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文檔簡介

1、實驗一 革蘭染色法、細菌的特殊染色法,微生物學與細胞生物學教研室,實驗目的,掌握細菌革蘭染色的原理與方法 掌握細菌芽孢染色的基本原理與方法 熟悉普通光學顯微鏡的油鏡使用與保養(yǎng),實驗原理,革蘭染色法的簡介 革蘭染色法是細菌學中最廣泛使用的一種鑒別染色法。由丹麥醫(yī)師Christian Gram創(chuàng)立。 方法是先將細菌用結晶紫染色，加媒染劑（增加染料和細胞的親和力）后，用脫色劑（乙醇和丙酮）脫色，再用復染劑染色。,實驗原理,革蘭染色法的原理 一般認為革蘭陽性菌的細胞壁較厚，肽聚糖含量高，且交聯(lián)度大，脂類含量少，經(jīng)95%乙醇脫色時，肽聚糖層的孔徑變小，通透性降低，與細胞結合的結晶紫與碘的復合物不容易被脫

2、掉，因此細胞仍保留初染時的顏色。而革蘭陰性菌的細胞壁較薄，脂類含量較高，肽聚糖含量較低，乙醇脫色時溶解外層類脂質(zhì)，增加了細胞壁的通透性，使初染的結晶紫和碘的復合物易于滲出，細胞被脫色，經(jīng)復染之后，又染上了復染的顏色。,實驗原理,芽孢染色法的原理 芽孢具有厚而致密的壁，折光性強，通透性低，不易著色，用一般染色法只能使菌體著色而芽孢不著色。芽孢染色法都基于同一個原則，即除了使用著色力強的染料外，還需要加熱或延長染色時間等，促進標本著色。然后使菌體脫色而芽孢上的染料仍然保留。經(jīng)復染之后，菌體和芽孢呈不同的顏色。,實驗材料-菌株,金黃色葡萄球菌（209P） 18-20h斜面 大腸桿菌 18-20h斜面 枯草芽孢桿菌 20-24h斜面,實驗材料-試劑,蒸餾水 結晶紫 盧戈碘液 95%乙醇 番紅花紅 孔雀綠,實驗步驟,革蘭染色法 涂片 干燥 固定 初染（結晶紫1分鐘） 水洗 媒染（碘液1分鐘內(nèi)換2-3次） 水洗 脫色（95%乙醇20-30秒） 水洗 復染（番紅花紅5分鐘） 水洗 吸水紙吸干 鏡檢,實驗步驟,芽孢染色法 涂片 干燥 固定 初染（孔雀綠20分鐘） 水洗 復染（番紅花紅5分鐘） 水洗 吸水紙吸干 鏡檢,實驗結果,實驗結果,其它項目,預習酵母菌和霉菌的形態(tài)觀察

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