艾滋病實驗室標本管理制度

艾滋病實驗室標本管理制度（一）、樣品的采集和處理1.血液樣本的采集和處理1.1抗凝全血：消毒局部皮膚，用加有抗凝劑（EDTA鈉鹽或鉀鹽、枸櫞酸鈉、肝素）的真空采血管抽取適量靜脈血，或用一次性注射器抽取靜脈血，轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管中，輕輕顛倒混勻10-15次，備用。1.2末梢全血：消毒局部皮膚（成人和1歲以上兒童可選擇耳垂、中指、無名指或食指，1歲以下兒童采用足跟部）。用采血針刺破皮膚，用無菌紗布擦掉第一滴血。收集滴出的血液，備用。血漿：根據(jù)檢測需要，選擇含適宜抗凝劑的采血管，按照采1.3血管說明采集：靜脈血，分離血漿；或?qū)⒉杉目鼓?500～3000r/min離心15分鐘，上層即為血漿，吸出置于合適的容器中，備用。血清：根據(jù)檢測需要，按照采血管說明采集靜脈血，分離血清；或用不含抗凝劑的真空采血管抽取適量靜脈血，或用一次性注射器抽取靜脈血，轉(zhuǎn)移至無抗凝劑或含促凝劑的試管中放置1～2小時，待血液凝固、血塊收縮后再用1500～3000r/min離心15分鐘，吸出血清，置于合適的容器中，備用。淋巴細胞富集液：將采集的抗凝全血1500～3000r/min離心15分鐘，吸取血漿層下的淋巴細胞富集液，置于合適的容器中，備用。外周血單個核細胞（PBMC）：使用淋巴細胞分離液，進行密度梯度離心，吸出PBMC層，置于合適的容器中，備用。1.4抗凝劑的選擇：根據(jù)檢測要求選用適當?shù)目鼓齽?，如CD4+和CD8+T淋巴細胞數(shù)測定可選用EDTA鉀鹽或鈉鹽、枸櫞酸鈉、肝素（如果血液不用于核酸檢測）；艾滋病-1分離、核酸定性/定量檢測可選用EDTA鉀鹽或鈉鹽或枸櫞酸鈉。2、樣本采集后處理、保存、運輸?shù)臅r限和條件，因不同的檢測項目而異，應(yīng)參見相應(yīng)檢測項目要求。采血完成后的穿刺針頭必須丟棄于尖銳危險品容器內(nèi)，妥善處理，防止發(fā)生職業(yè)暴露。3、采集樣品注意事項（1）采集樣品原則上應(yīng)按臨床采血技術(shù)規(guī)范操作。（2）采集樣品時應(yīng)注意安全，建議采用真空采血管及蝶形針具，以避免直接接觸血液；直接接觸艾滋病感染者/艾滋?。ˋIDS）病人血液/體液的操作，應(yīng)戴雙層手套。（3）所有的血液、血清、未固定的組織和組織液樣品，均應(yīng)視為有潛在傳染性，都應(yīng)以安全的方式進行操作。（4）應(yīng)像操作未知傳染風險樣品一樣，小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進行消毒。（5）采血時一定要注意安全，采血用一次性注射器，謹慎操作，防止發(fā)生刺傷皮膚和造成外界污染。（6）離心機要使用密閉的罐和密封頭，以防液體溢出或在超/高速離心時形成氣溶膠。（二）樣品的保存用于抗體和抗原檢測的血清或血漿樣本，短期（1周）內(nèi)進行檢測的可存放于2～8℃，一周以上應(yīng)存放于-20℃以下。用于核酸檢測的血漿和血細胞樣本，4天內(nèi)進行檢測的可存放于2-8℃：3個月以內(nèi)應(yīng)存放于-20℃以下；3個月以上應(yīng)置于-70℃以下保存。用于CD4+T淋巴細胞檢測的全血樣本，室溫保存，時間不超過48小時。如果用CD45設(shè)門，樣本保存不超過72小時。篩查結(jié)果為陽性的樣本應(yīng)及時進行補充試驗；篩查結(jié)果為陰性的樣本，可根據(jù)具體需要決定保存時間，建議至少保存1個月。艾滋病檢測確證實驗室收到的篩查陽性樣本，無論補充試驗結(jié)果如何，均應(yīng)保存剩余樣本，保存時間根據(jù)需要確定，建議至少保存3年，特殊用途或?qū)ｍ楉椖康臉颖靖鶕?jù)具體要求確定保存時間。補充試驗結(jié)果為陽性的樣本按照國家生物樣本管理的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。（三）樣品的運送1、全血、血漿的運送應(yīng)符合生物安全要求，參照《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》（衛(wèi)健委第45號令，2006年2月1日執(zhí)行）。2、血液樣本運送時應(yīng)采用三層容器對樣本進行包裝，隨樣本應(yīng)附有與樣本唯一性編碼相對應(yīng)的送檢單。送檢單應(yīng)標明受檢者姓名、樣本種類等信息，并應(yīng)放置在第二層和第三層容器之間。第一層容器：直接裝樣本，應(yīng)防滲漏。樣本應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi)，試管上應(yīng)有明顯的標記，標明樣本的唯一性編碼或受檢者姓名、種類和采集時間。在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料，以免碰碎。第二層容器：容納并保護第一層容器，可以裝若干個第一層容器。要求不易破碎、帶蓋、防滲漏、容器的材料要易于消毒處理。第三層容器：容納并保護第二層容器的運輸用外層包裝箱。外面要貼上醒目的標簽，注明數(shù)量、收樣和發(fā)件人及聯(lián)系方式，同時要注明“小心輕放、防止日曬、小心水浸、防止重壓、禁止倒立”等字樣，還應(yīng)易于消毒。3、用于抗體檢測的血清和血漿樣本應(yīng)在凍存條件下運送。用于CD4+和CD8+T淋巴細胞測定的樣本應(yīng)在室溫下（18～25℃）運送。用于病毒載量檢測的樣本應(yīng)在-20℃以下運輸。干血斑和尿液樣本應(yīng)在室溫下（18～25℃）運送，可通過郵寄方式運送。血液制品樣本的運送按照血液制品有關(guān)使用說明執(zhí)行。4、運送樣本必須有記錄。（四）樣本接收和拒收標準1、含有感染性樣品的包裹必須在具有處理感染源設(shè)備的實驗室內(nèi)由經(jīng)過培訓的、穿戴防護衣的工作人員打開，用后的包裹應(yīng)進行消毒。2、核對樣品與送檢單，認真核對標本上病人姓名、年齡、性別、病區(qū)、床號、住院號是否與申請單符合。檢查樣品管有無破損和溢漏，如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出，對樣品管和盛器消毒，同時報告有關(guān)領(lǐng)導和專家。3、檢查樣品的狀況，觀察標本的量、標本類型、是否抗凝或有小凝塊樣品，記錄有無嚴重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況，判斷標本是否符合檢驗要求。如果污染過重或者認為樣品不能被接受，則應(yīng)將樣品安全廢棄。并要將樣品情況立即通知送樣人。4、打開標本容器時要小心，以防內(nèi)容物潑濺。樣品處理時若內(nèi)容物有可能濺出，則應(yīng)在生物安全柜中戴手套進行。同時應(yīng)戴口罩、防護眼鏡，以防皮膚或黏膜污染。5、因特殊臨床治療導致自發(fā)熒光的樣品不可用于熒光方法測試。6、接收樣品時應(yīng)規(guī)范填寫樣品接收單。7、不符要求的標本，必須及時填寫退回理由單，及時通知送樣人，說明情況，重新留取。不符合要求的標本與可疑含有感染性樣品用后的包裹同檢驗后的標本一樣進行消毒或無害化處理后廢棄。（五）標本檢測1、離心機要使用密閉的罐和密封頭，以防液體溢出或在超/高速離心時形成氣溶膠。復核標本接收過程中的每一步驟，在檢測過程中，應(yīng)嚴格按照標準化操作規(guī)程。2、在標本足夠的情況下，不能浪費、隨意丟棄或損壞標本。應(yīng)像