等。,相差顯微鏡的裝置 1. 環(huán)狀光圈 2. 相差物鏡（具有環(huán)狀相板） 3. 定中心望遠(yuǎn)鏡（亦稱輔助目鏡） 4. 輔助固定扳手 5. 綠色濾光片,歐林巴斯（OLYMPUS）相差顯微鏡,相差顯微鏡的使用方法 1. 相差裝置的安裝 ：轉(zhuǎn)盤聚光鏡 綠色濾光片 2. 相差物鏡的安裝 3. 安放標(biāo)本 4. 對光 5. 調(diào)焦：用粗調(diào)控制鈕和微調(diào)控制鈕調(diào)節(jié)焦，看清物象時(shí)為止 6. 旋轉(zhuǎn)相差轉(zhuǎn)盤