2011食品農(nóng)藥殘留分析.ppt

1、農(nóng)藥殘留與分析,緒論,農(nóng)藥:用于預(yù)防或控制危害農(nóng)、林的病、蟲、草和其他有害生物以及有目的地調(diào)節(jié)植物、昆蟲生長的化學(xué)合成物或者幾種物質(zhì)混合物及其制劑。,農(nóng)藥殘留: 由于農(nóng)藥的應(yīng)用而殘存于生物體 、農(nóng)產(chǎn)品、環(huán)境中的農(nóng)藥親體及其具有毒理學(xué)意義的雜質(zhì)、代謝轉(zhuǎn)化產(chǎn)物和反應(yīng)物等所有衍生物的總稱。,農(nóng)藥殘留毒性：因攝入或長時(shí)間重復(fù)暴露農(nóng)藥殘留而對(duì)人、畜以及有益生物產(chǎn)生急性或慢性中毒。,農(nóng)藥的降解（半衰期） 農(nóng)藥性質(zhì)：穩(wěn)定性、溶解性等 環(huán)境因子：溫度、降水、陽光、風(fēng) 稀釋作用：植物的吸收,農(nóng)藥分析方法的進(jìn)展,* 重量法和滴定法 - 無機(jī)農(nóng)藥（銅、砷、鉛） * 銀量法、電位滴定法和重量法 - 有機(jī)氯農(nóng)藥 （50

2、年代；沒有特異性，類似結(jié)構(gòu)的雜質(zhì)或制劑中輔助劑影響測定結(jié)果，測定步驟多，花費(fèi)時(shí)間長） * 比色法（可見光范圍內(nèi)的分光光度法） - 有機(jī)磷農(nóng)藥 * 紫外和紅外分光光度法 - 芳香基團(tuán)和雜環(huán)農(nóng)藥（60年代，制備樣品操作簡單，方法具有特異性） * 薄層色譜法 - 具有分離雜質(zhì)能力，適用于熱穩(wěn)定性差、易分解、蒸氣壓低的農(nóng)藥 * 氣相色譜法 - 大部分農(nóng)藥（60年代后期，選擇性好，靈敏度高，樣品處理簡單） * 高效液相色譜法 - 熱穩(wěn)定性差、不易揮發(fā)農(nóng)藥，但費(fèi)用高（70年代） * 質(zhì)譜的應(yīng)用,農(nóng)藥殘留：有機(jī)溶劑和從基質(zhì)中能否提取可分為,可提取殘留（Extractable residues）； 不可提取殘

3、留（Unextractable residues）,結(jié)合殘留（bound residues） 指農(nóng)藥或代謝物與土壤中的腐殖質(zhì)、植物體的木質(zhì)素、纖維素通過化學(xué)物理作用牢固結(jié)合形成的殘留物。,軛合殘留（Conjugated residues） 指農(nóng)藥或代謝物與生物體內(nèi)內(nèi)源物質(zhì)如糖苷、氨基酸、葡萄糖醛酸等在酶的作用下結(jié)合形成的極性較強(qiáng)、毒性較低的殘留物。,當(dāng)農(nóng)藥直接用于農(nóng)作物、畜禽或環(huán)境介質(zhì)（包括水、空氣、土壤）時(shí)，或者間接通過揮發(fā)、漂移、徑流、食物或飼料等方式暴露時(shí)，就產(chǎn)生了農(nóng)藥殘留。,農(nóng)藥殘留的來源,過高的農(nóng)藥殘留量一般是由于使用化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、不易分解的農(nóng)藥品種，或者是不合理地過量使用農(nóng)藥而造成

4、的。,初始?xì)埩袅浚涸谵r(nóng)藥施用結(jié)束或暴露（或者轉(zhuǎn)移）停止時(shí)發(fā)生的農(nóng)藥殘留程度。 在此后農(nóng)藥殘留量取決于降解速率，降解速率主要受農(nóng)藥的性質(zhì)、受體的性質(zhì)以及環(huán)境因素三方面的影響。,農(nóng)藥殘留的來源,殘留半衰期：與農(nóng)藥的性質(zhì)包括蒸氣壓、穩(wěn)定性、溶解度和分散性有關(guān)，溶解度影響環(huán)境介質(zhì)、生物體內(nèi)的分配、轉(zhuǎn)移；分散性影響介質(zhì)中的附著、分布、向大氣的轉(zhuǎn)移；受體的性質(zhì)影響農(nóng)藥的吸附、吸收、貯存和分布，而植物的生長速率影響生長稀釋作用；環(huán)境因子影響如溫度、降水、陽光、風(fēng)等影響農(nóng)藥的揮發(fā)、降解和轉(zhuǎn)移。,因攝入或長時(shí)間重復(fù)暴露農(nóng)藥殘留而對(duì)人、畜以及有益生物產(chǎn)生急性毒性或慢性毒性叫農(nóng)藥殘留毒性。,農(nóng)藥殘留毒性：,農(nóng)藥殘留

5、毒性的大小受農(nóng)藥的性質(zhì)和毒性、殘留量多少等因素的制約而表現(xiàn)極大的差異。,農(nóng)業(yè)資源狀況,人均耕地嚴(yán)重不足: 人均0.11公頃，不足世界人均耕地的45%。 人均水資源嚴(yán)重不足:人均只有2300 m3（世界平均的1/4）。 2010年我國農(nóng)藥原藥生產(chǎn)量為160萬噸（出口占60%）。 農(nóng)藥登記品種為600余種，常年生產(chǎn)270種。 我國農(nóng)藥藥害面積達(dá)500萬畝以上，損失達(dá)10億元。 我國農(nóng)田化肥平均施用量已達(dá)375kg/公頃（超過污染安全上限225kg/公頃）。 森林覆蓋面積是世界平均水平的16%-25%。,中國食品產(chǎn)業(yè),1999年我國食品工業(yè)總產(chǎn)值為7,828億，農(nóng)業(yè)總產(chǎn)值為24,542億，食品工業(yè)總

6、產(chǎn)值與農(nóng)業(yè)總產(chǎn)值之比僅為0.32/1； 2004年我國食品工業(yè)總產(chǎn)值超過16,000億，與農(nóng)業(yè)總產(chǎn)值之比突破0.5/1。 2010年我國食品工業(yè)總產(chǎn)值超過53,000億，與農(nóng)業(yè)總產(chǎn)值之比突破1.05/1。,我國針對(duì)92種作物制定182種農(nóng)藥的808個(gè)MRLs。,136種農(nóng)藥 479個(gè) 國家最大殘留標(biāo)準(zhǔn),118種農(nóng)藥 329個(gè) 行業(yè)最大殘留限量,三年內(nèi)準(zhǔn)備發(fā)表 180余種農(nóng)藥7000多個(gè)MRLs,農(nóng)藥最大殘留限量（MRL）,我國農(nóng)藥管理,農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)制定步驟,農(nóng)藥殘留試驗(yàn),推薦MRL值,NOEAL,MRL風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估,膳食結(jié)構(gòu),CODEX,ADI,+已登記作物MRL,確定MRL,農(nóng)產(chǎn)品/食品供應(yīng)

7、鏈,食品溯源系統(tǒng),質(zhì)量控制系統(tǒng),Carbendazim的 MRL,大米(Rice) 小麥(Wheat) 玉米(Corn) 大豆(Soy Bean) 花生(Peanut) 番茄(Tomato) 黃瓜(Cucumber) 蘆筍（asparagus） 辣椒(Fresh) 梨果類水果（pome fruit） 葡萄（grape） 其他水果（other fruits） 油菜籽（rapeseed） 甜菜（sugarbeet）,2.00 0.05 0.50 0.20 0.10 0.50 0.50 0.10 0.10 3.00 3.00 0.50 0.10 0.10,0.10 0.10 0.50 0.20 0.

8、10 5.00 0.50 - 5.00 2.00 3.00 1-7.00 - -,Commodity Name,MRLs（mg/kg）,中國,韓國,中國MRL與國外的比較,韓國 Carbendazim的 MRL(70多個(gè)),4000多個(gè)農(nóng)藥公司 600多種農(nóng)藥原藥生產(chǎn) 3000多種農(nóng)藥產(chǎn)品 農(nóng)藥生產(chǎn)量226萬噸, 194億$(2009年),methamidophos monocrotophos parathion parathion methyl phosphamidon,Aldicarb, carbofuran, coumaphos, demeton, ethoprophos, fenami

9、phos, fonofos, isazofos, isofenphos-methyl, Phorate, phosfolan, phosfolan-methyl, sulfotep, terbufos,2007,glyphosate Paraquat imidacloprid chlorpyriphos avermectin,禁止用于蔬菜, 果樹, 茶葉,2006年11月,中華人民共和國農(nóng)業(yè)法 中華人民共和國漁業(yè)法 中華人民共和國農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全法 農(nóng)藥管理?xiàng)l例 獸藥管理?xiàng)l例 飼料和飼料添加劑管理?xiàng)l例 農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理?xiàng)l例 無公害農(nóng)產(chǎn)品管理辦法 植物檢疫條例 中華人民共和圍動(dòng)物防疫法 中華

10、人民共和國進(jìn)出境動(dòng)植物檢疫法,我國食品安全相關(guān)法規(guī),中華人民共和國食品安全法 中華人民共和國產(chǎn)品質(zhì)量法 中華人民共和國標(biāo)準(zhǔn)化法 中華人民共和國環(huán)境保護(hù)法 中華人民共和國進(jìn)出口商品檢驗(yàn)法,綜合協(xié)調(diào)和監(jiān)督指導(dǎo),初級(jí)農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)環(huán)節(jié)的監(jiān)管,農(nóng)業(yè)部,質(zhì)檢總局,監(jiān)管生產(chǎn)加工和進(jìn)出口活動(dòng),衛(wèi)生部門,公安部門,工商部門,食藥監(jiān)管局,打擊食品安全犯罪,監(jiān)管生產(chǎn)經(jīng)營、流通環(huán)節(jié),監(jiān)管食品消費(fèi)環(huán)節(jié),中國食品安全監(jiān)管系統(tǒng),國務(wù)院食品安全辦,“從農(nóng)田到餐桌”影響食品安全的因素 Factors Affecting Food Safety from Farm to Table,農(nóng)田 農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn) 食品加工 流通 餐桌,腐敗變質(zhì)

11、 污染 制作不當(dāng),新技術(shù)新食品資源,核污染等,制假摻假 泛用濫用 違規(guī)使用 不潔污染,商務(wù)部,化 肥,農(nóng)藥殘留毒性的類型, 化學(xué)穩(wěn)定性：難以生物降解、脂溶性強(qiáng)、生物體富集 有機(jī)氯農(nóng)藥，如六六六、DDT 三致性：致癌、致畸、致突變 殺蟲脒的代謝產(chǎn)物（N-4-氯鄰甲苯胺）、 代森類殺菌劑代謝產(chǎn)物（乙撐硫脲）、敵枯雙、三環(huán)錫等 環(huán)境激素化合物：也稱內(nèi)分泌干擾化合物 美國EPA提出60種環(huán)境激素化合物，其中除草醚等農(nóng)藥39種。 遲發(fā)性神經(jīng)毒性：下肢麻痹、肌肉無力、食欲不振攝入 溴苯磷、 TOCP（三鄰甲苯磷酸酯，1930年美國引起姜酒事件）,農(nóng)藥殘留分析的目的, 研究農(nóng)藥使用后在環(huán)境中的代謝和降解，制

12、定農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)、農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn)； 檢測食品和飼料中農(nóng)藥殘留的種類和水平，以確定其質(zhì)量和安全性，滿足對(duì)食品質(zhì)量和安全的管理需要； 檢測環(huán)境介質(zhì)和生態(tài)系生物構(gòu)成的農(nóng)藥殘留種類和水平，以了解環(huán)境質(zhì)量和評(píng)價(jià)生態(tài)系統(tǒng)的安全性，滿足環(huán)境監(jiān)測與保護(hù)的管理需要。, 殘留水平低, ng(10-9g)、pg(10-12g)水平； 使用農(nóng)藥歷史的未知性和樣品種類的多樣性，造成分析過程的復(fù)雜性； 農(nóng)藥品種的不斷增多，對(duì)農(nóng)藥多殘留分析提出了更高的技術(shù)適應(yīng)性要求。,農(nóng)藥殘留分析是分析化學(xué)中最復(fù)雜的領(lǐng)域，原因是：,殘留分析方法的種類, 單殘留方法（Single Residue Methods） 多殘留方法（Multi

13、residue Methods）,農(nóng)藥殘留分析程序, 樣品采集 ：采樣、樣品運(yùn)輸和保存； 樣品預(yù)處理：縮分、剔除或粉碎樣品，成為檢測樣品； 樣品制備：提?。簭脑嚇又蟹蛛x殘留農(nóng)藥的過程； 凈化：提取物中的農(nóng)藥與干擾物質(zhì)分離的過程； 分析測定,農(nóng)藥殘留分析方法的選擇, 農(nóng)藥的理化特性、分析任務(wù)的要求、樣品的性質(zhì)及樣品來源； 單殘留或多殘留方法； 最大殘留限量、方法檢測限以及方法總誤差； MRL與LOD/LOQ關(guān)系、相對(duì)誤差（準(zhǔn)確度）+2相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（精密度） 分析方法的有效性； 分析時(shí)間和費(fèi)用。,殘留分析的程序,Pesticide treatment,Harvest,Instrumental An

14、alysis,1950年代,1958年,Analytical Sensitivity,Delany Clause,1960年代,現(xiàn)在,No additive should be deemed safe if it is found to induce cancer when ingested by man or animal of if it is found. - zero tolerance,Instruments are too sensitive to find very tiny amount of pesticides now,- 可接受的日攝入量(Acceptable Daily

15、 Intake，ADI） 指在一生中，對(duì)消費(fèi)者健康沒有可感知危險(xiǎn)的日攝入量。 單位為：mg/kg/day。,- 容許最大限量（Permissible level） 在新鮮食品中允許的最大殘留限界。,ADI：日攝取量（ppm） S：安全系數(shù) F：食品的消費(fèi)量,- 臨時(shí)可接受日攝入量（TADI） 指可以獲得足夠的以致額外的生化、毒性以及其它所需數(shù)據(jù)，而確定的有限時(shí)期內(nèi)可接受的日攝入量。,TADI ADI,- 最大殘留限量(MRL) 指由食品營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)推薦的，食品或動(dòng)物飼料中允許的農(nóng)藥殘留物的最大濃度（毫克/公斤）。是根據(jù)在毒理學(xué)上認(rèn)為可以接受的食品農(nóng)藥殘留量制定的。,一、 樣品的種類 二、 取

16、樣方法 三、 樣品的包裝、記錄和貯存 四、 樣品的預(yù)處理,、樣品的采集與預(yù)處理,一、 樣品的種類,a.主觀樣品 為研究農(nóng)藥殘留量與各種因素的關(guān)系，從設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)區(qū)域內(nèi)采集的樣品。 b.客觀樣品 監(jiān)測樣品和執(zhí)法樣品，測定的農(nóng)藥殘留種類是未知的或施藥背景不清楚的樣品。,二、 取樣方法,a.取樣原則 - 代表性 - 方法與目的保持一致 - 精度要求 - 防止化學(xué)變化或丟失 - 防止污染,b.商業(yè)取樣分類 - 監(jiān)測調(diào)查取樣：隨機(jī)、概率、分 布水平 - 執(zhí)法取樣：強(qiáng)制性、超標(biāo)與否,c.取樣量要求 - 小的或輕的產(chǎn)品 1.01.5Kg - 中等大小產(chǎn)品 2.02.5Kg - 大的產(chǎn)品 4.05.0Kg -

17、肉、禽、魚 1.01.5Kg - 谷物和制品 0.51.0Kg,d.采集要求 - 根莖類蔬菜 采集整個(gè)果實(shí) - 豆類 整個(gè)果實(shí) - 果類蔬菜 去除莖部 - 谷物 整個(gè)籽粒 - 肉類 整體,三、樣品的包裝、記錄和貯存,編號(hào)： 樣品名稱： 采樣時(shí)間： 地點(diǎn)：,溫度 濕度 光照 隔離,記錄內(nèi)容,貯存要求, 粉狀物：粉碎、過40目篩或勻漿，取250-500g樣品 谷物：研磨后按四分法進(jìn)行 小體積水果和蔬菜：混合前切開 大體積水果和蔬菜：混合前切碎，保證樣品的代表性 液體樣品：充分混合，過濾除去漂浮物、沉淀物和泥土 土壤：風(fēng)干、粉碎、過篩，除去石塊、動(dòng)物體殘?bào)w等殘物,四、樣品的預(yù)處理,蔬菜類的預(yù)處理過程

18、,果類的預(yù)處理過程,谷類、豆類的預(yù)處理過程,馬鈴薯和生姜的預(yù)處理過程,玉米的預(yù)處理過程,豌豆的預(yù)處理過程,、樣品的制備,稱量,液固提取,減壓過濾,濃縮,液液提取,凈化,制備過程中避免組分發(fā)生化學(xué)變化； 要防止和避免欲測定組分的沾污； 盡可能減少無關(guān)化合物引入制備過程； 盡可能簡單易行。,制備原理,利用殘留農(nóng)藥與樣品基質(zhì)的物理化學(xué)差異，使其從檢測系統(tǒng)有干擾作用的樣品基質(zhì)中提取分離出來（相似相溶）。 極性-溶解度、分配系數(shù)；揮發(fā)性-蒸汽壓。,制備原則,1. 樣品提??？,是指通過溶解、吸附（吸著）或揮發(fā)等方式將樣品中的殘留農(nóng)藥分離出來的操作步驟，也叫萃取。,提取方案的選定主要考慮殘留農(nóng)藥的理化特性而

19、決定。 其外還有試樣類型、樣品組分（脂肪、水含量）、農(nóng)藥在樣品中存在形式以及檢測方法。,1.1 溶劑提取法,根據(jù)農(nóng)藥與樣品組分在不同溶劑中的溶解性差異，選用對(duì)殘留農(nóng)藥溶解度大的溶劑，經(jīng)過震蕩、搗碎等方式將分析物從樣品基質(zhì)中提取出來的方法。,按提取對(duì)象分,液-液提取,液-固提取,液-氣提取,- 提取溶劑的選擇,a. 溶劑的極性、對(duì)分析物的溶解度 b. 溶劑的純度、穩(wěn)定性、毒性 c. 沸點(diǎn)：4080者為宜 d. 提取溶劑回收的難易與經(jīng)濟(jì)性,a. 液- 固提取,指通過溶解、擴(kuò)散作用使固相物質(zhì)中的化合物進(jìn)入溶劑中的過程。,b. 液 - 液提取,原理：利用樣品中不同組分分配在兩種不混溶的溶劑中溶解度或分

20、配比的不同來達(dá)到分離、提取或純化的目的。,由于液-液萃取過程中劇烈振動(dòng)，經(jīng)常發(fā)生乳化現(xiàn)象，特別是那些含脂肪的樣品,通過改變KD; 改變?nèi)軇? 緩沖劑調(diào)節(jié)pH; 鹽調(diào)節(jié)離子強(qiáng)度等。,破乳方法,乳化原因,水樣：液液提取 (生物液體，如尿液、奶液、血漿，加入乙醇或鹽) b. 植物和動(dòng)物樣品：固液提取+液液提取 c. 土壤樣品：固液提取+液液提取 d. 食品樣品：固液提取+液液提取,1.4不同樣品中殘留農(nóng)藥的提取,2. 凈化,是指通過物理的或化學(xué)的方法除去提取物中對(duì)測定有干擾作用的雜質(zhì)的過程。,脂類：蠟質(zhì)、脂肪、油脂 色素：葉綠素、葉黃素、花青素 氨基酸衍生物：蛋白質(zhì)、肽、生物堿、氨基酸 碳水化合物：

21、糖、淀粉、醇 木質(zhì)素：酚類及其衍生物,農(nóng)藥殘留分析中常見的干擾物質(zhì)：,2.1 柱層析法,利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物與干擾化合物分離，達(dá)到分離和富集目標(biāo)化合物的目的。,固相萃取的模式及原理,反相固相萃取 正相固相萃取 離子交換固相萃取, 陰離子交換 陽離子交換,流動(dòng)相：極性（水溶液）或中等極性 固定相：非極性。 分離對(duì)象：中等到非極性物質(zhì)。,反相固相萃取,分析物中的CH鍵 + 硅膠表面官能團(tuán)吸附極性溶液中的有機(jī)分析物保留在SPE。 用非極性溶劑解吸吸附在固定相中的目標(biāo)物質(zhì)。,反相固相萃取原理,正相固相萃取,流動(dòng)相：非極性、中等極性 固定相：極性 分離物質(zhì)：極性、中等極性、非極性,正相

22、固相萃取原理,保留取決于分析物的極性官能團(tuán)與吸附劑表面的極性官能團(tuán)之間的相互作用。 用比樣品本身更極性的溶劑洗脫吸附的分析物質(zhì)。,- 吸附劑類型,- 弗羅里硅土：Florisil，吸附活性相對(duì)弱 是一個(gè)多孔性的并有很大面積的固體顆粒，需要高溫加熱，提高對(duì)雜質(zhì)的吸附能力，而不影響農(nóng)藥的淋洗率。 - 氧化鋁：價(jià)格便宜，不經(jīng)常用 - 硅膠：Silica gel，除去糖等極性雜質(zhì),離子交換固相萃取,原理：靜電吸引，化合物上的帶電荷基團(tuán)與鍵合硅膠上的帶電荷基團(tuán)之間的吸引。,適用于帶有電荷的化合物（水溶液、有機(jī)溶液）。,溶劑極性的影響, 目標(biāo)化合物在極性/非極性溶劑中的溶解度，這主要涉及淋洗液的選擇。 目

23、標(biāo)化合物有無可能離子化（可用調(diào)節(jié)pH值實(shí)現(xiàn)離子化）。 目標(biāo)化合物有無可能與吸附劑形成共價(jià)鍵。 在吸附劑上吸附點(diǎn)的競爭程度，關(guān)系到能否很好分離。,操作程序,活化,上樣,洗滌,洗脫 收集,？,HPLC柱,SPE,減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,包括旋轉(zhuǎn)燒瓶、冷凝器、溶劑接收瓶、真空設(shè)備、加熱源等。,3、濃縮技術(shù),2. 氮吹儀, 不能用于燃點(diǎn)低于100 的物質(zhì) 氮?dú)饧兌雀哂?9.999% 不能用于酸、堿物質(zhì)的濃縮 酸性用碳酸氫鈉溶解中和 一天一換水浴的水,注意事項(xiàng),. 農(nóng)藥殘留分析的質(zhì)量控制,a.試劑要求,蒸餾水：除掉水中金屬離子。 試 劑：殘留分析中所用試劑應(yīng)為分析純（AR）以上， HPLC流動(dòng)相和凈化溶劑為色譜

24、純（GR）。,1. 實(shí)驗(yàn)室的基礎(chǔ)條件,b. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境條件,C.人員要求, 應(yīng)具有大專以上文化水平，經(jīng)培訓(xùn)、合格后上崗 熟練掌握殘留分析技術(shù)，要做到理解原理、操作正確 敬業(yè)能力 勤快、不恥下問,d. 管理制度, 樣品管理：登記、分裝標(biāo)簽； 試劑管理：專人負(fù)責(zé)、分類存放； 儀器管理：專人負(fù)責(zé)、建卡立檔，經(jīng)常進(jìn)行安全檢查； 數(shù)據(jù)管理,2. 分析方法的可靠性確認(rèn),方法的靈敏度：方法對(duì)單位質(zhì)量的待測物質(zhì)的變化所引起的相應(yīng)量變化程度。 最小檢出量（Limit of detection） 3空白的背景信號(hào) b. 方法的準(zhǔn)確度：測定值與真值（假定）之間符合程度的度量。 c. 方法的精密度：測定值之間的一致程

25、度 d. 標(biāo)準(zhǔn)曲線：表達(dá)被分析物質(zhì)不同質(zhì)量與測定儀器響應(yīng)之間的線形定量關(guān)系的曲線。 e. 回收率實(shí)驗(yàn), 樣品運(yùn)輸及儲(chǔ)存 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 防止實(shí)驗(yàn)室污染和干擾 減少提取和濃縮過程的殘留農(nóng)藥損失 回收率測定,3. 農(nóng)殘分析重要環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制,、農(nóng)藥多殘留分析,農(nóng)藥多殘留方法（Multi-residue methods，MRMs)：,是在一次分析中同時(shí)測定一種以上農(nóng)藥殘留量的方法。,影響因子： 1、溶劑能夠提取的農(nóng)藥殘留種類的廣泛性、以及提取的徹底性； 2、凈化中只除去雜質(zhì)的能力； 3、測定儀器對(duì)各種農(nóng)藥的分離和相應(yīng)能力以及測定步驟的多少。,1.酶抑制法,有機(jī)磷和氨基甲酸酯殺蟲劑的共同毒

26、理機(jī)制是抑制昆蟲膽堿酯酶（Ache）的活性，造成乙酰膽堿（Ach）的積累，影響昆蟲正常的神經(jīng)傳導(dǎo)而致死。酶抑制法基于這種原理以乙酰膽堿酯酶與蔬菜樣品的提取液反應(yīng)，檢測提取液中這類殺蟲劑的存在。 特點(diǎn)：具有快速、靈敏、費(fèi)用低、特異性強(qiáng)和適用于現(xiàn)場大批量樣品篩選等優(yōu)點(diǎn)。,固相微萃取法是不需要柱填充物，使用溶劑進(jìn)行解吸，它只要一支類似進(jìn)樣器的固相微萃取裝置即可完成全部前處理和進(jìn)樣工作。 特點(diǎn)：可同時(shí)檢測130余種農(nóng)藥，具有操作簡單、費(fèi)用少、易于自動(dòng)化等一系列優(yōu)點(diǎn) 。,2. 固相微萃取法,50 g 樣品+乙腈 100mL,離心,濃縮（上層液 3 mL）,定容（20% acetone/蒸餾水）,蒸餾水

27、10mL,萃取,NaCl 2g,濃縮 甲醇/二氯甲烷(3/7, v/v) 3 ml,NH2小柱 甲醇/二氯甲烷(3/7, v/v) 5 ml +收集 5 ml,3. 色譜快速檢測法, GC : HP 6890 Plus withG2614A autosampler Column : DB 5 Capillary column(30m0.25mm(I.d),0.25) Inlet : temperature 250, injection volume 1, split l : 60, constant flow 1.2/min Detector : temperature 320, make u

28、p(N2) : 10/min Oven(total 40min) 130(2min hold) increased at 7/min to 200 at 2/min to 220(4min hold) finally at 10/min to 300(6min hold),GC/ECD儀器條件（73種農(nóng)藥）, GC : HP 5890 Plus withG2614A autosampler Column : DB 5 Capillary column(30m0.25mm(I.d),0.25) Inlet : temperature 250, injection volume 1, splite

29、ss constant flow 1.2/min Detector : temperature 320, make up(N2) : 10/min fuel gas : H2 3.1/min air 60/min Oven(total 40min) 130(2min hold) increased at 7/min to 200 at 2/min to 220(4min hold) finally at 10/min to 300(6min hold),2) GC/NPD儀器條件（59種農(nóng)藥）, HP 1100 series Column : Phenomenox (25 , particle

30、 size 5, C18) Inlet : Injection volume 10 Detector - UV : Wavelength : 220 nm - FL : Excitation : 286 nm Emission : 316 nm Mobile phase - H2O/acetonitrile(45/55, v/v) : 0 min 5 min 1.0 ml/min - H2O/acetonitrile(30/70, v/v) : 5.1 min 25 min 1.3 ml/min,3) HPLC (UV, FL)儀器條件（11種農(nóng)藥）,農(nóng)藥色譜圖 - GLC/NPD (stan

31、dard, 1 /),農(nóng)藥色譜圖 HPLC/FL (standard, 1 /), GC : CP3800 (Varian, USA) Column : CP 8132 Rapid -MS(10m0.53mm(I.d),0.25) Inlet : temperature 280, injection volume 1, split ratio 20:1 constant flow 1.2/min Oven: 60(1.5min hold) increased at 18/min to 280(1min hold) Mass Spectrometric Detector : Saturn 220

32、0 (Varian, USA) Ion trap: temperature 230 Manifold: temperature 120 Transfer line: temperature 220 ,GC/MS儀器條件(206種農(nóng)藥),農(nóng)藥多殘留分析的操作過程,Solid Phase Extraction Technique with QuEChERS method (STQ),STQ萃?。≦uEChERS）,Homogenize,NaCl1g,Magnesium sulfate anhydrous 4g,Trisodium ctrate dihydrate 1g,攪拌（1 min）,離心（3

33、000rpm5 min）,Disodium hydrogen citrate 1.5-water 0.5g,樣品 10g (谷物 5g +H2O 10mL),取0.5mL（相當(dāng)于樣品0.5g ） GC-A法 or GC-B法,取乙腈 層,30min/4樣品,取1mL（相當(dāng)于樣品1g） LC法,乙腈 10mL,前處理 （GCLC法）, 切碎, Homogenize, 粉碎, 加試劑, 離心, ,離心后, 攪拌,STQ-GCA法,Toluene0.3mL,淋洗 甲苯/乙腈（1/3）0.6mL,淋洗 乙腈0.5mL,凈化10min/4樣品,C18-50mg,流出液,GC/MS（進(jìn)樣20uL： 5mg

34、 ）,定容（2 mL, 甲苯/乙腈）,GCS-20mgPSA-30mg,取 0.5mL,1%PEG(300)/丙酮4uL,C18 , . .,GCS , PSA , ., 2 GCS PSA ,C18 ,GCSPSA , Chlorophyll(),C18, ,GCS,PSA,STQ-GCB,H2O2 mL,20%氯化鈉 20mL,淋洗(80%乙腈/H2O)1mL,凈化20min/4樣品,C18-50mg：凈化,溶出液,GC/MS（進(jìn)樣25uL）,PLS3-20mg：Trap,取 0.5mL,1%PEG(300)/丙酮2uL,H2O0.2mL,溶出液,PLS3-20mg：再Trap,干燥 3min,連接PSA-30mg：凈化,淋洗丙酮 /正己烷（3/7）1mL,溶出液,定容（1 mL,丙酮 /正己烷（3/7）, ,PLS3, , , , H2O, PLS3 Trap ., H2O , PLS3