血涂片染色郭麗香講解

血涂片染色主講人：郭麗香瑞特（氏）（Wright）染色法吉姆薩（Giemsa）染色法復(fù)合染色法染料的組成染料的組成MCL

＋NaE―――ME↓＋NaCL

亞甲藍(lán)（堿性）

伊紅（酸性）

瑞特染料瑞特染料+甲醇+甘油-----瑞氏染液甲醇的作用：溶解染料，解離出M+和E-

凝固蛋白增加染色效果細(xì)胞著色原理包括物理吸附和化學(xué)親和作用。染色原理染色原理成分本質(zhì)染色原理染色結(jié)果血紅蛋白、嗜酸性顆粒堿性蛋白（嗜酸性物質(zhì)）正電荷，堿性物質(zhì)，易與帶負(fù)電荷的酸性染料伊紅結(jié)合被染成粉紅色或紅色系列RNA、DNA等細(xì)胞核蛋白和淋巴細(xì)胞胞漿及嗜堿性顆粒酸性蛋白（嗜堿性物質(zhì)）負(fù)電荷，酸性物質(zhì)，易與帶正電荷的亞甲藍(lán)結(jié)合被染成藍(lán)色系列中性顆粒中性物質(zhì)與酸性染料和堿性染料結(jié)合染成紫紅色染色原理操作勿沖洗再加等量或稍多瑞氏染色乙液用洗耳球吹勻，使之與染液充分混勻，并染色5－10分鐘直接流水沖洗3-5分鐘（切勿先到掉染液）涂片經(jīng)水洗干燥后待檢李四123涂片干燥后加瑞氏染色甲液3-5滴覆蓋整個血膜0.5-1分鐘染色結(jié)果血膜外觀成紫紅色。紅細(xì)胞呈粉紅色，細(xì)胞核呈紫紅色，嗜酸性顆粒呈桔紅色，嗜堿性顆粒呈紫黑色。質(zhì)量保證瑞特染液質(zhì)量封閉條件下，染液儲存時間愈久，染色效果愈好PH染液偏酸，染色偏紅，染液偏堿，染色偏藍(lán)脫色與復(fù)染過深，甲醇脫色過淺，復(fù)染操作染色時機(jī)染液用量混勻染色時間沖洗血涂片染色質(zhì)量保證緩沖液的pH6.4－6.8由于蛋白質(zhì)系兩性電解質(zhì)，所帶電荷隨溶液pH而定偏酸性環(huán)境中下正電荷增多，易與伊紅結(jié)合，染色偏紅偏堿性環(huán)境中負(fù)電荷增多，易與美藍(lán)或天青結(jié)合，染色偏藍(lán)質(zhì)量保證-PH染色偏酸，紅細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞顆粒偏紅，白細(xì)胞核呈淡藍(lán)色或不著色。染色偏堿，細(xì)胞呈灰藍(lán)色，嗜酸性顆?？扇境砂岛稚?，甚至紫黑色或黑色。質(zhì)量保證偏酸合適偏堿染色時機(jī)：未干透的血膜不能染色，否則染色時血膜會脫落。染液用量：以剛好覆蓋血膜為宜。染色時間：環(huán)境溫度越低，細(xì)胞數(shù)越多，染色時間越長。沖洗：沖洗時不能先倒掉染料，應(yīng)用流水沖去，以防染料沉淀在血膜上。質(zhì)量保證-操作對胞漿染色效果好，特別是中性顆粒，對核著色較差。瑞特（氏）（Wright）染色法對核染色好，但胞質(zhì)和顆粒較差。吉姆薩（Giemsa）染色法：即以稀釋吉姆薩