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文檔簡(jiǎn)介
第一節(jié) 植物快速繁殖技術(shù)一、植物組織培養(yǎng)簡(jiǎn)介1理論基礎(chǔ):植物細(xì)胞的全能性。(1)愈傷組織的特點(diǎn):細(xì)胞是一種高度液泡化的薄壁細(xì)胞,呈無定形狀態(tài),排列疏松而無規(guī)則,具有很強(qiáng)的分生能力。(2)脫分化:由高度分化的細(xì)胞重新恢復(fù)到未分化的狀態(tài)。(3)再分化:愈傷組織在適當(dāng)?shù)娜斯づ囵B(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)又可以重新分化成芽、根等器官,進(jìn)而發(fā)育成一棵完整的植株。3培養(yǎng)基(1)成分:除含外植體所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外,還需添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素兩種植物激素。(2)類型:據(jù)外植體在不同發(fā)育階段的要求,需配制“脫分化培養(yǎng)基”、“生芽培養(yǎng)基”、“生根培養(yǎng)基”。4無菌條件:培養(yǎng)基的滅菌要徹底、外植體的消毒要充分、接種時(shí)的無菌操作要嚴(yán)格。二、月季的快速繁殖程序1配制培養(yǎng)基先將各種營(yíng)養(yǎng)成分按比例配制成MS培養(yǎng)基母液,再利用母液配制所需的三種培養(yǎng)基。(1)脫分化培養(yǎng)基:母液中加入質(zhì)量濃度為0.1 mg/L的6BA和IAA。(2)生芽培養(yǎng)基:去掉脫分化培養(yǎng)基中的IAA即可。(3)生根培養(yǎng)基:無機(jī)鹽濃度為MS的,另外添加質(zhì)量濃度均為0.1 mg/L的NAA和IAA。2外植體消毒清水洗凈體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸5 s質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的次氯酸鈉溶液中浸泡6 min10 min用無菌水清洗至少3次,漂凈消毒液用無菌濾紙吸干。3接種:將已消毒的月季嫩莖接種到脫分化培養(yǎng)基上,使嫩莖的形態(tài)學(xué)下端接觸培養(yǎng)基。4培養(yǎng):接種后的錐形瓶放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),將愈傷組織接種到生芽培養(yǎng)基上,每天用日光燈光照12 h,培養(yǎng)10 d左右長(zhǎng)出小芽,小芽繼續(xù)長(zhǎng)成枝條。待枝條長(zhǎng)到3 cm左右時(shí),將它切下后插在生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根。5馴化試管苗6移栽預(yù)習(xí)完成后,請(qǐng)把你認(rèn)為難以解決的問題記錄在下面的表格中問題1問題2問題3問題4一、植物組織培養(yǎng)1原理細(xì)胞的全能性(1)原因:生物體的每個(gè)細(xì)胞都含有本物種生長(zhǎng)、發(fā)育、遺傳和變異的全部遺傳信息。(2)實(shí)現(xiàn)全能性的條件:離體狀態(tài)和適宜的環(huán)境條件(如營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素、溫度等)。2過程植物組織(外植體)或細(xì)胞愈傷組織根芽植物體3培養(yǎng)基(1)脫分化培養(yǎng)基:生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例適中。(2)生芽培養(yǎng)基:生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例偏低。(3)生根培養(yǎng)基:生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例偏高。二、試管苗的培養(yǎng)過程中應(yīng)注意的問題1培養(yǎng)一株完整的試管苗,必須先進(jìn)行生芽培養(yǎng),然后進(jìn)行生根培養(yǎng),如果順序顛倒,先誘導(dǎo)生根,就不好誘導(dǎo)生芽了。2試管苗應(yīng)該進(jìn)行見光培養(yǎng)。3試管苗一般在高濕、弱光、恒溫下異養(yǎng)生長(zhǎng),出瓶后一定要保溫、保濕。4試管苗光合作用能力低,在移栽前給予較強(qiáng)光照閉瓶煉苗,以促進(jìn)小苗向自養(yǎng)轉(zhuǎn)化。植物組織培養(yǎng)的過程及應(yīng)用為提高玉米產(chǎn)量,科學(xué)家在育種和栽培中進(jìn)行大量實(shí)驗(yàn)研究。下面是科學(xué)家關(guān)于玉米培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)過程,請(qǐng)回答:玉米種子幼苗取莖尖移栽(1)選取玉米幼苗莖尖進(jìn)行脫分化處理,是因?yàn)榍o尖細(xì)胞_。(2)表示_,它能被再次培養(yǎng)成為幼苗的根本原因是_。(3)若想制作人工種子,應(yīng)選用_,若利用此項(xiàng)技術(shù)來獲取細(xì)胞的代謝產(chǎn)物,培養(yǎng)將進(jìn)行到_。(填編號(hào))【審題導(dǎo)析】解答此題應(yīng)注意:(1)掌握植物組織培養(yǎng)的過程,(2)了解各步驟的注意事項(xiàng),(3)了解植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用?!揪v精析】莖尖細(xì)胞是具有旺盛分裂能力的細(xì)胞,更容易通過培養(yǎng)表達(dá)出全能性,同時(shí)由于細(xì)胞剛剛分裂產(chǎn)生,還沒有被病毒或細(xì)菌感染,可以直接培養(yǎng)出無病毒植株。植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞具有全能性。在人工種子的制作中,必須培養(yǎng)到具有根、芽分化的胚狀體方可進(jìn)行,而要獲取細(xì)胞代謝產(chǎn)物則應(yīng)在愈傷組織階段?!敬鸢浮?1)分裂旺盛且沒有被病毒或細(xì)菌感染(2)愈傷組織植物細(xì)胞具有全能性(3)植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用(1)快速繁殖、培養(yǎng)無病毒植株。病毒在植株上的分布是不均勻的,老葉、老的組織和器官中病毒含量高,幼嫩的未成熟的組織和器官中病毒含量較低,莖尖、根尖生長(zhǎng)點(diǎn)幾乎不含病毒或病毒較少。(2)組織培養(yǎng)除了在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用外,目前世界各國(guó)都在重視另一個(gè)方面,即有用化合物的工業(yè)化生產(chǎn)。有用化合物包括藥物、橡膠、香精油、色素這些化合物許多都是高等植物的次生代謝物。(3)制作“人工種子”。所謂“人工種子”,是指以胚狀體為材料,經(jīng)過人工薄膜包裝的種子。在適宜條件下它能萌發(fā)長(zhǎng)成幼苗。(4)轉(zhuǎn)基因植物的培養(yǎng)也要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)。1利用植物的莖尖或葉片、莖段等,在無菌條件下,培養(yǎng)在玻璃器皿中人工配制的培養(yǎng)基上,使它發(fā)育成完整的植株,這種技術(shù)可以用來培育植物新品種,可以在較短的時(shí)間內(nèi)大量繁殖植物,可以防止病毒的侵害。下列關(guān)于這種技術(shù)的敘述,正確的是()這種技術(shù)利用了植物細(xì)胞的全能性這種技術(shù)叫做組織培養(yǎng),可以克隆生物體這種技術(shù)屬于細(xì)胞工程的應(yīng)用領(lǐng)域之一這種技術(shù)是一種無性繁殖的方式ABCD【答案】D植物組織培養(yǎng)的影響因素植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中加有激素。下表是培養(yǎng)基中兩種植物激素在不同比例時(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。請(qǐng)分析回答:(其中6BA是一種細(xì)胞分裂素,IAA是一種生長(zhǎng)素)實(shí)驗(yàn)組別1234激素種類及激素含量關(guān)系6BA6BAIAA6BAIAA6BAIAA結(jié)果組織塊產(chǎn)生愈傷組織組織塊分化出芽愈傷組織不斷生長(zhǎng)愈傷組織有生根趨勢(shì)(1)促進(jìn)愈傷組織產(chǎn)生的條件是_,愈傷組織生長(zhǎng)的條件是_。(2)芽的分化條件是_,根的分化條件是_。(3)在植物組織培養(yǎng)中,脫分化可用的激素組合是實(shí)驗(yàn)_和實(shí)驗(yàn)_中的激素含量關(guān)系,再分化時(shí)可用的激素組合是實(shí)驗(yàn)_和實(shí)驗(yàn)_中的激素含量關(guān)系。整個(gè)實(shí)驗(yàn)表明,植物的生根、發(fā)芽等生命活動(dòng)是_的結(jié)果。(4)植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中,除激素外,還必須含有_,它的成分至少應(yīng)該含有_、_等。(5)判斷愈傷組織的依據(jù)是_?!緦忣}導(dǎo)析】(1)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果尋找條件,判斷不同組織分化所需的條件。(2)掌握植物組織培養(yǎng)的條件?!揪v精析】從表中數(shù)據(jù)可以看出,只有靠細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的共同作用及適當(dāng)?shù)谋壤?,才能使組織培養(yǎng)過程順利進(jìn)行。培養(yǎng)基中必須具備植物激素、無機(jī)物(礦質(zhì)元素)、有機(jī)物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。而愈傷組織的特點(diǎn)是細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則,呈無定形狀態(tài)?!敬鸢浮?1)必須有細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素含量相等(2)細(xì)胞分裂素的含量大于生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素的含量大于細(xì)胞分裂素(3)1324多種激素共同作用(4)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)無機(jī)物(礦質(zhì)元素)有機(jī)物(5)細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則,呈無定形狀態(tài)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的使用對(duì)分化的影響使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素,后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化同時(shí)使用分化頻率提高生長(zhǎng)素量與細(xì)胞分裂素量比值高有利于根的分化生長(zhǎng)素量與細(xì)胞分裂素量比值低有利于芽的分化,抑制根的形成生長(zhǎng)素量與細(xì)胞分裂素量比值適中促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)2為了探究6BA和IAA對(duì)某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響,某研究小組在MS培養(yǎng)基中加入6BA和IAA,配制成四種培養(yǎng)基(見下表),滅菌后分別接種數(shù)量相同、生長(zhǎng)狀態(tài)一致、消毒后的莖尖外植體,在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后,統(tǒng)計(jì)再生叢芽外植體的比率(m),以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n),結(jié)果如下表?;卮鹣铝袉栴}:(1)按照植物的需求量,培養(yǎng)基中無機(jī)鹽的元素可分為_和_兩類。上述培養(yǎng)基中,6BA屬于_類生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。(2)在該實(shí)驗(yàn)中,自變量是_,因變量是_,自變量的取值范圍是_。(3)從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少的培養(yǎng)基是_號(hào)培養(yǎng)基。(4)為了誘導(dǎo)該菊花試管苗生根,培養(yǎng)基中一般不加入_(填“6BA”或“IAA”)。【解析】按照植物的需求量,在培養(yǎng)基中加入的無機(jī)鹽的元素可分為大量元素和微量元素。6BA是細(xì)胞分裂素類生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,由于該實(shí)驗(yàn)探究的是6BA和IAA對(duì)菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響,而6BA的濃度在各實(shí)驗(yàn)組中相同,因此實(shí)驗(yàn)的自變量是IAA濃度,取值范圍是00.5 mgL1,因變量是再生叢芽外植體的比率及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù),即表中的m和n。再生外植體數(shù)乘以外植體上的叢芽平均數(shù)即為叢芽總數(shù),計(jì)算可知誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少的是1號(hào)培養(yǎng)基。在植物組織培養(yǎng)中,生長(zhǎng)素用于誘導(dǎo)細(xì)胞的分裂和根的分化,細(xì)胞分裂素主要促進(jìn)細(xì)胞分裂和分化出不定芽,因此為了誘導(dǎo)生根,培養(yǎng)基中一般不加6BA(細(xì)胞分裂素類生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑)而加入IAA(生長(zhǎng)素類生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑)?!敬鸢浮?1)大量元素微量元素細(xì)胞分裂素(2)IAA濃度再生叢芽外植體的比率(m)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)00.5 mgL1(3)1(4)6BA1下列實(shí)例中能體現(xiàn)細(xì)胞全能性的是()用懸浮培養(yǎng)的胡蘿卜單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)成可育的植株植物用種子繁殖后代用煙草組織的單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)出可育的完整植株ABC D【解析】細(xì)胞全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育的潛能。其中和都是屬于由分化的細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)形成可育的植株,體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性。植物用種子繁殖后代,實(shí)際上就是由一個(gè)受精卵,通過細(xì)胞的增殖和分化發(fā)育成新個(gè)體,所以是由未經(jīng)分化的細(xì)胞(受精卵)發(fā)育成新個(gè)體的過程,因此不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性。【答案】B2在工業(yè)化大量培養(yǎng)植物試管苗的過程中,一般進(jìn)行如下操作,則正確的操作順序是()誘導(dǎo)形成芽取合適外植體誘導(dǎo)形成愈傷組織誘導(dǎo)形成未分化狀態(tài)的細(xì)胞誘導(dǎo)形成根A BC D【解析】外植體經(jīng)過誘導(dǎo)脫分化,形成未分化狀態(tài)的細(xì)胞,進(jìn)而形成愈傷組織。再分化的誘導(dǎo)應(yīng)該先誘導(dǎo)生芽,再誘導(dǎo)生根?!敬鸢浮緽3如圖所示為胡蘿卜的韌皮部細(xì)胞通過無菌操作,接入試管后,在一定的條件下,形成試管苗的培育過程,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題:(1)要促進(jìn)細(xì)胞分裂生長(zhǎng),培養(yǎng)基中應(yīng)有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括_和小分子有機(jī)物;激素包括細(xì)胞分裂素和_兩類植物激素。(2)此過程要無菌操作,主要是指對(duì)_進(jìn)行滅菌消毒。B階段需要光照,原因是_。(3)試管苗的根細(xì)胞沒有葉綠素,而葉的葉肉細(xì)胞具有葉綠素,這是基因_的結(jié)果。【解析】此題綜合考查了植物組織培養(yǎng)過程、所需條件等方面的知識(shí)
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