CNAS-TRL-018-2022 醫(yī)學實驗室 核酸檢測質(zhì)量和安全指南

發(fā)布日期：2022年03月01日醫(yī)學實驗室核酸檢測質(zhì)量和安全指南中國合格評定國家認可委員會CNAS-TRL-018:2022 2 3 3 3 4 4 4 4 6 8 10 10 10 12 12 12 12 13 13 14 14 15 16 19 20CNAS-TRL-018:2022CNAS-TRL-018:2022醫(yī)學實驗室核酸檢測質(zhì)量和安全指南ISO/TS20658《醫(yī)學實驗室-樣CNAS-CL02-A001：2021《CNAS-TRL-018:2022核酸檢測過程分為檢驗前、檢驗中和檢驗后（具檢測過程檢驗前過程檢測項目的申請，知情同意的簽署，樣本的采集、運輸、接收和保存、耗材的驗收等檢驗中過程檢測過程中的核酸提取質(zhì)量控制、核酸擴增、室內(nèi)質(zhì)量控制，室間質(zhì)量評價，檢驗過程的標準操作程序及實驗記錄等檢驗后過程包括報告的解釋及發(fā)放，數(shù)據(jù)的處理及保存，檢驗后樣本和材料的保存、處理及銷毀等4.1.1.1送檢申請、樣本采集、樣本運輸、樣本接收等檢驗前過程應符合GB/T4.1.1.3報告的解釋及發(fā)放，數(shù)據(jù)的處理及保存等檢驗后過程應符合GB/TCNAS-TRL-018:2022CNAS-TRL-018:2022a）設專門運維人員，按照設施設備的使用說明進行保養(yǎng)與維護，并制定巡a）定量檢測方法：分析性能驗證內(nèi)容至少應包括精密度、CNAS-TRL-018:2022b）定性檢測方法：驗證內(nèi)容至少應包括測定下限、特異性、準確度（方法CNAS-TRL-018:2022a）人員選擇。要對選擇人員的背景、健康監(jiān)護、培訓和能力等要素進行綜b）人員培訓。做好實驗人員的崗前培訓、在崗持續(xù)培訓以及定期或不定期CNAS-TRL-018:20224.1.4.3操作CNAS-TRL-018:2022a)風險材料的存儲，包括菌毒株、檢測的陽性材料、存儲的病死動物尸體1）放置區(qū)域：全自動核酸提取純化設備應放置在核本制備區(qū)，PCR儀等檢測設備應放置于擴增區(qū)等相關(guān)區(qū)域內(nèi)，相互獨立。實驗3）設備工作條件：環(huán)境溫濕度應符合設備要求；實驗室承重及實驗臺承重a）防污染驗證：推薦進行防污染驗證?？刹捎闷灞P法，即陰性和陽性質(zhì)控c）提取方法學比對：對于同一檢測項目同時采用不同方法進行核酸提取純CNAS-TRL-018:2022試劑配制、樣本核酸純化、反應體系構(gòu)建、PCR擴增、數(shù)據(jù)分析等一系列流程制程序控制各個功能組件的運轉(zhuǎn)、通過網(wǎng)關(guān)收集/分析數(shù)據(jù)并可通過網(wǎng)關(guān)將數(shù)據(jù)CNAS-TRL-018:2022c）處理模塊：樣本純化，包括裂解、清洗、洗脫；PCR反應體系構(gòu)建，即e）庫存管理單元：存儲試劑、質(zhì)控品、裂解液、洗脫液、磁珠、洗液等；存儲在生物安全二級或以上級別實驗室使用，并嚴格執(zhí)行實b）試劑、耗材管理：必須按照廠家要求進行試劑、耗材的存儲和有效期的5基于高通量測序的核酸檢測程序5.1工作流程高通量測序核酸檢測流程如下：樣本接收核酸提取樣本前處理測序結(jié)果解讀報告發(fā)放圖1高通量測序核酸檢測流程圖其中檢驗前、檢驗中、檢驗后過程要求應符合GB/T22576.1中5.4～5.9要求，高通量測序的核酸檢測工作流程中還需注意以下幾點：a)文庫構(gòu)建：提取后的核酸經(jīng)過片段化、反轉(zhuǎn)錄(如適用)、末端修復、5'端磷酸化、加接頭和標簽序列、擴增等步驟，構(gòu)建可用于測序的DNA片段，在b)文庫定量和混合：使用文庫濃度檢測設備，對所得文庫進行DNA濃度c)信息分析：使用既定的信息分析流程及相關(guān)數(shù)據(jù)庫，對測序數(shù)據(jù)進行處d)結(jié)果解讀(如適用):實驗室根據(jù)不同的檢測項目使用特定的數(shù)據(jù)庫，對e)報告發(fā)放：由具備相關(guān)專業(yè)技術(shù)職稱的授權(quán)人員對報告內(nèi)容進行核對和簽發(fā)，并以約定的形式發(fā)送給送檢客戶或受檢者，如適用，應提供遺傳咨詢或報CNAS-TRL-018:20223）核酸濃度檢測設備如電泳儀、熒光定量儀、微量分光光度計和熒4）文庫定量和混合：文庫濃度檢測設備通常有生物分析儀、qPCR儀、熒b）高通量測序?qū)嶒炇抑饕陌踩O備包括生物安全柜、樣本滅活設備、壓CNAS-TRL-018:20221）高通量測序?qū)嶒炇腋鲄^(qū)空調(diào)相互獨立，不可連通3）測序儀芯片或載片倉內(nèi)的激光器產(chǎn)生的激光存在潛在人體危害，儀器運4）測序儀產(chǎn)生的廢液使用廢液桶收集，廢液中的化學成分對眼睛、皮膚和5）測序區(qū)和服務器機房使用的消防滅火系統(tǒng)，應避免水、泡沫、CNAS-TRL-018:2022b）樣本采集、運輸、接收與保存要求CNAS-TRL-018:2022高通量測序核酸檢測項目可通過加入與文庫基質(zhì)相同或相似的質(zhì)控樣品評CNAS-CL02-A001:2021《醫(yī)學實驗室質(zhì)量和能力認可準則的應用要求CNAS-TRL-018:2022實驗室應建立高通量測序數(shù)據(jù)保存類型和保存期限相關(guān)要求，一般保存FASTQ文件、BAM文件和VCF文件，并保留雙備份。數(shù)據(jù)保存應符合CNAS-CL02-A001:2021《醫(yī)學實驗室質(zhì)量和能力認可準則的應用要求》4.13記附錄A(資料性附錄)實驗室功能區(qū)核酸檢測采樣方案A.1采樣方法內(nèi)畫交叉線(如圖A.1),盡量讓植絨拭子每個面都接觸到采樣目標，一個采樣圖A.1采樣區(qū)域內(nèi)交叉線采樣法A.2采樣區(qū)域及編號根據(jù)不同采樣區(qū)域和采樣點及要求進行采樣，每個采樣點單獨一個植絨拭子，按照表A.1中要求放置到含有采樣液的采樣管中并標注采樣編號，如采樣編號為管1中應放置的是把手、傳遞窗、臺面單獨采樣的3個植絨拭子。CNAS-TRL-018: