《基因工程的基本操作程序》（第1課時(shí)）公開(kāi)課學(xué)案

PAGE4/41.2基因工程的基本操作程序（第1課時(shí)）【學(xué)習(xí)目標(biāo)】1、簡(jiǎn)述基因工程的基本操作步驟；2、了解獲取目的基因方法；3、了解基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程及基因表達(dá)載體的組成?！咀灾鲗W(xué)習(xí)1】從基因文庫(kù)中獲取目的基因1、基因文庫(kù)定義：將含有某種生物不同基因的許多，導(dǎo)入受體菌的群體中，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫(kù)。：含有一種生物的基因2、種類：含有一種生物的基因3、如何從基因文庫(kù)中得到所需要的基因？?！竞献魈骄?】如何構(gòu)建部分基因文庫(kù)（cDNA文庫(kù)）？【自主學(xué)習(xí)2】利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因1、PCR（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）：是一項(xiàng)在生物體外特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。2、原理：。3、反應(yīng)條件：模板、、、。【合作探究2】PCR與體內(nèi)DNA復(fù)制的比較PCR技術(shù)DNA復(fù)制相同點(diǎn)原則原料條件不同點(diǎn)解旋方式場(chǎng)所酶結(jié)果【自主學(xué)習(xí)3】基因表達(dá)載體的構(gòu)建1、基因表達(dá)載體的組成（1）啟動(dòng)子：位于基因的，它是識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA。（2）終止子：位于基因的，終止。（3）標(biāo)記基因：受體細(xì)胞中是否含有，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)2、目的意義：使目的基因在受體細(xì)胞中，并且給下一代；使目的基因和?！竞献魈骄?】1、畫出完整的基因表達(dá)載體2、簡(jiǎn)述構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程個(gè)切口個(gè)黏性末端重組DNA分子（重組質(zhì)粒）兩個(gè)切口獲得目的基因處理DNA分子質(zhì)?！净A(chǔ)鞏固】1、基因工程的操作步驟包括以下幾步，正確的操作順序是（）①目的基因與運(yùn)載體結(jié)合②將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞③目的基因的檢測(cè)與鑒定④提取目的基因。A.④①②③B．②④①③C．③②④①D．③④①②2、下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是（）①?gòu)幕蛭膸?kù)中獲取目的基因②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因③反轉(zhuǎn)錄法④通過(guò)DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成A．①②③④B．①②③C．②③④D．②③3、如圖是利用基因工程技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植物，生產(chǎn)可食用疫苗的部分過(guò)程示意圖，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ為四種限制性內(nèi)切酶。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．圖示過(guò)程是基因工程的核心步驟B．表達(dá)載體構(gòu)建時(shí)需要用到限制酶SmaⅠC．抗卡那霉素基因的存在有利于將含有抗原基因的細(xì)胞篩選出來(lái)D．除圖示組成外，表達(dá)載體中還應(yīng)該含有啟動(dòng)子和終止子等結(jié)構(gòu)【能力提升】4、嗜熱土壤芽胞桿菌產(chǎn)生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一種耐熱纖維素酶，為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用，開(kāi)展了以下試驗(yàn)：Ⅰ.利用大腸桿菌表達(dá)BglB酶（1）PCR擴(kuò)增bglB基因時(shí)，選用基因組DNA作模板。（2）右圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜。bglB基因不含圖中限制酶識(shí)別序列。為使PCR擴(kuò)增的bglB基因重組進(jìn)該質(zhì)粒，擴(kuò)增的bglB基因兩端需分別引入和