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PAGEPAGE7課題1DNA的粗提取與鑒定(建議用時:30分鐘)考點基本目標發(fā)展目標1.DNA的粗提取與鑒定方法1,2,3,4,511,12,13,14,152.DNA的粗提取與鑒定的試驗操作6,7,8,9,10[基本目標]1.在混合物中提取DNA分子的基本思路是()A.依據(jù)各種大分子的理化性質(zhì)的差異B.依據(jù)各種大分子的理化性質(zhì)的共性C.依據(jù)各種大分子在細胞內(nèi)的功能D.依據(jù)各種大分子的結(jié)構(gòu)和在細胞內(nèi)的位置A解析提取生物大分子的基本思路是選用肯定的物理或化學(xué)方法分別具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。就DNA分子的粗提取而言,是利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異進行分別的。2.下列有關(guān)DNA的提取、分別與鑒定原理的敘述,不正確的是()A.向雞血細胞中加入蒸餾水的目的是使其吸水漲破,釋放出其中的DNAB.NaCl溶液濃度從2mol/L到0.14mol/L的范圍內(nèi),DNA的溶解度隨著溶液濃度的減小而減小C.DNA不溶于酒精,而細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精D.將初步純化的DNA溶解于NaCl溶液后再加入二苯胺試劑,沸水浴后可視察到溶液顯紫色D解析將純化的DNA溶解于2mol/L的NaCl溶液后,再加入二苯胺試劑,沸水浴冷卻后可視察到溶液顯藍色。3.下列與析出DNA黏稠物有關(guān)的敘述,不正確的是()A.操作時緩緩滴加蒸餾水,降低DNA的溶解度B.在操作時,用玻璃棒輕緩攪拌,以保證DNA分子的完整性C.加蒸餾水可同時降低DNA和蛋白質(zhì)的溶解度,兩者均可析出D.當絲狀黏稠物不再增加時,此時NaCl溶液的濃度接近0.14mol/LC解析向含有DNA的NaCl溶液中加入蒸餾水后,NaCl溶液的濃度會變小,當NaCl溶液的濃度為0.14mol/L時,DNA的溶解度最小而析出,而蛋白質(zhì)不會析出。4.在DNA的粗提取與鑒定試驗中,若選擇的試驗材料為植物細胞,裂開細胞時要加入肯定量的洗滌劑和食鹽。加入洗滌劑和食鹽的目的分別是()①利于DNA的溶解②分別DNA和蛋白質(zhì)③溶解細胞膜④溶解蛋白質(zhì)A.①③ B.③②C.④① D.③①D解析食鹽的主要成分是NaCl,DNA在肯定物質(zhì)的量濃度的NaCl溶液中易溶解,加入洗滌劑的目的是瓦解細胞膜。5.在采納雞血為材料對DNA進行粗提取的試驗中,若需進一步提取含雜質(zhì)較少的DNA,可以依據(jù)的原理是()A.在物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小B.DNA遇二苯胺在沸水浴的條件下會染成藍色C.DNA不溶于酒精而細胞中的一些物質(zhì)易溶于酒精D.質(zhì)量濃度為0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液具有抗凝血作用C解析DNA粗提取的原理有:DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最小和DNA不溶于95%的冷酒精。進一步提取含雜質(zhì)較少的DNA時利用后者。B項用于DNA的鑒定,D項中檸檬酸鈉可防止血液凝固,均不是提純DNA的原理。6.某同學(xué)用洋蔥進行DNA的粗提取和鑒定試驗,下列操作錯誤的是()A.加入洗滌劑后用力進行快速、充分地研磨B.用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNAC.加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌D.加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱A解析加入洗滌劑后,攪拌動作要輕緩、柔軟,否則簡單產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟的操作;用蛋白酶分解過濾研磨液中的蛋白質(zhì),可純化研磨液中的DNA;加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌的目的是保證DNA分子不斷裂,保持其完整性;加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱才能出現(xiàn)顏色反應(yīng)。7.下列有關(guān)DNA的粗提取與鑒定試驗的操作步驟,正確的是()A.制備雞血細胞液→提取細胞核物質(zhì)→溶解核內(nèi)的DNA→析出并濾取DNA黏稠物→DNA的再溶解→提取較純凈的DNA→鑒定DNAB.制備雞血細胞液→提取細胞核物質(zhì)→溶解并析出DNA→DNA的再溶解→提取較純凈的DNA→鑒定DNAC.制備雞血細胞液→溶解DNA→提取細胞核中的DNA→DNA的再溶解→提取較純凈的DNA→DNA的鑒定D.制備雞血細胞的細胞核物質(zhì)提取液→溶解DNA并析出→提取較純凈的DNA→DNA的鑒定A解析B項漏掉了DNA溶解前要過濾;C項提取細胞核中DNA的敘述欠妥,應(yīng)是提取核物質(zhì),并且應(yīng)放在溶解DNA之前;D項敘述明顯有誤。8.在DNA的粗提取和鑒定試驗中,以下操作步驟錯誤的是()A.將雞血細胞置于蒸餾水中并用玻璃棒充分攪拌釋放出DNA等核物質(zhì)B.在DNA析出和再溶解過程中要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動C.在用酒精析出DNA時,要運用冷酒精,甚至可將混合液放入冰箱中冷卻D.鑒定DNA時,須要將甲基綠試劑加入含DNA的溶液中并進行水浴加熱D解析將雞血細胞置于蒸餾水中并用玻璃棒充分攪拌有利于細胞吸水漲破,釋放出DNA等核物質(zhì),A項正確;在DNA析出和再溶解過程中要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動,防止DNA鏈斷裂,B項正確;在用酒精析出DNA時,要運用冷酒精,甚至可將混合液放入冰箱中冷卻,C項正確;鑒定DNA時,須要將二苯胺試劑加入含DNA的溶液中并進行沸水浴加熱,D項錯誤。9.如圖甲、乙為“DNA的粗提取與鑒定”試驗中涉及的兩個操作裝置圖。下列相關(guān)敘述正確的是()甲乙A.圖甲的燒杯和圖乙的試管中所用溶液都為NaCl溶液,但兩者濃度不同B.圖乙試管經(jīng)稍稍加熱后即可視察到一支試管中的溶液明顯變藍,另一支試管中的溶液不變藍C.圖甲操作需用玻璃棒快速攪拌以使DNA析出,并纏繞在玻璃棒上D.圖乙操作中所用的二苯胺試劑需現(xiàn)配現(xiàn)用,以達到較好的鑒定效果D解析圖甲燒杯中為酒精溶液,圖乙試管中為NaCl溶液,A項錯誤;圖乙試管須要在沸水浴中加熱5min,B項錯誤;圖甲用玻璃棒沿一個方向輕輕攪拌,卷起絲狀物,C項錯誤;圖乙操作中所用的二苯胺試劑最好現(xiàn)配現(xiàn)用,否則二苯胺會變成淺藍色,D項正確。10.在“DNA的粗提取與鑒定”試驗過程中,有兩次DNA沉淀析出,其依據(jù)的原理是()①DNA在物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低②DNA在冷卻的體積分數(shù)為95%的酒精中能沉淀析出A.兩次都是①B.兩次都是②C.第一次是①,其次次是②D.第一次是②,其次次是①C解析DNA的第一次析出是利用其在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小而沉淀析出的,其次次析出是利用DNA不溶于冷卻的95%的酒精,而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)可溶解于冷卻的95%的酒精這一原理,達到對第一次析出的DNA進一步分別提純的目的。[發(fā)展目標]11.在DNA的粗提取與鑒定試驗中有三次過濾:①過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細胞液;②過濾含黏稠物的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液;③過濾溶解有DNA的物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl的溶液。以上三次過濾分別為了獲得()A.含核物質(zhì)的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液B.含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA黏稠物、含DNA濾液C.含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA黏稠物、紗布上的DNAD.含較純DNA濾液、紗布上黏稠物、含DNA濾液A解析過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細胞液應(yīng)取濾液(其內(nèi)含DNA);過濾含黏稠物的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液應(yīng)取黏稠物(因其內(nèi)含析出的DNA);DNA易溶于物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液,故過濾該溶液時應(yīng)取濾液(其內(nèi)溶有DNA)。12.在“DNA的粗提取和鑒定”試驗中,甲、乙、丙、丁四個小組除下表中所列處理方法不同處,其他操作步驟均正確,但試驗結(jié)果卻不同。下列有關(guān)敘述不正確的是()組別試驗材料提取核物質(zhì)時加入的溶液去除雜質(zhì)時加入的溶液DNA鑒定時加入的試劑甲雞血蒸餾水95%的酒精(25℃)二苯胺乙菜花蒸餾水95%的酒精(冷卻)雙縮脲試劑丙豬血蒸餾水95%的酒精(冷卻)二苯胺丁雞血蒸餾水95%的酒精(冷卻)二苯胺A.試驗材料選擇錯誤的組別是丙B.沸水浴后試管中溶液顏色變藍的組別是甲、丁C.甲組試驗現(xiàn)象差的緣由是25℃的酒精對DNA的凝集效果差D.乙組試驗不勝利僅因為在鑒定時加入了雙縮脲試劑D解析乙組菜花細胞有細胞壁,只加入蒸餾水細胞膜不裂開,須經(jīng)過研磨;鑒定DNA時要用二苯胺試劑。13.下圖為“DNA粗提取和鑒定”試驗的相關(guān)操作。這些操作目的正確的是()A.①是洗滌紅細胞,去除血細胞表面的雜質(zhì)B.②是溶解DNA,去除不溶于酒精的雜質(zhì)C.③是溶解DNA,去除不溶于2mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)D.④是稀釋NaCl溶液,去除不溶于低濃度NaCl溶液的雜質(zhì)C解析①是使雞血細胞吸水漲破釋放出核物質(zhì);②是析出DNA,去除溶于酒精的雜質(zhì);④是稀釋NaCl溶液使其濃度接近0.14mol/L,去除溶于低濃度NaCl溶液的雜質(zhì)。14.如圖表示以雞血為試驗材料進行DNA的粗提取與鑒定的操作程序,請分析回答問題:(1)步驟一中,向雞血細胞液中加入________并攪拌,可使雞血細胞裂開。(2)步驟二:過濾后收集含有DNA的________。(3)步驟三、四的操作原理是__________________________________________。步驟四通過向溶液中加入________調(diào)整NaCl溶液物質(zhì)的量濃度為________mol/L時,DNA將會析出,過濾除去溶液中的雜質(zhì)。(4)步驟七:向步驟六過濾后的________中,加入等體積的冷卻的________________,靜置2~3min,溶液中會出現(xiàn)______色絲狀物,這就是粗提取的DNA。(5)步驟八:DNA遇________試劑,沸水浴5min,冷卻后,溶液呈______色。解析第一步加入蒸餾水的目的是使紅細胞漲破,釋放出核物質(zhì);其次步收集含有核物質(zhì)的濾液;由于DNA在不同濃度NaCl溶液中的溶解度不同,所以通過限制NaCl溶液的濃度可以分別溶解和析出DNA,對DNA進行提純;第四步加入蒸餾水的目的是漸漸稀釋NaCl溶液,使其物質(zhì)的量濃度降到0.14mol/L,這時DNA在NaCl溶液中溶解度最低,可以析出DNA。DNA不溶于酒精,某些蛋白質(zhì)可以溶于酒精,這樣可以進一步提純DNA。鑒定DNA的方法是用二苯胺試劑,在沸水浴加熱條件下,假如變藍色,證明是DNA。答案(1)蒸餾水(2)濾液(3)DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,可通過限制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)蒸餾水0.14(4)濾液體積分數(shù)為95%的酒精白(5)二苯胺藍15.某生物愛好小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動,詳細步驟如下:材料處理:稱取簇新的花菜、辣椒和蒜黃各2份,每份10g。剪碎后分成兩組,一組置于20℃、另一組置于-20℃條件下保存24h。DNA粗提?。旱谝徊剑簩⑸鲜霾牧戏謩e放入研缽中,各加入15mL研磨液,充分研磨,用兩層紗布過濾,取濾液備用。其次步:先向6只小燒杯中分別注入10mL溶液,再加入20mL體積分數(shù)為95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌,使絮狀物纏繞在玻璃棒上。第三步:取6支試管,分別加入等量的2mol/LNaCl溶液溶解上述絮狀物。DNA檢測:在上述試管中各加入4mL二苯胺試劑,混合勻稱后,置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表:材料保存溫度花菜辣椒蒜黃20℃++++++-20℃+++++++++(注:“+”越多表示藍色越深。)分析上述試驗過程,回答下列問題:(1)該探究性試驗課題名稱是___________________________________________________________________________________________________________________。(2)其次步中“緩緩地”攪拌,這是為了削減____________。(3)依據(jù)試驗結(jié)果,得出結(jié)論并分析。①結(jié)論1:與20℃相比,相同試驗材料在-20℃條件下保存,DNA的提取量較多。結(jié)論2:__________________________________________________________________________________________________________________________________。②針對結(jié)論1,請?zhí)岢龊侠淼恼f明:________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)氯仿密度大于水,能使蛋白質(zhì)變性沉淀,與水和DNA均不相溶,且對DNA影響微小。為了進一步提高粗提取時DNA的純度,依據(jù)氯仿的特性,在第三步的基礎(chǔ)上接著操作的步驟是:__________________________________________________________________________
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