《獸醫(yī)免疫學(xué)》PPT課件.ppt

獸醫(yī)免疫學(xué) 多媒體教學(xué)提綱 黃青云 編 2005.9,2,課程特點(diǎn)： 1.重要專業(yè)基礎(chǔ)課 2.系統(tǒng)性強(qiáng) 3.理論性強(qiáng) 4.技術(shù)性強(qiáng) 5.內(nèi)容豐富、發(fā)展迅速,3,學(xué)習(xí)目的,學(xué)好免疫學(xué)基本理論知識、實驗技術(shù) 為動物疾病，尤其傳染病的: 1. 免疫學(xué)預(yù)防 2. 免疫學(xué)診斷 3. 免疫學(xué)治療 打好基礎(chǔ)。,4,學(xué)習(xí)方法：,為掌握知識、技術(shù)而學(xué) 認(rèn)真聽課，及時復(fù)習(xí) 認(rèn)真實驗、實習(xí)，及時做好實驗、實習(xí)報告，有問題及時向老師提問。,5,第一章 緒論,第一節(jié) 免疫的概念 免疫（immune）是指人和動物機(jī)體免疫系統(tǒng)特異識別、清除體內(nèi)抗原(Antigen)的生理功能。 有利方面： 防止病原微生物感染 防止腫瘤發(fā)生 不利方面：一定條件下引起 變態(tài)（超敏）反應(yīng) 自身免疫病 免疫耐受,6,第二節(jié).免疫學(xué)發(fā)展簡史,一. 免疫學(xué)是人類在與傳染病的病原微生物作斗爭的過程中建立和發(fā)展起來的。免疫學(xué)與醫(yī)學(xué)微生物學(xué)、獸醫(yī)微生物學(xué)、傳染病學(xué)有不可分割的聯(lián)系。 二. 免疫學(xué)于18世紀(jì)末開始，至今經(jīng)歷了三個發(fā)展階段,7,免疫實踐、免疫學(xué)形成階段（16世紀(jì)18世紀(jì)末）,16世紀(jì)（明朝）中國醫(yī)生首先實踐用人痘痂皮接種青少年預(yù)防天花,8,17世紀(jì)推廣 18世紀(jì)傳到亞洲、歐洲各國 18世紀(jì)末，英國醫(yī)生Jenner首次發(fā)明牛痘預(yù)防天花。,9,免疫學(xué)誕生: Vaccine(牛痘)定為“疫苗” Vaccination（種痘）定為“免疫接種”,10,免疫學(xué)實驗研究階段（19世紀(jì)末20世紀(jì)中）,實驗室發(fā)明人工培育疫苗 Pasteur（法） 微生物學(xué)、免疫學(xué)創(chuàng)始人 1880年 雞霍亂（巴氏桿菌）弱毒菌苗 1882年 狂犬病病毒弱毒疫苗,11,疫苗免疫機(jī)理研究 細(xì)胞免疫學(xué)說（1890） Metchnikoff（俄1883）首次發(fā)現(xiàn)吞噬細(xì)胞的吞噬作用，疫苗免疫后提高吞噬細(xì)胞吞噬特異抗原，發(fā)揮預(yù)防作用，提出“細(xì)胞免疫學(xué)說” 體液免疫學(xué)說（1897） Behring(德1890)、北里（日本）首次發(fā)現(xiàn)白喉抗毒素（血清抗體） 1891年首次用抗毒素血清治好白喉病人 抗體、抗原概念、血清學(xué)試驗形成 Erlich（德 1897）提出“體液免疫學(xué)說”：疫苗免疫后產(chǎn)生抗體，在體液中發(fā)揮預(yù)防作用,12,兩種學(xué)說爭論了70年，促進(jìn)了免疫學(xué)的發(fā)展 發(fā)現(xiàn)變態(tài)反應(yīng) 提出各種抗體產(chǎn)生理論（學(xué)說） 發(fā)現(xiàn)免疫耐受現(xiàn)象 1963年Wright,Deuglas發(fā)現(xiàn)調(diào)理素 兩種學(xué)說得以統(tǒng)一認(rèn)識,13,現(xiàn)代細(xì)胞、分子免疫學(xué)研究發(fā)展階段（20世紀(jì)中期以來）,免疫概念從傳統(tǒng)概念發(fā)展為現(xiàn)代概念 傳統(tǒng)概念防御感染；有利 現(xiàn)代概念識別排除抗原；既有利也有不利 現(xiàn)代免疫學(xué)完全從微生物學(xué)中獨(dú)立出來 理論和技術(shù)在細(xì)胞和分子水平上飛躍發(fā)展 免疫學(xué)研究中有20多位學(xué)者的研究獲諾貝爾獎,14,第三節(jié).免疫學(xué)及其分支學(xué)科,一.免疫學(xué) 二.免疫學(xué)的分支學(xué)科 基礎(chǔ)免疫學(xué)：免疫學(xué)，免疫遺傳學(xué)，細(xì)胞、分子免疫學(xué)，分子免疫學(xué)，免疫學(xué)原理，免疫生物學(xué)，免疫生理學(xué)，免疫病理學(xué)，免疫藥理學(xué)等 應(yīng)用免疫學(xué)：醫(yī)學(xué)免疫學(xué)，臨床免疫學(xué)，移植免疫學(xué)，血液免疫學(xué)，腫瘤免疫學(xué)，繁殖免疫學(xué)，獸醫(yī)免疫學(xué)，家禽免疫學(xué)等,15,第四節(jié).獸醫(yī)免疫學(xué) （50學(xué)時）,基礎(chǔ)理論（35學(xué)時）： 免疫系統(tǒng)、抗原、免疫應(yīng)答、抗感染免疫、變態(tài)反應(yīng)、常用免疫學(xué)檢測技術(shù)、免疫學(xué)在獸醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用 常用實驗（15學(xué)時）： 目前檢驗、檢疫最常用的78項實驗（分5次做） 綜合實習(xí)（半周）： 動物防疫、檢驗、檢疫實習(xí),16,第二章 免疫系統(tǒng) （Immune system）,機(jī)體內(nèi)參與對抗原的免疫應(yīng)答，執(zhí)行免疫功能的一系列器官、細(xì)胞和分子。,17,18,第一節(jié) 免疫器官,豬免疫器官示意圖,19,雞免疫器官示意圖,20,一中樞免疫器官 免疫細(xì)胞產(chǎn)生或成熟的器官,（一） 骨髓（bone marrow） 長骨髓 源生各種免疫細(xì)胞。 哺乳動物B細(xì)胞成熟，直接進(jìn)行免疫應(yīng)答， 產(chǎn)生大量 抗體，約占40%。 （二） 胸腺（thymus） 誘導(dǎo)淋巴干細(xì)胞成熟為T細(xì)胞 （三） 禽法氏囊（bursa of fabricius） 誘導(dǎo)淋巴干細(xì)胞成熟為B細(xì)胞,21,免疫細(xì)胞誘生示意圖,22,二外周免疫器官 免疫細(xì)胞分布及進(jìn)行免疫應(yīng)答的器官,（一）淋巴結(jié)（lymphnode） （見下圖） 結(jié)構(gòu)：皮質(zhì)區(qū)：B細(xì)胞25%，生發(fā)中心 副皮質(zhì)區(qū)：T細(xì)胞75%，樹突狀細(xì)胞（DC） 髓質(zhì)區(qū)：巨噬細(xì)胞(M)、漿細(xì)胞 豬的淋巴結(jié)相反。雞無淋巴結(jié)，水禽頸、腹腰兩對 作用：肌肉，皮下注射的抗原從淋巴到達(dá)淋巴結(jié)進(jìn)行 免疫應(yīng)答,23,24,（二）脾臟(spleen) 白髓 淋巴鞘T細(xì)胞25% 脾小結(jié)B細(xì)胞65% 紅髓 巨噬細(xì)胞(M)、樹突狀細(xì)胞(DC) 作用 對來自血液的抗原進(jìn)行免疫應(yīng)答，主要 產(chǎn)生抗體,25,26,（三）粘膜免疫系統(tǒng)（membrane immune system，MIS） 呼吸道 消化道 泌尿生殖道 腺體分泌管 特點(diǎn)與作用：對粘膜表面侵入的病原微生物抗 原進(jìn)行正確識別和迅速的免疫應(yīng)答，大量產(chǎn)生分泌性抗體IgA，分布在粘膜表面起粘膜局部免疫保護(hù)作用,黏膜下分布大量免疫細(xì)胞：T、B、M、DC，與淋巴結(jié)、脾臟等分布的免疫細(xì)胞相對分隔開，自成一個粘膜免疫系統(tǒng),27,（四） 禽哈德氏腺 （Harder gland）,分布T細(xì)胞、B細(xì)胞 雞新城疫系苗滴眼免疫起重要作用,28,第二節(jié) 免疫細(xì)胞,一淋巴細(xì)胞（lymphocyte） T、B、NK細(xì)胞：來源、分布、特征（重要表面標(biāo)志）、亞類及功能。 （一）T細(xì)胞 （Thymus dependent lymphocyte , T） 1. 來源、分布：胸腺 副皮質(zhì)區(qū)、白髓、粘膜下，大量進(jìn)行淋巴細(xì)胞再循環(huán)。 (請看下圖),29,30,2.T細(xì)胞表面標(biāo)志 (1)T細(xì)胞抗原受體(T cell recepter,TCR) 組成：、二條肽鏈（圖） 多樣性：一個個體約有1015克隆（株）Tc，每個克隆T細(xì)胞的TCR都不同，各識別一種抗原。 多樣性產(chǎn)生機(jī)制（表） 作用：識別結(jié)合抗原，引起T細(xì)胞的免疫應(yīng)答。,31,TCR組成、作用示意圖,32,33,34,35,基因水平上TCR多樣性產(chǎn)生的機(jī)制 TCR 胚系基因片段組合 V 50 57 D 2 J 70 13 VJ,VDJ連接多樣性 5070=3 103 57 2 13=1103 連接機(jī)動性 + + N區(qū)核苷酸插入 V-J V-D,D-J 總的多樣性 1015,多樣性機(jī)制,36,(2)紅細(xì)胞受體(Erythrocyte receptor,ER) 結(jié)構(gòu)：單鏈多肽（CD2） 分布：成熟T細(xì)胞 作用：T細(xì)胞膜上的粘附分子 人和哺乳動物的T細(xì)胞在體外，通 過CD2與綿羊紅細(xì)胞結(jié)合，進(jìn)行E玫 瑰花環(huán)試驗區(qū)分T、B細(xì)胞，檢 測T細(xì)胞數(shù)量（見下圖）,37,T細(xì)胞的E玫瑰花環(huán)試驗,38,（3）致有絲分裂原植物血凝素（PHA）、刀豆素（ConA）受體 作用：與PHA或ConA結(jié)合，刺激小的T細(xì)胞 轉(zhuǎn)化為有活性的大T細(xì)胞（淋巴母細(xì)胞）淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗。 區(qū)分T、B細(xì)胞。 檢測T細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能。,39,40,41,（4）T細(xì)胞表面抗原（標(biāo)志） 分化不同時期的T細(xì)胞，表達(dá)各種不同的蛋白質(zhì)分子出現(xiàn)在細(xì)胞膜上，稱為分化抗原（Cluster of differentiation，CD）。與免疫相關(guān)的重要CD： CD2 單鏈多肽，成熟Tc上，ER CD3 5-6鏈多肽，成熟Tc上，與TCR/CD3 傳遞抗原信息 CD4 單鏈多肽，TH上，輔助TH的TCR識 別抗原，人愛滋病毒（HIV）受體 CD8 雙鏈多肽，Tc上，輔助Tc的TCR識 別抗原 （見下圖）,42,43,3. T細(xì)胞亞群及其功能 亞群 CD表型 功能 TC CD3+ CD4- CD8+ 殺傷靶細(xì)胞，分泌IFN- TS CD3+ CD4- CD8+ 分泌TSF，抑制T、B細(xì) 胞和m的作用 TDTH（TH1 ） CD3+ CD4+ CD8- 分泌MIF，IFN-等致 遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng) TH2 CD3+ CD4+ CD8- 分泌 IL-4、IL-5等輔助B 細(xì)胞產(chǎn)生抗體,44,（二）B細(xì)胞（Bone marrow/bursa of fabricius dependent lymphocy , B）,1來源、分布：骨髓（法氏囊） 皮質(zhì)區(qū)，脾小結(jié)，粘膜下；少進(jìn)行再循環(huán),45,2B細(xì)胞的重要受體 （1）抗原受體（Surface membrane immunoglobuling，SmIg） 組成： 未成熟B細(xì)胞 SmIgM 成熟B細(xì)胞 SmIgM+SmIgD 多樣性： 每個人體內(nèi)約有107B細(xì)胞克?。ㄖ辏?，每個克隆B細(xì)胞SmIgM，SmIgD都不同，各識別結(jié)合一種抗原（每個B細(xì)胞105個SmIg） SmIg多樣性的基因水平機(jī)制與TCR相似 作用：識別結(jié)合抗原，引起B(yǎng)細(xì)胞的免疫應(yīng)答,46,47,(2) Fc受體 B細(xì)胞膜上的糖蛋白 能與抗體Fc段結(jié)合 （3）C3b受體（CD35） B細(xì)胞膜上的另一種蛋白 能與補(bǔ)體C3b結(jié)合(圖),48,B,E,E,E,E,E,E,EA玫瑰花環(huán)示意圖,B,E,E,E,E,E,E,EAC玫瑰花環(huán)示意圖,FcR,Fc,C3bR,C3b,49,50,2. B細(xì)胞亞群及功能 B1 、B2 亞群特性及特性表 特性 B1（CD5+） B2（CD5-） 發(fā)育程度 未成熟 成熟 Sm Ig 類型 Sm IgM Sm IgM、Sm IgD IgG Fc受體 + C3b受體 + 針對的抗原 TI Ag TD Ag 產(chǎn)生的抗體 IgM IgM、IgG、IgA、IgE、IgD 再次抗體應(yīng)答 + 免疫耐受 易形成 難形成,51,(三）自然殺傷細(xì)胞(natural kill cell,NKC),骨髓 體液 1.膜表面標(biāo)志 Fc受體（CD16）：與抗體Fc結(jié)合 抑制性受體（KIR） 激活性受體（KAR） 2.作用：自然殺傷病毒感染細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞，但 不殺傷正常組織細(xì)胞。為什么？ 殺傷機(jī)理：使靶細(xì)胞凋亡及發(fā)揮抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用（ADCC）,52,53,54,55,二、單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng),單核吞噬細(xì)胞的發(fā)育與分布 骨髓 血液 組織 多能干細(xì)胞 結(jié)蹄組織：組織細(xì)胞 單 巨 肺：肺泡巨噬細(xì)胞 髓樣干細(xì)胞 核 噬 肝： Kupffer細(xì)胞 細(xì) 細(xì) 脾： 巨噬細(xì)胞 前單核細(xì)胞 胞 胞 神經(jīng)組織：小膠質(zhì)細(xì)胞 骨：破骨細(xì)胞 關(guān)節(jié)：滑膜A型細(xì)胞 胸腹腔:巨噬細(xì)胞,56,(一)單核吞噬細(xì)胞特征 膜受體：Fc受體 、 C3b受體 膜抗原：Ia- M Ia+ M （二）單核吞噬細(xì)胞的功能 （主要4個方面） 1. 分泌功能：分泌近百種活性物質(zhì) 2.吞噬消化功能monocyte， Ia M （見下表和圖）,57,單核吞噬細(xì)胞分泌的活性物質(zhì)舉例 產(chǎn)物分類 分 泌 的 活 性 物 質(zhì) 酶類 溶菌酶、蛋白質(zhì)、肽酶、糖苷酶、 磷酸酶、脂酶、血纖維蛋白溶酶原、 膠原酶、彈性蛋白酶等 血漿蛋白 凝血因子、a2巨球蛋白、補(bǔ)體成分 （C1 C2 C3 C4 C5 P因子、D因子、I因 子、H因子）等 生物活性蛋白 IL-1、IL-6、IL-8、TNF、集落刺激 因子、間葉細(xì)胞增殖因子、血管生 成因子等 低分子物質(zhì) 前列腺素E、白三烯、胸腺嘧啶核甙等,58,消耗大量O2 呼吸爆發(fā)O2n- 自由基H2O2、OH-、IO2 殺死細(xì)菌,59,3. 遞呈抗原功能Ia+M 將侵入體內(nèi)的抗原物質(zhì)傳遞給Th細(xì)胞的TCR 如何遞呈,60,4. 殺瘤作用，有時則助長腫瘤作用 M分泌蛋白水解酶、腫瘤壞死因子（TNF） 抑、殺瘤細(xì)胞 助瘤：M進(jìn)入腫瘤組織，分泌腫瘤血管因子，促進(jìn)瘤細(xì)胞生長、轉(zhuǎn)移。,61,三抗原遞呈細(xì)胞,1. 概念： 專職捕捉（攝?。┛乖?、降解抗原，向T細(xì)胞遞呈抗原的細(xì)胞 2. 種類： （1）巨噬細(xì)胞（M） （2）樹突狀細(xì)胞(DC)、郎罕氏細(xì)胞（Lc 皮膚、未成熟 DC） （3）B細(xì)胞 3. 共同特征：表達(dá)大量MHC-類分子 4. 作用：捕捉、降解、遞呈抗原，啟動免疫應(yīng)答,62,四.粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、紅細(xì)胞,1. 粒細(xì)胞 吞噬消化病原菌 有IgG Fc受體，發(fā)揮調(diào)理吞噬作用，消除抗原 堿性粒細(xì)胞有IgE Fc受體，參與過敏反應(yīng) 2. 肥大細(xì)胞 有大量IgE Fc受體，參與過敏反應(yīng) 3. 紅細(xì)胞 有C3b受體 起消除血液中抗原-抗體復(fù)合物(免疫復(fù)合物)的作用 1982年，sigel(美)提出“紅細(xì)胞免疫系統(tǒng)”,63,第二節(jié) 免疫分子,機(jī)體內(nèi)參與調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的各種蛋白分子 一免疫細(xì)胞膜上分子（4類） （一）TCR （二）BCR（SmIgM SmIgD） （三）白細(xì)胞分化抗原（CD） 機(jī)體各種細(xì)胞，分化不同群，成熟不同階段，活化不同時期出現(xiàn)于膜上的蛋白質(zhì)分子不同，以cluster of differtiation，CD命名、編號。 例如成熟T細(xì)胞都有CD2、CD3，分化成TH則有CD4，Tc有CD8 意義：以CD分子水平鑒定細(xì)胞 CD分子在細(xì)胞發(fā)揮功能時起作用,64,（四）MHC分子 什么叫MHC？主要組織相容性復(fù)合體（major histocompatibility complex , MHC） 著絲點(diǎn) MHC 人6號（HLA） 染色體 小鼠17號（H2 ） 豬7號（SLA） MHC- MHC- MHC- (C2、C4、TNF ) MHC基因結(jié)構(gòu)及表達(dá)、類分子示意圖,65,66,1 MHC-類分子 結(jié)構(gòu)：重鏈，輕鏈 分布：所有有核細(xì)胞 作用：(1) 組織相容性抗原 (2) 靶細(xì)胞的MHC-I與內(nèi)源性抗原結(jié) 合，限制Tc的TCR識別、殺傷靶 細(xì)胞,67,68,2 MHC-類分子 結(jié)構(gòu)：鏈，鏈 分布：抗原遞呈細(xì)胞 作用：與外源性抗原肽結(jié)合，控制抗原 遞呈細(xì)胞，將抗原遞呈給TH，又 稱免疫相關(guān)抗原（immuno- assodiated antigen，Ia）,69,70,71,72,73,74,75,3MHC-類分子：C2、C4、Bf、TNF等，分布于血清中，發(fā)揮作用 （五）其它膜分子，各種受體 三體液中的免疫分子 免疫球蛋白 、補(bǔ)體系統(tǒng) 、 細(xì)胞因子 (一)免疫球蛋白(Immunoglobuling，Ig) B細(xì)胞膜表面Ig (SmIgM SmIgD) B細(xì)胞受抗原作用后分泌在體液中的抗體(IgM、 IgG、 IgA 、IgE 、IgD),76,1. Ig的基本結(jié)構(gòu)（見圖示）,77,免疫球蛋白V區(qū)C區(qū)結(jié)構(gòu)域模式圖,78,2Ig的水解片段（見圖示）,79,3五類Ig的主要特性,80,81,(二)補(bǔ)體系統(tǒng)（complement system） 1補(bǔ)體系統(tǒng)的組成 30多種蛋白質(zhì)，最基本的是C1（C1q、C1r、C1s）-C9共11種蛋白 2補(bǔ)體特性 不穩(wěn)定：56OC60OC30min可滅活 平常無活性，經(jīng)過系統(tǒng)激活才起作用 協(xié)助抗體吞噬細(xì)胞等，起非特異的清除抗原，防御感染等作用,82,3. 補(bǔ)體系統(tǒng)激活（見圖示） C1途徑（傳統(tǒng)途徑） C3途徑（代替途徑） MBL途徑,83,84,85,游離于血液中,86,C1途徑（傳統(tǒng)途徑） 動畫演示,87,4.補(bǔ)體系統(tǒng)激活作用 溶菌，溶病毒囊膜 粘連清除免疫復(fù)合物 C3a、C5a的過敏毒素作用、趨化作用,88,(三)細(xì)胞因子 機(jī)體內(nèi)各種細(xì)胞分泌的調(diào)節(jié)細(xì)胞發(fā)育和功能的小分子蛋白質(zhì)（見圖示），種類很多，各有特性，也有共性 1. 共性 產(chǎn)生細(xì)胞與作用細(xì)胞多樣性 細(xì)胞受到刺激分泌快，自身作用或?qū)︵徑?xì)胞作用，降解快，刺激停止，細(xì)胞因子的產(chǎn)生也即停止 分子量小，產(chǎn)量很微量，與作用細(xì)胞的受體親和力高，作用效果強(qiáng),89,2種類及功能 (1) 白細(xì)胞介素（interleukin,IL） 產(chǎn)生：單核吞噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞 類型：IL-1IL-29 作用：誘導(dǎo)造血干細(xì)胞生長、分化，淋巴細(xì) 胞增殖分化（見圖示） (2) 集落刺激因子(colony stimulating factor, CSF) 產(chǎn)生：T細(xì)胞、上皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞產(chǎn)生 類型：G-CSF 、M-CSF、 EPO 作用：誘導(dǎo)造血干細(xì)胞定向分化、發(fā)育,90,91,92,（3）干擾素（interferon，IFN） 概念：機(jī)體細(xì)胞受病毒、抗原或其它誘導(dǎo)劑刺 激后產(chǎn)生的具有抗病毒作用的小分子蛋白 產(chǎn)生及類型： 白細(xì)胞受刺激產(chǎn)生IFN- 成纖維細(xì)胞受刺激產(chǎn)生IFN- T細(xì)胞受抗原刺激產(chǎn)生IFN- 作用: 廣譜抗病毒，機(jī)理（見圖示） 抗腫瘤，機(jī)理 調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答作用：適量促進(jìn)免疫， 大量抑制免疫,93,干擾素干擾病毒機(jī)理示意圖,病毒,病毒復(fù)制,抑制病 毒復(fù)制,信號轉(zhuǎn)導(dǎo),IFN,IFN-誘導(dǎo)蛋白,誘導(dǎo)刺激,胞核,胞核,第三章 抗原（Antigen, Ag） 完全抗原（免疫原性+反應(yīng)原性）免疫原 免疫原性 物質(zhì)（細(xì)菌） 機(jī)體免疫細(xì)胞 免疫產(chǎn)物 （效應(yīng)細(xì)胞、抗體）+物質(zhì) 特異反應(yīng) 反應(yīng)原性 不完全抗原（半抗原）（只有反應(yīng)原性） 物質(zhì)(激素)+蛋白載體 機(jī)體免疫細(xì)胞 免疫產(chǎn)物 （抗體）+物質(zhì) 特異反應(yīng),95,第一節(jié) 完全抗原（免疫原）的基本條件 異物性，大分子，化學(xué)組成、結(jié)構(gòu)復(fù)雜 一異物性 親緣關(guān)系越遠(yuǎn)的物質(zhì)，免疫原性越強(qiáng) 自身物質(zhì)可以形成“天然免疫耐受” 自身物質(zhì)結(jié)構(gòu)、成分改變后成為“自身抗原” 自身也有一些“隱蔽抗原”眼球晶體、精子、甲狀腺蛋白等,96,二大分子 通常在10000dal以上 三化學(xué)組成、結(jié)構(gòu)復(fù)雜 明膠蛋白分子量10萬dal，但免疫原性差 因是直鏈AA組成 胰島素只有5734dal，但免疫原性好因 組成、結(jié)構(gòu)復(fù)雜 凡含有苯環(huán)、雜環(huán)AA和糖的蛋白，結(jié)構(gòu) 都較復(fù)雜，免疫原性好,思考：下列各物質(zhì)是否是好的免疫原？ 為什么？ 1. 化學(xué)藥物注入機(jī)體 2. 鐵釘釘入皮膚 3. 玻璃插入皮膚 4. 自身蛋白質(zhì) 5. 牛奶給狗喝 6. 牛奶注入狗的皮下 7. 細(xì)菌、病毒感染畜禽 8. 細(xì)菌死苗喂豬,第二節(jié) 抗原決定簇（antigenic determinants,AD） （見圖示） B細(xì)胞AD T細(xì)胞AD 位置: 抗原表面(半抗原) 抗原內(nèi)部(載體內(nèi)) 成分: AA,糖,核苷酸 肽 大小: 56個AA,單糖,核苷酸 918個AA（肽） 作用: 直接與BCR（SmIg）特 外源性抗原需APC吞噬 異識別 降解 直接與抗體特異結(jié)合 MHC-分子/抗原肽-TCR (Th) 內(nèi)源性抗原 MHC-/抗 原肽-TCR(Tc),99,100,101,第三節(jié) 抗原分類 不同角度有不同分類 分類依據(jù) 抗原類型 抗原舉例 免疫原性 -完全抗原 各種病原微生物 -不完全抗原（半） 糖、藥物、激素 抗原來源 -異種抗原 各種病原微生物 -同種抗原 同種異體血型抗原、 組織相容性抗原 -自身抗原 變性自身組織,隱蔽抗原(釋放) -異嗜性抗原 一些微生物、植物、動物、 人體細(xì)胞組織共有的抗原(鏈 球菌與人心肌,腎小球組織) 對Th -TD Ag（見圖示） 所有病原微生物等天然抗原 依賴性 -TI Ag 少數(shù)細(xì)菌多糖,102,103,分類依據(jù) 抗原類型 抗原舉例 免疫保護(hù)性 -保護(hù)性抗原 新城疫病毒F、HN蛋白,口 (相應(yīng)Ab有保護(hù)作用) 蹄疫病毒VP1、VP4蛋白 -非保護(hù)性抗原 布氏桿菌一些抗原，雞白 (相應(yīng)Ab無保護(hù)作用， 痢桿菌一些抗原 但有免疫診斷作用) 對T細(xì)胞的 -普通抗原 絕大多數(shù)抗原 激活 特異識別激活T細(xì)胞 受MHC-分子限制 -超抗原 (super Ag) 少數(shù)抗原 非特異激活T細(xì)胞 (葡萄球菌、腸毒素、鏈 （多克隆激活） 球菌M蛋白等) 不受MHC-分子的限制,104,第四節(jié) 獸醫(yī)學(xué)中重要的天然抗原 一微生物抗原 各種微生物各有不同的抗原成分，各有抗原特異性 同種微生物、不同株抗原成分也有差別，分為不同血清型,105,（一）細(xì)菌抗原（見圖示） 例 腸道桿菌： 大腸桿菌 沙門氏菌 菌體(O)Ag 170多型 60多型,50多群 脂多糖,耐熱 畜禽AF群 鞭毛(H)Ag 60多型 60多型,第特異相(a.b.c) 蛋白質(zhì),不耐熱 第變異相(1.2.3) 表面Ag -莢膜 炭疽桿菌 多糖多肽,耐熱 -菌毛 大腸桿菌(KAg) 傷寒桿菌(Vi Ag) 蛋白,不耐熱 100多種,K88、K99等 毒素Ag -外毒素(蛋白,免疫原性強(qiáng),不耐熱,0.3-0.4%甲醛處理可脫毒制 成類毒素) -內(nèi)毒素(脂多糖，免疫原性弱,耐熱,不能制成類毒素),106,抗原結(jié)構(gòu)式：鼠傷寒沙門氏菌(1.4.5.12：i.1.2) OAg 1.4.5.12 HAg 相i,相1.2,107,(二) 病毒抗原 無囊膜病毒抗原成分主要是殼粒蛋白 有囊膜病毒抗原成分主要是囊膜粒(纖突)蛋白 有的只有一個血清型(豬瘟病毒) 有的有多種血清型(流感病毒)（見圖示）,108,流感病毒囊膜的重要抗原示意圖,血凝素H1-15,神經(jīng)氨酸酶N1-9,109,第五節(jié) 佐劑(adjuvant) 增強(qiáng)抗原免疫原性的物質(zhì) 一疫苗佐劑 氫氧化鋁膠:吸附、濃縮、緩慢釋放抗原 注射用白油、水花生油: 形成油包抗原水溶液，濃縮、緩慢釋放抗原 蜂膠: 含全面的營養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)免疫細(xì)胞增生 維生素A、E: 促進(jìn)免疫細(xì)胞增生 脂質(zhì)體(人工制備類脂質(zhì)小球體): 包裹抗原溶液，起載體+佐劑作用 分子佐劑: IL-2、IL-12、IL-18等，正研究用于基因工程疫苗、DNA疫苗的佐劑,110,二制備高免血清的佐劑 (一)弗氏不完全佐劑(Freund,s incomplete adjuvant，F(xiàn)IA) 配制：Ag溶液+石蠟油+羊毛脂（吐溫80） 攪拌乳化成油包Ag溶液劑型 機(jī)理：濃縮、緩釋Ag，刺激注射部位形成炎癥反應(yīng)，肉芽腫，聚集大量免疫細(xì)胞，大大促進(jìn)Ab產(chǎn)生 (二)弗氏完全佐劑(Freund,s complete adjuvant ，F(xiàn)CA) 配制: FIA+殺死的分枝桿菌 機(jī)理: 具備FIA作用的基礎(chǔ)上還促進(jìn) M、T、B 細(xì)胞增殖和功能，促進(jìn)Ab產(chǎn)生的效果比FIA更強(qiáng),111,第四章 免疫應(yīng)答(immune response) 正常免疫應(yīng)答、變態(tài)反應(yīng)、免疫耐受 第一節(jié) 正常免疫應(yīng)答的基本過程 細(xì)胞免疫 識別階段 反應(yīng)階段 效應(yīng)階段 體液免疫 （見圖示） TDAg與TIAg有所不同,112,113,114,免疫應(yīng)答的基本特征 自身識別 高度特異 免疫記憶（TDAg）,115,第二節(jié) 細(xì)胞免疫(T cell mediated immunity,TMI),一基本過程 Ag pro-Tc 激活Tc 殺傷靶細(xì)胞 Ag Th Ag Th1(TDTC) 各種淋巴因子 炎癥反應(yīng)，清除抗原,116,117,二激活Tc的殺傷作用 特點(diǎn)：直接、特異，重復(fù)殺傷靶細(xì)胞 過程（機(jī)制） -在MHC-分子限制下，通過TCR特異識別結(jié)合靶細(xì)胞 -釋放穿孔蛋白，溶解靶細(xì)胞 -表達(dá)蛋白毒素，致靶細(xì)胞凋亡 三 Th1的作用 Th再受到同種Ag的作用，釋放50多種淋巴因子(細(xì)胞因子) 炎癥反應(yīng)、消除抗原 （主要的淋巴因子見下圖）,118,119,120,四細(xì)胞免疫作用 （一）有利方面 抗細(xì)胞內(nèi)感染免疫 -胞內(nèi)菌(結(jié)核桿菌、布氏桿菌、麻風(fēng)桿菌等) -病毒，尤其慢性病毒 -原蟲 抗腫瘤 （二）不利方面 傳染性變態(tài)反應(yīng)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(組織炎癥、損傷)。例：肺結(jié)核,121,第三節(jié) 體液免疫(B cell mediated immunity,BMI),一基本過程 TDAg APC降解 Th Th2 Bc 漿細(xì)胞 抗體(IgM、IgG) 記憶細(xì)胞 漿細(xì)胞 抗體(IgG) TDAg TIAg Bc 漿細(xì)胞 抗體(IgM),122,123,二抗體(Antibody,Ab；Immunoglubulin,Ig) (一) 抗體產(chǎn)生的一般規(guī)律（見圖示） 1初次應(yīng)答(primary response) 過程：陰性期(3-7天；2-3周) 對數(shù)期 穩(wěn)定期（短） 下降期（快） 特點(diǎn)：陰性期長，主要產(chǎn)生IgM，抗體水平 低，維持時間短,124,B（漿）細(xì)胞合成（分泌）Ig示意圖,125,2再次免疫應(yīng)答（secondary response） 過程：陰性期 對數(shù)期(高) 穩(wěn)定期(長) 下降期 （慢） 陰性期短，或原有Ab暫時降低 Ab水平迅速升高 大量產(chǎn)生IgG 維持時間長,126,127,（二）抗體產(chǎn)生理論 克隆選擇學(xué)說（clone selection theory） 科學(xué)地解釋了免疫應(yīng)答（Ab產(chǎn)生）3大特點(diǎn) 哪3大特點(diǎn)？,128,129,（三）抗體分類 分類依據(jù) Ab類型 CH結(jié)構(gòu) IgM、IgG、IgA、IgE、 IgD及各亞類 2. 與Ag反應(yīng) 完全Ab2價 不完全Ab單價 3. Ag與免疫機(jī)體 異種Ab病原微生物Ab 的關(guān)系 同種Ab血型Ab 自身Ab 異嗜Ab鏈球菌Ab,130,4血清學(xué)試驗 沉淀Ab（IgG） 凝集Ab（IgG、IgM） 補(bǔ)體結(jié)合Ab（IgG、IgM） 中和Ab（ IgG、IgM、IgA） 溶血素（紅細(xì)胞Ab，IgG、IgM） 調(diào)理素（IgG） 溶菌素（細(xì)菌抗體，IgG、IgM）,131,5抗體均一性 多克隆Ab免疫血清Ab 單克隆Ab（monoclone Ab,McAb） McAb：一個B細(xì)胞受一種B細(xì)胞決定簇刺激增殖的漿細(xì)胞分泌的抗體只有通過雜交瘤技術(shù)才能制備。,132,133,第四節(jié) 免疫應(yīng)答影響因素 機(jī)體、抗原兩大方面 一機(jī)體 (一) 遺傳受MHC-、基因控制 (二) 年齡與免疫系統(tǒng)發(fā)育、成熟有關(guān) 胚胎期易形成免疫耐受 幼齡期免疫系統(tǒng)發(fā)育未成熟，易受母源抗體影響 成年期最好，但也受上次免疫Ab的影響 老年期差，易產(chǎn)生自身免疫病、腫瘤,134,（三）營養(yǎng) 嚴(yán)重缺蛋白、VitA、VitC、Fe、Zn、Sn等，免疫器官發(fā)育不良或退化 （四）應(yīng)激（冷、熱、噪音、驚嚇、遷群、長途運(yùn)輸、饑渴） 腎上腺素 免疫功能 （五）健康：長期患病、病毒感染、使用免疫抑制劑 免疫功能,135,二抗原 （一）性質(zhì) 親緣遠(yuǎn)：滅活苗 B細(xì)胞 體液免疫為主 親緣近：內(nèi)源性Ag T細(xì)胞 細(xì)胞免疫為主 （二）物理狀態(tài) 可溶性Ag （血清蛋白、類毒素） Ab產(chǎn)生陰性期長（2-3周） 顆粒性Ag 陰性期短（3-5天） 加佐劑Ag 陰性期短，一次注射可產(chǎn)生多次再次應(yīng)答,136,三接種途徑 皮下肌肉注射淋巴結(jié) 靜脈注射脾、骨髓 加弗氏佐劑淋巴結(jié)、肉芽腫部位 氣霧呼吸道粘膜 飲水呼吸道、腸道粘膜 滴眼、滴鼻哈德氏腺,137,四. 劑量 適當(dāng)范圍：好 大高劑量：可能發(fā)生免疫耐受 五.接種間隔時間 疫苗：原有Ab還很高時不宜接種免疫監(jiān)測 制備高免血清：通常隔2周，每次接種Ag比前次增多,138,第五節(jié) 免疫應(yīng)答調(diào)節(jié) 正常機(jī)體自動調(diào)節(jié)對抗原的免疫應(yīng)答到最適合的程度，機(jī)制十分復(fù)雜，涉及免疫細(xì)胞、免疫分子和神經(jīng)-體液等方面的調(diào)節(jié)作用。,139,第五章 抗感染免疫 病原微生物 侵襲力 毒素 （感染） 寄生蟲 畜禽機(jī)體 天然防御 抗感染 免疫應(yīng)答 （細(xì)胞免疫、體液免疫）,140,第一節(jié) 天然防御機(jī)制 機(jī)械阻擋 粘膜纖毛運(yùn)動 化學(xué)作用 體表（皮膚、粘膜） 脂肪酸 溶菌酶 粘多糖 胃酸、蛋白酶 一.生理屏障 生物學(xué)作用 正常菌群 淋巴結(jié) 內(nèi)部 脾臟 過濾 血管壁 （ 血腦屏障、血胎屏障）,141,二、吞噬作用 嗜中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、各種組織中的M 完全吞噬、不完全吞噬 三、體液因素,142,四、細(xì)胞因子 （一）單核因子 扁桃體發(fā)炎、嚴(yán)重外傷感染，為什么會發(fā)熱？ 細(xì)菌感染 單核吞噬細(xì)胞吞噬 產(chǎn)生各種單核因子 IL-1、IL-6、TNF-、IL-12 (1) 刺激下丘腦體溫中樞 體溫升高、發(fā)熱（抑制細(xì)菌繁殖、增強(qiáng)免疫應(yīng)答） (2) 刺激肝細(xì)胞 急性期蛋白 C3途徑激活補(bǔ)體、溶解細(xì)菌,143,(3) TNF 刺激小血管擴(kuò)張、血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)粘附分子，促使白細(xì)胞、血小板粘附、移出，血液中IgG、補(bǔ)體、淋巴細(xì)胞移出，IL-8招引中性粒細(xì)胞移行至感染局部。 但全身感染，全身血管擴(kuò)張、通透性增加、血漿喪失、休克、器官衰竭、死亡。 (4) IL-12 Th Th1 NK細(xì)胞活化 (二) 干擾素 廣譜干擾病毒,144,第二節(jié) 抗各類病原體的感染免疫 一、抗細(xì)菌感染免疫 （一）抗胞外菌感染免疫 1天然防御 吞噬細(xì)胞(有些細(xì)菌的莢膜、凝固酶具有抗吞噬作用) 肽聚糖C3激活補(bǔ)體(有些細(xì)菌唾液酸具有抑制補(bǔ)體激活作用) 脂多糖（LPS）刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞、M產(chǎn)生TNF-、IL-1、IL-6、IL-12等,145,2特異性免疫 胞外菌體液免疫（Ab）為主,IgG調(diào)理吞噬作用（見圖示）,146,IgM、IgGC1激活補(bǔ)體 IgG中和外毒素（見圖示） SIgA免疫排除 （見圖示） 分泌型抗體(SIgA)免疫排除作用示意圖 抗毒素(IgG)中和毒素示意圖 免疫預(yù)防：弱毒菌苗、滅活菌苗均有效,147,（二）抗胞內(nèi)菌感染免疫 1天然防御 吞噬胞內(nèi)菌的M 激活 IFN 殺滅 IL-12 活化NK細(xì)胞 2特異性免疫：細(xì)胞免疫與體液免疫結(jié)合 細(xì)胞免疫殺滅胞內(nèi)細(xì)菌 淋巴因子（IFN-）活化M Tc的殺傷作用 同時發(fā)生傳染性變態(tài)反應(yīng)（見下圖）,148,傳染性變態(tài)反應(yīng)（肺結(jié)核）示意圖,149,體液免疫消除胞外細(xì)菌 IgG調(diào)理吞噬 IgG、IgM，C1激活補(bǔ)體 免疫預(yù)防：必須有弱毒菌苗+滅活苗,150,二抗病毒感染免疫 （一）天然防御 病毒感染細(xì)胞產(chǎn)生IFN-、，干擾病毒復(fù)制 NK細(xì)胞自然殺傷作用 IFN-、促進(jìn)NK細(xì)胞作用 （二）特異性免疫：體液免疫與細(xì)胞免疫聯(lián)合作用免疫預(yù)防不能只用滅活苗,151,-體液免疫產(chǎn)生特異抗體，作用細(xì)胞外的病毒 中和作用（IgG） 調(diào)理作用（IgG） 激活補(bǔ)體（IgM、IgG） -細(xì)胞免疫對細(xì)胞內(nèi)的病毒作用 Tc特異殺傷感染病毒的靶細(xì)胞 穿孔素溶解靶細(xì)胞 表達(dá)粘附蛋白（FasL）使靶細(xì)胞凋亡 IFN-抑制病毒復(fù)制 機(jī)體抗病毒的免疫應(yīng)答也可造成型變態(tài)反應(yīng),152,三抗真菌的感染免疫 真菌感染主要見于狗、貓皮膚，家禽的肺及畜禽飼料中黃曲霉中毒。 真菌在表皮或肺難于接觸淋巴細(xì)胞、黃曲霉毒素則是簡單的化合物，無免疫原性，所以，真菌和毒素引起機(jī)體的免疫很差，研究很少，沒疫苗可用。主要靠清潔、健康的皮膚及脂肪酸防御真菌感染皮膚。做好飼料保存，防止引起的霉菌毒素中毒。,153,四抗寄生蟲的感染免疫 （一）因世世代代寄生，寄生蟲形成了各種逃避宿主免疫的機(jī)制： 蟲體表面帶宿主成分，免疫原性弱 生活史復(fù)雜，不同時期蟲體表面抗原不同 有的蟲體表面抗原不斷脫落更換 有的形成包囊寄生腸腔，蟲體大，相應(yīng)抗體不能作用 有的能抵抗相應(yīng)抗體等作用 有的可產(chǎn)生破壞抗體的酶 故研究寄生蟲免疫預(yù)防的疫苗比較困難,154,（二）特異性免疫 原蟲寄生于宿主細(xì)胞內(nèi)以細(xì)胞免疫為主 蠕蟲以體液免疫（IgE）嗜酸性粒細(xì)胞脫出胞漿顆粒堿性蛋白殺滅幼蟲,155,第六章 變態(tài)反應(yīng)（allergy）,對某種Ag已進(jìn)行免疫應(yīng)答的機(jī)體，再接觸同種Ag時發(fā)生的、引起生理功能紊亂或組織損傷的再次免疫反應(yīng)，又稱超敏反應(yīng)（hypersensitivity）。 變應(yīng)原（allergen）:引起機(jī)體發(fā)生變態(tài)反應(yīng)的抗原。 完全變應(yīng)原（異種血清、蛋白質(zhì)、花粉、微生物、寄生蟲等） 不完全變應(yīng)原（藥物、青霉素等）,156,類型：、型 過程：致敏 發(fā)敏 1.變應(yīng)原初次進(jìn)入機(jī)體（第一階段） 初次免疫應(yīng)答 產(chǎn)生免疫物質(zhì)（Ab或TDTH） 機(jī)體處于敏感狀態(tài) 2.變應(yīng)原再次進(jìn)入機(jī)體（第二階段） 作用到Ab或TDTH 發(fā)生癥狀 第一節(jié) 型變態(tài)反應(yīng)（過敏反應(yīng) anaphylaxis） 一發(fā)生機(jī)制 以青霉素過敏為例，見圖,157,158,159,二特點(diǎn)： 1 由IgE引起 2 與遺傳有關(guān) 3 癥狀發(fā)生快（幾秒或幾分鐘），消失快 4 只引起全身或局部功能紊亂 三常見過敏病例 青霉素、免疫血清、花粉、食物等過敏 四診斷 青霉素皮試 檢出變應(yīng)原飼料,160,五預(yù)防 1. 避免致敏機(jī)體再次接觸變應(yīng)原 2. 脫敏注射免疫血清 分小量，隔2030min，多次注射 六治療 1. 注射腎上腺素、麻黃堿、色甘酸二鈉等 穩(wěn)定肥大細(xì)胞、堿性粒細(xì)胞膜 2. 服用撲爾敏、苯海拉明等，抑制組織胺 3. 注射葡萄糖酸鈣等降低血管通透性等,161,第二節(jié) 型變態(tài)反應(yīng)（細(xì)胞溶解型） 一發(fā)生機(jī)制,162,163,二特點(diǎn) 1 IgM、IgG、補(bǔ)體、M、NK細(xì)胞等參與 2 血細(xì)胞溶解 三常見病例 1 輸血反應(yīng) A型紅細(xì)胞 輸給 B型紅細(xì)胞人 A型紅細(xì)胞溶解 為什么？ 如何預(yù)防？,164,2新生幼畜溶血癥 馬 + 驢 第一胎 Aa+ Aa- 駒Aa+ 駒（第二胎）Aa+ 幼駒(吃母驢初乳后溶血死亡) 為什么？（型變態(tài)反應(yīng)） 如何預(yù)防？（選配，不吃初乳，換血）,165,166,167,3. 藥物引起的溶血驗血、停藥 4感染引起的溶血用藥或用疫苗消除病原（馬傳染貧血病毒、邊蟲、錐蟲、焦蟲、沙門氏菌等）,168,第三節(jié) 型變態(tài)反應(yīng)（免疫復(fù)合物型）,一發(fā)生機(jī)制 第一步： 可溶性抗原 機(jī)體 Ab(IgG、IgA、IgM) (病毒,免疫血清) 第二步： Ag+Ab (Ag-Ab)n復(fù)合物 Ab過量大復(fù)合物 易被吞噬細(xì)胞消除 Ag過量小復(fù)合物 易從尿中排出,169,Ag稍超過Ab 中等大小復(fù)合物 易通過血管壁、沉積基底膜+補(bǔ)體、吞噬細(xì)胞作用 血管炎（腎小球腎炎、關(guān)節(jié)炎、發(fā)熱、全身出血）,170,171,172,二特點(diǎn) 1由IgG、IgA、IgM與相應(yīng)Ag（稍大量） 形成中等大小復(fù)合物引起 2. 有補(bǔ)體、中性粒細(xì)胞等參加 3. 以血管炎和臨近組織損傷為特征,173,三常見疾病 1. 局部型變態(tài)反應(yīng)（Arthus反應(yīng)） 多次皮下注射血清注射局部出現(xiàn)炎癥（水腫、出 血、壞死） 2血清?。ㄈ硇孕妥儜B(tài)反應(yīng)） 一次注射大量免疫血清后10天左右，全身反應(yīng)（皮膚 紅斑、水腫、蕁麻疹、淋巴結(jié)腫大、關(guān)節(jié)炎、發(fā)熱、 蛋白尿、中性白細(xì)胞減少）幾天后自行消退 注意與血清過敏癥區(qū)別 3多種傳染病表現(xiàn)的皮疹、關(guān)節(jié)炎、眼炎、 皮炎、腎小球腎炎，均因型變態(tài)反應(yīng)引起 治療：用抗菌藥等消滅病原（Ag）,174,175,第四節(jié) 型變態(tài)反應(yīng)（遲發(fā)型） 一發(fā)生機(jī)理 第一步： 初次Ag 機(jī)體 細(xì)胞免疫應(yīng)答 Th1(TDTH) 第二步： 再次Ag 機(jī)體 Th1 多種淋巴因子 大量吞 噬細(xì)胞集中于Ag存在部位，引起組織細(xì)胞變性、壞死 二特征 1再次進(jìn)入Ag后出現(xiàn)癥狀慢（48-72h）（遲發(fā)型） 2出現(xiàn)局部炎癥（單核細(xì)胞浸潤、組織變性、壞死）,176,177,三常見疾病 1 傳染性變態(tài)反應(yīng)（胞內(nèi)菌引起） 結(jié)核分支桿菌感染肺結(jié)核（圖） 結(jié)核菌素試驗乳牛結(jié)核病檢疫： 結(jié)核菌素(結(jié)核桿菌裂解提取物)0.lml注入乳牛頸側(cè)皮內(nèi)72h注射部位出現(xiàn)紅腫（陽性） 或0.lml滴入乳牛眼結(jié)膜囊內(nèi)15-18h眼流膿 性分泌物（陽性）,178,2變態(tài)反應(yīng)皮炎 人、動物皮膚第一次接觸變應(yīng)原（油漆、染 料、農(nóng)藥、塑料等） Th1 再次接觸同種變應(yīng)原 Th1 釋放各種淋巴因子 24-96h 皮炎(紅腫、奇癢、水皰)、抓傷、感染 治療: (1) 查出變應(yīng)原，避免再次接觸 (2) 對癥治療: 消腫、止癢、抗局部感染,179,3同種異體組織移植排斥反應(yīng) 異體組織（MHC-） 受體細(xì)胞免疫應(yīng) 答 Th1 釋放各種淋巴因子 淋巴因子 炎癥反應(yīng) 控制排斥: (1) 組織配型 (2) 用免疫抑制藥物抑制受體 的免疫功能,180,181,第七章 免疫學(xué)實驗技術(shù) 包括細(xì)胞免疫檢測技術(shù)，體液免疫檢測技術(shù) 血清學(xué)技術(shù) 第一節(jié) 細(xì)胞免疫檢測技術(shù) -檢測機(jī)體血液中的T細(xì)胞數(shù)量 E玫瑰花環(huán)試驗 T細(xì)胞酸性醋酸萘酯酶測定 -檢測機(jī)體血液中T細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗 巨噬細(xì)胞移動抑制試驗 T細(xì)胞活化試驗,182,一E玫瑰花環(huán)試驗 原理：人、豬、牛、羊等的T細(xì)胞膜上的CD2是綿羊紅細(xì)胞受體，馬、豬的T細(xì)胞膜上的CD2是豚鼠紅細(xì)胞的受體（見圖）,183,用途：區(qū)別T細(xì)胞、B細(xì)胞，檢測機(jī)體T細(xì) 胞水平 花環(huán)數(shù) （花環(huán)率= 100%） 200個淋巴細(xì)胞,184,二. 酸性醋酸萘酯酶測定 原理：酸性醋酸萘酯酶 醋酸萘酯 萘酚+醋酸離子 + 六偶氮副品紅 紅色反應(yīng)物 + 甲基綠 紅黑色顆粒 用途：1.鑒別T、B細(xì)胞；2.血液中T細(xì)胞計數(shù),185,三淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗 （一）形態(tài)學(xué)試驗法 原理：PHA+T細(xì)胞（有PHA受體） 轉(zhuǎn)化 大的淋巴母細(xì)胞 顯微鏡觀察計算轉(zhuǎn)化率 轉(zhuǎn)化率=(過渡型細(xì)胞+母細(xì)胞)/200個淋巴細(xì)胞100% 特點(diǎn)：簡便，準(zhǔn)確性較差,186,187,188,（二）3H胸腺嘧啶核苷（3H-T）摻入法 原理： 試驗管 對照管 PHA+T細(xì)胞+3H-TdR T細(xì)胞+3H-TdR 轉(zhuǎn)化 不轉(zhuǎn)化 淋巴母細(xì)胞 T細(xì)胞 （摻入3H-TdR） （無3H-TdR摻入） 液體閃爍儀測摻入 測CPM 3H-T的脈沖數(shù)CPM 計算轉(zhuǎn)化刺激指數(shù)SI=試驗管CPM/對照管CPM 特點(diǎn)：準(zhǔn)確，需昂貴的閃爍儀,189,四巨噬細(xì)胞移動抑制試驗 原理： 試驗 對照 Ag+T細(xì)胞+M T細(xì)胞+ M 轉(zhuǎn)化 不轉(zhuǎn)化 M移動抑制因子 無M移動抑制因子 M的移動面積變小 M的移動面積大 計算移動指數(shù)MI MI=試驗M的移動面積/對照M的移動面積100%（圖）,190,191,五T細(xì)胞活化試驗（MTT檢測法） 原理：PHA、ConA+T細(xì)胞（受體） 轉(zhuǎn)化 分裂、增殖 脫氫酶 甲氮唑鹽（MTT） 甲簪（formazan） 酶標(biāo)儀（595nm）測OD值 特點(diǎn)：敏感、準(zhǔn)確 先進(jìn)實驗室用CD單抗和流式細(xì)胞儀進(jìn)行T、B細(xì)胞的檢測,192,第二節(jié) 體液免疫檢測技術(shù) 血清學(xué)試驗(抗原抗體試驗) (serulogical test or reaction),種類：1沉淀試驗 2凝集試驗 傳統(tǒng)試驗 3補(bǔ)體參與的試驗 4中和試驗 5標(biāo)記抗體試驗新技術(shù),193,一體外抗原抗體反應(yīng)的一般規(guī)律 1高度特異性 異嗜性抗原與免疫血清之間 交叉性 腸道桿菌與